В чем преимущество гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом?

Гиалуроновая кислота представляет собой большую молекулу мукополисахаридОбычно встречается в позвоночниках позвоночных и капсулах некоторых бактерий. Благодаря высокой вязкости и пластичности, превосходному удержанию и проницаемости воды, а также хорошей биосовместимости гиалуроновая кислота широко используется в медицине, фармацевтике, косметике, пищевой и других областях. Промышленное производство гиалуроновой кислоты осуществляется в основном двумя способами: извлечение из животных тканей и микробная ферментация. Извлечение гиалуроновой кислоты из тканей ограничивается нехваткой сырья и сложным процессом извлечения. Ферментация стала основным методом промышленного производства гиалуроновой кислоты [1]. В последние годы было установлено, что биологическая активность и эффект гиалуроновой кислоты напрямую связаны с ее относительным молекулярным весом (Mr), а гиалуроновые кислоты с различными молекулярными весами могут даже демонстрировать диаметрально противоположные биологические активности.

Гиалуроновая кислота с высоким молекулярным весом(Mr > 2×106) обладает хорошей эластичностью и увлажняющими свойствами, а также такими функциями, как подавление воспалительных реакций и смазки. Часто используется в офтальмологической хирургии вискоэластичными агентами и внутрисуставными инъекциями для лечения. Гиалуроновая кислота с Mr в диапазоне (1-2)×106 обладает хорошими увлажняющими свойствами, смазкой и устойчивым действием препарата. Может использоваться в косметике, глазных каплях, заживлении кожи и послеоперационной профилактике адгезии; Г-н ≤ 1 × 104 гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом (включая олигосахаридную гиалуроновую кислоту и о-гиалуроновую кислоту), которая обладает противоопухолевыми, раневыми, костно-ангиогенезом и иммунной регуляции, имеет широкие перспективы для фармацевтического применения [2-3] и привлекает широкое внимание исследователей внутри страны и за рубежом, став горячей точкой в исследованиях гиалуроновой кислоты.

1 физиологические функции гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом

Гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом, в Том числе гиалуроновая кислота олигосахариды, обладает характеристиками уникальной хорошей проницаемости, отличной биохимической совместимости и легкой абсорбции. Он в основном проявляет следующие важные биологические функции в организме человека.

1.1 стимулирующий эффект ангиогенеза

В отличие от ингибиторного эффектаМакро-молекулярная гиалуроновая кислотаПри неозиваскуляризации, малая молекулярная гиалуроновая кислота может стимулировать распространение и миграцию сосудистых эндотелиальных клеток в аорте и капиллярах, способствуя формированию новых кровеносных сосудов. Ангиогенез необходим для нормального роста тканей и восстановления ран. Таким образом, малая молекулярная гиалуроновая кислота может противодействовать снижению кровеносных сосудов, вызванным старением и радиотерапией. В настоящее время механизм, с помощью которого малая молекулярная гиалуроновая кислота способствует ангиогенезу, до сих пор не совсем ясен. Исследования показывают, что это может быть через активацию кинасов в пути преобразователя сигнала рецепторами на поверхности сосудистых эндотелиальных клеток или гиалуронических кислотно-связывающих белков, что приводит к тому, что преобразователь сигнала играет определенную роль [3-5].

1.2 содействие заживлению ран

Когда травма происходит на поверхности тела,Местная гиалуроновая кислотаСодержание немедленно и значительно увеличивается. Высокая молекулярная масса и высокие концентрации гиалуроновой кислоты могут препятствовать движению клеток, распространению, дифференциации и фагоцитозу. Гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом имеет обратный эффект, будучи в состоянии проникать в дермы, удалять свободные от кислорода радикалы, защищать грануляционную ткань от повреждения свободными от кислорода радикалами, и способствовать выражению воспалительных факторов, тем самым способствуя ангиогенезу для достижения цели содействия заживлению ран [6-7].

