D Mannose: из чего он сделан?

С момента проведения исследованияБум на белкахИ нуклеиновых кислот в начале 20 века, исследование углеводов испытали быстрое развитие. В 1960 - х годах научные исследования по углеводам можно было разделить на три области: углеводная химия, углеводная биология и углеводная инженерия [1]. По мере углубления исследований в области углеводов наше понимание углеводов также продолжает развиваться. Например, исследователи использовали химические свойства сахара для синтеза различных производных сахара, и понимание функций сахара эволюционировало от их роли в качестве источников углерода до целого ряда биологических функций [1,2]. Кроме того, углубленные исследования показали, что все полисахариды с несколькими биологическими видами деятельности содержат Д-маннюс (Д-маннюс (Д-маннюс (D-mannose))) в качестве компонента, и последующие доклады подтвердили, что D-mannose обладает различными физиологическими видами деятельности.

D манносовый широко распространен в природе, содержит полисахаридыЕдиницы измерения D-mannoseПрисутствуют в больших количествах в стенках растительных клеток и олигосахаридах, а также в некоторых фруктовых кожухах [1,2]. Таким образом, D-mannose может быть подготовлен путем экстракции и очистки растений полисахариды, чтобы получить чистый продукт. Кроме того, D-mannose может быть синтезирован химически или с помощью методов биопреобразования. В настоящее время основными отечественными и международными производителями D-mannose являются Nanjing Reagent Co., Ltd., Hubei Jusheng Technology Co., Ltd., BioTech Pharmacal-Inc. Источник происхождения, а теперь еда. В качестве естественного активного моносакхарида d-манносовый широко используется в качестве углеводов питательных веществ для борьбы с такими заболеваниями, как диабет и ожирение. Кроме того, D-mannose обладает противовоспалительными и иммуномодуляционными функциями. В человеческом теле D-mannose обильно присутствует в жидкостях тела и тканевых жидкостях, хотя он не легко метаболизируется человеческим телом. Однако он играет важную роль в иммунном регулировании и синтезе гликобелка [2,3]. Кроме того, D-mannose широко используется в пищевой промышленности в качестве подсластителя, лекарственного средства для профилактики инфекций мочевыводящих путей в медицине, для профилактики сальмонеллы у кур-бройлеров и увеличения производства яиц в животноводстве, а также в химическом синтезе для производства трифтороманносовых и l-рибозных производных [4].

1. Научно-исследовательский прогресс в области технологии подготовки D-Mannose

Основные методы борьбы с терроризмомПодготовка D-mannoseВключают экстракцию, химический синтез и биологические методы. Экстракция является широко используемым методом подготовки d-манноса, который включает в себя гидролиз и отделение растений полисахаридов и олигосахаридов для получения d-манноса. Этот метод требует большого количества растительного материала и зависит от географических и сезонных факторов. Химический синтез предполагает преобразование d-глюкозы путем изомеризации или расширения углеродной цепи d-арабинозы. Химические методы разнообразны и описаны в различной литературе, но они связаны со сложными производственными процессами и высокими затратами. Биологический метод использует микробную ферментацию или определенные изомеразы для преобразования моносакхаридов или полисахаридов в d-манносы. Этот метод имеет такие преимущества, как мягкие условия реакции и низкая стоимость. Однако указанные изомеразы, используемые в текущих исследованиях, имеют низкую каталитическую эффективность, и продукты могут содержать значительное количество побочных продуктов [4].

1.1 метод экстракции

1.1.1 экстракция с использованием кофейных площадок в качестве сырья

Кофе основания являются побочным продуктом мгновенного производства кофе и содержатОбильные полисахаридыВ основном маннан олигосахаридес. Исследования показывают, что маннан олигосахариды могут быть гидролизированы до д-манноса, который затем может быть сокращен до маннанола, оба из которых играют важную роль в качестве пищевых добавок [5].

