Как извлечь каротеноиды из микроводорослей?

Каротеноиды представляют собой класс растворимых в липидах изосферных соединений, широко встречающихся в различных растениях, животных и микроорганизмах- да.Они выступают в качестве естественных антиоксидантов в организмах и выполняют важные физиологические функции- да.Исследования показали, что каротеноиды обладают эффективностью в профилактике и лечении заболеваний человека, а также в улучшении здоровья человека, таких как профилактика сердечно-сосудистых заболеваний, лечение рака, улучшение зрения и укрепление иммунной функции. В последние годы каротеноиды находят широкое применение в фармацевтической, пищевой, медицинской, косметической и кормовой промышленности. Спрос на каротеноиды на мировом рынке растет на 2,9% в год, и, по прогнозам, к 2017 году он достигнет 10 МЛН тонн [1]. Однако большинство имеющихся в продаже каротиноидов получают путем химического синтеза, а их биологическое воздействие и безопасность являются предметом постоянного изучения [2-3]. В результате постоянного повышения осведомленности потребителей о проблемах здоровья растет популярность каротиноидов, получаемых из природного сырья.

В последние годы микроводоросли привлекают все больше внимания в качестве устойчивого и возобновляемого ресурса для производства биотоплива. Однако технология производства биотоплива на основе микроводорослей остается незрелой, а производственные издержки чрезмерно высоки, что на сегодняшний день не позволяет добиться прорывов в промышленном масштабе. Некоторые исследователи переключили свое внимание на производство других продуктов с высокой добавленной стоимостью из микроводорослей. Микроводоросли считаются наилучшим естественным источником коммерчески ценных каротеноидов, и извлечение каротеноидов из микроводорослей имеет значительные преимущества: во-первых, микроводоросли быстро растут, легко выращиваются и пригодны для крупномасштабного выращивания; Во-вторых, микроводоросли синтезируют широкий спектр пигментов, таких как ану-каротин, лютейн и астаксантин; Подтверждена биоактивность и антиоксидантные свойства этих пигментов; Наконец, рост микроводорослей не зависит от сезонных изменений, не конкурирует за пахотные земли или пресноводные ресурсы, а микроводоросли обладают высокой адаптируемостью, при этом некоторые виды могут расти и размножаться в сточных водах [4-5]. Поэтому исследования и разработка каротеноидов из микроводорослей могут расширить источники природных каротеноидов, повысить ценность водорослей и принести значительные экономические выгоды.

Однако в настоящее время высокая себестоимость производства является главным препятствием для коммерческого производства микроводорослей каротеноидов. Производство каротеноидов из микроводорослей включает три этапа: выращивание микроводорослей, сбор и извлечение водорослей и их очистка. Среди них ключевыми технологиями, определяющими производственные издержки, являются сбор водорослей и извлечение каротеноидов. В настоящем документе рассматриваются различные технологии извлечения микроводорослей каротеноидов на основе опубликованной литературы из внутренних и международных источников с целью обеспечения основы для дальнейших исследований и разработок в области микроводорослей каротеноидов.

1 распространенные высокопроизводительные микроводоросли с высоким содержанием каротеноидных соединений

Исследования микроводорослей как источника каротеноидов начались в 1960 - х годах. На сегодняшний день микроводоросли, богатые каротеноидами, в основном относятся к хлорофитинскому подклассу, включая хлорореллу, скэнедемус, хламидомоны, дунальеллу, муриеллопс и гематококку. Среди этих видов дуналиелла салина и - гематококк6. Плювиалис (pluvialis)были использованы для коммерческого производства грау-каротин и астакзантин. Общие микроводоросли, производящие различные каротеноиды, и их содержание показаны в таблице 1.

2  Методы экстракции каротеноидов из микроводорослей

В последние годы вопрос о Том, как эффективно извлекать каротеноиды из микроводорослей, стал одним из ключевых направлений исследований и изысканий ученых во всем мире. Процесс получения каротеноидов из микроводорослей, как правило, включает следующие этапы: сбор биомассы водорослей Однако сбор, сушка и разрушение клеток водорослей требуют значительного потребления энергии, что приводит к высоким производственным издержкам. Некоторые исследователи усовершенствовали традиционные методы экстракции, объединив сбор микроводорослей, разрушение стенки клеток и экстракцию в Один процесс или отказавшись от этапа сушки, тем самым упростив операционные этапы, сократив потребление энергии и снизив производственные издержки. В настоящее время основными методами извлечения каротеноидов из микроводорослей являются: экстракция органических растворителей, экстракция растворителей под давлением, экстракция сверхкритических/подкритических жидкостей, экстракция В случае необходимостиНа месте происшествияи двухфазная экстракция.