1.3 иммуномодулирующий эффект

Об этом сообщается во многих исследованияхГиалуроновая кислота с высоким молекулярным весомИ гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом порошок имеет различные физиологические реакции на воспаление. Гиалуроновая кислота с высоким молекулярным весом может подавлять фагоцитическую способность макрофагов, в то время как гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом может способствовать выражению некоторых молекул, связанных с воспалением макрофагами. Нофлах [8] и другие исследования показали, что гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом и циклоспорин, при их использовании в комбинации, могут уменьшить реакцию отбракования организма после трансплантации органов. Из этого следует, что гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом может быть связана с рецептором CD44 на поверхности клетки, что не позволяет лейкоцитам и клеткам T входить в пересаженный орган, тем самым снижая реакцию отторжения организма. Тер меер и др. [9] обнаружили, что о-гиалуроновая кислота с относительной молекулярной массой 800-3200 может вызывать созревание дендритных клеток человека и мышей и способствовать образованию таких цитокинов, как интерлейкин и некроз опухоли, дендритными клетками [10]. Поэтому иммуномодуляторный эффект гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом может проявляться через мощную активацию иммунных клеток и стимуляцию цитокиновой активности.

1.4 содействие образованию костей

Пиллони и др. [11] нашли этоГиалуроновая кислота с низким молекулярным весомС Mr 3 × 104 может способствовать миграции и дифференциации мезенхимальных клеток в пробирке, тем самым способствуя образованию костей. В патентах сообщается, что низкомолекулярная гиалуроновая кислота может стимулировать распространение остеоблостов, выращиваемых в пробах, увеличивая количество остеоблочных колоний в культурной среде и площади отдельных колоний. Таким образом, внутрисуставная инъекция гиалуроновой кислоты не только смазывает полость сустава, но и способствует росту клеток как таковойГиалуроновая кислота деградировалаВ гиалуроновую кислоту с низким молекулярным весом.

1.5 гиалуроновая кислота и опухоли

В последние годы было проведено большое число исследований по вопросу о взаимосвязи между нимиГиалуроновая кислота и опухолиУстановлено, что развитие опухоли может быть связано со значительными изменениями в балансе гиалуроновой кислоты в организме. Эти существенные изменения включают в себя не только изменения количества гиалуроновой кислоты, но и, что более важно, различия в молекулярном весе гиалуроновой кислоты. В настоящее время появляется все больше свидетельств того, что эндогенная гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом позитивно коррелируется с высокой злокачественностью опухоли, в то время как экзогенная гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом имеет антиопухолевую активность.

1.5.1 развитие гиалуроновой кислоты и опухоли

Гиалуроновая кислота является одним из важных компонентовИз внеклеточной матрицы. В физиологических условиях гиалуроновая кислота в организме человека играет важную роль в поддержании структурной целостности тканевой матрицы, динамического баланса внутриклеточной воды и белков, эндотелиального распространения клеток, распознавания клеток и их перемещения. Когда опухоль начинает развиваться, тело и#39. Существующая макромолекулярная гиалуроновая кислота может препятствовать росту опухоли и метастазу, препятствуя образованию новых кровеносных сосудов. Однако опухолевые клетки или связанные с раком стромальные клетки выделяют опухолевую макромолекулярную гиалуроновую кислоту, которая разрушает первоначальную ретикулярную структуру вокруг опухоли, обеспечивая высокогидратированный канал для опухолевых клеток и облегчая поступление питательных веществ в опухолевые клетки, тем самым способствуя росту опухолевых клеток и метастазу. В то же время опухолевые клетки выражают гиалуронидазу (гиаз), которая распахивает макромолекулярную гиалуроновую кислоту на малую молекулярную гиалуроновую кислоту, стимулируя высвобождение воспалительных факторов реакции, путем прикрепления к рецептору CD44 на поверхности сосудистых эндотелиальных клеток и гиалуроновых кислотно-медийных мобильных рецепторов (R гиалуроновая кислота мм), активирует внеклеточные светорегулируемые киназы, стимулирует распространение, Миграция и микрообразование сосудистых эндотелиальных клеток способствует неозиваризации опухолей, что приводит к появлению и развитию отдельных опухолей [12-14].