В конце xx века сунь чжунлян и др. [6] провели предварительные исследования по гидролизному процессуМаннан олигосахаридес- да. Добавляя кислоту, давление и устанавливая конкретную температуру, они гидролизировали маннаньский олигосахарид и обнаружили, что трубный реактор обеспечивает лучший гидролиз при высоких температурах и коротких периодах реакции. Раствор продукта реакции был светло-коричневого цвета, облегчая разделение и очистку. В начале xxi века хуан гуанмин и др. [7,8] проводили технологические исследования по производству D-mannose из кофейных полей методом кислотного гидролиза. В условиях концентрации серной кислоты от 1,5 моль/л до 3,0 моль/л, температуры от 100 до 130 градусов и времени реакции от 80 до 120 минут, выход D-mannose в растворе гидролиза составлял от 28% до 30%. После последующих шагов, включая деколонизацию, концентрацию испарения, кристаллизацию разделения и сушку, был получен чистый D-mannose. В 2015 году Pei Jun В то же время- эл. - привет.[9] изобрели метод извлечения D-mannose высокой чистоты из кофейных полей. Этот метод облегчает разделение продукта в процессе подготовки, с выходом более 60% и чистоты более 98%, и процесс прост и эффективен с точки зрения затрат, что делает его пригодным для промышленного производства.

1.1.2экстракция с использованием семян пальм в качестве сырья

Пальмы обильно встречаются в южных провинциях китая и принадлежат к семье пальм. Листья, цветы, корни и кора пальм используются в традиционной медицине. В 1980 - х годах фан цзинь и др. [10] ссылались на условия деградацииБамбуковые полисахаридыИ другие материалы. Они добавили 80% концентрированной серной кислоты в раздавленные семена пальм, разбавили концентрацию серной кислоты до 2N и рефлуксировали на 100 градусов в течение 5-6 часов. После разделения, концентрации, кристаллизации, очистки и сушки D-mannose был получен с доходностью 30%. Впоследствии Пан зиго из чжэцзянского университета продолжил изучение процесса извлечения и очистки д-маннитола на основе этого метода. Используя семена пальм в качестве сырья, жидкость, содержащая д-маннитол, извлекалась путем кислотного гидролиза, щелочной нейтрализации и ферментативной реакции. Затем жидкость была декорирована активированным углем, сконцентрирована и отделена с помощью силикатного геля. Жидкость, содержащая чистый д-маннитол, опреснялась с помощью ионной обменной смолы, и, наконец, кристаллы д-маннитола были кристаллизованы с кристаллизационной доходностью 86,7% и общей доходностью 48,4%. Этот метод позволил повысить урожайность продукции, сократить производственные издержки и свести к минимуму загрязнение окружающей среды, обеспечив необходимые исходные данные для промышленного производства целевой продукции и извлечения, разделения и очистки промежуточных жидкостей.

1.2 метод химического синтеза

Широко используемый метод химического синтезаПодготовка D-mannoseВключает в себя использование химических реагентов, чтобы вызвать дифференциальную реакцию изомеризации в глюкозе. Однако этот метод требует строгого контроля за концентрацией кислоты и температурой во время обработки. В 1975 году TakemurA/данные отсутствуют.[11] описал патентный метод с использованием молибдической кислоты в качестве катализатора, нагревая d-глюкозу раствор при температурах от 110 до 160 градусов и pH/ч.от 2,3 до 4,5, который преобразовал часть глюкозы в d-манносовой с выходом от 30% до 36%. Из-за низкой урожайности и содержания примесей в продукте этот метод не подходит для крупномасштабного производства. PH/ч.2.3-4.5. Из-за нестабильности молибдической кислоты в 2003 году лю чуньян [12] гидролизировал сукроуз (T = 100°C, pH = 2,0) в течение 2 часов, получая 50% d-глюкозы и 50% d-фруктозы. Затем смесь нагревалась с 0,15% (NH₄)₂MoO₄ (pH = 3,0) при 100°C в течение 2 часов, в результате чего выход D-mannose составил 30%. Впоследствии чжао гуангуи и др. [13] использовали 1% (NH₄)₂MoO₄ (pH = 3,0) для катализации реакции при 150°C в течение 2 часов, достигнув максимальной скорости преобразования глюкозы 32,3%. Метод химического синтеза для подготовки D-mannose имеет низкую урожайность и функционально громоздкий, что делает его пригодным только для мелкомасштабной лабораторной подготовки.

