Изучение преимуществ экстракта черного риса при гиперлипимии

Черный рис черный из-за высокого содержания антоцианинов- да- да. Xia et al. [1] и Ling et al. [2] [3]найдены в экспериментальных исследованиях на животных, чтоРацион черный рисМожет снизить уровень липидов крови экспериментальных животных, препятствовать возникновению и развитию атеросклероза, и предположить, что этот эффект связан с антоцианинами в семенном плаще. Кроме того, в ходе некоторых экспериментов по химическому имитационному моделированию In vitro были подтверждены свободные радикальные эффекты накопления и антиоксидантов экстракта черного риса [4] [5] [6] [7]. Однако до сих пор мало исследований по основным активным ингредиентам экстракта черного риса и его физиологической активности в организме.

Настоящий документ исследованияПреимущества экстракта черного рисаДля крыс гиперлипемией и анализирует состав и содержание антоцианинов и жирных кислот. Был сделан вывод о Том, что антоцианозиды и ненасыщенные жирные кислоты в экстрактах черного риса являются важной материальной основой антиоксидантных и липидных эффектов черного риса.

- о, да. Материалы и методы

1.1 экспериментальные материалы

1.1.1 реагенты и приборы

Total Антиоксидант (антиоксидант)capacity (TAC), glutathione peroxidase (GSH-Px) activity, malondialdehyde (MDA) content иsuperoxide dismutase (SOD) Деятельность организации объединенных нацийwere provided by Nanjing JianjiА вот и нет.Bioengineering Research Institute; всегоcholesterol (TC) иtriglycerides (TG) were provided by Beijing Zhongsheng Bioengineering Hi-Technology Company; LDL-C иHDL-C were provided by Wenzhou East Biological Engineering Company. The total cholesterol (TC) иtriglyceride (TG) kits were provided by Beijing Zhongsheng Bioengineering Hi-Tech Company; В настоящее времяlow-Плотность населенияlipoproteВ случае необходимостиcholesterol (LDL-C) иhigh-density lipoproteВ случае необходимостиcholesterol (HDL-C) kits were provided by Wenzhou East Biological Engineering Company. All other chemical reagents used В случае необходимостиВ настоящее времяanalysis were domestic analytical pure.

1.1.2 подготовка экстрактов черного риса

Сорт черного риса "LongjВ случае необходимости1" Культивируется институтом рисоводства академии сельскохозяйственных наук им. Джилина и обеспечивается институтом биотехнологических исследований академии сельскохозяйственных наук провинции гуандун. Свежий черный рис "Longjin 1" (40 сеток) был извлечен с 60% этанола в качестве растворителя на 50 градусов и сконцентрирован под сниженным давлением, чтобы получить темно-красную сиропиюЭкстракт черной рисовой кожуры.

Подготовка к конференцииЭкстракты черного рисаРастворялся в дистиллированной воде и готовился в 5%, 10% и 20% растворов, которые использовались в качестве откормочных материалов для трех пробных групп BRPE низкой, средней и высокой плотности, хранились при 4 градусах и использовались в течение 2 недель после подготовки.

1.1.3 экспериментальные животные и группы

Sixty clean-grade male SD rats, weighing 160±20 g, were provided by the Laboratory Animal Center Соединенные Штаты америкиGuangzhou University Соединенные Штаты америкиTraditional Chinese Medicine. The animals were fed сnormal feed for 1 week По адресу:acclimatize to the environment, иthen blood was collected Из российской федерацииthe orbital vein plexus. According to the level Соединенные Штаты америкиtotal cholesterol, the animals were randomly divided into 5 groups: a control group, a model group, и3 experimental groups Соединенные Штаты америкиlow, medium, и- высокий уровеньdoses Соединенные Штаты америкиBRPE, с12 rats in each group, иwere fed with В отличие от другихfeeds according to the design Соединенные Штаты америкиthe experiment, and then entered into the experimental period.