1.5.2 диагностика гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом и опухолей

По уровням образованияГиалуроновая кислота с высоким молекулярным весомВ опухолевых тканях и жидкостях тела многих онкологических пациентов значительно выше, чем у нормальных людей. Опухолевые клетки и связанные с ними стромальные клетки в высокой степени выражают гиалуроновую кислоту, и активность гиазы также повышается. По мере роста злокачественности опухоли увеличивается выражение гиалуроновой кислоты и гиазы в опухолевой ткани, а скорость разложения гиалуроновой кислоты превышает скорость разложения нормальной ткани, что приводит к повышению уровня гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом. Поэтому гиалуроновая кислота, гиаза и гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом высоко выражены в тканях и жидкостях организма злокачественных опухолевых пациентов и играют важную роль в диагностике и мониторинге злокачественных опухолей. Так как гиалуроновая кислота большого молекулярного веса легко деградирует в организме, гиаз имеет короткий срок пребывания и не легко обнаруживается, гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом считается важным маркером для обнаружения опухоли. Высокие уровни гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом часто указывают на высокую степень злокачественности и плохой прогноз. В то же время, уровни гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом позитивно коррелируют со стадией опухоли и сортностью. Поэтому уровни гиалуроновой кислоты в тканях и жидкостях организма могут быть использованы в качестве важного индикатора для раннего метастаза, рецидива и клинической постановки опухолей [14]. Разработка соответствующих реагентов обнаружения имеет хорошие перспективы применения.

1.5.3 противоопухолевый эффект гиалуроновой кислоты

На местном уровнеГиалуроновая кислота с низким молекулярным весомПоложительно коррелирует со злокачествами опухолей, но экзогенная гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом оказывает противоопухолевое действие [2-3, 14]. G гиалуроновая кислота tak et - эл. - привет.[15] обнаружили, что экзогенная гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом может подавить рост клеток рака молочной железы TA3/st мышей, клеток глиомы C6 крыс, опухолевых клеток HCT человека и клеток рака легких LX1 человека В случае необходимостиvitro с частотой ингибирования 50-100%. Дальнейшие исследования показали, что экзогенная гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом препятствует росту различных типов опухолевых клеток, сдерживая активность фосфолипазы 3- киназы и фосфорилирование киназов серина/трионина белка. Этот механизм может быть связан с конкурентоспособной привязкой к рецептору CD44. В то же время экзогенная гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом усиливает иммунное убийственное воздействие на раковые клетки, активируя дендритические клетки, и препятствует росту и распространению раковых клеток [2, 16].

1.5.4 гиалуроновая кислота и лекарственные средства для целевой терапии рака

Самым большим недостатком противоопухолевых лекарств является их низкая специфичность. Атакуя опухолевые клетки, они также атакуют нормальные ткани, вызывая серьезные неблагоприятные реакции. Целевая терапия опухолевыми препаратами может значительно уменьшить неблагоприятные реакции противоопухолевых препаратов. Так как некоторые твердые опухоли и метастатические лимфоциты имеют большое количество рецепторов гиалуроновой кислоты CD44 и R гиалуроновой кислоты мм на своих поверхностях, и они имеют aСильная привязанность к гиалуроновой кислотеГиалуроновая кислота может быть использована в качестве целевого носителя противоопухолевых препаратов. Для прикрепления меньших молекул препарата к ретикулярной структуре гиалуроновой кислоты или для пересадки молекул препарата на носители гиалуроновой кислоты, которые могут быть направлены на связывания рецепторами на поверхности опухолевых клеток, позволяя большему количеству молекул препарата проникать в опухолевую ткань, увеличивая время всасывания и удержания антиопухолевых препаратов в опухолях и лимфоузлах, тем самым повышая эффективность препарата и уменьшая его токсичные побочные эффекты [2-3, 6].

