Что такое натуральное пищевое окрашивание фитоцианина?
Спирулина — водное растение с высокой питательной ценностью и биодоступностью, которое широко используется в кормах для животных [1] и косметике [2], а его высококачественные белки и натуральные пигменты привлекают большое внимание в пищевой промышленности [3 — 4]. Белки желчи спирулины в основном подразделяются на фикоцианин, альбумин и фикоцианин в соответствии с их абсорбционными спектрами. Среди них фикоцианин (ПК), также известный как фикоцианин, является водорастворимым растительным белком [5], который может быть классифицирован как к-фикоцианин (получаемый из цианобактерий), р-фикоцианин (получаемый из красных водорослей) и р-фикоцианин (получаемый из симбиотических кокчи) согласно его источникам [6].
Голубой цвет фикоцианина связан с тетрапиролевой хромофорой, прикрепленной к белковой части через соединение тиотера. В настоящее время считается, что фикоциан содержит две относительно гомологичные полипептические цепи α и β, которые связаны с тремя хрома-форами, расположенными в α-subunit Cys84, и в β-subunit Cys84, Cys155, соответственно, и α и β subunits образуются в одну единицу (αβ) через взаимодействие между молекулами. Форма агрегации подгрупп зависит от окружающей среды, и большинство из них являются мономерами, тримерами и счетчиками [7-8].
Фитоцианин является высокопитательным растительным экстрактомС свойствами белка, который может быть использован в качестве естественного пигмента в продуктах питания, косметике и т.д. Между тем, благодаря своим флуоресцирующим свойствам, он может быть сделан в флуоресцирующие реагенты, зонды, индикаторные вещества и т.д., и был использован в области клинической медицины, иммунологии и биологии. Недавние исследования также показали, что фитоцианин обладает антиоксидантами, антиопухолями, бактериостатическими и другими функциональными видами деятельности и может использоваться в качестве фармацевтического ингредиента в здравоохранении, а также идеального фотосенсибилизатора без токсичных побочных эффектов [9-11]. Поэтому белок голубого цвета водорослей имеет большое значение в качестве естественного пигмента или функционального активного ингредиента. В настоящем документе представлен всесторонний обзор методов его извлечения, очистки, стабильности и фортификации, а также физиологической активности.
1 1 2 3 - фикоцианин
Стандартный метод экстракции голубого белка водорослей отсутствует, и широко используемые методы внутри страны и за рубежом включают в себя оттепеление, ультразвуковое дробление, лизы и химический реагент. Хадиянто и др. [13] использовали скорость экстракции и антиоксидантную активность (эк50) в качестве переменных чувствительности и оптимизировали поверхность чувствительности ультразвуковой частоты, времени и температуры. Результаты показали, что ультразвуковые волны могут значительно увеличить скорость экстракции микроводорослей фикоцианина, а оптимальные условия — 52,5 градуированной температуры экстракции, 42 КГЦ ультразвуковой частоты за 42 мин, выход может достичь 15,7%, эк50 — 85,78 мг/мл.
Чжан цзин и др. [14] использовали цианобактерий из озера тайху в качестве исследовательского объекта и сравнивали экстракционные эффекты повторяющихся методов холодного размораживания, ультразвукового метода, метода растворения и ацетона, принимая в качестве индексов типичные пики поглощения и концентрации голубого белка водорослей, и пришли к выводу, что экстракционный эффект этих четырех методов может в различной степени обеспечить получение голубого белка водорослей, При наибольшом количестве голубого белка водорослей, извлеченного методом многократного размораживания, наименьшее количество голубого белка водорослей, извлеченного методом ультразвука, и коэффициенты вариации концентрации соответствующих значений обоих методов составили < 0,6, что позволило сделать сравнение и сделать вывод о Том, что оптимальным методом является многократный метод размораживания водорослей.
Коэффициент разброса этих двух методов составлял < 0,6, и было сочтено, что оптимальным методом является метод многократного замораживания и оттаивания. Pang et al. [15] далее сравнивали типы буферов в повторяемом методе замораживания с жидким азотом и использовали буфер асольцин-чапы (AC), фосфатный буфер и триметилолпропан-гидрохлорокислотный буфер для извлечения цианобактериальных белков, а эффективность извлечения буферов AC и фосфатов была более значительной, и, хотя буфер AC имел наибольшую эффективность извлечения, его подготовка была дорогостоящим и сложным делом. Хотя буфер переменного тока имеет высокую эффективность извлечения, его подготовка является дорогостоящей и сложной, поэтому фосфатный буфер более подходит для извлечения альгината.
Кроме того, существуют исследования по комбинации двух или более методов, Hou Zhaoqian et al [16] провели отдельные оптимизационные тесты для холоднооттепели и ультразвуковых методов, на основе которых холоднооттепель, а затем ультразвук были использованы для оказания помощи в экстракции голубого белка водорослей, и было установлено, что скорость экстракции была значительно выше, чем у двух методов, используемых в отдельности.
Ю. Jianfeng et al.[17] использовали метод отека, ультразвуковой метод, метод многократного замораживания и оттаяния и метод отека-ультразвуковой метод отека-ультразвука, метод отека-ультразвуковой метод отека-ультразвука для уничтожения клеток спирулины, и самая высокая производительность составила 8,9%, 7,4%, 8,0%, 8,3%, 9,2%, 8,9%, и в сочетании с условиями эксплуатации, в конечном итоге решили растворить-ультразвуковой метод и время отека 12 ч, ультразвуковой метод 5 мин может получить лучший эффект разрушения. Лучший эффект разрушения стены был получен 5 мин сверхтонкой измельчения. Ху шуанфей [18] использовал два метода извлечения белков из желчного пузыря спирулины: повторное охлаждение и ультразвуковая гогнизация и ультразвуковая комбинированная подкритическая экстракция воды, оптимизировал чувствительную поверхность температуры, ультразвуковой мощности и времени, и обнаружил, что скорость экстракции белка первого метода составила 45,76%, а оптимизированная ультразвуковая комбинированная подкритическая экстракция белка желчного пузыря спирулины достигла 74,02%.