2.1 метод экстракции органических растворителей

Традиционный метод экстракции органических растворителей является одним из наиболее широко используемых методов экстракции каротеноидов из микроводорослей. Однако некоторые высокоурожайные водоросли, производящие каротеноидные водоросли, такие как хлорелла, скэнедемус и муриеллопс, имеют чрезвычайно жесткие клеточные стенки, что затрудняет разрушение клеточных стенок и часто приводит к неполному извлечению каротеноидных соединений. Таким образом, до извлечения каротеноидов из микроводорослей необходимо разрушение стенок клеток или могут использоваться вспомогательные методы извлечения для одновременного выполнения операций по разрушению стенок клеток и извлечению.

CerПо состоянию наet - эл. - привет.[15] извлек лютейн из Скэнедемус (Scenedesmus)almeriensis и сопоставил воздействие пяти различных методов разрушения стенок клеток (раствор оксида алюминия, фрезерование шаров, фрезерование шаров оксида алюминия, ультразвуковое нарушение и фрезерование шаров оксида алюминия в сочетании с ультразвуковым нарушением) на эффективность извлечения лютейна. Было установлено, что нарушение работы клеток значительно повлияло на эффективность извлечения лютеина, при этом оптимальным методом нарушения работы клеток было фрезерование шаров оксида алюминия в течение 5 минут, достигнув уровня извлечения 98%, в то время как уровень извлечения из неразбитых клеток составлял только 40%.

Deenu et al. [16] оптимизировали технологические условия для извлечения лютеина из порошка хлореллы вулгарис с помощью ультразвуковой экстракции 90% этанола. При оптимальных условиях ультразвуковой мощности 35 КГЦ, ультразвуковой интенсивности 56,58 вт/см, температуре экстракции 37,7 вт/см, времени экстракции 5 ч и соотношении твердых жидкостей 31 мл/г, содержание лютеина составило (3,16 ² 0,03) мг/г. Жао сяоян и др. [17] оптимизировали условия экстракции астаксинтина из гематококкового плувиалиса с использованием органических растворителей с микроволновой поддержкой переменной частоты (этилацетат: этанол = 1,2; V /v. При оптимальном соотношении жидкости к твердым, температура экстракции и время экстракции 200:1,45 градусов и 20 минут, соответственно. Уровень извлечения астаксантина составил 36,88%. Это исследование показало, что смешанная экстракция органических растворителей с помощью микроволн с переменной частотой может быстро повысить скорость экстракции астаксинтина из гематококковой плавиалисы. В таблице 2 резюмируются принципы и преимущества/недостатки ряда широко используемых методов разрушения стенок микроводорослей.

Каротеноиды в микроводорослях существуют в основном в двух формах: свободных и жирных кислотных эфирах [20]. Однако каротеноиды, извлекаемые с использованием органических растворителей, часто содержат такие примеси, как хлорофилл и масла. Присутствие этих веществ влияет на чистоту извлекаемых каротеноидов и влияет на последующие этапы переработки. Сапонификация образцов каротеноидов не только высвобождает связанные каротеноиды, увеличивая содержание свободных каротеноидов, но и эффективно удаляет примеси, такие как хлорофилл и масла, повышая тем самым чистоту извлекаемых образцов каротеноидов [21].

Реагенты сапонификации обычно выбираются в качестве метанола или водного раствора ко, который может быть использован для сапонификации при комнатной температуре или при соответствующем нагревании образца в целях сокращения времени сапонификации; После сапонификации экстракция осуществляется с использованием органических растворителей с низкой полярностью, таких как гексан или нефтяной эфир; Наконец, экстракционный продукт промывается водой для удаления ко. Однако сапонификация может привести к повреждению каротеноидов и снижению их урожайности; Поэтому условия сапонификации должны строго контролироваться, с тем чтобы свести к минимуму потери. CerПо состоянию наet al. [15] предложили процесс экстракции, подходящий для промышленного производства лютейна из альмериенсических водорослей, и оптимизировали условия экстракции. Этот метод состоит в основном из трех этапов: разрушение клеток, щелочная обработка и экстракция растворителей. Результаты оптимизации показали, что предварительная обработка порошка водорослей с использованием шарового фрезерования оксида алюминия в течение 5 минут с последующей обработкой с использованием раствора 4% w/v KOH для 100 г/л биомассы водорослей в течение 5 минут и, наконец, извлечение с использованием гексана того же объема, что и проба, с использованием шести экстракций позволили добиться коэффициента восстановления лютеина в 95%.