1.3 биологический метод

1.3.1 метод биологической ферментации

Существуют два метода получения D-mannose с использованием биологических методов: биологическая ферментация и биологическая конверсия. Биологический метод ферментации предполагает ферментирование полисахаридов или моносахаридов с использованием микроорганизмовПолучить D-mannose, с многочисленными докладами литературы. В обзоре литературы 2007 года ху чжаохуэй и др. [14] было отмечено, что из дрожжей можно легко получить манносовые белки путем ферзиматического гидролиза или нагрева при высоких температурах. Впоследствии ян в и др. [15] пришли к выводу, что моносакхаридный состав SSLO (где xylose и mannose составляют молекулярную цепь SSLO) в соевых соусах отличается от состава олигосакхаридов в соевых бобах, что позволяет предположить, что D-mannose может быть получен путем микробной ферментации. В 2013 году Charchoghlyan H В то же время- эл. - привет.[16] выделяли бактериальный штамм под названием M. chitosanitabida из почвы, который при гидролизе EPS производил высокие уровни экстраклекулярных полисахаридов (ESP), состоящих из глюкозы, манноса и галактозы (соотношение молекулярного веса 18:6:1). Это говорит о Том, что получение свободного D-mannose через микробную ферментацию не просто.

1.3.2 раздел 1.3.2   Метод биопреобразования

Биохимическое преобразование — это метод, который использует ферментативные реакции для преобразования фруктозы или глюкозы в d-манносовую при мягкой температуре, давлении и pH условиях. Ферменты, участвующие в этих ферментативных реакциях, включают d-манносовый изомер, селлобиоз изомеров, и d-ликсозе изомеров, которые широко доступны. Согласно отчетам, d-манносовый изомер из Bacillus subtilis M-1 преобразует приблизительно 25% фруктозы в d-галактозу, когда pH составляет 8,0-8,5, а концентрация фруктозы увеличивается с 5% до 40% [17]. В 2015 году Jiang Bo et al. [18] разработали производственный процесс для эффективного преобразования d-фруктозы вD-mannoseС помощью d-манносового изомера из псевдодомы псевдомаллей, подавшего заявку на патент (CN201510195854.4). Этот метод подходит для крупномасштабного производства и обеспечивает новый подход к ферментативной промышленной подготовке D-mannose. По сравнению с изомером D-mannose, изомером целлюлозы является единственным ферментом, способным преобразовать глюкозу в D-mannose; Однако этот фермент имеет низкую эффективность преобразования и производит большое количество побочных продуктов (D-fructose) в процессе преобразования, что делает его непригодным для крупномасштабного промышленного производства [5]. Кроме того, использование изомеров d-ликсозы для синтеза d-манноса привлекло значительное внимание исследователей. Хуан цзявей и др. [5] синтезировали термостабильный изомер d-лактулозы из термостойкого микроорганизма и применили его к синтезу D-mannose. Они обнаружили, что фермент продемонстрировал хорошую тепловую устойчивость в нейтральных и слабых щелочных условиях при температурах от 70 до 75 градусов, со ° значительно повышает ферментную активность, что делает его пригодным для D-lactulose преобразования, а также демонстрирует хорошую каталитическую эффективность по отношению к fructose.

2  Научно-исследовательский прогресс в области применения д-маннитола

2.1.1.   Применение d-маннитола в пищевой промышленности

D- маннитол имеет стабильные свойства, aСладкий вкус,, и низкие калории, что делает его широко используемым в качестве подсластителя и пищевой добавки, которые могут быть потреблены непосредственно. В настоящее время основными странами, производящими d- маннитол пищевого класса, являются Китай и Соединенные Штаты, при этом продукты в основном доступны в капсуле или порошковой форме [3]. Добавление D-mannose в пищу может улучшить текстуру. В работе Elghaouth et al. [19] показано, что прививка D-mannose яблокам, приближающимся к порче, уменьшает диаметр гнили. Yang Bingxun et al. [20] использовали высокопроизводительную жидкую хроматографию для подтверждения того, что D-mannose усиливает иммунную функцию напитков.

2.2 применение D-mannose в фармацевтической промышленности

Исследования показывают, чтоD-mannoseОбладает разнообразной физиологической деятельностью, включая усиление иммунитета, улучшение иммунной системы и лечение распространенных заболеваний, таких как диабет. В настоящее время это единственный углеводный питательный материал, используемый в клиническом применении в фармацевтической промышленности. Ван шутинг [21] продемонстрировал, что D-mannose может образовывать полимерные связки с доксорубицином в качестве целевого препарата, что позволяет проводить адресную терапию рака и уменьшает токсичные побочные эффекты препарата. Ранта [22] использовала D-mannose в качестве сырья для подготовки иммуностимулянта, связанного с клеточной стеной маннан кандиды альбикан. Камель [23] синтезировал ряд новых баз Schiff, используя D-mannose в качестве синтетического промежуточного продукта, и продемонстрировал, что эти соединения обладают антиопухолевой активностью. Dengler et al. [24] инновационно используют D-mannose для улучшения невирусной генной терапии.