1.2 кормление животных и обращение с ними

Animal feeding was completed in the clean animal laboratory Соединенные Штаты америкиGuangzhou University Соединенные Штаты америкиTraditional Chinese Medicine. All groups Соединенные Штаты америкиrats were housed in separate cages according to groups, except for the control group which was fed with a basal diet, the other 4 groups were fed with high fat diet (containing 85% basal diet, 10% egg yolk powder, 5% lard, 0.5% sodium cholate). During the experimental period, the control group and the model group were given 1ml/100g body weight of saline by gavage every day, and the 5%, 10%, and 20% BRPE groups were given 1ml/100g body weight of 5%, 10% and 20% BRPE, respectively, and were fed and watered ad libitum, and the amount of food consumed was recorded every 3 days. The experimental period was 8 weeks. After the experiment, the animals were fasted for 8 h, the eyes were removed to collect blood and separate the serum, which was divided and stored at -20℃ for future use. The animals were killed by the cervical dislocation method, and the livers were separated and stored at -20℃.

1.3 индексы и методы обнаружения

1.3.1 определение уровня липидов в кровиTC, HDL-C и TG по методу фермента CHOD-PAP. LDL-C измеряется прямым методом 7060 автоматических биохимических анализаторов.

1.3.2 изоляция, очистка и окисление ЛДЛ плазмы 

Plasma LDL was separated by density gradient centrifugation, and the LDL protein content was measured by Lowry' метод s. Содержание белка LDL измеряется Lowry' метод s, и окислительная модификация LDL была выполнена путем окисления Cu2+ [8]. Степень чистоты и окисления LDL определялась электрофорезом геля ag, а степень изменения LDL измерялась относительной электрофоретической мобильностью (КЗМ). Электрофоретические результаты показали, что крена окс -LDL составляет 1,4.

1.3.3 определение антител-титра антиоксидолдола в сыворотке крыс 

According to the instructions of the Protein DetectroTM ELISA Kit, the concentration of prepared ox-LDL and natural LDL was diluted to 10 µg protein with 1× coating solution. The prepared ox-LDL and natural LDL concentrations are diluted to 10 µg protein-ml-1 with 1× Coating Solution and incubated in the plate overnight at 4°C. The plate is washed 3 times with Wash Solution and then added to the plate with 100 µg protein-ml-1. The plate is washed 3 times with wash buffer, then secondary antibody solution diluted 1:500 with 100 µl of 1×BSA Diluent/Blocking Solution is added and incubated for 1 h at room temperature.

После тщательной промывки было добавлено 100 гравюр субстратного раствора, и реакция была остановлена путем добавления 100 гравюр раствора реакции через 30 мин и читать при 405 нм на ферзиме. Титер антиоксидного -LDL антитела в сыворотке выражается как значение поглощения оксида -LDL минус значение поглощения LDL [9].

1.3.4 подготовка однородной ткани печени и определение содержания белка 

Take liver tissue and rinse it in cold saline, remove the blood, wipe it dry with filter paper, weigh it, use sterilized saline as a homogenizing medium, make 10% liver homogenate (w﹕v) at 4℃, centrifuge it at 4℃ for 15 min at 3,000g, take the supernatant into portions, store it at -20℃ and reserve it for use, and then determine the protein content with Bradford' метод s.

1.3.5 определение общей антиоксидантной способности сыворотки и печени (TAC), сод, активности GSH-Px и содержания MDA 

TAC, SOD, GSH-Px фермент активности, и MDA были измерены спектрофотометрически в соответствии с инструкциями комплекта.

1.3.6 определение содержания антоцианина в экстрактах

The four anthocyanosides, namely, cornflowerin-3-glucoside, cornflowerin-3,5-diglucoside, geraniolin-3,5-diglucoside and mallowin, which were purified independently and identified to meet the chromatographic purity standard were used as standards[7], and then determined by HPLC method.

1.3.7 определение содержания жирной кислотыВ экстрактах жирная кислота анализируется с помощью газовой хроматографии-масс-спектрометрии (гц-мс).

1.4 обработка данных и статистический анализ

SPSS 10.0 software package was used for statistical analysis. Homogeneity of variances was tested for the means of multiple groups; if the variances were not homogeneous, one-way ANOVA was performed after the variables were exchanged to achieve homogeneity; the LSD method was used for the two-by-two comparisons between groups.

