Что такое фикоцианин?
Spirulina — род челюстных цианобактерий, подсемейства цианофикэ, подсемейства сегментных организмов. Это филейные, многоклеточные, спирально-прокариотические водоросли с высоким содержанием белка и быстрой репродуцированием [1, 2]. Спирулина включает в себя различные штаммы, такие как Arthrospira platensis, Arthrospira maxima и Arthrospira salina. Спирулина богата белком, жиром, витаминами, минералами, хлорофилом, грау-каротином и полисахаридами и является идеальным пищевым и лекарственным ресурсом для человека [3].
Спирулина содержит фикоцианин, важный легкий пигментный белок, который состоит в основном из фитоцианина (PC), аллофикоцианина (APC) и фиторитрина (PE). Фикобилибелки являются безопасным и нетоксичным источником белка. Они не только являются ценным пищевым и кормовым источником белка в природе, но и имеют преимущества в исследовании оригинальной теории фотосинтеза. Важными активными веществами спирулины являются полисахариды спирулины и фикоцианин [4]. Исследования, проведенные в последние годы как внутри страны, так и за рубежом, показали, что спирулина имеет множество функций, включая антиусталость, антирадиацию, антивирусные, противоопухолевые, антиаллергические и иммуноусиливающие свойства, что означает, что спирулина и ее активные ингредиенты имеют широкие перспективы применения в исследованиях и разработках функциональных продуктов питания [5].
Фитоцианин является одним из видов фотосинтетических вспомогательных пигментов обычноОбнаружен в клетках цианобактерий. Это особый пигментный белок, состоящий из тетрапирольного соединения с открытой цепью и белока дегидрогеназы, связанного цепной серой [6]. В последние годы ее теоретическим исследованиям и прикладным разработкам уделяется большое внимание. Содержание фитоцианина в спирулине достигает от 10% до 20%, и является важным естественным пигментом для фотосинтеза в клетках спирулины. Он может передавать световую энергию в фотосистему II с почти 100% эффективностью во время фотосинтеза [7, 8]. Фитоцианин может широко использоваться в качестве натурального пигмента в таких отраслях, как пищевая промышленность, косметика и красители. Фикоцианин также имеет сильную флюоресценцию и может использоваться для производства флюоресцентных реагентов, флюоресцентных датчиков, флюоресцентных датчиков и т.д., которые используются в клинической медицине, иммунной химии и биологической инженерии [9, 10]. Как важный физиологически активный ингредиент, он также может быть сделан в лекарства для здравоохранения. Фитоцианин также является идеальным фотосенсибилизирующим средством без токсичных побочных эффектов [8].
Благодаря хорошим перспективам развития фитобилибелков и их высокому содержанию в спирулине, исследования по фитобилибелкам в спирулине стали горячей точкой в исследованиях по изучению водорослей белка. В статье представлен прогресс исследований фитобилибелков спирулины в последние годы с точки зрения извлечения, очистки, физико-химических свойств, физиологической активности и т.д.
1 1 2 3
Экстракция фикоцианина спирулины часто подразделяется на два процесса: растворение белка и белковые осадки. Фикоцианин является внутриклеточным белком. Чтобы растворить его, клеточная стенка и клеточная мембрана должны быть сначала сломаны таким образом, чтобы раствор растворился в растворенном состоянии. Текущие исследования показывают, что извлечение спирулинного белка все еще находится на стадии экспериментальных исследований, и методы извлечения не те же самые. Чжэнь цзян [11] резюмировал методы нарушения работы клеток следующим образом: неоднократное замораживание и размораживание, химическая реагентная обработка, отек, ультразвуковая обработка и измельчение тканей. Существует пять методов, к числу которых относятся: соленование, кристаллизация, изоэлектрические точечные осадки и ультра-фильтрация.
