Невероятные преимущества экстракта черного риса цианидин 3 глюкозид

Что такое цианидин -3- глюкозид?

Цианидин -3- глюкозид (т -3- ГЛК,C3G) Является наиболее распространенным, широко распространенным и обильным антоцианозидом среди антоцианидного соединения [1][2]. Кукуруза -3- глюкозид обычно встречается в листьях, фруктах и корнях темных растений, таких как оранжевые, красные и фиолетовые растения, особенно в черном рисе [3]. Кукуруза -3- глюкозид является одним из антоцианинов в антоцианосиде группы, и большое количество исследований внутри страны и за рубежом показали, что кукуруза -3- глюкозид имеет различные биологические виды деятельности, такие как профилактика сердечно-сосудистых заболеваний, улучшение усталости зрения, и снижение диабетических пациентов. &#- 39; Воспаление и так далее.

Что такое построение цианидин -3- глюкозида?

Антоцианозид относится к флавоноидам, поэтому имеет типичную структуру флавоноидов, то есть C3-C6-C3 как основной скелет, и является производным 2- фенилхромена [4]. Родитель антоцианозида — антоцианин, потому что антоцианин нестабилен, поэтому в природе он в основном антоцианин как лиганд в сочетании с другими сахарами образует различные гликозиды, то есть антоцианозиды. Большинство антоцианов имеют гидроксильные заменители на 3,5-7 углеродных участках. Различные антоцианозиды образуются из-за различий в заменителях b-кольца. В настоящее время 6 Наиболее распространенными антоцианозидами в природе являются: цианиндин, пеларгонидин, дельфинидин, пеонидин, пеунидин и мальвидин. Из-за различных типов, положения и количества связывающих сахара в антоцианозидах, антоцианозиды также различны. Основными связующими сахарами являются моносакшариды, такие как глюкоза, роговица, галактоза и ксилоза, и дисакшариды, такие как риноглюкоза и acacia disaccharide [5]. Структура 3- глюкозида показана на рис. 1-1, которая формируется комбинацией кукурузы и глюкозы.

Рис.1-1    Структура цианидина -3- глюкозида

Содержание цианина -3- глюкозида в экстракте черного риса

Согласно литературе, содержаниеЦианидин -3- глюкозидВ черном рисе чрезвычайно богат [6], и цзинь ван и др. [7] экспериментально пришли к выводу, что содержание цианидина -3- глюкозида черного риса достигает (1,017 грану0,028) мг/г.

В этом эксперименте в качестве опытного материала использовался экстракт черных риса, а его цианидин -3- глюкозид очищался хроматографической колонкой с тремя видами наполнителей, а именно: аб8 - макропористой смолой, полиамидом и декстроном гелем, в свою очередь, чтобы получить цианидин -3- глюкозид, и чистота могла достичь 95% после расчета.

1. Экспериментальные методы

1.1. Система управления Технический метод

Подготовка цианидина -3- глюкозида из экстрактов черного риса

Рис. 2-1 Условия обнаружения продукта цианидин -3- глюкозид

1.2 качественный и количественный анализ цианидина -3- глюкозида в экстракте черного риса

1.2.1 подготовка проб

После заморозки тестовый раствор черного риса антоциянина весит 10 мг сухого сухого сухого порошка, растворяет его в 6% формовой кислоты и довести до постоянного объема в 10 мл, затем для фильтрации был использован фильтр м для игл, а определение было проведено с использованием высокопроизводительного жидкого хроматографического тандема тройной четырехступенчатой штанги.

Таблица 2-1 процедура уклона Для UPLC

1.2.2 качественные и количественные методы

(1) я качественные методы

Качественный анализ отделенных и очищенных образцов проводился с помощью колонки ультравысокопроизводительной жидкой хроматографии (UPLC) при сканировании режимов множественного мониторинга реакции (MRM) в сочетании с анализом ультрафиолетового (UV) и масс-спектрометрии (MS) путем проверки времени удержания цианидин -3- глюкозида в системе управления цианидин -3- глюкозидом и в изолированных и очищенных экстрактах черного рис.