- о, да. Результаты и анализ

2.1 влияние экстракта черной рисованной кожуры на липиды крови у гиперлипиэпидемических крыс

В таблице 1 приведены уровни липидов крыс в каждой группе, из которых видно, что по сравнению с группой моделей уровни TC сыворотки и TG в трех группах BRPE значительно снизились (P< 0,05), а группа BRPE в 20% была близка или даже ниже, чем в контрольной группе, при определенной зависимости "доза-эффект" между тремя группами доз, а содержание HDL-C в трех группах BRPE было значительно выше, чем в группе моделей (P< 0,05). Уровни HDL-C во всех трех группах BRPE были значительно выше, чем в группе моделей (P < 0,05). 10% и 20% BRPE также смогли снизить уровни LDL-C (P < 0,05), в то время как 5% BRPE не оказали существенного воздействия (P > 0,05).

Влияние экстракта черного риса на уровень липидов в крови крыс (mmol·L-1, x±s, n=12)

CG = контрольная группа,MG = группа моделей

Значения в колонке без общей буквы надписи значительно отличаются, P < 0,05. То же, что и ниже.

2.2 влияние экстракта черного риса на атеросклеротический индекс гиперлипиэпидемических крыс

Атеросклеротический индекс (AI) является параметром, который объединяет несколько показателей липидов крови, чтобы отразить риск атеросклероза (AS), и увеличение AI предполагает увеличение вероятности AS. Таблица 2 показывает, что значения Аи 1 1 и AI2 для трех групп доз были значительно ниже значений для группы моделей (P <) 0,05, и существует зависимость "доза-эффект" между тремя группами.

Таблица 2 Effect of Black Rice Extract on Atherosclerosis Index in Rats (x±s,n =12)

AI1 =(TC-HDL-C)/HDL-C Д - 2, аи = LDL-C/HDL-C

2.3 антиоксидантный эффект экстракта черного риса на гиперлипиэпидемических крыс

2.3.1 общая емкость антиоксиданта

Сыворотка и печень крыс в модельной группе были ниже, чем в контрольной группе при развитии гиперлипидемии. Потребление BRPE увеличило TAC у крыс, среди которых низкая доза BRPE, как правило, увеличивала TAC печени, но разница была незначительной (P > 0,05), но сыворотка TAC у животных этой группы была значительно улучшена по сравнению с контрольной группой модели (P < 0,05). 10% и 20% BRPE значительно улучшили сыворотку и печень TAC, среди которых уровень TAC сыворотки в группе BRPE 20% был выше, чем в контрольной группе. BRPE на 10% и 20% значительно улучшил сыворотку и печень TAC, при этом 20% BRPE группа имеет более высокие уровни TAC сыворотки, чем контрольная группа (P < 0,05).

Table 3 The Effect of Black Rice Extract on the Total Antioxidant Capacity of Serum and Liver in Rats (x±s, n =12)

2.3.2 активность антиоксидантного фермента и содержание продуктов пероксидного окисления липидов

Long-term intake of high-fat diets increased the blood lipid level of rats, decreased the activities of GSH-Px and SOD, and significantly increased the content of lipid peroxidation products (MDA) (P＜0.05). The intake of BRPE enhanced the activity of antioxidant enzymes and showed a certain quantitative effect relationship (P＜0.05). Accordingly, the MDA content of rats in the three dose groups was significantly lower than that of the model group (P<0.05), showing a significant quantitative effect relationship (Table 4).

Влияние экстракта черного риса на антиоксидантную ферментную активность и содержание малодиалдегида в сыворотке крови и печени крыс (x±s, n) =12)

2.3.3 антиоксид -LDL Уровень антител

Окс -LDL может стимулировать организм к производству антител, и его уровень антител может отражать производство окс -LDL в определенной степени. Как показано в таблице 5, наряду с повышением уровня LDL-C, уровень антитела антиоксида -LDL в группе моделей был значительно выше, чем в контрольной группе (P < 0,05), а потребление BRPE значительно сократило производство антитела антиоксида -LDL (P < 0,05), что свидетельствовало о зависимой от дозы зависимости.