1.1. Система управления Среди методов разрушения клеток, метод отека имеет длительный цикл экстракции, а ультразвуковой метод имеет низкую скорость экстракции. Поэтому наиболее часто используемыми методами являются метод многократного замораживания и оттаивания и метод химической реагентной обработки, однако между ними также существуют определенные различия. Лин хонгвей [12] и др. использовали додецилсульфат натрия (SDS) для уничтожения клеточной мембраны плаценза артроспирали для экстракции фикобилибелков с коэффициентом экстракции до 98%, который был значительно лучше контрольной группы, извлеченной методом заморозки. Чжан ифанг (Zhang Yifang) и другие использовали комбинацию KCl и lysozyme для извлечения фикобилибелков из клеточных стен спирулины, достигнув скорости разрушения стенок более 95%. По сравнению с методом морозильной оттепели они пришли к выводу о Том, что метод морозильной оттепели подходит только для подготовки небольшого количества проб и что очень трудно быстро замораживать и оттепелить большое количество проб. Химический метод реагента затрудняет очистку белка позже из-за добавления химических реагентов, и неправильная работа может легко привести к денатурации белка. Метод заморозки прост и удобен в эксплуатации. Поэтому метод заморозки чаще используется в экспериментах для извлечения небольших количеств фикобилибелков.
1.2. Общие сведения В реальной эксплуатации для максимально возможного растворения фикобилибелков в комбинации часто используется несколько методов. Например, гао тяньжун [14] и ван юн [15] неоднократно замораживали и размораживали клетки спирулины с помощью ультразвука. Лин хонвей (Lin Hongwei) и другие использовали метод мытья и циклического замораживания и размораживания для извлечения фикобилибелков спирулины. Результаты показали, что извлекаемая доходность с использованием реагента 20 - летнего возраста составила 65,1%, что выше, чем при использовании метода циклического замораживания и оттаивания буферных растворов.
После нарушения работы клеток фикобилибелок растворяется в экстракционном растворе. В настоящее время очень важно выбрать подходящий метод выпадения осадков. Метод выпадения осадков в изоэлектрической точке использует свойства белков, имеющих наименьшую растворимость в изоэлектрической точке. Благодаря корректировке pH раствора до изоэлектрической точки фикобилибелка, растворимость фикобилибелка снижается и ускоряется. Чжан ифанг [13] и тан чжаохай [16] использовали этот метод для выпадения фикоцианина. Однако, как правило, считается, что фикоцианин чувствителен к pH, и плохое управление pH во время осадков может легко привести к денатурации белка. В литературе больше говорится об использовании соления для выпадения фикоцианина, и его воздействие на осадки также широко признается.
Сульфат аммония является широко используемым солевым раствором. Чжан ифанг [13] и другие также использовали солевые растворы, такие как магния сульфат, диамоний водород фосфат, и аммония диводород фосфат для сравнения с аммония сульфат раствор для соления. Полученные результаты свидетельствуют о Том, что выделение соли сульфата аммония является эффективным, в то время как другие методы выделения соли являются менее эффективными. Однако существуют различные мнения относительно концентрации сульфата аммония в соли. В основном 50% насыщенного сульфата аммония используется для выпадений [4, 12, 17], но некоторые используют от 30% до 60% насыщения [15, 18], а лин хонвэйи [19, 20] даже использует 70% или 80% сульфата аммония. Ху йибинь [21] и другие использовали растворы сульфата аммония различной концентрации для создания поэтапного метода градиентного соления с целью отделения и очистки фикобилибелков динофлагата с хорошими результатами. - эйч. В. зиглеман [22] считает, что растворы сульфата аммония различной концентрации могут также отделять фикобилибелки от других фикобилибелков, в то время как пэн веймин [23] считает, что невозможно отделить фикобилибелки от других фикобилибелков путем выделения сульфата аммония. Тем не менее, извлечение фикобилибелков из спирулины всегда связано с обработкой сульфата аммония для получения сырого фикобилибелкового экстракта.
2 метода очистки
Экстракт спирулиньского белка имеет высокое содержание примесей белков, а соотношение чистоты (A620/A280) фикоцианина должно быть выше 4,0, чтобы иметь практическую ценность [11]. Поэтому сырой экстракт должен быть дополнительно отделен и очищен для удаления примесей белков и повышения чистоты фикоцианина. Методы очистки, о которых в настоящее время сообщается в литературе, включают гидроксиапатитную хроматографию колонн, гелевую хроматографию, ионный обмен и менее широко используемую диатомную хроматографию земной колонны. На практике для достижения лучших результатов зачастую необходимо одновременно использовать два или более методов.