2 метода очистки - фикоцианин
Альгинат можно классифицировать по степени чистоты как пищевой, так и фармацевтической продукции, а методы очистки, широко используемые в стране и за рубежом, включают в себя осаждение сульфата аммония, осаждение изоэлектрическими точечными осадками, градиентную засоление, хроматографию колонн с йонным обменном, гидроксиапатитную хроматографию колонн, расширение адсорбции пласта, двухфазную экстракцию воды и сочетание различных методов.
2.1 очистка фикоцианина одним способом
Сюй ран [19] использовал осадки сульфата аммония и изоэлектрические осадки для очистки сырой экстракта голубого белка и сопоставлял его чистоту и восстановление. Чистота и восстановление фикоцианина были положительно коррелированы с насыщением сульфата аммония, а сульфат аммония, насыщенный 40%, был наиболее эффективным, поэтому оптимальное насыщение сульфата аммония для очистки фикоцианина находилось в диапазоне 30%~50%; В ходе испытания изоэлектрического токового метода выпадения осадков наибольшее количество осадков было получено на pH3.5, однако чистота и восстановление были крайне низкими по сравнению с методом выпадения сульфата аммония, а изменение кислотности в ходе испытания было легко денатурацией фикоцианина.
Однако по сравнению с методом выпадения сульфата аммония чистота и восстановление были очень низкими, и изменение кислотности в ходе испытания могло бы легко привести к повреждению альгината, поэтому этот метод не был рекомендован. Ли бинг и др. [20] использовали спирулину обтусусус в качестве сырья для оптимизации экстракции и очистки голубого белка водорослей, во-первых, 50% сульфата аммония было использовано для ускорения экстракта сырого белка, и чистота экстракта может достичь 2,56 после гидроксиапатитной (га) хроматографии столбца, а затем полученная фракция голубого белка может быть очищена с помощью гелевой хроматографии столбца сефакрил р -200, а затем снова хроматографии столбца га. Был достигнут единственный пик очищения фикоцианина, и чистота в это время достигала 4,71.
Yu Shukun et al.[21] с целью упрощения этапов очистки гагината реагента, во-первых, для выведения осадков использовался двухступенчатый метод сульфата аммония с 30 - процентной и 50 - процентной насыщенности, а затем диализ с буфером фосфата 0,01 моль/л, а затем на втором этапе в колонну га был добавлен диализованный альгинат синего раствора для проведения градиентной очистки, а затем на третьем этапе, Пик с наивысшей чистотой и содержанием белка альгинатов был сконцентрирован, а затем очищен на хроматографии десен-сефхадек-а -25 во второй раз. На третьем этапе пики с наивысшей чистотой и содержанием альгината были сконцентрированы и очищены на хроматографической колонке dee-sephadexa -25.
Уровень чистоты и экстракции фикоцианина на каждой ступени составлял 0,87 и 23,6%, 2,1 и 49,3%, 5,4 и 63,1%, соответственно, что указывает на возможность получения фикоцианина реагентного сорта и дает теоретические ориентиры для дальнейших исследований процесса очистки, пригодного для промышленного производства. NASCIMENTO et al.[22] смешанный полий (этиленгликоль) с фосфатом калия, сульфатом аммония и цитратом натрия при различных соотношениях массы, а затем подвергается бигидратации.
NASCIMENTO et al.[22] смешанный полиэтанол с фосфатом калия, сульфатом аммония и цитратом натрия в различных соотношениях массы и провел бифазное извлечение белков желчи водорослей. Было установлено, что наилучшие результаты были получены с использованием бифазной системы 13% политанола -14% фосфата калия для экстракции кандиды и бифазной системы 13% политанола -14% цитрата натрия для экстракции Cichlidium variegatum. Wang Y et al. [23] очищенная водорослей цианобактерия с чистотой 14, которая является наивысшим значением, сообщаемым внутри страны и за рубежом, с использованием процессов Sephadex G-200, dee -Sephadex a -25, HA и Sephadex G-200.
2.2 очистка фикоцианина композитной технологией
Чжан файю [24] выбрал три метода, а именно: сегментальное соленование, двойная фазовая экстракция воды и хроматография, для очистки и уточнения сырого экстракта цианобактериальных цианобактериальных белков из озера чоу. Сравнивая воздействие молярной концентрации (NH4)2SO4, используемой на каждом этапе соления, на очищающий эффект и анализируя компоненты с помощью уф-видимой спектроскопии, было установлено, что нечетные соления шестиступенчатого метода соления проводились с использованием 1,0 моль/л (NH4)2SO4 для удаления примесей, а четные соления производились путем выпадения водорослей цианобактериальных белков с 1,8 моль/л (NH4)2SO4. При шестиступенчатом методе соления чистота 0,4 альгината возросла до 2,26 после двух этапов соления, а чистота достигла 3,48 после четырех этапов соления, однако чистота возросла лишь до 3,71 после шести этапов сегментального соления при значительном снижении восстановления. Он показывает, что метод сегментированной солености может обеспечить хорошую очистку альгината, а двухэтапный метод солености может использоваться в качестве общего метода очистки, а четырехэтапный метод солености может использоваться для получения альгината фармацевтического класса.