2 метод приготовления гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом

Из-за важной физиологической активности и особых физиологических функцийГиалуроновая кислота с низким молекулярным весом, подготовка гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом порошка стала горячей темой исследований внутри страны и за рубежом. В настоящее время гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом в основном готовится методами физического, химического и ферментативного разложения для преобразования макромолекулярной гиалуроновой кислоты в гиалуроновую кислоту с низким молекулярным весом [6, 17]. В последние годы многие исследователи также пытались непосредственно ферментировать и производить гиалуроновую кислоту с низким молекулярным весом, контролируя условия ферментации и улучшая штаммы.

2.1 метод физической деградации

Физические факторы, такие как отопление, механическая измельчение, ультрафиолетовое излучение, ультразвук, гравитационное излучение и гомогенизация под высоким давлением-все это может привести кДеградация гиалуроновой кислоты- да. Методы физического разложения имеют преимущества четкого принципа, нет необходимости добавлять какие-либо реагенты в процессе разложения, упрощенная постобработка, узкий диапазон распределения Mr результирующей гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом и хорошая термостабильность.

2.2 метод химической деградации

По химическому оружиюМетоды разложения гиалуроновой кислотыВ основном включают щелочный гидролиз, кислотный гидролиз и окислительную деградацию. Гидроксид натрия обычно используется для щелочного гидролиза, концентрированная соляная кислота-для кислотного гидролиза, а гипохлорит натрия (NaClO) и перекись водорода (H2O2)-для окислительной деградации. Молекулярный вес продукта можно контролировать путем изменения pH или количества окислителей и времени реакции. Химическое разложение является менее дорогостоящим и легким для массового производства, но продукт может содержать остатки химических реагентов. Кроме того, химическая деградация, особенно окислительная, может привести к изменению альдегидной кислоты или гидроксиловой группы в мономере гиалуроновой кислоты. Поэтому биологическая активность гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом, производимой химическими методами, может существенно различаться.

2.3 биохимическое разложение

Энзиматический гидролиз биологических макромолекул часто является предпочтительным для макромолекулярной деградации из-за его высокой специфичности, мягкой реакции условий и отсутствия побочных продуктов. Ферменты, которые конкретно разлагают гиалуроновую кислоту, - это гиалуронидаза и сульфат-лиаза хондроитина. Однако источники гиалуронидазы и сульфата хондроитина лиазы являются весьма ограниченными и дорогостоящими, что значительно ограничивает их применение. Гиалуронидасе долгое время игнорировался в прошлом из-за сложности изоляции и очистки и считался малозначимым для исследований. В последние годы, с открытием значения малой молекулы гиалуроновой кислоты и клиническим развитием гиалуронидазы как лекарственного средства permeabilizer, анестезирующего адвентиванта и послеоперационного восстановителя отеков, исследования по всем аспектам гиалуронидазы привлекли внимание людей#39;s внимание [18]. Энзиматический гидролиз является идеальным методом подготовкиГиалуроновая кислота с низким молекулярным весомПоскольку он очень специфичен, условия реакции мягкие, а структура полисахарида остается неизменной. Контролируя время разложения, можно получить гиалуроновую кислоту с различными молекулярными весами.

2.4 ферментация порошковой гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом

2.4.1 генная модификация синтетазы гиалуроновой кислоты

В настоящее времяСинтез гиалуроновой кислотыВ клетках требуется участие нескольких ферментов, среди которых синтез гиалуроновой кислоты (синтез гиалуроновой кислоты, S) является ключевым ферментом в пути синтеза гиалуроновой кислоты [1]. Pummill et al. [19] проанализировали взаимосвязь между различиями в последовательности аминокислотных соединений гиалуроновой кислоты S из различных источников и относительным молекулярным весом синтезированной гиалуроновой кислоты. Сделан вывод, что относительный молекулярный вес гиалуроновой кислоты связан с первичной структурой синтазы гиалуроновой кислоты.