Wei Ping [18] et al. прошли сырой экстракт фикоцианина через адсорбционные колонки dee-sephadex a -25 и hydroxyapatite (HA), соответственно, а затем вновь убрали фикоцианиновую фракцию через колонку HA и прошли через колонку G-150 для экстракции фикоцианина из Arthrospira maxima. Результаты показывают, что реагентный фикоцианин с коэффициентом чистоты до 4,18 может быть получен с помощью домашней вторичной гидроксиапатитной колонки, а фикоцианин с одним компонентом может быть получен с помощью дополнительной хроматографии колонки G-150.
Ху йибинь [21] и другие использовали гидроксиапатитную хроматографию и гелевую хроматографию сефадекса G-100 для получения фитоцианина с коэффициентом чистоты более 5,0. Инь ган [24] и другие использовали сефакрил с -200 гелевая хроматография и гидроксиапатитная колонна хроматография для изоляции и очистки фитоцианина от искусственно культивируемого спирулинного плаценза, получая чистый фитоцианин. Чжан чэнгву [4] и другие дважды очищали фикобилибелок хроматографией HA столбца, а затем еще раз очищали его сефадексом G-100 столбца хроматографией и фильтрацией для получения электрофорестически чистого фикобилибелока. Инь ган [25] и другие также изучали использование обмена ионов и гидроксиапатитной адсорбции для изоляции и очистки фикобилибелков от спирулинового плаценза. Фикобилибелки были определены как электрофорестически чистые с помощью изоэлектрической фокусировки. Инь ган [26] и другие использовали гидроксиапатит и сефадекс G-100 для хроматографии колонок, чтобы изолировать и очистить фикобилибелок с коэффициентом чистоты 4,71.
Пенг веймин [23] и другие использовали гидроксиапатитную хроматографию столбца для очистки фикобилибелка от спирулины, чтобы получить фикобилибелк с высокой чистотой. Лин хонвей [19, 20] и др. сначала использовали колонку диатомита 545 для частичного очищения, а затем использовали ионный обмен смерти-целлюлозы для очищения спирулины с коэффициентом чистоты 4,1. Чжан цзяньпин [27] и другие сначала использовали гидроксиапатитную хроматографию столбца, а затем сефадексную G-150 dextran gel chromatography, чтобы получить более чистый фитоцианин. Ван юн [15] и другие изучали и устанавливали процедуру разделения и очистки для сефадекса G-200, дэя-сефадекса a -25, HA и сефадекса G-200. Результаты этого метода были идеальными, с полиакриламидом геля электрофорез (страница) показывает Один электрофорез диапазон, и соотношение чистоты до 14, пройдя через предыдущее максимальное значение 10, как сообщается внутри страны и за рубежом. Это также типичный пример комбинированного использования различных методов очистки.
3. Исследования физико-химических свойств
Благодаря широким перспективам применения фитобилибелков, изучение их физико-химических свойств стало важной темой в развитии спирулины. В последние годы исследования по фитобилибелкам были посвящены молекулярному составу, и значительный прогресс был достигнут в изучении других физико-химических свойств.
3.1 исследования спектральных свойств
Спектроскопия является одной из важных характеристик фикобилибелков, а изучение спектроскопических свойств обеспечивает важную основу для идентификации фикобилибелков спирулины. В то же время максимальная абсорбция может также использоваться для определения содержания белка, обеспечивая простой и эффективный метод контроля качества фитобилибелковых продуктов. Однако из-за различий в фитобилибелке между различными штаммами спирулины и разной чистоты образцов фитобилибелка, используемых исследователями, существуют также различия в сообщаемых спектроскопических свойствах.
Инь ган [26] и другие показали, что ультрафиолетово-видимый спектр фикоцианина плаценза спирулины имеет характерные пики поглощения на длинах волн 278, 360 и 620 нм. Wei Ping [18] и другие обнаружили, что после очищения фикоцианин спирулины максимума имеет характерные пики поглощения 620 нм и 348 нм после сканирования с использованием ультрафиолетового излучения. Чжан чэнву (Zhang Chengwu) и другие измерили максимальную абсорбцию волны очищенного фикоцианина спирулинового плаценза в 620 нм путем сканирования с использованием ультрафиолетового излучения. Пэн веймин [17] и др. измеряли максимальную видимую пиковую абсорбцию фикоцианина спирулинового плаценза в 620 нм с помощью ультрафиолетового спектрофотометра, а пиковую величину выбросов флюоресценции-при комнатной температуре 645 нм с помощью флюоресценционного спектрофотометра.