Кроме того, была проведена проверка двухэтапной хроматографии соли в сочетании с двухфазной экстракцией воды, и чистота альгината была повышена лишь с 1,969 до 2,619 за счет использования двухфазной гидросульфата полиэтилена-аммония в оптимальной системе, а полиэтиленгликоль было нелегко удалить, поэтому этот метод не был пригоден для очистки альгината в совершенном виде.
В ходе испытания двухэтапной соления в сочетании с хроматографией колонок, с уделением основного внимания типу и последовательности хроматографии колонок, было окончательно установлено, что для предварительной очистки используется целлюфайн а -500, а затем хроматография HA колонок проводится два раза для очистки, которые могут получить фармацевтический с-альбумин и с-аллофикоцианин. GUO et al. [25] использовали метод расширения дна в сочетании с хроматографией стационарного дна для изоляции и очистки цианобактерий водорослей, а сырая экстракция цианобактерий водорослей закачивалась в колонну, оборудованную Sereamline DEA. GUO et al[25] использовали метод хроматографии расширенной кровати в сочетании с стационарной кроватью для очистки альгината, сырое извлечение альгината было загружено в расширенную колонну, оснащенную герметичной деарью, и чистота могла быть увеличена до 8,8 раза, а затем раствор альгината, обогащенный в расширенной кровати, был хроматографирован для удаления гетерогенных белков с использованием стационарной кровати XAD7HP, а чистота полученной альгината была увеличена до 2,36 раза, И полное восстановление альгината может составить до 34,96%.
3 исследования по вопросам устойчивости
3.1 влияние устойчивости
Очищенный голубой пигмент водорослей легко разлагается, и легко подвержен воздействию света, тепла, pH значения и так далее и изменения цвета во время обработки и хранения. Чайклахан и др. [26] в производстве спирулины со средней культурой, извлечение продуктов, фильтрация и очистка пищевой порошок голубого белка водорослей, чтобы исследовать влияние температуры на его стабильность, и обнаружили, что при 47 ℃ является очень стабильным, когда температура выше скорость разложения голубого белка водорослей резко возрастает.
Ченг чао и др. [27] изучили влияние экологических факторов на хроматичность и содержание белка желчи спирулины диварикаты в качестве сырья и установили кинетику разложения голубого белка водорослей и его хроматику, которая показала, что процесс термического разложения соответствует кинетике первого порядка, и установили, что белок голубого цвета водорослей практически не имеет характерных пиков поглощения в видимом районе при pH 3, И что охотник-б пигментного раствора был самым маленьким и синим цветом на pH 4. Лю юхуан и др. [28] изучили стабильность цианобактериальных белков спирулины мажор и пришли к выводу, что цианобактериальные белки более стабильны в условиях п5 ~7, видимого или темного света внутри помещений, и широко используемые пищевые добавки не оказывают существенного воздействия на цианобактериальные белки, а влияние Na+, K+ и Mg2+ на цианобактериальные белки не является значительным, И стабильность цианобактериальных белков не сильно пострадала от низких концентраций Fe3+, Al3+ и Zn2+, но концентрация цианобактериальных белков не была значительной.
Воздействие низких концентраций Fe3+, Al3+ и Zn2+ на стабильность голубого белка водорослей было незначительным, однако концентрация более 0,002 моль/л вызвала бы осадки голубого белка водорослей, что нанесло бы серьезный ущерб стабильности голубого белка водорослей. Bi et al. [29] обнаружили, что содержание ПК и чистота спирулины обтусуса уменьшились после уф-излучения, а структура хромофора была изменена. Кроме того, оптимальные условия для цианобактерий в этих исследованиях были несколько различными, что может быть связано с различными источниками добычи.
3.2 методы повышения устойчивости
Будучи натуральным пигментом с высокой питательной ценностью, белок голубого цвета водорослей имеет широкую рыночную перспективу, но легко подвержен воздействию окружающей среды и обесцвечиванию во время переработки и хранения, и этот недостаток значительно ограничивает его применение. В настоящее время меры по повышению стабильности голубого белка водорослей включают главным образом добавление стабилизаторов и технологии микроинкапсуляции.
3.2.1 добавление стабилизаторов
Ян Lihong et al [30] извлек из Cichlidium spp. голубой белок водорослей с чистотой 1,958 и исследовал воздействие пищевых добавок на стабильность его хранения, и тест показал, что различные пищевые добавки оказывают различное воздействие на него, сахар, бензоиновую кислоту, эритритол оказывает защитное воздействие на голубой белок водорослей, в то время как этанол, литровая кислота, сорбат калия и так далее оказывают разрушительное воздействие на цвет и смазку голубого белка водорослей.
Хадиянто и др. [31] исследовали защитное воздействие глюкозы, сукроза и фруктозы на цвет спирулины цианобактерии 40, 60 и 80 ℃ и проанализировали кинетический анализ теплового разложения, среди которых глюкоза может увеличить энергию активации полимеризации цианобактерии в 4 раза и повысить антиоксидантную активность цианобактерии на 18,47% путем снижения значения IC50, а фруктоза имеет наиболее значительный защитный эффект при 80 ℃.