Таблица 5 Эффект экстракта черного риса на сыворотку антиоксидолдол антитела крыс (x±s, n =12)

Таблица 6  Антоцианин в экстракте черного риса

2.4. 2. Анализ компонентов экстракта черного риса

2.4.1 содержание антоцианина

Четыре антоцианина, а именноЦианидин -3- глюкозидЦианидин -3,5- диглюкозид, гераний -3,5- диглюкозид и малахитин были обнаружены в экстракте черного риса. Среди них самое высокое содержание было у цианидина -3- глюкозида, за ним следовали цианидин - 3,5 - диглюкозида и самое низкое содержание малачитина. Как показано в таблице 6, общее содержание четырех антоцианов составило 43,43 г /100 г.

2.4.2 содержание жирной кислоты

The composition of fatty acids in Черный рис (рис) extract has high unsaturated characteristics. Among the 14 detected fatty acids, 6 are unsaturated fatty acids, accounting for 87.66% of the total fatty acids. The highest proportion of fatty acids are oleic acid and linoleic acid (Table 7).

Таблица 7 Жирное кислотное содержание экстракта черного риса

- о, да. Обсуждение на форуме

3.1 влияние экстракта черного риса на липидный метаболизм и уровни антиокислительного стресса в организмах

Гиперлипидемия является независимым фактором риска для AS. Повышенные уровни липидов, особенно LDL-C, напрямую связаны с развитием A- с,и HDL-C имеет определенный антиаз эффект из-за его продвижения обратного переноса холестерина и антиоксидантной активности [10]. Поэтому значение (TC-HDL)/HDL может в определенной степени отражать риск [11].

In the present study, the intake of Черный цвет кожиРис (рис)extract was found to reduce serum TC, TG, and LDL-C levels and increase HDL-C levels in high-fat chow-fed rats, thus improving lipid metabolism and decreasing the risk of AS, with a significant quantitative dependence on the effect of intake. Studies have shown that hyperlipidemia is a major inducer of oxidative stress[12], and free radicals generated by oxidative stress further oxidize and modify LDL to form ox-LDL, which exerts a strong AS-causing effect by inducing endothelial dysfunction, promoting the phagocytosis of lipids by monocytes to form 3. Пенаcells, and facilitating the synthesis and secretion of a large number of cytokines and adhesion molecules by vascular cells[13].

In the present study, ox-LDL production was significantly reduced in rats consuming the Черный цвет кожиРис (рис)extract, thereby reducing its damaging Последствия для окружающей средыon blood vessels. The decrease in ox-LDL production may be attributed to the reduction of LDL in rats by Черный цвет кожиРис (рис)peel extract, and to the enhancement of antioxidant enzymes, which scavenge the overproduced reactive oxygen radicals in the body and prevent the oxidative 3. Изменениеof LDL.

3.2 антигиперлипиэпидемическое и антиоксидентное действие экстрактов черной рисовой кожуры

In the present study, it was found that Черный цвет кожиРис (рис)extract could improve lipid metabolism, enhance the activity of antioxidant enzymes and reduce the 1. Формирование вооруженных силof lipid peroxidation products, thus possessing antioxidant and hypolipidemic biological activities. This result is consistent with the effects of black rice or black rice peel found by Xia et al [1] and Ling et al [2] [3].

In the present study, the black rice peel extract obtained by ethanol extraction was rich in black rice pigments and rice bran oil, and it has been confirmed that anthocyanosides are the main components of black rice pigments [14][15]. The anthocyanosides and rice bran oil have received much attention because of С их стороныactive physiological functions. Therefore, the present study focused on the composition and content of anthocyanosides and fatty acids in black rice extract. The results showed that the extract contained 43.43% of anthocyanosides such as cornflower-3-glucoside and 14.5% of unsaturated fatty acids such as linoleic acid.

Studies on the antioxidant activity of anthocyanosides have been widely reported, and Kano [16] et al. demonstrated that anthocyanosides contained in - фиолетовый.- с удовольствием.potato have antioxidant activity both in vivo and in vitro. Sun Ling [7] et al. and Zhang Mingwei [6] et al. found that the in vitro antioxidant activity of different black rice varieties showed a highly significant positive correlation with the total anthocyanin content of their seed coat (P < 0.01), suggesting that the antioxidant effects of black rice or its extracts are closely related to anthocyanin compounds. Therefore, anthocyanosides may be the main active substances in the antioxidant effect of black rice extracts.