(2) Метод количественного анализа

10 мг экстракта черного риса A1, A2, A3, A4, B1, B2, B3, B4, B4, B5 и C1 были точно взвешены и конденсированы в объемной колбе по 100 мл с 6% формовой кислотой и измерены с помощью системы управления цианидином -3- глюкозидом в тех же хроматографических условиях, после чего концентрация подготовленного раствора была получена по стандартному уравнению кривой, а чистота каждого образца, подлежащего испытанию, была получена путем расчета уравнения (2). 1. Вопрос 1.

1.3. Система управления Изоляция и очистка цианидина -3- глюкозида от экстрактов черного риса

1.3.1 обезжиривание экстрактов черного риса

1.3.2 подготовка антоцианинового экстракта из экстрактов черного риса

1.3.3 изоляция и очистка цианидина -3- глюкозида из экстрактов черного риса

(1) отделение и очистка путем адсорбции на макропористой смоле AB-8

(2) хроматография колонн полиамидов

(3) отделение и очистка хроматографией гелевой колонны

2. Результаты и обсуждение

2.1качественный и количественный анализ цианидина -3- глюкозида в экстракте черного риса

2.2 оптимизация параметров масс-спектрометрии эталонного вещества цианидин -3- глюкозид

Как показано на рис. 2-2.

2.3 качественный анализ цианидина -3- глюкозида в экстракте черного риса

Исходя из установленных параметров масс-спектрометрии, время удержания цианидина -3- глюкозида в экстракте черного риса определялось сверхвысокой производительностью жидкой хроматографии. Как показано на рис. 2-3 (а), время удержания стандартного раствора цианидин -3- глюкозид составляет 3,46 минуты. Как показано на рис. 2-3 (B), время удержания основного хроматографического пика в экстракционном растворе черного риса антоцианина составляет 3,46 минуты, поэтому основным антоцианином черного риса является цианидин -3- глюкозид.

2.4 количественное определение цианидина -3- глюкозида в экстракте черного риса

Рисуем стандартную кривую с концентрацией по горизонтальной оси и пиковой зоной по вертикальной оси, как показано на рис. 2-4. Уравнение регрессии Y= 79,027x + 85,746 (Y-пиковая зона, X-концентрация), коэффициент корреляции R2= 0,9991, а линейное соотношение цианидина -3- глюкозида является хорошим в диапазоне 19,2-134,40 нг/мл.

Рис.2-3   Хроматограммы черного риса и Цианидин -3- глюкозид ( Стандарт C3G

Таблица 2-2   Пиковая площадь стандартного раствора крышка -3- GLC

Рис.2-4   1. Стандартная кривая По технологии C3G

2.5 изоляция и очистка цианидина -3- глюкозида от экстракта черного риса

2.5.1 метод адсорбции макропористой смолы ab8

Рис.2-5  Хроматограммы антоцианинов экстракта черного риса

Рис.2-6   Хроматограммы C3G отделены от черного риса методом адсорбции макропористой смолы ab8

Примечание: рис. А: хроматограмма A1; Рис. B: хроматограмма A2; Рис. С: хроматограмма а3; Рис. D: хроматограмма а4

2.5.2 хроматография колонок полиамидов

Использование безводного этанола и 80% этанола для последующего градиентного элюдирования колонок полиамидной хроматографии, содержащих а1 и а4 последовательно, как показано на рис. 2-7. Согласно хроматограмме результатов обнаружения UPLC-MS/MS, крышка -3-g1c в черном рисе была отделена и очищена с помощью этого метода, а пиковое время соответствовало результатам AB-8. После подсчета чистота B1, B2, B3 и B4 составила 91,6%, 92,3%, 93% и 92%, соответственно. По сравнению с A1 и A4 чистота цианидина -3- глюкозида была значительно улучшена после очистки полиамидом, что свидетельствует о Том, что метод очистки полиамида сыграл значительную роль в разделении и очистке цианидина -3- глюкозида в экстракте черного риса.