Ван йонг [15] и другие обнаружили, что длина поглощающей волны фикоцианина в соленосной спирулине при pH 7,0 составляет 615 нм и что по мере уменьшения pH максимальная видимая пиковая величина поглощения фикоцианина переходит на длину голубой волны, а красная − на увеличение pH; Пик возбуждения флюоресценции фикоцианина в нейтральных условиях имеет два пика в 590 нм и 635 нм, а пик выбросов флюоресценции имеет только одно пиковое значение в 650 нм. Чжан эрсиан [28] и другие установили, что максимальная пиковая абсорбция фикоцианина составляет 625 нм, а пиковая концентрация флюоресценции - 648 нм. Инь ган [24, 26] и другие также проводили инфракрасную спектроскопию на фикобилибелках и обнаружили, что у фикобилибелков пики поглощения составляют 3200, 1650, 1550, 1100, 1050 и 650 см -1, что обеспечивает более прочную основу для идентификации фикобилибелков.
3.2 аминокислотный состав фикобилибелков
Изучение аминокислотного состава белка способствует дальнейшему изучению внутренней структуры и активных групп фикобилибелков, а также обеспечивает теоретическую основу для других свойств фикобилибелков. Инь ган [24, 26], лю цифан [29], ли цзяньхун [9] и другие изучали аминокислотный состав фикобилибелков в спирулине. Результаты показывают, что аминокислотный состав фикобилибелков в спирулине различных штаммов практически одинаков.
Чжан чэнгу (Zhang Chengwu) и другие проанализировали состав аминокислоты и содержание фикобилибелка spirulina platensis и пришли к выводу, что, за исключением триптофана, который не был измерен, фикобилибелк содержит 14 аминокислот, только следовые количества хистидина и пролайна, и не хватает метионина. Пенг веймин [17] использовал высокопроизводительную жидкую хроматографию для анализа аминокислотного состава фикоцианина в спирулиновом плацензе. Результаты показали, что аминокислотный состав фикоцианина и фикоцианина является аналогичным, при этом наиболее распространенным является фенилаланин, за которым следуют апартическая кислота, глютамическая кислота и тирозин, в то время как пролайн и хистидин менее распространены. В то же время соотношение кислотных аминокислот к основным аминокислотам в фикоцианине составляет 2,14, что выше, чем у других фикоцианинов (1,92). Поэтому фикоцианин считается кислотным белком, что также объясняет, почему изоэлектрическая точка фикоцианина ниже, чем у других фикоцианов, как сообщается в литературе [29].
3.3 биохимические характеристики
3.3.1 изоэлектрическая точка
Изоэлектрическая точка является одним из наиболее заметных свойств белков. Сообщаемые изоэлектрические точки фитоцианина спирулины варьируются, но все они находятся в пределах от 3,4 до 4,8 [4, 13, 24, 26, 29]. Это может быть связано с различиями в свойствах фикоцианина в различных штаммах спирулины, и еще одна причина заключается в Том, что фикоцианин различных примесей влияет на последовательность результатов измерений. Результаты исследования также показали, что изоэлектрическая точка фикоцианина, как правило, ниже, чем у других фикоцианин, что может быть связано с составом аминокислот в белке [17].