Впоследствии вейгель и др. [20] подтвердили Pummill' вывод s путем внесения точечных мутаций в четыре остатка Cys в синтазе Стрептококк. Чтоsuis - гиалуронан(se-Hya). Было обнаружено, что когда Cys262 и Cys281 из se-Hya мутировали в Ala, молекулярный вес гиалуронана составлял всего 62% от дикого типа [21]. Кроме того, изменение лис48 остатков se-- гиалуронанS (мутированных в глу или Phe) может уменьшить молекулярный вес гиалуроновой кислоты. При одновременной мутации Lys48 и Glu327 в se-hyaluronan SНаименьший молекулярный вес гиалуроновой кислотыПолучено 0,6 мда, что составляет лишь 17% от дикого типа [22]. Приведенные выше результаты исследований показывают, что трансформация штамма гиалуроновой генов может получить штамм, который производит небольшую молекулярную гиалуроновую кислоту, а стабильную маленькую молекулярную гиалуроновую кислоту можно получить путем ферментации.

2.4.2 контроль за промежуточными продуктами ферментации молекулярного веса гиалуроновой кислоты

Насосная станция и др. [19] впервые подтвердили, что относительная сила каталитической активности гиалуроновой синтазы и ее способность связывать субструты могут регулировать молекулярный вес гиалуроновой кислоты.

В настоящее времяМолекулярный вес гиалуроновой кислотыСинтезированная гиалуроновой кислотой синтаза зависит от концентрации цепочки-прекурсора олигосахарида, концентрации субстрата и соотношения двух к концентрации гиалуроновой кислоты синтазы в процессе синтеза. Шенг и др. [23] поместили синтазы зоэпидемической кислоты стрептококка и ген UGD гиалуроновой кислоты под контроль двух различных промышленных промоуторов и ввели их в лактококковый актис. Было установлено, что на молекулярный вес биосинтезированной гиалуроновой кислоты влияет соотношение между концентрацией субстрата и концентрацией S гиалуроновой кислоты и что это соотношение положительно коррелируется с молекулярным весом биосинтезированной гиалуроновой кислоты. В то же время избыточное выражение генов, связанных с синтезом мочедифосфатной глюкуроновой кислоты, может также уменьшить молекулярный вес гиалуроновой кислоты. Таким образом, молекулярный вес гиалуроновой кислоты можно контролировать путем регулирования промежуточных продуктов ферментации в процессе ферментации.

2.4.3 условия культуры ферментации влияют на молекулярный вес гиалуроновой кислоты

Условия ферментации культуры являются ключевым фактором, влияющим на урожайность иМолекулярный вес гиалуроновой кислоты- да. Подходящие условия ферментации не только способствуют росту бактерий, но и улучшают способность микроорганизмов использовать субстрат, а также направляют метаболизм на синтез продуктов. Армстронг и др. [24] обнаружили, что урожайность и молекулярный вес гиалуроновой кислоты снижались, когда температура была выше или ниже 37 градусов. Молекулярный вес гиалуроновой кислоты тесно связан с содержанием кислорода в среде культуры. Высокое содержание кислорода в большей степени способствует синтезу гиалуроновой кислоты с высоким молекулярным весом, в то время как аноксические условия способствуют образованию гиалуроновой кислоты с малым молекулярным весом. Относительный молекулярный вес гиалуроновой кислоты, образованной с помощью глюкозы, значительно ниже, чем у пакетной культуры при тех же условиях [25].

3. Выводы

Гиалуроновая кислотаИмеет много отличных биологических видов деятельности. В частности, гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом может сдерживать возникновение воспаления, способствовать ангиогенезу, легко проникать в дермы, регулировать обмен веществ кожи, стимулировать кровообращение, способствовать заживлению ран, а также имеет противоопухолевую активность. Это также активатор иммунных клеток и цитокины. Она имеет широкие перспективы применения в области медицинских исследований. В то же время, гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом легко всасывается кожей и перорально, и имеет преимущества перед большей молекулярной гиалуроновой кислотой в развитии биологических агентов. Поэтому исследования по подготовке низкомолекулярной гиалуроновой кислоты, особенно использование генной инженерии и метаболической инженерии для создания инженерных штаммов для производства низкомолекулярной гиалуроновой кислоты, а также создание эффективных методов регулирования ферментации низкомолекулярной гиалуроновой кислоты имеют не только важное теоретическое значение, но и рыночную востребованность.