Примечание: A: хроматограмма B1; B: хроматограмма B2; C: хроматограмма в3; D: хроматограмма в4; E: хроматограмма в5

2.5.3 хроматография колонки геля

Цианидин -3- глюкозид высокой чистоты был получен методом полиамидной очистки, как показано на рис. 2-8. На основе хроматограммы с1 результатов обнаружения и сопоставления с хроматограммой в5 можно увидеть, что после отделения и очистки цианидин -3- глюкозида в экстракте черного риса с использованием этого метода пика примеси обнаружено не было. После обнаружения чистота C1 была рассчитана в 95%, с небольшим улучшением чистоты, можно увидеть, что хроматография геля колонна может способствовать разделению и очистке цианидин -3- глюкозид.

После подсчета, уровень подготовки цианидин -3- глюкозида с чистотой 95% составляет 0,098%, что близко к лаборатории ' ранее выявленное содержание цианидина -3- глюкозида в черном рисе составляло 0,1%. В то же время существует небольшая разница по сравнению с данными, полученными Wang Jing et al. [8] с содержанием цианидин -3- глюкозида (1,017 грау0,028) мг/г, что указывает на то, что метод, используемый в этом эксперименте, имеет высокую степень подготовки и высокую чистоту полученного соединения, что заслуживает широкого распространения.

Рис.2-8 хроматограммы C3G отделены от черного риса глюкозой гелевой колонны 3. Хроматография

3. Ii. Резюме

В этом исследовании использовались UPLC-MS/MS для качественного и количественного анализа цианидина -3- глюкозида в экстракте черного риса. Сравнивая время удержания с исходным веществом цианидин -3- глюкозида в тех же условиях масс-спектрометрии, жидкой фазы и уф, можно сделать вывод о Том, что изолированный и очищенный мономер из экстракта черного риса антоцианин -3- глюкозид. Результаты соответствуют результатам, приведенным в литературе.

Невероятные преимущества экстракта черного риса цианидин 3 глюкозид

Сообщается, что экстракт черного риса цианидин -3- глюкозид имеет множество физиологических свойств [10-13], таких как сбор свободных радикалов [9], антиокисление [10], противовоспалительные, противоопухолевые [8], профилактика диабета и улучшение его нефропатии [11][12][13], защита печени, зрение и мозг от ишемического инсульта [14][15][16]. Как сообщается в исследованиях, цианидин -3- глюкозид оказывает защитное воздействие на постишемическую травму головного мозга в результате антиоксидантного стресса, способствуя синтезу синтазы оксида азота эндотелия, противовоспалительному, ингибирующему нейрональному апоптозу, а также развитию плазменной химиокиной экспрессии.

Hao et al. [6] показали, что цианидин -3- глюкозид может значительно снизить повышенные уровни креатинина сыворотки и азота мочевины, а также уровни оксидазы ксантина, малодиалдегида и оксида азота в почках, вызываемые кбро3, вызываемой тяжелыми травмами почек у мышей. Его защитным действием на почки является способность свободного радикального выпытывания антоцианов. Чжан чуян и др. [17] использовали линию гепг -2 раковых клеток печени человека в качестве модели для изучения защитного воздействия цианидин -3- о-глюкозида (C3G) на вызываемый H2O2 окислительный стресс в клетках. Результаты показали, что цианидин -3- глюкозид не обладает значительной токсичностью для клеток гепг -2 в диапазоне 0- 0,5 ммоль/л; При высокой (400 μ Mol/L), средней (200 μ Mol/L), низкой (50 μ Treatment with cyanidin-3-glucoside At three of Mol/L) значительно увеличили общую емкость антиоксида, активность димутазы супероксида и уменьшили содержание глутатиона в клетках, уменьшив при этом внутриклеточный малодиалдегид. Сон нан и др. [18] исследовали влияние цианидина -3- глюкозида на обмен глюкозы и липидов в альцгеймере#39;s болезнь (AD) модели мышей. Результаты показывают, что цианидин -3- глюкозид регулирует устойчивость инсулина и воспалительную реакцию через путь JNK/AKT, эффективно улучшая нарушения обмена глюкозы головного мозга у мышей AD модели, но не в значительной степени регулируя липидный обмен веществ, и может препятствовать осаждению возрастных бляшек в гиппокампе головного мозга.