В работе FAIETA et al [32] изучались последствия различных концентраций сукроза и альгината для термоустойчивости альгината, и полученные результаты показали, что сукроза оказывает более значительное защитическое воздействие, чем альгината при той же концентрации, а утрата цвета альгината тесно связана со структурной нестабильностью белка в результате циркулярного дихроизма. В работе Martelli et al [33] дополнительно изучается воздействие меда или высокой концентрации сахара на термическую стабильность альгината путем добавления меда или высокой концентрации сахара в альгинат при высоких температурах. В работе MARTELLI et al. [33] далее изучается вопрос о Том, что добавление меда или высокой концентрации сахара в раствор альгината при высокой температуре может эффективно предотвратить деградацию к-альгината в синем цвете. Данные показали, что стабилизирующее воздействие сахара на голубой цвет к-фикоцианина связано с конечной концентрацией добавленного сахара, а не с его типом.
Lv Pingping et al. [34] исследовали воздействие четырех косметических добавок на альгинатный раствор и обнаружили, что после добавления 12% глицерола, 9% бутилена гликоля, 3% хлорида натрия и 0,15% бензоата натрия до 0,1 мг/мл альгинатного раствора скорость удержания пигментации была увеличена до 78,24%, 57,80% и 57,80% в среде избегания света при 25 - гравитационной обработке, при 25 - гравитационной обработке и при 40 - гравитационной обработке, соответственно, 76,02%. Кроме того, в целях повышения кислотной устойчивости альгината чжанг и др. [35] добавили сыворотный белок, белок яичного белка и белок гороха для решения проблемы агрегирования альгината в кислотных условиях и пришли к выводу, что добавление раствора сырого белка является наиболее эффективным средством предотвращения образования осадков и агрегирования альгината на пхо3, что может быть вызвано электростатическими или гидрофобными взаимодействиями между сыровым белком и альгинатом, которые отделяют их от окружающей среды. Фалькеборг и др. [36] исследовали влияние додецилсульфата натрия (SDS) на изменение цвета фикоцианина при различных pH и показали, что синяя конформация фикоцианина стабилизировалась путем предотвращения образования дочерней формы фикоцианина при критической концентрации мицеля в растворе SDS 0,7%. Механизм действия может заключаться в Том, что молекулы встроены в микселы и стабилизированы гидрофобными взаимодействиями.
3.2.2 технология микроинкапсуляции
Ян и др. [37] использовали альгинат натрия и читосан для инкапсулирования альгината натрия методом экструзии, а оптимизированный процесс составлял 1:1,5 альгината натрия (2,5%) для альгината, 2% хлорида кальция, 2% читосана для производства микрокапсул альгината натрия/альгината натрия и микрокапсул альгината натрия, соответственно. Дальнейший анализ показал, что оба эти метода могут повысить кислотную толерантность альгината, а структура альгината/альгината натрия/читосана является более плотной, чем структура микрокапсул альгината/альгината натрия, и тепловые потери альгината могут быть значительно сокращены. Lv Xiaoling et al. [38] выбрали в качестве настенного материала гелятин и мальтодекстерин и приняли метод нанесения покрытий на воздушную подвеску для подготовки микрокапсул альгината. Микрокапсулы альгината были подготовлены при температуре 80 ° с, давлении распыления 0,15 мпа и соотношении массы тела к стенке 1:1,5 (с 20% гелатина в настенном материале), и были проведены испытания на устойчивость, которые показали, что их легкость, тепло и стабильность хранения значительно улучшились.
4 исследования физиологической активности
Помимо его использования в качестве естественного пигмента, фитоцианин, как было показано, обладает такими физиологическими свойствами, как антиоксиданты, антиканцеры, противовоспалительные и иммунологические эффекты.
4.1 исследования антиоксидантной активности
Liu Q et al. [39] исследовали защитное воздействие фитоцианина на вызываемое рентгеновством окислительное повреждение мышей и обнаружили, что фитоцианин значительно увеличил активность антиоксидантных ферментов, супероксида и глутатиона пероксидазы в плазме и печени мышей и снизил содержание химически активных кислородных радикалов в тканях печени, Предполагается, что фитоцианин может ослабить окислительный ущерб, причиняемый радиационным облучением, путем повышения антиоксидантной способности организма. Yu Jia et al.[40] провели in vitro антиоксидантные тесты на экстракте белка желчи, цианине водорослей и гемоглобине водорослей из гесианского рис и изучили способность гидроксильных радикалов (o), анионных радикалов супероксида (O2- -) и ингибирование липидного пероксидантного окисления, а также подтвердили, что эти три белка имеют хорошую антиоксидантную активность, но эти три имеют различные режимы действия.
Wang Xingping and Ping [41] провели нелипосомальный антиоксидантный тест и in vitro антиоксидантный тест на госсипиевой алгинате, а метод хемилюминанции был использован для подтверждения того, что способность госсипиевой алгинаты к накоплении на O2-, o и H2O2 была позитивно коррелирована с концентрацией в определенном диапазоне концентрации, при значениях IC50 396, 185 и 139 μg/mL, И этот гагинат госсыпия может оказать защитное воздействие на повреждение митохондрии печени и значительно повлиять на антиреактивную кислородную способность плазмы. Значения IC50 составили 396, 185 и 139 μg/mL, соответственно, и это оказало защитное воздействие на митохондриальные повреждения печени у мышей, и это может значительно повлиять на плазменную антиреактивную кислоновую способность.