Если используются традиционные методы экстракции, то для экстракции каротеноидов из микроводорослей требуются такие шаги, как сбор и сушка, что ведет к увеличению производственных издержек. Канг и др. [22] используют новый метод экстракции растворителей для экстракции свободного астаксинтина из плавиалиса гематококка. Этот метод состоит из двух этапов. На первом этапе они извлекли астакзантин и астакзантин эфиры из культурного носителя - гематококкpluvialis с использованием додекана, а затем отделили додекан от культурного носителя, содержащего фрагменты клеток; На втором этапе додекан постоянно смешивался с равным объемом 0,02 моль/л naohметанола раствора, в ходе этого процесса астаксантин и его эфиры в додекановой фазе непрерывно перемещаются в метаноловую фазу. Астаксантин эфиры преобразуются в свободный астаксантин через сапонификацию в метаноловой фазе. Наконец, эти две фазы разделены, и додекановая фаза может быть использована повторно. Показатели извлечения астаксантина на двух этапах составили 95% и 85% или выше, соответственно. По сравнению с другими методами добычи этот метод устраняет необходимость сбора микроводорослей, является простым в эксплуатации, характеризуется низким энергопотреблением и имеет высокую ценность с точки зрения разработки и применения. Однако из-за летучести и токсичности органических растворителей, которые вредны для здоровья человека и окружающей среды, зеленые растворители, такие как растительные масла, могут использоваться для замены традиционных органических растворителей для извлечения каротеноидов из микроводорослей.

Канг и др. [23] использовали несколько распространенных растительных масел (соевое масло, кукурузное масло, виноградное семя и оливковое масло) для извлечения астаксантина из гематококкового плавиалиса. При комнатной температуре, равные объемы растительного масла и гематококковой плювиалиновой культуры были смешанными, энергично возбуждены, чтобы сломить клетки водорослей, и позволили осести, чтобы разделить две фазы. Растительное масло извлекало астаксантин из водорослей, при этом водоросли оставались в нижней фазе, а нефтяная фаза достигла коэффициента восстановления более 88%. Этот метод является экологически чистым и эффективно сохраняет стабильность и естественные свойства масла. После экстракции методы адсорбции могут использоваться для отделения микроводорослей каротеноидов от растительного масла. Бахарин [24] использовал два вида макропористых адсорбционных смол для адсорбции каротиноидов из пальмового масла. После адсорбции адсорбент отделялся от пальмового масла, а каротеноиды на адсорбенте десорбировались с помощью метода экстракции Soxhlet.

2.2 метод экстракции растворителя под давлением

Под давлением жидкая экстракция (PLE), также известная как ускоренная экстракция растворителей (ASE), является новым методом предварительной обработки проб, который получил широкое применение в сельском хозяйстве, пищевой промышленности, окружающей среде и медицине [25]. Принцип предполагает повышение растворимости веществ и диффузионной эффективности растворов в условиях высокой температуры (50-200 градусов) и высокого давления (500-3000 фунтов на квадратный дюйм), тем самым повышая эффективность экстракции [26]. По сравнению с другими методами экстракции, PLE обладает такими преимуществами, как короткий срок экстракции, снижение расхода растворителей, высокая эффективность экстракции и высокая автоматизация.

Кастра-пуяна и др. [27] применяют пло для извлечения каротеноидов из богатых нефтью зеленых алгановых неохлористых олеовлажнов, одновременно сравнивая эффективность извлечения пла с традиционными методами органического растворителя. Результаты показали, что при 100% экстракции этанола при 100 градус в течение 20 минут, уровень экстракции каротеноидов составил 32,6%, что значительно выше, чем при использовании ацетона, содержащего 0,1% (вт/в) бутилового гидрокситолуола, который дал только 28,3%.

Хотя метод PLE может обеспечить высокую скорость извлечения каротеноидов, грима и др. [14] отметили, что этот метод требует высокой температуры экстракции, которая может привести к превращению хлорофилла в микроводорослей в токсичный хлорофилл, истощенный магнием, тем самым влияя на активность извлекаемых каротеноидов. Таким образом, метод PLE имеет определенные ограничения для извлечения каротеноидов из микроводорослей. Jaime et al. [28] использовали метод PLE для извлечения каротеноидов из гематококковой плувиалиса и сравнивали антиоксидантную активность каротеноидов, извлекаемых при различных температурах (50, 100, 150, 200 градусов). Результаты показали, что при 100% экстракции этанола в течение 20 минут коэффициент экстракции каротеноидов увеличивался при более высоких температурах, в то время как антиоксидантная активность экстрактов соответственно снижалась.