2.3 применение D-mannose в аквакультуре

Чрезмерное использование антибиотиков в аквакультуре может привести к распространению резистентных к лекарствам бактерий и загрязнению окружающей среды [25,26]. Ван [26] и чжан чжаофу [27] и др. продемонстрировали, что D-mannose оказывает ингибиторное воздействие на инфекцию сальмонеллы у цыплят, без побочных эффектов, и может служить альтернативой антибиотикам для лечения инфекций сальмонеллы. Berge et al. [28] продемонстрировали, что добавление D-mannose кКорм для скотаПрепятствует распространению патогенов в кишечнике, защищает здоровье кишечника, повышает иммунитет и устойчивость к болезням, а также улучшает использование кормов.

2.4 применение D-mannose в области химического синтеза

D-mannose может быть синтезирован в различные производные и играет важную роль в клиническом применении [29]. Ян чжицзе и др. [30] использовали D-mannose в качестве исходного материала и, через ацетиляцию, гидролиз и сульфонирование, приготовили трифтороманнос с чистотой 99%. В природе, первичная структурная форма нуклеозидов d-ребра, в то время как l-ребра является изомером d-ребра. По сравнению с d-ребром l-ребро проявляет лучшую антивирусную и антиопухолевую активность и более низкую цитотоксичность [31]. В настоящее время L-ribose синтезируется в основном химически, обычно используя D-mannose в качестве исходного материала, который преобразуется в L-ribose черезD- манносовая кислота -1,4- лактонизация[31,32]. Такахаши и др. [32,33] продемонстрировали, что D-mannose может быть синтезирован в L-ribose посредством восьми шагов, включая циклизацию, в условиях митсунобу. Seo et al. [32,34] повысили урожайность за счет использования D-mannose acid-1,4- лактона в качестве сырья для подготовки l-ребра.

2.5 применение D-mannose в косметической промышленности

Алоэ вера обладает такими функциями, как защита солнца, улучшение красоты и увлажнение [35], с глюкуроновой кислотой и длинноцепными полимерами маннана, являющимися ее основными биоактивными компонентами [36]. Исследования показали, чтоD-mannoseИмеет эффект кондиционирования кожи, что делает кожу мягче и гладче после стирки [37]. Wivell et al. [38] продемонстрировали, что при молярном соотношении d-глюкозы, d-глюкуроновой кислоты и d-манноса 2,8:2.0:2,0 эффект увлажнения и очищения кожи является оптимальным.

2.6 применение D-mannose в биохимических исследованиях

Joersbo et al. [39]Использованный D-mannoseВ качестве агента трансгенных клеток для скринирования преобразованной сахарной свеклы, достигая скорости зародывания до 30% от общего количества ячеек. Кроме того, было доказано, что d-маннозные клетки пригодны для первичного трансгенного риса в различных условиях выращивания. Ван и др. [40] обнаружили, что D-mannose оказал хорошее влияние на протопластовую трансформацию кукурузы в полиэтиленгликоле.

3 резюме и перспективы

Процесс производства дляПодготовка D-mannoseВ первую очередь речь идет о трудоемких методах добычи, которые чувствительны к сезонным и региональным изменениям в сырьевых материалах и подвержены экологическому ущербу и загрязнению. Химический синтез подходит для мелкомасштабного лабораторного производства, но не для крупномасштабного промышленного производства. Биологические методы были горячей точкой исследований в последние годы, так как они просты, зелени и безопасны. Однако большинство обнаруженных до настоящего времени изомеразов имеют низкую каталитическую активность, легко подвержены воздействию реакционных условий и могут нарушать производственные процессы, в то время как сами ферменты являются дорогостоящими. Поэтому выявление недорогого изомера с высокой каталитической эффективностью и стабильностью является одной из основных задач нынешних исследователей.