Ю. ренцян и др. [19] были направлены на изучение воздействия цианидина -3- глюкозида на вес тела, липиды крови и устойчивость инсулина у тучных крыс. Тучные крысы были вызваны высоким содержанием жира в рационе питания и произвольно разделены на контрольную группу и экспериментальную группу. Экспериментальная группа вводилась с помощью 100 мг /(кг · г) цианидина -3- глюкозида, в то время как контрольная группа вводилась с таким же количеством физиологической физраствора. Результаты исследования показали, что масса тела, висцеральная масса жира, средний коэффициент использования энергии питания, общий уровень холестерина, триглицериды, липопротеиновый холестерин низкой плотности, индекс артериосклероза, глюкоза крови, инсулин сыворотки и индекс резистентности инсулина экспериментальной группы значительно ниже, чем у контрольной группы (r < 0,05), Хотя уровень холестерина липопротеина и адипонестина в сыворотке крови был значительно выше, чем в контрольной группе (r < 0,05), можно сделать вывод о Том, что цианидин -3- глюкозид может замедлить вес тела, увеличить висцеральную массу жира, улучшить нарушения обмена глюкозы и липидов, связанные с ожирением, и устойчивость инсулина у тучных крыс, и предположить, что его механизм может быть связан с увеличением сечения адипонетина в сыворотке. В работе Lin Huai et al. [18] изучалось воздействие 3- глюкозидного корнуха на вызываемые свинцом повреждения печени и почек в результате экспериментов с крысами. Результаты показали, что кукурузный цветок 3- глюкозид оказал значительное защитное воздействие на вызванные свинцом повреждения печени и почек, однако механизм его действия все еще нуждается в дальнейшем изучении.

Экстракт черного риса цианидин -3- глюкозидный эксперимент:

Исследования цианидина -3- глюкозида у себя дома и за рубежом показывают, что он обладает разнообразными биологическими видами деятельности, такими как профилактика сердечно-сосудистых заболеваний, улучшение визуальной усталости и снижение воспаления у больных диабетом, но содержание цианидина -3- глюкозида, обнаруженного в крови и связанных с ней тканях, крайне низкое. Причиной этого парадокса может быть то, что цианидин -3- глюкозид проходит метаболические реакции в желудочно-кишечном тракте, генерируя связанные метаболиты, которые попадают в кровь и связанные с ней ткани, что приводит к связанным с этим последствиям биологической активности.

Данное исследование направлено на подтверждение этой гипотезы с использованием цианидина -3- глюкозида в качестве экспериментального материала, с использованием in vivo и in vitro экспериментальных методов и UPLC-MS/MS в качестве метода обнаружения, для качественного и количественного анализа метаболитов цианидина -3- глюкозида в желудочно-кишечном тракте крыс, а также изучения его метаболических изменений в желудочно-кишечном тракте крыс. В то же время путем анализа метаболитов цианидина -3- глюкозида в крысиной крови была уточнена абсорбция его метаболитов в организме, что обеспечило основу для выяснения того, имеют ли метаболиты цианидина -3- глюкозида соответствующую биологическую деятельность, и послужило справочным материалом для выявления механизма активности цианидина -3- глюкозида. Основными направлениями исследований и результатами проекта являются:

(1) Черный рис использовался в качестве экспериментального материала для очистки цианидин -3- глюкозида на макропористой смоле AB-8, полиамиде и декстранском геле. Содержание цианидина -3- глюкозида после очистки составило 95%, а выход 0,098%.