Вместе с тем ChA/данные отсутствуют.et al. [29] сопоставили воздействие метода пла с традиционным экстракцией растворителей, экстракцией сокшлета и экстракцией с помощью ультразвука на содержание каротеноидов, хлорофилла a, хлорофилла b и хлорфилла a, обедненного магнием, и хлорфилла кислоты A/данные отсутствуют.в хлорофиле хлорофилла. Они пришли к выводу, что по сравнению с другими методами экстракции метод PLE продемонстрировал более высокую эффективность экстракции для каротеноидов и хлорофилов. Кроме того, они отметили, что при температуре экстракции 160°C содержание в экстракте хлорфила, обедненного магнием, было самым низким (0,01 °) мг/г, в то время как традиционный метод экстракции растворителя, метод экстракции Soxhlet, методы экстракции с помощью ультразвука давали содержание хлорфила, обедненного магнием, 0,85 ° 0,09, 5,15 ° 0,59 и 2,15 ° 0,71 мг/г, соответственно. Они предположили, что это связано с высокими температурами (>) 110. Инактивация хлорофиллазы была произведена в более мягких условиях при температуре 20-80 градусов, когда хлорофиллаза оставалась активной, что ускорило преобразование хлорофилла в хлорофилл, истощенный магнием. Таким образом, метод PLE является весьма перспективным методом экстракции пигментов из микроводорослей.

2.3метод экстракции сверхкритической/подкритической жидкости

Сверхкритическая экстракция жидкостей (SFE) является экологически безопасной экологически чистой технологией экстракции, которая использует сверхкритические жидкости в качестве растворителей для отделения растворимых компонентов от целевого материала. Благодаря низкой вязкости и отличной диффузивности сверхкритических жидкостей, эффективность извлечения быстрее и эффективнее. Регулируя плотность сверхкритической жидкости, активные компоненты микроводорослей могут быть извлечены выборочно. После экстракции, путем повышения температуры или снижения давления, сверхкритическая жидкость преобразуется в обычный газ и высвобождается, не оставляя остатков растворителя в извлекаемых каротеноидах. Извлеченный порошок водорослей также может быть использован в дальнейшем. Сверхкритические жидкости имеют такие преимущества, как невоспламеняемость, токсичность и химическая стабильность, что приводит к повышению безопасности продуктов.

Kitada et al. [30] использовали сверхкритические CO₂ для извлечения каротиноидов и хлорофилла из хлореллы вулгарис, изучая влияние экстракционного давления, температуры и растворителей (этанол и ацетон) на содержание пигмента в экстракте, и сравнивали результаты с результатами традиционного метода экстракции Soxhlet.

Исследование показало, что оптимальное давление и температура вытяжки составляют 50 мпа и 80° с. Сверхкритическая CO₂ экстракция может избирательно извлекать лютеин, но скорость экстракции низкая. Добавление 7,5% этанола в качестве сорастворителя фактически увеличивает содержание лютеина в экстракте, но также увеличивает содержание хлорофилла, что приводит к снижению чистоты извлекаемого лютеина. По сравнению с методом SFE, метод экстракции Soxhlet имел самый высокий уровень экстракции пигмента. В ответ некоторые ученые предложили более эффективное решение. Бинг и др. [31] использовали метод экстракции сверхкритической жидкости с использованием антирастворителя (пфэ) для очистки зеаксантина от сырой экстракции, полученной с помощью метода экстракции Soxhlet микроводорослного нанохлоропса oculata. Результаты показали, что чистота zeaxanthВ случае необходимостидостигла 93,8%. Этот метод сочетает в себе преимущества традиционной экстракции органических растворителей и овсе и в то же время позволяет эффективно избегать таких недостатков органических растворителей, как токсичность и низкая чистота экстрактов. Поэтому она обладает значительным потенциалом для развития в области микроводорослей каротеноидов.

Подкритическая экстракция жидкости (SFE) является новым методом экстракции, который использует подкритические жидкости в качестве экстрагентов. Он передает липофильные компоненты из извлекаемого материала в жидкий экстрагент через молекулярную диффузию, за которой следует разделение экстрагента и целевого продукта через процесс вакуумного испарения. Подкритические жидкости-это жидкости, находящиеся на краю сверхкритического состояния, при давлении, превышающем критическую точку, и температуре ниже критического значения, образующие жидкость высокого давления. По сравнению с сверхкритическими жидкостями, подкритические жидкости требуют более низких температур, ближе к комнатной температуре, что устраняет необходимость в отопительном оборудовании, делая его более экономически жизнеспособным с точки зрения инвестиций в оборудование и потребления энергии. Кроме того, при Том же давлении, subcritical CO₂ имеет более высокую плотность и более высокую растворимость, чем supercritical CO₂. В настоящее время мало исследований по извлечению каротеноидов из микроводорослей с использованием подкритического извлечения жидкости. Только хуан синсинь и др. [32] провели соответствующие исследования. Для извлечения лютеина из хлореллы они использовали усовершенствованную ультразвуковой субкритическую технологию CO₂ и исследовали оптимальные условия технологического процесса, в конечном итоге определяя оптимальные условия следующим образом: температура экстракции 25°C, давление экстракции 11 мпа, скорость потока жидкости 30 кг/ч, дозировка агента-перевозчика (безводного этанола) 1,5 мл/г, время экстракции 3 часа, и мощность ультразвука 750 вт. В этих условиях содержание лутеина составило 68,85 мг /100 г порошка хлореллы.