Чжао яньцзин и др. [42] пришли к выводу, что вышеуказанная способность свободных радикалов к уборке была также отмечена для цианобактерий белков из Brassica napus, при этом скорость уборки составила 33,79% для O2- и 92,71% для o. В целях дальнейшей проверки антиоксидантного механизма Chen et al. [43] исследовали режим связывания между фикоцианином и бубумином в сыворотке крупного рогатого скота и установили, что концентрация фикоцианина обратно пропорциональна интенсивности флюоресценции бубумина в сыворотке крупного рогатого скота флюоресценцией спектроскопии и спектрофотометрией и что статический флюоресценция лопнул в результате связывания фикоцианина с бубумином в сыворотке крупного рогатого скота, С константой привязки K = 1,22 × 106 L/mol и номером узла привязки n = 1,14.
4.2 исследования противоопухолевой активности
В настоящее время многие отечественные и зарубежные литературные произведения подтверждают, что фитоцианин оказывает антиопухолевое действие in vivo и in vitro. LI et al. [44] доказали, что фикоцианин может сдерживать рост клеток A549 in vivo и препятствовать распространению эмбриональных легочных клеток человека, а также может снизить уровень mRNA рекомбинантной киназы белка человеческого целлюлозного цикла и упрегулировать выражение цистеина протеза -3 и, таким образом, вызывать клеточный апоптоз, когда он используется в сочетании со всеми трансретинойными кислотами (ATRA). В сочетании со всетранкретиновой кислотой (ATRA), ATRA может снизить уровень рекомбинатной киназы человеческого клеточного цикла, зависящей от белка (CDK) mRNA и регулировать выражение цистеина протеза -3, тем самым вызывая апоптоз, и сочетание этих двух препаратов может эффективно уменьшить токсичные побочные эффекты ATRA у человека.
Subhashini et al.[45] обнаружили, что 50 μmol/L высокочистого альгината существенно сдерживают рост и распространение хронического миелоидного лейкемии человека (CML) K562 клеток, при этом 49 - процентное сокращение распространения клеток произошло после 48 часов действия, а флюоресценция и электронная микроскопия показали, что распространение клеток значительно сократилось. Флюоресценция и электронная микроскопия показали апоптотические особенности, такие как усыпление клеток и атомная сплоченность, а дальнейшие исследования, проведенные цитометрией потока и блотчированием белков, показали, что фикоцианин индуцировал апоптоз в клетках к562, клея ферменты ДНК восстанавливают и понижают регулирование гена b-лимфоблестома -2.
Ван сюэцин и др. [46] исследовали механизм антиопухолевой активности голубого белка водорослей и изучали взаимосвязь между изменениями протеинового соединения и его антиканцеровыми свойствами. Колориметрический анализ тетразолиевой соли и иммуноферментный анализ показали, что фитоцианин и его дигесты могут повысить активность цистеина протеза -3, а активность каспаза -3 быстро возросла и достигла пика, когда 100 мг/л ПК использовались для лечения клеток гелы в течение 12 часов.
Скорость ингибирования каспеза -3 в клетках HeLa составила 29,9%, а продукт 1-h дайджеста — 56,5%, но скорость ингибирования снизилась, когда ферментатическое время было продлено до 3 ч ~4 ч. Скорость ингибирования продукта 1-h дайджеста снизилась. Однако скорость ингибирования снизилась, когда время пищеварения было увеличено до 3-4 ч. Это может быть связано с тем, что правильное пищеварение раскрывает хромофоровое благочестие и, таким образом, повышает антиопухолевую активность, в то время как чрезмерная ингимизация приводит к изменениям в активной структуре из-за потери пептида и потери способности к подавлению опухоли. Кроме того, ряд экспериментов показал, что фикоцианин может препятствовать росту и распространению клеток гепатоцеллюлярного рака smmc7721, карциномных клеток гортани heс2 [47], меланомных клеток [48] и раковых клеток легких [49].
4.3 противовоспалительные и иммунологические исследования
LEDON et al. [50] исследовали противовоспалительное действие фикоцианина, извлеченного из микроводорослей, вызывая отек у мышей и изучая изменения концентрации prostaglandin E2 (PGE 2) и активности фосфолипазы A2 (PLA 2) в присутствии фикоцианина. Впервые было продемонстрировано, что противовоспалительное действие фитоцианина частично связано с производством пгэ 2 и умеренным подавлением активности PLA 2. HAO et al. [51] использовали динамическую протеомическую технологию SiLAD для анализа воздействия фитоцианина на вызванные липополисахаридом RAW264.7 макрофаги, показывая, что фитоцианин снижает воспаление путем регулирования подачи сигналов PDCD5-NF-kB, что вызывает клеточный апптоз.
Танг мей и др. [52] культурированный селен-обогащенный водорослей голубой белок для исследования его физиологической активности, а опыты in vitro могут повысить скорость преобразования лимфоцитов, а эксперименты мышей показали, что он может повысить гемолитическую способность вакуумных гемолитических клеток, что указывает на то, что селен-обогащенный водорослей синий белок может повысить клеточный иммунитет и функцию гумового иммунитета организма. Жао и др.
Жао и др. [53] создали модель старения мышей, индуцированную d-галактозой, обрабатывали мышей различными дозами альгината и сравнивали их с контрольной группой, измеряли их активность супероксида сыворотки, содержание малодиалдегида, индекс тима и индекс селезенки, а также обнаружили, что альгината из Zostera marina удалось значительно повысить индекс тима и индекс селезенки мышей модели, тем самым улучшив иммунную функцию мышей, И затягивание процесса старения за счет повышения активности супероксида сыворотки дисмутазы, значительного снижения содержания малодиалдегида в сыворотке, а также сбора свободных радикалов. Предварительный вывод заключается в Том, что он оказывает сильное антистареющее воздействие.