3.3.2 изучение фитоцианиновых подгрупп
Текущие исследования показывают, что фикобилибелки состоят из двух подгрупп с различными молекулярными весами (α and β) и, как правило, являются hexamers двух подгрупп (αβ)6 [15]. Однако в настоящее время существуют различные мнения относительно молекулярного веса подединиц. Чжан чэнву [4] и др. использовали 12% додецилсульфатно-полиакриламидовый гелеэлектрофорез натрия (SDS-PAGE) для анализа очищенных фикобилибелков. Они обнаружили, что фикобилибелок спирулинового плаценза состоит из двух подгрупп, гравитационных и гравитационных, и что их молекулярный вес составляет 14 500 гравитационных и 15 000 гравитационных, соответственно. Чжан эрсиан [28] измерил молекулярный вес двух фитобилибелковых подблоков на 4900 и 17200 гранул. Пенг веймин [17] провел регрессионный анализ, используя в качестве параметров относительную скорость миграции (X) стандартного белка и логаритм его соответствующего молекулярного веса (Y). Полученное уравнение регрессии: Y = 1,0228x + 5,1255 (R2 = 0,9889). Рассчитанный молекулярный вес грануляционной подединицы фикобилибелка в спирулине тупого колпака составляет приблизительно 16,3 к D, а молекулярный вес грануляционной подединицы — приблизительно 18,9 к D, что аналогично отчетам в литературе [30, 31].
3.4 устойчивость фикобилибелка
Чжан ифанг [13] считает, что фитоцианин стабилен ниже 40 градусов. При 45 градусах его пигмент начинает разлагаться, оптическая плотность раствора постепенно уменьшается, а при 50 градусах оптическая плотность быстро уменьшается. При 70 градусах оптическая плотность раствора на 75% ниже первоначального значения. Сахарный раствор может улучшить тепловую устойчивость фикоцианина. Свет оказывает относительно небольшое воздействие на фикоцианин. После 60 часов воздействия света при 5000 люксах оптическая плотность раствора pH 5 остается неизменной. Исследования также показали, что фикобилибелки стабильны между pH 4,0 и 8,5 без изменения оптической плотности. Цвет раствора загорается при pH более 8,5 или менее 4,0. Вышеуказанные результаты исследований показывают, что фикобилибелки чувствительны к температуре и pH, но не к свету. Этот вывод имеет большое значение для контроля условий добычи, очистки и сохранения фикобилибелков.
4 исследования физиологической активности
Фитоцианин является одним из важных активных ингредиентов спирулины. Клинические исследования показали, что фитоцианин в спирулине может улучшить тело и#39. Иммунная система, способствует регенерации клеток животных и препятствует росту раковых клеток [32]. Поэтому большое значение имеет дальнейшее изучение физиологической активности фикоцианина. В настоящее время основное внимание в рамках исследований уделяется главным образом изучению деятельности по борьбе с коррупцией, и был достигнут определенный прогресс в изучении других видов деятельности.
4.1 исследования по борьбе с коррупцией
Донг цян [33] и другие изучали антиканцерогенную активность фитоцианина (ПК) на клетках гелы двумя методами. Эксперимент показал, что ПК оказывает значительное ингибиторное воздействие на рост клеток HeLa, а когда концентрация ПК составляет 80 мг · л -1, скорость ингибирования раковых клеток достигает 31,0%. Шэнь хайян [34] и другие использовали метод полутвердого agar culture и MT T для определения влияния спирулины фикоцианин на рост клеток лейкемии человека HL-60, K-562 и μ-937. Три типа опухолевых клеток лечили с разной концентрацией спирулины фикоцианина в условиях экстракорпоральной культуры. Результаты показали, что спирулина фикоцианин имеет различную степень ингибиторного воздействия на три типа опухолевых клеток, и наблюдается эффект концентрации-дозы, с сильным ингибиторным эффектом при высоких концентрациях. Го баоцзян [35] и другие изучали ингибиторное воздействие селенизированного фикоцианина, извлеченного из Селена-обогащенного культивируемого спирулинового плаценза, на раковые клетки печени. Го баоцзян (Guo Baojiang) и другие также изучали ингибиторный эффект фотоиммобилированного фикоцианина на линии клеток рака печени in vitro 7402. Эксперимент показал, что при первоначальной иммобилизованной концентрации фикоцианина 20μg/w ell, скорость ингибирования 7402 клеток достигла 55%. По мере дальнейшего роста концентрации уровень ингибирования раковых клеток снижается. Когда концентрация фикоцианина достигла 0,5 мг/вт ell и 1 мг/вт ell, коэффициент ингибирования восстановился до 55% и 66%.