2.4 метод извлечения на месте

Экстракция In situ означает непрерывное смешивание водорослей с биологически совместимым органическим растворителем для экстракции каротеноидов в стадию органического растворителя, в то время как микроводоросленные клетки продолжают синтезировать каротеноиды, обеспечивая тем самым одновременное выращивание микроводорослей и экстракцию каротеноидов. Это устраняет необходимость сбора микроводорослей, повышает урожайность каротеноидов и снижает производственные издержки.

Hejazi et al. [33] применили метод экстракции В случае необходимостиsitu к производству грау-каротина из дуналиэллы салины. После того как клетки - дуналиелла.* салина * *были отрублены в нормальных условиях, они были переданы биореактору, как показано на рис. 1. Сильное световое облучение привело к образованию большого количества грава-каротина, в то время как додекан постоянно вводился в дно водорослей раствора. Додекан извлекал грау-каротин из водорослей через водную фазу, и, наконец, под действием насоса додекан был переработан из верхней фазы обратно в нижнюю, чтобы продолжить цикл. Эксперименты показали, что при сильном облучении светом и в присутствии додекана дунальелла салина все еще может выжить (> 47 дней), хотя рост клеток замедлился, а скорость извлечения грава-каротена превысила 55%. Клейнегрис и др. [34] исследовали механизм экстракции на месте, применяемый к соленым водорослям. Они обнаружили, что контакт между солеными водорослями и водно-органическим фазовым взаимодействием приводит к гибели клеток, а последующее разрушение клеток приводит к высвобождению каротеноидов, что позволяет эффективно осуществлять процесс экстракции.

Хотя метод экстракции В случае необходимостиsitu может устранить обременительные операционные этапы традиционных методов экстракции, Клейнегрис (Kleinegris)et al. [35] пришли к выводу, что объем добычи грава-каротины из дуналиеллы салины с использованием метода экстракции in situ был относительно низким - 8,3 мг/л · д, в то время как традиционный метод экстракции дал 13,5 мг/л · д. Кроме того, эмульсификация двухфазных растворителей и непрерывное накопление кислорода в биореакторе препятствуют росту дуналиэллы салины, в то время как сильное воздействие света приводит к деградации гравитационного каротина. Эти недостатки препятствуют дальнейшему развитию метода экстракции in situ.

2.5 двухфазная экстракция воды (ATPE)

Водяная двухфазная экстракция (ATPE) возникла в 1960 - х годах и является весьма перспективной технологией разделения твердых жидкостей. По аналогии с общим принципом экстракции воды органическими методами она отделяет компоненты на основе их различных моделей распределения между двумя этапами. Системы атпе имеют широкие перспективы применения при извлечении и разделении биоактивных веществ.

В настоящее время мало исследований посвящено извлечению каротеноидов с использованием атпе. Только Cisneros et al. [36] провели соответствующие исследования, используя прототекоиды хлореллы после сбора урожая для изучения поведения лютеина в фосфатной водной двухфазной системе. Сначала они добывали лютейн из навозной жижи водорослей, используя этанол в 30 процентах сырого веса водорослей, а затем добывали сырой экстракт в двухфазной системе, состоящей из 22,9 процента (вт/вт) пег 8000 и 10,3 процента (вт/вт) фосфата при pH 7,0. Результаты показали, что большинство каротеноидов было распределено в верхней фазе, с фрагментами водорослей в нижней фазе, и выход каротеноидов составил 81,0% ± 2,8%. Этот метод обеспечивает более широкую перспективу для исследований и разработок методов извлечения каротеноидов из микроводорослей.