Ссылки на статьи

[1] Jiang YC, Jiang SY, Fu FM и др. Научно-исследовательский прогресс в области биосинтеза и генной инженерии гиалуроновой кислоты [J]. Китайский журнал биотехнологии, 2015, 35(1): 104-110.

[2] мича ск, ежи зн. Гиалуронан: к новым методам лечения рака [J]. Фармакологические отчеты, 2013, 65(5): 1056-1074.

[3] хуан юэшан, Пан йиминг, сюэ цзин. Исследования функций и применения гиалуроновой кислоты с различными относительными молекулярными весами [J]. Диализ и искусственные органы, 2011, 22(2): 10 — 13.

[4] юар Ди-СИ, кумар - с. В настоящее время Последствия изменения климата - гиалуронат и Его олигосахариды  По состоянию на  Эндотелия (эндотелия)  1. Ячейка Распространение ядерного оружия И монолайер тоже Целостность [J]. Бывшая югославская республика македония  1. Ячейка Res,1989,183(1): 179-196.

[5] рао См, деб Туберкулёз, Datta - к. - гиалуроническая болезнь - кислота; Искусственная гиалурония - кислота; Обязательные для исполнения документы Содержание белка в крови D. фосфориляция И в-оситол 3. Трифосфат 1. Формирование вооруженных сил В случае необходимости Лимфоциты [J]. Биохимия (биохимия)  * * * *  10. Молекулярная структура  1. Биология  Международный,1996,40 (2):327-337.

[6] цуй сяньчжэнь, ван фэньшань, лю айхуа и др. Исследования низкого молекулярного веса и олигомерной прозрачной гиалуроновой кислоты [J]. Продукты питания и лекарственные средства, 2006, 8(3): 6-9.

[7]Trabucchi E,Pallotta S,Morini M, и др  - гиалуроническая болезнь  - кислота;   Не допускается использование  Кислород в воздухе  - бесплатно;   Радикальный ущерб, причиненный По адресу: Ткани для грануляции  В течение года В случае ранения Исцеление [J]. По запросу Int - J. - ткань; Ответ,2002,24(2):65-71.

[8] нофлах A, азума О, мой Бог C, и др. Иммуномод-улитарий Функции генерального секретаря Низкая-молекулярная Вес (кг) Гиалуронат на месте Острый почечный аллотрансплантат Отказ в приеме Модель [J]. День святого валентина ПГС (ГСС) Нефрол,1999,10(5):1059-1066.

[9] термер C, слиман (Sleeman) Джей-пи, Саймон - джей СИ. Гиалурон-волшебный клей  для  В настоящее время  Правила и положения  Соединенные Штаты америки  В настоящее время Иммунитет от болезней Ответ [J]. Iii. Тенденции В случае необходимости Иммунология,2003,24(3):112 — 114.

[10] Ke Chunlin, Zeng Xiaoxiong. Прогресс в исследованиях биологической активности гиалуроновой кислоты [J]. Китайская фармацевтическая биотехнология, 2009, 4(2): 148 — 151.

[11] пиллони а, Бернард гв. Гиалуроническая с низким молекулярным весом - кислота;   Увеличьте остеогенез Пробирка [J]. J Dent Res, 1992(71):574.

[12] цуй лей, чжи шенгли. Взаимосвязь между гиалуроновой кислотой и гиалуронидазой и опухолями [J]. Китайский журнал биохимических препаратов, 2007, 28(2): 127-129.