Широкое применение D-mannose создало широкую рыночную перспективу, особенно потому, что оно может служить заменой высококалорийным сахарам и новой пищевой добавки, предлагая значительную рыночную ценность. В области тонкой химии D-mannose не только снижает затраты, но и, благодаря своим природным свойствам и превосходным эффектам ухода за кожей, приносит значительные экономические выгоды предприятиям. В фармацевтической области препараты, модифицированные D-mannose, обладают значительными противовоспалительными свойствами,Противораковые и противоопухолевые эффекты, предлагая многообещающие перспективы для будущего применения в разработке новых лекарств.

Ссылки на статьи

[1] Пан зиго. Исследование процесса извлечения и очистки D-mannose[D]. Ханчжоу: чжэцзян университет, 2009.

[2] чэн зе. Исследование термодинамических свойств и кинетики термического разложения моносакваридов при низких температурах [D]. Шэньян: шэньянский технологический университет, 2016.

[3] ху х, ши, чжан п и др. D-Mannose: свойства, производство и применение: обзор [J]. Комплексные обзоры в Food Science иFood Safety, 2016, 15(4): 773-785.

[4] лян ц, хуан г. Подготовка и использование мужского носа [J]. Друг химической промышленности, 2000(3): 14.

[5] хуан цзявэй, ши юэ, чжан вэньли и др. Журнал продовольствия и биотехнологии,2019,38(1): 83-92.

[6] сунь чжунлян, чэнь вейпин, хуан гуанмин и др. Гидролиз остатков кофе при производстве d-гликозы [J]. Наука о еде, 1999,20(12): 30-32.

[7] хуан гуанмин, чэнь ипин, ян сюэлуй и др. Определение маннана на очищенных кофейных площадках [J]. Журнал хайнанского университета (издание естественных наук),1999(4): 317-321.

[8] хуан гуанмин, чэнь вейпин. Кислотный гидролиз D-mannose с кофейной площадки [J]. Наука и техника в легкой промышленности,2002(1): 19-21.

[9] пэй цзюнь, шэн яньхуа, гао ликн. Способ приготовления D-mannose высокой чистоты: Китай, CN105087712A[P]. 2015-11-24.

[10] фан цзянь, ван хонг чэн, чжан де чжун и др. Подготовка D-mannose из семян пальмы [J]. Мир химии,1981(9): 25-26.

[11] Takemura - м,Iijima - м,Tateno Y, et al. Процесс подготовки д-маннитола: США, патент 4 083 881 [п]. 1978- 1974 -11 годы.

[12] лю, яньчунь. Синтез маннитола и сорбитола путем электрохимического восстановления сукроза [D]. Шиджиазхуан: хэбэй, обычный университет, 2003.

[13] чжао гуаньхуй, ван гуаньбинь, ли юньпин и др. Анализ ортогонального испытания на каталитическое производство манноса из глюкозы [J]. Современная химическая промышленность,2005,34(1): 39-41.

[14] ху чжаохай, инь ян, юэ цян. Прогресс в исследовании маннобелка в Saccharomyces cerevisiae[J]. Пивоварение,2007,34(4): 64-66.

[15] ян б, прасад к н, се х и др. Структурные характеристики олигосахаридов из соевого соуса lees и их потенциальный пребиотический эффект на молочных кислотных бактерий [J]. Пищевая химия, 2011, 126(2): 590-594.

[16] шарчоглян - г, - в парке H  D. День рождения. Общие сведения о компании Соединенные Штаты америки a  Новые бактериальные полисахариды состоят из глюкозы и маннососа в качестве основных компонентов [J]. Продукты питания гидроколлоквиумы, 2013, 30(2): 512-518.

[17] до свидания - джей, - маеда? - к, Йокои (Япония) - г, et  al.  Очистка от загрязнения И характеристика изомеров манносового сустава из агробактериевого радиобактера   M-1[J]. Бионаук, биотехнология и биохимия, 2001, 65(3): 658-661.

[18] б. цзян, т. чжан, х. ху и др. D-mannose изомерационный штамм и способ производства D-mannose с ним: Китай, CN201510195854.4[P]. 2015-07-15.

[19] El G A, Wilson C L, Wisniewski С. О.E. Сахарные аналоги как потенциальные фунгициды для патогенов яблока и персика после смерти.[J] Заболевания растений, 1995, 79(3): 254.

[20] ян бинсюнь, шэнь чуньсян, ван цзэн и др. Определение D-mannose в официальном напитке Dendrobium с помощью HPLC[J]. Наука о еде,2011(8):275 — 277.