3   Перспективы на будущее

Микроводорослей богаты каротеноидами с высоким содержанием и разнообразными типами, и они обладают такими преимуществами, как короткие циклы выращивания, простота в управлении условиями выращивания и способность к непрерывному производству, что делает их отличным источником каротеноидов. Однако подготовка каротеноидов из микроводорослей является дорогостоящим процессом, серьезно ограничивающим исследования и разработки микроводорослей. В настоящее время для извлечения каротеноидов из микроводорослей используются главным образом механические нарушения работы клеток в сочетании с органическими растворителями. Этот метод прост в использовании и легко поддается масштабированию для промышленного производства, но требует значительного потребления энергии и органических растворителей. В последние годы благодаря разработке новых методов экстракции, таких, как ультразвуковая экстракция, микроволновая экстракция и ускоренная экстракция растворителей, о которых упоминалось выше, появилась возможность эффективно повышать показатели экстракции каротеноидов, сокращать сроки экстракции и в различной степени сокращать потребление растворителей. Однако эти методы неизбежно предполагают использование органических растворителей, которые не являются экологически безопасными.

В отличие от этого, сверхкритическая/подкритическая экстракция жидкости соответствует принципам «зеленой химии», производя каротеноидные продукты с высокой безопасностью. Однако этот метод имеет высокие требования к оборудованию и обеспечивает более низкие показатели извлечения каротеноидов по сравнению с методами, основанными на растворителях. Все вышеупомянутые методы требуют сбора биомассы водорослей, что неизбежно увеличивает производственные издержки. В отличие от этого добыча на месте может эффективно избегать процесса сбора урожая, позволяя одновременно выращивать микроводорослей и извлекать каротеноиды, тем самым сокращая потребление энергии и снижая производственные издержки. Однако этот метод все еще находится на стадии разработки и сталкивается с такими проблемами, как низкие показатели добычи. Подводя итог, можно сказать, что, хотя были проведены обширные и углубленные исследования по добыче каротеноидов из микроводорослей и был достигнут определенный прогресс, в настоящее время не существует метода, который одновременно обладал бы высокой эффективностью добычи, гибкостью, быстротой, экологичностью и низкой стоимостью.

Поэтому для увеличения производства каротеноидов и сокращения производственных издержек в будущем развитие микроводорослей должно быть сосредоточено на следующих областях: во-первых, выявление быстро растущих, экономически жизнеспособных водорослей с высоким содержанием каротеноидов; Во-вторых, принятие надлежащих методов добычи, упрощение этапов добычи, оптимизация процессов добычи и сокращение производственных издержек при постоянном совершенствовании существующих методов; Исследования и разработка новых технологий для достижения промышленного производства микроводорослей каротеноидов; В-третьих, использовать современные методы генной инженерии для изменения микроводорослей и ускорения индустриализации производства микроводорослей. С учетом продолжающегося развития новых микроводорослей и постоянного совершенствования процессов добычи, не так далеко продвинулось крупномасштабное коммерческое производство микроводорослей каротеноидов.

Ссылка на сайт

[1]Venil CK,Zakaria ZA,WА вот и нет.AA. Бактериальные пигменты и их применение [J]. Биохимия процессов,2013,48 (7) : 1065 — 1079.  [2]HСоединенные Штаты америкиKHVH,G注rtner - к, вирсма A,et ии Al. Сравнение В области биодоступности Соединенные Штаты америки  По окружающей среде  В чем дело?  1. Нефть  - каротеноиды и   Синтетический грау-каротин in   Люди [J]. Журнал по теме  Соединенные Штаты америки В сельском хозяйстве  и Пищевая химия,1999,(4) : 1582-1586.

[3] джилл - GKCBS. Производство и продажа и 3. Определение характеристик Соединенные Штаты америки Микробные каротеноиды как альтернатива синтетическим цветам: обзор [J]. International Журнал по темеСоединенные Штаты америки- продукты питанияProperties,2011,14 (3) : 503-513.

[4] ахмед ф, фаннинг к, нецель м и др Антиоксидант (антиоксидант) - пропускная способность Соединенные Штаты америки От микроводорослей  Субтропические субтропические зоны Прибрежные и солоноватые воды [J]. Пищевая химия,2014,165:300 — 306.

[5] клейнегрис Дм, янссен М, бранденбург ва и др Al. 2 - 1. Этап 1 Системы: потенциальные возможности  для  in   situ  1. Извлечение Соединенные Штаты америки  Микроводоросли [J]. Достижения биотехнола,2011,29 (5) : 502-507.

[6] ибаес - э, сифуэнтес A. выгоды от инвестиций Соединенные Штаты америки Использование программного обеспечения  - водоросли По состоянию на 31 декабря Природные источники функционального Ингредиенты [J]. Журнал по теме Соединенные Штаты америки В настоящее время Наука и техника Продовольствия и сельского хозяйства,2013,93 (4) : 703-709.