В результате исследований ученых изучались все новые и новые медицинские значения цианобактериальных белков водорослей, а извлечение функциональных пептидов из цианобактериальных белков водорослей является одной из основных точек исследования, и был проведен ряд экспериментов по извлечению активных пептидов из спирулиновых и цианобактериальных белков водорослей и освоению аминокислотных сечений этих пептидов. Liu Li-Ban et al.[54] использовали pepsin и trypsin для переваривания ПК, чтобы выяснить, ингибируют ли дигесты ангиотензимообразующий фермент.
Результаты показали, что трипсин гидролизировал ПК при 42 ℃, 1:50 соотношение фермента к субстрату, pH 8, и 6% субстратной массовой фракции ингибировал ангиотензин-конвертирующий фермент на 93,54%. Minic etal.[55] выделили и выявили пептиды пептидов, перевариваемых фитобилирубином, и определили их физиологическую активность, а также показали, что пять полученных пептидных фракций обладают значительной антиоксидантной и металлохелирующей активностью. Пять полученных пептидных фракций обладали значительной антиоксидантной и металлохелирующей активностью.
Зенг цяохуй [56] подготовил биоптиды спирулинового белка для исследования механизма антифотостарения кожи. Шесть пептидов были выявлены из компонентов с сильным антиоксидантом и антифотостареющей деятельности, и среди них, пептид 1 (GMCCSR) был наиболее эффективным в защите человеческих эритроцитов, и это может значительно способствовать распространению фиброблестов и производства коллагена в стареющем слое кожи.
В дополнение к исследованию функциональной активности голубого белка водорослей и ферментного дайджеста ван суэцин и др. [57] исследовали влияние голубого белка водорослей и гидролиза на старение прямолинейно-цепного и разветвленного крахмала кукурузы и обнаружили, что добавление 10% ПК увеличило скорость восстановления прямолинейно-цепного и разветвленного крахмала на 60,4% и 69,6%, соответственно; Гидролизированный пептид увеличил скорость восстановления прямолинейного и разветвленого крахмаля на 184,7% и 47,7%, соответственно, под одной и той же дозой. Гидролизированный пептид увеличился на 184,7% и 47,0% соответственно при той же дозе. Это исследование открывает новое поле для функционального белка для вмешательства в процесс регенерации крахмала, что является новым способом разработки многофункциональных продуктов питания для здоровья и расширения области применения белка голубого цвета водорослей и кукурузного крахмала.
5. Выводы
Будучи редким натуральным пигментом синего цвета, фитоцианин имеет важное значение для применения в области продовольствия, медицины и косметики. Как редкий природный голубой пигмент, он имеет важное значение для применения в области продовольствия, медицины и косметики. Обладая уникальным цветом, богатым питанием, антиоксидантами, противоопухолевыми, противовоспалительными и другими физиологическими функциями, водоросль цианиновый белок имеет широкие перспективы для развития и применения. Однако с точки зрения нынешнего развития технология очистки голубого белка водорослей по-прежнему нуждается в совершенствовании, а проблема его стабильности не была хорошо решена, что серьезно ограничивает широкое применение этого пигмента, поэтому технология подготовки и стабилизации голубого белка водорослей нуждается в глубоком изучении и изучении.
Справочные материалы:
[1] HOLMAN B W B, MALAU ADULI A E O. Spirulina as A animal supplement and animal feed [J]. Журнал физиологии животных и питания животных, 2013, 97(4): 615-623.
[2] DING M L, YU Z Q. Spirulina industry in China: Present status and future prospects[J]. Журнал прикладной филологии, 1997, 9(1):25-28.
[3] LUCAS B F, MORAIS M G D, SANTOS T D, и др. Спирулина для обогащения закусок: питательные, физические и сенсорные оценки [J]. LWT, 2018, 90: 270 — 276.
[4] лю цзянна, ян хайлон, ли йисюань и др. Питательная ценность щелочной пищи спирулина [J]. Журнал по безопасности пищевых продуктов, 2013(7): 56-57.
[5] TAO Ran, BIT Zhengpeng, CUI Rong, et al. Разработка ресурсов и применение яиц, пигментированных водорослями [J]. Наука и технологии пищевой промышленности, 2010, 31(4): 377-380.
[6] SEKAR S, CHANDRAMOHAN M. Phycobiliproteins as a commodi- ty: trends in applied research, патенты и коммерциализация [J]. Журнал прикладной филологии, 2008, 20(2): 113 — 136.
[7] сюй баокинг. Отделение и очистка флуоресцирующего фикоцианина от спирулины обтусуса [г]. Ханчжоу: чжэцзян университет, 2003.
[8] хих ло м, кастильо г, очоа бесерра м а и др. Phy- коцианин и фикоритрин: стратегии повышения урожайности и химической стабильности [J]. Исследование водорослей, 2019, 42: 101600.
[9] каннауджия в к, синха р п. термокинетическая стабильность фико-цианина и фикоритрина в консервантах пищевого класса [J]. Журнал прикладной филологии, 2016, 28(2): 1063 — 1070.
[10] DEWI E N, KURNIASIH R A, PURNAMAYATI L. применение микрокапсулированного фитоцианина в качестве синего природного красителя к качеству желе конфеты [J]. Серия IOP Conference Series: Earth and Environ — mental Science, 2018, 116: 12047.
[11] янь мейхон. Метод и применение обнаружения тяжелых металлов на основе голубого белка водорослей в качестве флуоресцирующего зонда [D]. Харбин: харбинский технологический институт, 2017.