[13] кувиди - кей, бердиаки - а, никитович D, et и al.  Роль организации объединенных наций Соединенные Штаты америки Рецептор для гиалуроника Кислотная подвижность (рхам) в Низкий уровень дохода Молекулярный вес - гиалуронан(LMWHA)- медиат - Организация < < эд > > Фибросаркома (фибросаркома) 1. Ячейка Сцепление [J]. - J. 1. Биол Химия,2011, 286(44):38509-38520.

[14] ю. м., ду у., гао ф. научный прогресс полимерной и олигомерной гиалуроновой кислоты в диагностике и лечении опухолей [дж]. Рак, 2014, 34(4): 374 — 377.

[15] гатак - с, мисра. - с, тул. - б. Hyaluronan  Олигосача - - Поездки на автомобиле  - ингибит  Крепление-независимо от крепления  Рост на душу населения  Соединенные Штаты америки  - опухоль. - нет. 2. Камеры По запросу: - подавление; - фосфоинозид 3- кинасе/акт 1. Ячейка В целях выживания Путь [J]. - J. 1. Биол Химия,2002,277(41): 38013-38020.

[16] аланис - я, риццо - м, гарсия Мг,et Al. Низкий молекулярный вес  hyaluronan   3. Предварительная подготовка   Соединенные Штаты америки  - опухоль. - нет. - пульсирующий дендритик 2. Камеры Увеличения их взносов По вопросам миграции 3. Возможности и In-утки Иммунитет от уголовного преследования Против: против - мурин. Колоректальный Рак [J]. - Рак; Иммунизация и иммунизация Immun,2011,60(10):1383 — 1395.

[17] Ke Chunlin, Qiao Deliang, Zeng Xiaoxiong. Подготовка гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом и ее антиоксидантной активности [J]. Наука и технологии пищевой промышленности, 2010, 31(1): 107 — 111.

[18] у цзяньин, чэнь йихан. Состояние и перспективы исследования гиалуронидазе [J]. Современная химическая промышленность, 2014, 34(5): 47 — 52

[19] насосная станция PE,DeAngelis pl.change Соединенные Штаты америкиpolysaccha- ride size distribution Соединенные Штаты америкиa vertebrate hyaluronan syn- thase by mutation[J]. J Biol Chem,2003,278(22):19808-19814.

[20]Weigel PH,Baggenstoss BA. Гиалуронанная синтаза полимеризирующая активность и контроль размера продукта — это дискретные ферментные функции, которые могут быть объединены мутагенезом сохраненных цистейнов [J]. Гликобиология, 2012,22(10):1302-1310.

[21] медина Париж, Франция Джей эл, вейгель Доктор наук гиалуронан Синтакейз выступает посредником   Краска с краской   Перевод в другое место    По всему периметру   1. Липосамал   Мэм-бранес [J]. BMC (BMC) Биохимия,2012,13(2):1-9.

[22] kuari K,Baggenstoss BA,Parker AL,et al.Mutation of two intramembrane polar resiwithin the hyaluronan Синхронизация функцийfamily alters hyaluronan product size[J]. J Biol Chem,2006,281(17):11755 — 11760.

[23] шэн JZ, линг - пэкс, чжу XQ,et Al.Use (аль.использование) of  3. Вводный курс  Сотрудники по связям с общественностью По адресу: В области регулирования hyaluronan  synthase  и Код UDP -  Глюкозе -6 - дегидрогеназа of  Streptococ3. Категория 1  - зоэпидеми  cus  Выражение на английском языке  in   - лактококк  Lactis: тематическое исследование механизма регулирования полимера гиалуроновой кислоты [J]. J Appl Microbiol,2009,107(1):136-144.

[24]Armstrong D,Johns MR. Culture условия влияют на молекулярные свойства гиалуроновой кислоты, производимой Streptococcus zooepidemicus[J]. Appl Envi- Микробиол рона,1997(63):2759 — 2764.

[25] лю ли, ван цян, чэнь юнхао. Научно-исследовательский прогресс в микробной ферментации для производства гиалуроновой кислоты [J]. Пищевая и ферментационная промышленность, 2009, 35(2): 125 — 129.