4.2 другие исследования в области деятельности
Спирулина фикоцианин также имеет определенную активность в других областях. Ван юаньсюнь [37] и другие обнаружили, что кормление мышей извлеченной спирулиной фикоцианин значительно улучшило выносливость физических упражнений. Чжан чэнву [38] доказал в опытах на животных, что спирулина фикоцианин имеет антирадиационные эффекты, и результаты также показали, что фикоцианин может способствовать восстановлению гематопиетической функции у облученных животных. Танг мей [39] и другие обнаружили, что фикоцианин может способствовать распространению обычных селезеночных лимфоцитов мышей, повышению гемолитической способности спотообразующих клеток и содержания гемолисина в сыворотке, а также значительно противостоять повреждению гидрокортизонов организма и организма#39;s иммунная функция.
Чжао цзинцюань [40] и другие использовали кинетику конкурентной реакции для изучения эффекта падежа фитоцианина в спирулине против гидроксильных радикалов. Результаты показали, что фитоцианин оказывает сильное падальное воздействие на гидроксильные радикалы, а измеряемая константа скорости падальной реакции находилась в диапазоне (2,8-5,6) от 109л · моль - 1 · с - 1. Танг Мэй [41] и другие изучали влияние фитоцианина спирулины (ПК) на функции периферических лимфоцитов человека. Результаты показали, что ПК может способствовать воздействию PHA на стимулирование преобразования лимфоцитов, и существует зависимость зависимости от дозы. ПК может восстановить способность T клеток образовывать е розетки после повреждения циклопедом, особенно способность образовывать активные е розетки (Ea).
Экспериментальные исследования показали, что фитоцианин спирулины имеет физиологическую деятельность, такую как антиопухолевая, антирадиационная, антиусталостная, повышение иммунитета и свободное радикальное удаление отходов, что обеспечивает важную основу для принятия решений в развитии спирулины в области функциональных продуктов питания и лекарственных средств.
5. Исследования продуктов фитоцианина [42, 43]
Фитоцианин является важным активным ингредиентом спирулины, и его уникальные физические и химические свойства ценятся в исследованиях по разработке продукции. Школа наук о жизни пекинского университета использовала спирулинский шлам для подготовки и очистки мономеров фитоцианина, которые были соединены с очищенными антителами дфи. Затем конжугаты были очищены для получения антител с фитоцианином, как флуоресцирующие зонды. Институт химической металлургии китайской академии наук и институт океанологии китайской академии наук также провели исследования по разработке флюоресцирующих маркеров и диагностических реагентов для фитобилибелков, а также исследования по диагностическим реагентам и диагностическим комплектам (методы проверки, маркировки и обнаружения флюоресцирующих реагентов). Есть надежда, что технология и популярный фитобилибелковый антиген-диагностический комплект поверхности вируса гепатита в, который может заменить другие флюоресцентные маркеры и ферменты маркеры могут быть получены. В то же время, спирулинский белок добился большого прогресса в исследованиях пищевых продуктов, особенно функциональных исследований пищевых продуктов. В китае уже существует более 10 видов спирулиновых таблеток и капсул, которые были одобрены министерством здравоохранения в качестве медицинских продуктов в соответствии с различными функциями. Однако, поскольку добыча спирулинного белка все еще находится на стадии экспериментальных исследований, не существует подходящего технологического метода для промышленного производства, что делает спирулинский белок дорогостоящим и ограничивает его применение в определенной степени.
6. Выводы
Исследование спирулины в китае началось в 1970 - х годах. Несмотря на значительные достижения за последние 30 лет, большая часть исследований все еще находится на лабораторном этапе. Согласно литературным отчетам, трудно извлечь и очистить активный ингредиент спирулина фикоцианин, и потребуется некоторое время, чтобы развить зрелый производственный процесс. Существует также не так много функциональных продуктов на основе спирулины phycocyanin, и исследования и разработки в фармацевтической области все еще находится в зачаточном состоянии. Поэтому в ближайшие несколько лет исследования и разработки в области фитоцианина будут сосредоточены на следующих областях: 1. Изучение метода промышленного производства больших количеств фикоцианина в целях снижения его стоимости и содействия его широкому развитию и применению. 2. На основе результатов исследований по деятельности фитоцианина расширить разработку фитоцианина от функциональных пищевых продуктов до фармацевтических препаратов и разработку медицинских диагностических реагентов для дальнейшего повышения его ценности. В-третьих, продолжать углубленные исследования физических и химических свойств фикоцианина и разработать надежный метод контроля качества для обеспечения качества исследований и производства фикоцианиновых продуктов, особенно фармацевтических препаратов.