(2) С использованием цианидина -3- глюкозида в качестве экспериментального материала и метода UPLC-MS/MS в качестве метода обнаружения метаболические продукты и основные метаболические участки цианидина -3- глюкозида в кишечнике крыс изучались с использованием метода инкубационного раствора in vitro. Результаты показали, что в кишечнике крыс имеется 11 метаболитов цианидина -3- глюкозида, в Том числе 2,4,6- тригидроксибензоиновой кислоты, протокатечуиновой кислоты, p- гидроксибензоиновой кислоты, ванильной кислоты, гиппурической кислоты, кофеиновой кислоты фенолового альдегида, p- кумариновой кислоты, цианидина -3- глюкозида, цианидина и феруловой кислоты. Основными местами метаболизма являются джеюнум, илеум и толстая кишка.

(3) Используя цианидин -3- глюкозид в качестве экспериментального материала и метод UPLC-MS/MS в качестве метода обнаружения, желудок, дуоден, джеджун, илей и толстой кишки крыс собирались в различные периоды времени после откорма цианидин -3- глюкозид. Метаболиты цианидин -3- глюкозида были обнаружены и в общей сложности 11 типов, включая 2,4,6- тригидроксибензоиновую кислоту, протокатечуиновую кислоту, p- гидроксибензоиновую кислоту, ванильную кислоту, гиппурическую кофеиновую кислоту, хлорглюцинол-альдегид, p- кумариновую кислоту, цианидин -3- глюкозидную кислоту, типы продуктов соответствуют результатам метода in vitro, а цианидин -3- глюкозидную кислоту в основном присутствует в своей первоначальной форме в желудочном соке, В то время как цианидин -3- глюкозид в основном присутствует в виде агликоне (цианидин) в двенадцатиперстной кишке, jejunum, ileum и толстой кишки.

(4) С использованием цианидина -3- глюкозида в качестве экспериментального материала и метода UPLC-MS/MS в качестве метода обнаружения было обнаружено в общей сложности 10 метаболитов цианидина -3- глюкозида в крови крыс, включая протокатехуиновую кислоту, p- гидроксибензозидную кислоту, ванильную кислоту, гиппурическую кислоту, кофеиновую кислоту, представляет собой фенольный алдегид, p- кумариновую кислоту, цианидин -3- глюкозидную кислоту, цианидин и феруловую кислоту, однако было обнаружено no 2,4-6- тригидроксибензоиновую кислоту, что указывает на то, что за исключением 2,4,6- тригидроксибензоиновой кислоты, Другие метаболиты кишечника цианидин -3- глюкозида могут всасываться в кровь через кишечник. Для сравнения было установлено, что основными местами поглощения являются джеджунум, илеум и толстая кишка.

Результаты исследования подтверждают, что цианидин -3- глюкозид проходит метаболические реакции в желудочно-кишечном тракте, что приводит к ряду связанных метаболитов, которые могут быть поглощены в кровоток через кишечник.

Ссылка:

[1] джин X., чен м., лонг Y., и др. Дельфинидин -3- глюкозид защищает эндотелиальные клетки умственной вены человека от окисленных низкоплотных липопротеиновых повреждений, вызванных автоаутологией Упругость в воздухе Через сигнальный путь AMPK/SIRT1 [J]. Молекулярное питание и питание - исследования, 2014,58(10):1941 — 1951.

[2] Xu Z., Howard L. R. Analysis of antioxidant-rich phytochemicals[м]. Нью-джерси, уайли-блэквелл,2012.