[12] фу Лили, на ри, го юфэн и др. Исследование методов извлечения и очистки цианобактерий спирулины [J]. Биотехнологический вестник, 2016(1): 65-68.
[13] HADIYANTO H, SUTTRISNORHADI S. ответная поверхность opti- мизация ультразвукового искусственного экстракции (оаэ) фикоцианина из микроводорослей спирулина платенсис [J]. Emirates Journal of Food and Agriculture, 2016, 28(4): 227.
[14] чжан цзинь, вэй ючунь, ван госян и др. Сравнение методов экстракции фикоцианина из цианобактериальных проб воды в озере тайху [J]. Наука об озерах, 2013, 25(2): 283 — 288.
[15] Пан сяою, дуан хунтао, чжан ючао и др. Сравнение методов извлечения цианобактериальных белков из эвтрофических озерных вод [J]. Озерная наука, 2014, 26(5): 799-806.
[16] хоу чжаоцян, лю синян, ши чао и др. Исследование процесса извлечения цианобактериальных белков из спирулины sp. методом отморозки и методом ультразвукового дробления [J]. Журнал сельскохозяйственного университета внутренней монголии (издание естественных наук), 2017, 38(2): 69-75.
[17] юй цзянфэн, фу цзянь, ма сяо и др. Влияние разрушения клеток на экстракционное действие цианобелков спирулины альгинаты [J]. Продукты питания и оборудование, 2017, 33(5): 173 — 177.
[18] ху шуангфей. Ультразвуковая подкритическая экстракция воды из активных пептидов спирулины и гипогликемическая активность [D]. Гуанчжоу: южно-китайский технологический университет, 2018.
[19] сюй р. исследование стабильности хранения фитоцианина из спирулины обтусуса [г]. Тяньцзинь: тяньцзинский научно-технический университет, 2017.
[20] ли бинг, чжан сюэ чэн, гао Мэй хуа и др. Новый процесс извлечения и очистки цианобактериальных белков из спирулины обтусуса [J]. Морская наука, 2007, 31(8): 48 — 52.
[21] ю сюкун, юэ сицзюнь, ли мин и др. Отделение и очистка фикоцианина от спирулины обтусуса [J]. Наука и техника о продовольствии, 2019, 44(5): 248 — 252.
[22] NASCIMENTO S S, SANTOS V S V, WATANABE E O, et al. As- sessment of the of phycobilibelins in cyanobacteria through aqueous two -phase systems with different of PEG/salt[J]. Переработка пищевых продуктов и биопродуктов, 2020, 119: 345 — 349.
[23] ван юн, цянь кайсян, дун цянь. Отделение, очистка и спектральная характеристика белка высокой чистоты голубого водорослей [J]. Достижения в области биохимии и биофизики, 1999 год, 26(5): 457-460.
[24] чжан ф.ю. исследования процессов извлечения и очистки и спектральный анализ белка голубого цвета реагента [D]. Хэфей: хэфей технологический университет, 2017.
[25] го джей, ван ф, цуй з г и др. Отделение и очистка фикоцианина путем комбинированного использования расширенной и упакованной кровати [J]. Наука о еде, 2013,34(10):107 — 111.
[26] чайклахан р, ширасуван н, буннаг б. стабильность фикоцианина, извлеченного из спирулинапа. Влияние температуры, pH и консервантов [J]. Биохимия процессов, 2012, 47 (4): 659 — 664.
[27] BI H, ZHANG Guangming, WANG Wei. Воздействие ультрафиолетового излучения на фитоцианин в спирулине обтусус [J]. Журнал сельскохозяйственных и экологических наук, 2007, 26(3): 1033-1039.
[28] лю юхуан, ли кайша, ли дунлиан. Исследование процесса экстракции и стабильности белка голубого водорослей после вакуумной холодной сушки [J]. Китай Food and Nutrition, 2016, 22(9): 51-55.
[29] чэн чао, сюэ фэн, ли вэй и др. Деградация кинетики желчных белков и окраска в Ge Xian Mi[J]. Наука о еде, 2014, 35(9): 16 — 19.
[30] ян ли хон, руан син, ку хи гён и др. Исследование стабильности водорослей цианобактерий из рыбий водоросли как пищевых красителей [J]. Пищевая и ферментационная промышленность, 2010, 36(12): 129 — 133.
[31] крайствардана м, сутанто х, сузери м и др. Кинетическое исследование воздействия добавления сахара на термическое разложение фитоцианина из спирулинапа [J]. Food Bioscience, 2018, 22: 85 — 90.
[32] FAIETA M, NERI L, SACCHETTI G и др. Роль сахаридов в термоустойчивости фитоцианина в водных растворах [J]. Food Re-поиск International, 2020, 132: 109093.
[33] мартелли G, FOLLI C, VISAI L, et al. Повышение термоустойчивости-окраска синего цвета C-phycocyanin от Spirulina platensis для применения в пищевой промышленности [J]. Биохимия процессов, 2014, 49 (1): 154 — 159.
[34] Lv Pingping, Li Chuanmao, Yang Dengliang, et al. Экспериментальное исследование стабильности альгината из спирулины [J]. Экспериментальное исследование стабильности цианобактерий спирулины [J]. Химическая промышленность провинции гуандун, 2019, 46(5): 60-61.
[35] чжан з, ли и, ABBASPOURRAD A. повышение кольцевой-луидальной устойчивости фикоцианина в кислотных условиях с использованием взаимодействия фикоцианина-сырого белка [J]. Пищевые гидроколлоквиумы, 2020, 105: 105747.