Ссылки на статьи
[1] яо баожен. Функция спирулины по оценке питания и укреплению здоровья [J]. Исследования и разработки в области продовольствия, 1998 год, 6(2): 2.
[2] хе цзя, чжао цимей и др. Исследование стабильности спирулины фикоцианин [J]. Acta Biologica Sinica, 1998, 15(5): 17.
[3] Claudio S, массовое производство спирулины [J], экспериментация, 1982, 38: 40 — 43.
[4] чжан чэнву, зенг жаки и др. Изоляция, очистка и физико-химические свойства фитобилибелков спирулины плаценсис [J], исследование и разработка натуральных продуктов, 1996, 8(2): 29-34.
[5] хоу цзяньше, сюэ фэнчжао и др. Основные физиологические регулятивные функции спирулины [J], Food Research and Development, 2001, 22 (1): 31-34.
[6] и голян, цзян лицзинь. Модельная реакция биосинтеза водорослей фитобилибелка [J], Acta Chimica Sinica, 1991, (49): 94-97.
[7] Zeng Fanjie, Lin Qishan и др. Изоляция и характеристика р-фикоритрина от красной алги порфиры дентаты [J], Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 1992, 24 (6): 544 -551.
[8] глазер а. н. макромолекулярный комплекс, оптимизированный для передачи световой энергии [дж]. Biochim Biophys Acta, 1984, 768: 29-51.
[9] ли цзяньхун, тай зиху и др. Свойства большого спирулина phycobiliбелок [J]. Журнал наньцзинского университета, 1996, 32(1): 59-63.
[10] чжан чэнву, инь жимин и др. Разработка и использование фитобилибелков [J], Chinese Journal of Marine Drugs, 1998 (4): 26-29.
[11] чжэн цзян. Прогресс исследований в области экстракции и очистки фикобилибелков [J], Food Science, 2002, 23 (11): 159-161.
[12] лин хунвей, у чженцин и др. Новый процесс извлечения голубого белка спирулины [J], Guangxi Chemical Industry, 1997, 26(4): 5-7.
[13] чжан ифанг, лю сючуань и др. Экстракция и стабилизация белка спирулины [J], Journal of юньнаньский университет (Natural Science Edition), 1999, 21(3): 230-232.
[14] гао тяньжун, вэй сяокуй и др. Исследование комплексного процесса использования спирулины [J], журнал юннаньского нормального университета, 2002 год, 22(2): 42-43.
[15] ван юн, цянь кайсян и др. Исследование разделения и очистки высокочистого фикоцианина и его спектральных характеристик [J], Progress in Biochemistry and биофизика, 1999, 26(5): 457-460.
[16] тан чжаохуэй, цзян цзялунь. Предварительный отчет по извлечению и характеристике фитобилибелков спирулины плаценсис [J].
[17] пэн веймин, шанг шутянь и др. Исследование свойств фитобилибелков спирулины плацензии [J].
[18] вэй пин, ли хуан и др. Экстракция и очистка фикоцианина от спирулины maxima [J]. Журнал нанкинского университета химической технологии, 1999, 21(3): 62-64.
[19] лин хунвей, цинь хайку и др. Новый процесс извлечения и очистки фикобилибелков из спирулины плаценсис [J], Fine Chemicals, 1998, 15(1): 18-20.
[20] лин хунвей, лян хон. Отделение и очистка фикобилибелков от спирулины плаценсис [J], Guangxi Chemical Industry, 2002, 31(1): 30-31.
[21] ху йибинь, ху хунджун и др. Исследования по крупномасштабному извлечению и очистке фикобилибелков из спирулины, богатой фикобилибелками [J], вуханские ботанические исследования, 2002, 20 (4): 299-302.
[22] сигельман H W, Kycia J H. Algal biliproteins: handbook of phycoloology methods (под редакцией Johan A H) [J]. Combridge U nipress, 1978, 71-79.
[23] пенг веймин, шанг шутянь и др. Извлечение фикобилибелков из динофлагата Sp.~D (Spirulina platensis) [J], Food Science, 1999 (6): 48-49.