[3] младший т. а., риз р. н., визгоски ф. дж., и др. Цианидин -3- рутиносайд и цианидин -3- ксилосильрутиносайд в качестве первичных фенольных антиоксидантов в черной малине [J]. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии, 2008,56(6): 1880-1888.

[4] суза A., c. Араужу п., азеведо дж., и др. Антиоксидант (антиоксидант) И антипролиферативные свойства  Из 3- х окситантоцианидин [J]. Пищевая химия, 2016, 192: 142 — 148.

[5] Kumar S., Gautam S., Sharma A. идентификация противомутагенных свойств антоцианинов и других полифенолов лепестков розы (Rosa centifolia) и чая [J]. Журнал пищевых продуктов Наука, 2013, 78(6): 948 — 954.

[6] Bao Rui, Chen Di, Chen Fang влияние вк на микроволновую деградацию цианидина -3- глюкозида в экстракте черники [j] сохранение и переработка, 2014, 14 (6): 34-39

[7] Лю чанцзяо, сян сянвэй, чжэн ся и др. метод ПЖК для определения цианида -3- глюкозида в черном рисе [J] China Food Additives, 2017, (9): 210-215

[8] Ван цзинь, чжоу юсян, ян вэй, и др., идентификация и анализ содержания цианидин -3- глюкозида в черном рисе [j] Hubei Agricultural Science, 2014, 53 (23): 5836-5838

[9] Hao J., Hui Z., Zhang Z Q., et al. Выявление антоцианов в черном рисе (Oryza sativa L.) с помощью UPLC/Q-TOF-MS и их in vitro и in vivo антиоксидантной деятельности [J]. Журнал зерновых наук,2015, 64: 92 — 99.

[10] Turrini E., Ferruzzi L., Fimognari C. возможное воздействие диетических антоцианинов на диабет и инсулиностойкость [J]. Текущие целевые показатели по лекарствам, 2017 год, 18(6): 629-640.

[11] чэнь лян, синь сюлянь, юань цюань цюань прогресс в исследованиях по антикоррозионному эффекту кукурузы 3- глюкозы [j] Food Science, 2013, 34 (13): 329-333

[12] го х., ся м., зу т., и др. Цианидин -3- глюкозид уменьшает устойчивость инсулина к ожирению Стеатоз печени у мышей с высоким содержанием жира в рационе питания и db/db через коэффициент транскрипции FoxO1[J]. Журнал пищевой биохимии, 2012, 23(4): 349-360.

[13] цинь Y., жай Q., ли Y., et Ал. Цианидин -3- о-глюкосайд Улучшение качества жизни - диабетик. - нефропатия Через регулирование глутатионового бассейна [J]. Биомедицина и фармакотерапия, 2018, 103: 1223 — 1230.

[14] Scazzocchio B., Vari R., Filesi C., et al. Цианидин -3- о-бета-глюкозид и протокатехические кислотные xert инсулин-подобные эффекты от упрегуляционной активности ппаргаммы у человека в омантных адипоцитах [J]. Диабет, 2011, 60(9): 2234 — 2244.

[15] ли с. г., вэнс т. м., нам т. г., и др. Вклад антоцианинового состава в общую антиоксидантную способность ягод [J]. Растительные продукты для питания человека, 2015, 70(4): 427-432.

[16] марья п., хайнонен м. Антиоксидантная активность Антоцианинов и их Aglycons [J]. Журнал организации объединенных наций Химия сельского хозяйства и продовольствия, 2003 год, 51(3): 628-633.

[17] чжан чуян, чжан кецзя, лю цинь сравнение защитного воздействия цианидин -3- о-глюкозида на H2o2 индуцированный окислительный стресс в клетках гепг -2 [j] Journal of Nanjing University of Technology, 2018, 40 (3): 31-37

[18] сон нан, чжан линг, чэнь вей и др#39;s модель болезни мышей [j] китайский журнал сравнительной медицины, 2016, 26 (7): 15-23

[19] юй ренцян, у сяою, чжоу сянь, и др