[21] ван шутинг. Целевая доставка лекарственных средств исследование модифицированных полимеров D-mannose [D]. Вуси: цзяньнаньский университет,2015.

[22] Ranta K, Nieminen K, Ekholm F S, et Al. Оценка - иммуностимулятор Деятельность синтетических манносодержащих структур Имитация маннанса Кандида альбиканс из клеточной стены [J]. Клиническая и вакцинная иммунология,   2012,19(11): 1889 — 1893.

[23] камель С. О. M,  3. Организация < < али > > H  - я, 1. Анвар M  M,  et  al.   Синтез, антиопухоли Деятельность организации объединенных наций and  10. Молекулярная структура Стыковка в порту Исследования по теме: Из романа "сульфонамид-шифф" Базы, тиазолидиноны, бензотиазиноны и их С-нуклеозид  Деривативы [J]. Европейской экономической комиссии Журнал по теме Соединенные Штаты америки В медицинских целях - химия, 2010 год, 45(2): 572-580.

[24] Dengler E C, Alberti L A, Bowman B N, et al. Улучшение дефералитно-дефералированной дефекации спинного мозга D-mannose в качестве трансгенного адъюванта для управления хронической нейропатической болью [J]. Журнал нейровоспаления, 2014, 11(1): 92.

[25] ван ран, лю ти чжэн, ван тянь. Экологическая трансформация и экотоксичность антибиотиков [J]. Журнал экологии,2005,26(1): 265 — 270.

[26] Van impeseel F, Cauwerts K, Devriese L A, et al. Кормовые добавки  По адресу:  Контроль и контроль  - сальмонелла.  В случае необходимости  Птица [J].  Мир и общество#39;s птицеводство научный журнал, 2002, 58(4): 501-513.

[27] чжан чжао-фу. D-mannose ингибирует инфекцию сальмонеллы у цыпочек бройлеров [J]. Животноводство и птицеводство,1998 год (11): 18.

[28] Berge A C, Wierup M. Стратегии борьбы с сальмонеллой в моножелудочном животноводстве [J]. Животное, 2012, 6(4): 557-564.

[29] фэн мяо, юй цзинцзинь, инь чанфэн и др. Исследование метода обнаружения трифтороманносового бактериального эндотоксина [J]. Химические реагенты,2017,39(9): 992 — 994.

[30] ян чжицзе, чжоу сайчунь. Синтез трифтороманноса в качестве диагностического реагента [J]. Химического времени, 2004(7): 34-35.

[31] чжан цзинь, сюй чжэн, сюй Лу и др. Прогресс в производстве L-ribose[J]. Биообработка,2013,11(5): 74 — 78.

[32] цзоу е, су вейке. Прогресс в синтезе l-рибозы [J].  China Pharmaceutical Industry Magazine,2018,49(8): 35-47.

[33] такахаши х, ивай и хитоми и др. Новый синтез l-рибозы из d -mannono- 1,4 - лактона [J]. Органические буквы, 2002, 4(14): 2401-2403.

[34]Seo M J, An J, ShimJ H и др. Одногоршковая инверсия d-mannono-1,4- лактона для практического синтеза l- рибозы [J]. Письма тетраэдра, 2003, 44(15):3051 — 3052.

[35] чжан к, цуй й, гу х и др. Определение содержания алоэ-эмодина в косметике и его стабилизация [J]. Ежедневная химическая промышленность,2019,49(3): 199-202, 208.

[36] хе цзе, фан чжэньцзин. Научный прогресс алоэ вера полисахариды [J]. Медицина Huaxia,2017, 30(2): 188 — 191.

[37] Schmidt R R, Fortna R H, Beyer H H. аэрозольный мусс для мягкой чистки кожи с преимуществами увлажнения и ощущения кожи: США, Патент 5 002 680[п]. 1991-03-26.

[38] Wivell S C, Deckner G E. комбинированная личная чистка и увлажнение  Составы: U.S.Patent 5,439 682[P]. 1995-08-08.

[39] Joersbo M. достижения в выборе трансгенных растений с использованием генов неантибиотиков [J]. Физиология плантара, 2001, 111(3): 269-272.

[40] Wang A S, Evans R A, Altendorf P R, et al. Система отбора носа для производства плодородных трансгенных кукурузных растений из протопластов [J]. Отчеты о растительных клетках, 2000, 19(7): 654-660.