[24] инь ган, лю чжэн и др. Изоляция, очистка и характеристика фитобилибелков от динофлагата спирулина плаценсис [J], Journal of Tsinghua University (Natural Sciences), 1999, 39 (6): 20-22.
[25] инь ган, инь цзинь и др. Исследование по очистке фикобилибелков от спирулины анионным обменом и гидроксиапатитной хроматографией [J], ионный обмен и адсорбция, 2000, 6 (2): 128-133.
[26] инь ган, ли хуэй и др. Отделение и очистка фикобилибелков и полисахаридов от спирулины и характеристик продукта [J], Fine Chemicals, 1999, 16 (2): 10-13.
[27] чжан цзяньпин, чжан цзинмин и др. R- phyкоритрин [J], биофизический журнал, 1997 (6): 173-178.
[28] чжан эрсиан, чэнь яньли и др. Очистка фикобилибелков от спирулиньского пладенсиса и их сбор свободных радикалов [J], тайваньский пролив, 1999 год, 18 (2): 172-176.
[29] лю цифан, ван хуль и др. Изоляция и характеристика фитобилибелков из спирулины салины [J], Acta Hydrobiologica Sinica, 1988, 12 (2): 146-153.
[30] HIL DITCH C M, SMITH A J, et al. Phycocyanin from the cyanobacterium aphanothece halophytic [J], Phytochemistry, 1991, 30(11): 3515-3517.
[31] XIA A D, ZHOU J C, et al. Кинетика передачи энергии в фиконьянине от цианобактерия w estiellopsis fic, изучаемая насосно-зондовыми техниками [J], биохимические и биофизические исследования Communications, 1991, 179(1): 558-564.
[32] шварты J L, шкиар G. ингибирование роста и разрушение раковых клеток полости рта экстрактами спирулины [J]. Proc Amer Acad Oral Pathol, 1986, 40: 23 — 27.
[33] дун цян, цянь кайсян и др. Исследование антикоррозионной деятельности phycocyanin [J], Journal of Zhejiang University (Engineering Science), 2001, 35 (6): 672-675.
[34] шэнь хайян, ван сися и др. Влияние спирулины фикоцианин на рост лейкемических клеточных линий HL-60, K-552 и μ-937 [J]. Морская наука, 2000, 24 (1): 45 — 48.
[35] го баоцзян, у яньцин. Исследование влияния селенизированного фитоцианина как биоматериала на Рак печени [J], Journal of South China Normal University (Natural Science Edition), 2001 (3): 40-44.
[36] го баоцзян, сюй хеде и др. Ингибиторное действие фотоиммобилизованного фикоцианина на Рак печени in vitro 7402 [J], ионный обмен и адсорбция, 2000, 16 (6): 547-552.
[37] ван юаньсюнь. Research on Spirulina to improve tolerance [J], Journal of the Chinese Society of Sports Science, 1985, 4: 20-21.
[38] чжан чэнву, зенг жаки и др. Защитное действие полисахарида и фикоцианина спирулины плаценза на острое лучевое заболевание мышей [J], Journal of Nutrition, 1996, 18(3): 327-330.
[39] тан Мэй, джин инг и др. The effect of spirulina phycocyanin on The иммунная функция мышей, Journal of Jinan University (Natural and Medical Sciences) [J], 1998, 19 (5): 93-97.
[40] чжао цзинь цюань, чжан цзяньпин. Изучение кинетики реакции фитобилибелков с гидроксильными радикалами с использованием импульсного фотолиза [дж]. Научный бюллетень, 2000, 45(1): 32-36.
[41] тан Мэй, джин ин и др. The effects of spirulina хлорфиллин and algin on The function of human периферической крови lymphocytes [J], Journal of South China Normal University (Natural Science Edition), 1998 (4): 63-67.
[42] ли динмэй. Обзор и перспективы развития China's микроводорослная промышленность (1) [J]. Зернокомбикормовая промышленность, 2001, (5): 26-27.
[43] хоу цзяньше. The development and current situation of spirulina food research and development in China [J]. Исследования и разработки в области продовольствия, 2000 год, 21(4): 23-26.