[36] FALKEBORG M F, рода-серрат M C, BURNÆS K L, et al. Стабилизация фитоцианина анионическими микселями [J]. Пищевая химия, 2018, 239: 771 — 780.
[37] янь м, лю б, цзяо х д и др. Подготовка фитоцианина ми-крокапсулы и его свойства [J]. Переработка пищевых продуктов и биопродуктов, 2014, 92(1): 89 — 97.
[38] Lv Xiaoling, Xu Leiran, Chen Zhenghuan и др. Подготовка микрокапсул альгината путем нанесения покрытий на воздушную подвеску [J]. Подготовка микрокапсул альгината путем нанесения покрытий на воздушную подвеску [J]. Наука и техника о продовольствии, 2013, 38(2): 260-263.
[39] лю ци, ли вэньцзюнь, Лу лина и др. Защитное воздействие фикоцианина на вызываемые радиацией окислительные повреждения мышей [J]. Ядерная технология, 2018, 41(1): 27-32.
[40] юй цзя, ван шэн, сюй вэньци и др. Сравнение in vitro антиоксидантной активности сырых экстрактов белка желчи, голубого белка и гемоглобина водорослей из Ge Xian Mi [J]. Продовольственные исследования и разработки, 2019, 40(23): 104 — 108.
[41] ван син пин, се Пен цзюнь, Пан СИ и и др. Антиоксидантное действие фитоцианина в Ge Xian Mi [J]. Наука о еде, 2007, 28(12): 458 — 461.
[42] чжао яньцзин, ху хон, ван ин. Исследование антиоксидантных эффектов цианобактериальных белков в зостера марина [J]. Сиджин гомян гомян, 2012, 23(2): 337 — 338.
[43] чэнь инджи, лю шаофан, чэнь хуасин. Взаимодействие антиоксидантного активного фикоцианина с сывороткой крупного рогатого скота албумином [J]. Журнал фармацевтического анализа, 2011(1): 87 — 89.
[44] LI B, GAO M H, LV C Y и др. Исследование синергетического воздействия всетрансретиновой кислоты и к-фикоцианина на рост и апоптоз клеток а549 [J]. European Journal of Cancer Prevention, 2016, 25(2): 97-101.
[45] SUBHASHINI J, MAHIPAL S V K, REDDY M C, и др. Молекулярные механизмы при индуцированном к-фикоцианином апоптозе клеток человека при хроническом миелоидном лейкемии-к562 [дж]. Биохимическая фармакология, 2004, 68(3): 453 — 462.
[46] Wang X.Q., Fan M., Yang Chunyan, et al. Биофункциональные исследования по альгинату спирулины и его ферзиматическим реакторам [J]. Наука о еде, 2008, 29(10): 433 — 435.
[47] чэнь синмей, ван сяохуа. Исследования стабильности и антикоррозионной активности фитоцианина из спирулины [J]. Аминокислоты и биоресурсы, 2006, 28(1): 59-62.
[48] WU L C, LIN Y Y, YANG S Y, et al. Противомелеаногенное действие с-фикоцианина через модуляцию выражения тирозиназы по upreg-упругование ERK и понижение регуляции p38 MAPK сигнальных путей-путей [J]. Журнал биомедицинских наук, 2011, 18(1): 1-11.
[49] дениз I, озэн м о, есиль селикт о. сверхкритическая жидкость ex-тяга фикоцианина и исследование цитотоксичности на клетках рака легких человека [J]. Журнал сверхкритических жидкостей, 2016, 108: 13-18.
[50] ROMAY C, LEDON N, GONZALEZ R. влияние фитоцианина ex- тракта на уровень простагландина E2 при испытании на воспаление уха мышки [J]. Арзнеймиттл-форшунг, 2000, 50(12): 1106-1109.
[51] HAO S, YAN Y, HUANG W W, et al. C-phycocyanin уменьшает степень воспламенения путем ингибирования активности NF -κB путем снижения регулирования PDCD5 в сыром сыром 264,7 макрофаге, вызванном липополисахаридом [J]. Журнал функциональных пищевых продуктов, 2018, 42: 21 — 29.
[52] тан Мэй, ван ман, го баоцзян. Влияние Селена-обогащенного голубого белка водорослей на иммунную функцию и антиоксидантную активность мышей [J]. Журнал питания, 2001, 23(3): 275-278.
[53] чжао и дж., тан и с. отделение, очистка и антистарение переменного тока — способность фикоцианина к порфире езоэнсис [дж]. Наука о еде, 2012, 33(17):94 — 97.
[54] лю ли бан, ху чжихо, цзя цзин и др. Ингибиторная активность гидролита белка желчи спирулины алгината на ACE[J]. Наука о еде, 2009, 30(13): 212 — 217.
[55] MINIC S L, STANIC VUCINIC D, MIHAILOVIC J, et al. Пищеварение пепсином высвобождает биологически активные хромопептиды из C-phy — коцианин, голубого цвета билибелок микроводоросли спирулины [J]. Джур — нал протеомики, 2016, 147: 132 — 139.
[56] цзэн цяохай. Подготовка биоактивного пептида, получаемого из белка спирулины, и его механизма антифотостарения [D]. Гуанчжоу: южно-китайский технологический университет, 2016.
[57] ван сюэцин, цзян жунцзя, го чжипэн и др. Исследование механизма белка голубого цвета водорослей и его гидролизата для содействия регенерации кукурузы прямолинейным крахмалом [J]. Журнал сельскохозяйственного машиностроения, 2019, 3