The unsaturated fatty acids oleic acid and linoleic acid rich in black rice skin extract belong to the n-6 series of unsaturated fatty acids. Medical nutrition studies have shown that n-3 and n-6 series of unsaturated fatty acids play an important role in reducing blood TC and improving lipid metabolism. Allman-F et al. found that sunflower seed oil rich in oleic acid in the diet can reduce blood TC and LDL levels.

There is currently relatively little research on the effect of Антоцианин (антоцианин) on blood lipid metabolism. Takanori et al. [18] added - фиолетовый.- кукуруза;- пигмент.rich in cyanidin-3-glucoside to a high-fat diet and fed mice for 12 weeks. They found that compared to giving high-fat diet alone, the serum TG content of mice was significantly reduced. Yamakoshi [19] and others found that feeding - кролики.with procyanidins, the prerequisite of anthocyanins, can reduce the level of LDL in rabbit blood and reduce the formation of - атеросклеротикplaque. Based on the research results, it is speculated that Антоцианин (антоцианин)and unsaturated fatty acids may be the main active substances in black rice extracts that exert antioxidant and lipid-lowering effects.

- о, да. Iii. Выводы и рекомендации

В этом исследовании были проанализированы основные компоненты экстракта черного риса, которые содержали 43,43% антоцианозидов, таких как кукурузно -3- глюкозидные, и 16,6% жирных кислот, из которых 87,66% были ненасыщенные жирные кислоты. Применение различных доз экстракта черного риса может снизить липидный уровень крови у гиперлипиэпидемических крыс и улучшить окислительный стресс в организме. Был сделан вывод о Том, что антоцианозиды и ненасыщенные жирные кислоты в экстрактах черного риса were the important material basis for the antioxidant and lipid-lowering effects of black rice.

Ссылка на сайт

[1] Xia - м,Ling W H, Ma - джей,китс D D, Zawistowski J. добавки  Питание по системе   with    the    black    rice    pigment    Доля в %   Смягчает атеросклеротическое образование бляшек у мышей, испытывающих дефицит аполипопротеина. Журнал питания, 2003,133: 744 — 751.

[2] вэнь н л, чэн к х, ма дж, ван т. красный и черный рис снижают атеросклеротическое образование бляшек и повышают антиоксидантный статус кроликов. Журнал питания, 2001, 131: 1421 — 1426.

[3]  Линг W H, ван L L, ма джей добавки внешней фракции черного риса to  rabbits  Сокращение расходов по сравнению с предыдущим периодом atherosclerotic  Табличка с надписью formation  И увеличения расходов antioxidant  - на месте. Журнал по теме of  - питание, 2002 год,  132 (1):20-26.

[4] чжан м W, го б - джей,чи ж W, вей з с, сюй з H, чжан р ф. питательные вещества  and    Антиокислительное окисление  of   black   rice   - перикарп   and   В целях сохранения запасов effects  В процессе обработки - методы. Операции с ценными бумагами of  CSAE, 2004, 20(6): 165-169.

[5] Sun L, Zhang M W, Chi - J.W, Lai L Z, Zhang X Q. антиокислительная активность черного риса и его корреляция с флавоноидами и пигментом. Acta Nutrimenta Sinica, 2000, 22: 246 — 249.

[6] чжан м W, го б - джей,чи ж W, вэй з C, сюй з H, чжан - Y,чжан р ф. Антиоксиды (антиоксиды)  and  their  2. Корреляция with   total  Флавонид (флавонид) И антоцианин - содержание in  different  black  rice  - разновидности. Наука сельского хозяйства Sinica, 2005, 38: 1324 — 1331.

[7] чжан м W, го б - джей,чжан р ф, чи ж ж, вэй з с, сюй з х, чжан у.   - разделение,  Очистка от загрязнения   and    3. Идентификация   of   Антиоксидантные композиции в черном рисе. Наука сельского хозяйства Sinica, 2006, 39: 153-160.