[7]MogedПо состоянию на 31 декабряB,Casal C, Forjan И, и, иal.Beta-carotene повышение производительности уф-излучения в дунальелле бардавиль культивируется  А. лабораторные исследования   - реакторы. [J] .   Журнал по теме   Соединенные Штаты америки   3. Бионаучные науки    И биоинженерия,2009,108 (1) : 47 — 51.

[8] абе - кей, хаттори Хирано м. скопление И антиоксидант Деятельность организации объединенных наций  Соединенные Штаты америки  Вторичные продукты питания   - каротеноиды   in    В настоящее время   Средства массовой информации   Организация < < микроалга > > Коэластрелла стриолата Var. multistriata[J]. - продукты питания Химия,2007 100(2) : 656-661.

[9] у чанцзюнь, тан синьюн. Влияние света на рост и накопление зааксантина в мутантном водорослях дублиниенса сальмоидов, рвение [J]. Наука о еде,2012,03:199-202.

[10] ляу Бк, Гонконг Се, чан, LP,et al. Разделение В поле зрения... Охрана окружающей среды Зеаксантин (zeaxanthin)  Из российской федерации  - наннохлоропсис  < < окуката > > По запросу: Использование сверхкритических жидкостей экстракции в сочетании с элюсионной хроматографией [J]. Технология разделения и очистки,2011,78 (1) : 1-8.    [11] Песня для песни  # k, ча #  Кх, песня  Гд, и al.  3. Оптимизация - под давлением  В жидком состоянии   1. Извлечение   Соединенные Штаты америки   Зеаксантин (zeaxanthin)   Из российской федерации    - хлорелла?ellipsoidea[J]. Журнал по теме Соединенные Штаты америки Применение на практике  Филология,2012,24 (4) : 725-730.

[12] Анна Джей-ф, фернандес - джей Эм, асьен FG,et Al. Влияние Соединенные Штаты америки Положение в области культуры По состоянию на В настоящее время Производительность и содержание lutein В настоящее время Новый штамм Scenedesmus  Almeriensis [J]. В рамках процесса Биохимия, 2008,43 (4) : 398 — 405.

[13]Inbaraj BS,Chien JT,Chen BH. Улучшенный высокопроизводительный жидкостный хроматографический метод определения содержания каротеноидов в организме   Организация < < микроалга > >    - хлорелла?    - пиреноидза  [J] .    Journal     Хроматография а,2006,1102 (1-2) : 193-199.

[14] Fernandez-sevilla JM, Acien Fernandez FG,Molina Grima E.Biotechnological Производство и продажаСоединенные Штаты америки1. Лутейниits Применение [J]. Прикладная микробиология и биотехнология,2010,86(1) : 27-40.

[15] серон Мц, кампос I, санчес JF,et Al. Восстановление организма - из лютейна   - микроводоросли   Биомасса: развитие    Соединенные Штаты америки    a    В рамках процесса    Для биомассы Scenedesmus almeriensis [J]. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии,2008,56(24) : 11761 — 11766.

[16]Deenu A,Naruenartwongsakul S,Sang MK. Оптимизация и Экономический и социальный совет  Iii. Оценка  Соединенные Штаты америки  - ультразвук   1. Извлечение  Соединенные Штаты америки  1. Лутейн   Из российской федерации Chlorella vulgaris[J]. Биотехнология и биотехнологическая инженерия, 2013,18 (6) : 1151 — 1162.

[17] чжао сяоян, чэнь цзюнь, чэнь фэнлян и др. Исследование по извлечению астаксантина из радужных красных водорослей с помощью метода переменной частоты микроволновой связи [J]. Наука и техника о продовольствии,2014,03:188 — 193.

[18] Gunerken E,Hondt ED,Eppink MHМ, иal. Cell дляmicroводоросли biorefineries[J]. Достижения биотехнологии,2015, 33 :243 — 260.

[19] чжун юньшань, сюй янкан, цзин Берлин и др. Исследования и разработки в области продовольствия,2014,14:120 — 124.

[20] аром-каррилью Кт, сепеда A, < < фенте > > C,et и Al. Обзор Методы анализа каротеноидов [J]. Тенденции проф в аналитической химии,2014:49-73.

[21] гранадо - ф, ольмедилла Би, Гил-мартинес E,et  Al. A - быстро, Надежность и надежность и  Низкая-стоимость  1. Сапонификация  Протокол к конвенции для 3. Анализ Соединенные Штаты америки Каротеноиды в крови Овощи [J]. Журнал по теме Соединенные Штаты америки - продукты питания Состав и состав комитета Анализ,2001 год,14 (5) : 479-489 (11).

[22] кан CD,Sim - СИ джей. Селективная экстракция Соединенные Штаты америки - бесплатно; От астаксантина Haematococcus   Культура и искусство  Использование программного обеспечения  a   По тегу тандем  Органический пероксид (органический пероксид) Система растворителей [J]. Прогресс в области биотехнологии,2007 год,23 (4) : 866-871.

[23] кан CD,Sim - СИ джей. Прямой доступ к интернету 1. Извлечение Соединенные Штаты америки - астаксантин  Из российской федерации Культура гематококка с использованием растительных масел [J]. Биотехнол летт, 2008,30(3) : 441 — 444.

[24] бахарин Б, латип, б Ра, че, - привет. - привет. YB,et Al. Эффект - из каротина 1. Извлечение В системе организации объединенных наций on  В общем и целом В чем дело? 1. Нефть Качество, состав и стабильность каротина во время хранения. J Am Oil Chem Soc,2001,78 (8) : 851 — 855.

[25] сантойо С, родригес мейзосо Я, сифуэнтес A,et  Al. Зеленые процессы, основанные на экстракции под давлением жидкостей, чтобы получить мощный Противомикробные препараты Из российской федерации Haematococcus  pluvialis  Микроводоросли [J].  Lwt (Lwt)   Food    Наука и техника  и  Технологии,2009,42  (7) : 1213-1218.

[26] гон дж., сюй L, янь, Франция Y,et Al. Последовательность действий Организация < < эйс > > 1. Извлечение - алкилфенолов  Из российской федерации   Осадочные отложения: Число случаев заболевания   и  Экологические последствия [J]. J опасный матер,2011,192 (2) : 643-650.

[27] кастро пуяна м, херреро м, уррета и др. оптимизация Чистые методы экстракции, чтобы изолировать каротеноиды от микроводорослей 2. Нехлорис       Люди на земле       и       Последующие мероприятия в рамках        По химическому оружию 3. Определение характеристик   Использование программного обеспечения   В жидком состоянии   3. Хроматография    По тегу тандем   масса Спектрометрия.[дж] В целях анализа и 3. Биоанализ Химия,2013 405 (13) : 4607-4616.

[28] хайме л, родригес мейзосо I, сифуэнтес а и др. под давлением Жидкости для жидкостей as   an   Альтернативные варианты  В рамках процесса  По адресу: Антиоксидант (антиоксидант) - каротеноиды * * * *#- 39; Экстракция из микроводорослей Haematococcus pluvialis [J]. Продукты питания Lwt Наука и техника,2010,43:105 — 112.

[29]Cha KH,Lee HJ,Song YK,et al. Оптимизация герметизированной жидкости 1. Извлечение of  - каротеноиды И хлорофилы из Хлорелла вулгарис.[дж]. J Agric Food Chem,2010,58 (2) : 793-797.

[30]Kitada K,Machmudah S, сасаки, Россия M,et  Al. Сверхкритическое состояние 2. CO2 Экстракция пигментных компонентов фармацевтического значения из хлореллы вулгарис [J]. Журнал по теме В области химической технологии И биотехнология,2009,84 (5) : 657 — 661.

[31] ляу Бк, шэнь Кт, лианг Фп, и др. Al. Сверхкритическое состояние Экстракция жидкостей and   Противорастворители-растворители  Очистка от загрязнения  of   - каротеноиды  От микроводорослей и связанной с ними биоактивности [J]. Журнал сверхкритических жидкостей,2010,55 (1) : 169-175.

[32] хуан син-син, цю тай-цю. Ультразвуковая подкритическая экстракция CO2 лютеолина из хлореллы вулгарис [J]. Наука и технологии пищевой промышленности,2010,31 (04) : 212 — 215.

[33] хиджази - ма, хольверда - э, виджефелс  О, боже мой. Доение и доение Микроалга дуналиелла salina  for   Бета-каротин production  in  2 - фазовые биореакторы [J]. Биотехнология и биоинженерия,2004,85 (5) : 475-481.

[34] клейнегрис DM, ван эс ма, янссен м и др. фазовая токсичность додекана on   В настоящее время Организация < < микроалга > > Dunaliella  Салина [J]. Журнал по теме Прикладная филология,2011,23 (6) : 949 — 958.

[35] Kleinegris   Дм, янссен  М. : бранденбург  За, и, и Al. Непрерывное производство каротеноидов из Dunaliella salina[J]. Фермент Microb Technol,2011,48 (3) : 253-259.

[36] сиснерос - м, бенавидес - джей, бренес.  Ч, и Al. Восстановление организма В водном мире Два этапа-этап Системы организации объединенных наций of  lutein   Производство и продажа  По запросу: В настоящее время Зеленый микроводород Chlorella  Прототекоиды [J]. - J.  - хроматог B. Анализатор биомед жизни Sci,2004,807 (1) : 105-110.