[8] ван X, - грейлбергер. J, лединский г, кагер г, юргенс г.   Связывание и поглощение по-разному окисленного липопротеина низкой плотности в брюшной полости мышей Макрофаги (макрофаги) and  В общем, да.  1 макрофаги: Участие в программе Отрицательные заряды, а также специфические эпитопы окисления. Журнал клеточной биохимии, 2001, 81: 557 — 569.

[9] шаиш A., В чем дело? J,  - гилбурд. - B, - керен! - керен! П, левковиц г, харат д. диета Бета-каротин and  Альфа-токоферол Комбинация из двух частей А вот и нет. Не является ингибитом   1. Атерогенез   in    an     Организация < < за мир > >   Недостатки в работе   С помощью мыши   - модель. - да. Артериосклероз, тромбоз и биология сосудов, 1999, 19: 1470-1475.

[10] мендес а джей, (подпись) орам J  - ф. С ограниченной ответственностью Протеолиз (протеолиз) of  high   density  Липопротеин отменяет свое взаимодействие с целлюлозно-поверхностным соединением сайты Это повышает уровень холестерина. Biochimeca et biohysica Acta, 1997,1346: 285 — 299.

[11] фукусима - м, - охаши! - т, Организация < < секикава > > - м, В городе накано - м. Сравнительные данные Гипохолестеролемическое воздействие пяти животных масел у крыс, питающихся холестеролом. Биотехнология и биохимия, 1999, 63 (1):202-205.

[12] 13. Ямагути Y,  Мацуно с, Кагота с, < < хагинака > > J,  Кунитомо (Kunitomo) - м.флувастатин  Сокращение объема выбросов  modification   of  Низкая плотность населения  1. Липопротеин  В гиперлипиэпидемическом кролике, нагруженном окислительным стрессом. Европейский журнал фармакологии, 2002, 436: 97 — 105.

[13] Kaplan M, авирам м. окисленный липопротеин низкой плотности: атерогенный и провоспалительный Общие сведения о компании В течение года - макрофаге. foam  Формирование клеток. Ингибиторная роль для питательных антиоксидантов и параоксиназы сыворотки. Клиническая химия и лабораторная медицина, 1999, 37:777-787.

[14] сюй J,  Париж (Франция) 1. Z M.  Очистка от загрязнения and  Ii. Структура 3. Идентификация of  Компоненты кожи in  - гуйчжоу. black  - очень вкусно. rice  - зерно. Журнал по теме Китайской народной республики  1. Зерновые культуры  and   1. Масла - ассоциация, 2003 год,  18(2):  - 9-13. 

[15] Zhong L Y. анализ молекул Структура пигмента черного риса. Журнал китайской ассоциации зерновых и масел, 1996 год, 11(6): 26-35.

[16] кано  M,   - такаянаги  - т,  Организация < < харада > >  - к,  - макино.  - к,  - ишикава  F. антиоксиданты activity  of  anthocyanins  Из российской федерации purple  sweet  Картофель, Ipomoera batatas культивар Ayamurasaki. Биохимия, биотехнология и биохимия, 2005, 69: 979-988.

[17] Allman-Farinelli M A, Gomes K, Favaloro E J, Petocz P. диета богата С высоким содержанием олеевой кислоты Подсолнух (подсолнух) 1. Нефть - в самый раз. В чем дело? Липопротеин низкой плотности Уровень холестерина, Триглицериды, and  1. Коэффициент учета VII. Положение в области прав человека Активность коагулянтов. Journal of the American Dietetic Association, 2005, 105:1071-1079.

[18] цуда - т, - хорио! F, F, В городе учида K, Aoki H, Osawa - ти. - привет.диетическое цианидин 3- o-бета-d-глюкозид-рич purple  corn  Цвет (color) Не допускается использование - ожирение; И улучшает гипергликемию мышей. Журнал питания, 2003 год 133:2125-2130.

[19] ямакоши J,  Катаока (Kataoka) S,  Кога (кога) - т, - арига T.  Экстракт, богатый проантоцианидом from  Виноград и виноград 1. Семена Участие в выставке the  В целях развития of  Атеросклероз аорты in  Уровень холестерина - кролики. Атеросклероз, 1999, 142(1): 139 — 149.