Что такое гиалуроновая кислота?

Гиалуроноваякислота (га) является линейным макромолекулярным кислотным макромолекулярным кислотным мукополисахаридом с высоким молекулярным весом, состоящим из повторяющихся дисаксаридных единиц d-глюкуроновой кислоты и n-ацетила-d-глюкозамина [1]- да. Гиалуроновая кислота была впервые изолирована от витального юмора крупного рогатого скота в 1934 году, и было обнаружено, что гиалуроновая кислота также широко распространена в интерстициальной матрице соединительной ткани у животных и людей. Среди них, витальный юмор глаза, кожи, пуповины, хряща и синовиальной жидкости суставов имеют высокий уровень гиалуроновой кислоты. Гиалуроновая кислота из разных источников имеет практически одинаковую структуру, но гиалуроновая кислота из разных источников имеет разные молекулярные веса [2]. Как многофункциональная матрица в организме,Гиалуроновая кислота имеет важные физиологические функции, такие как регулирование распространения клеток, дифференциация, миграция, смазка суставов, защита хряща, содействие заживлению ран, сопротивление окислению и антистарению.

Гиалуроновая кислота оказывает сильное водоудерживающее действие, и его увлажняющий эффект выше, чем у других увлажняющих веществ, встречающихся в природе. Он известен как идеальный естественный увлажняющий фактор и широко используется в клинической медицине и косметике производства. С утверждением гиалуроновой кислоты в качестве нового сырья для питания в этом году, области применения гиалуроновой кислоты постоянно расширяются. В то же время, потребители &#- 39; Постоянно улучшается санитарное самочувствие населения, постоянно растет спрос на гиалуроновое кислотное сырье. Важное значение имеет промышленная подготовка высококачественной гиалуроновой кислоты. В данной статье представлен обзор физиологических функций, подготовки, разделения и очистки, а также областей применения природной гиалуроновой кислоты, с целью предоставления справочной информации для разработки и использования гиалуроновой кислоты.

1 распределение и физиологические функции гиалуроновой кислоты в организме

1.1 распределение гиалуроновой кислоты в организме

Натуральная гиалуроновая кислотаШироко распространена в различных тканях высших животных, хотя количество варьируется. В основном распространяется в клеточной матрице и смазочной жидкости, включая человеческий пуповину, синовиальную жидкость, кожу, торакальную лимфатическую жидкость, стекловидный юмор и расческу петуха. Расческа петуха в настоящее время является тканью животного с самым высоким содержанием гиалуроновой кислоты. Содержание гиалуроновой кислоты в различных организмах показано в таблице 1 [3]. Гиалуроновая кислота широко распространена в различных тканях человеческого организма. Распределение гиалуроновой кислоты в тканях различных организмов в основном одно и то же, с основной разницей в молекулярном весе. Молекулярный вес гиалуроновой кислоты в нормальных биологических тканях составляет приблизительно 1000-8000 кда. Различные молекулярные веса стимулируют различные рецепторы или пути в трехмерных структурах, оказывая различное воздействие [4].

1.2 физиологические функции гиалуроновой кислоты

1.2.1 смазывает соединения и защищает хрящи

Гиалуроновая кислота широко распространенаВ межклеточной матрице и клеточной матрице. Является основным компонентом синовиальной жидкости в суставах и распространяется на поверхности хряща и связок. Гиалуроновая кислота имеет хорошую вязкость. При ходьбе синовиальная жидкость является вязкой, чтобы уменьшить трение суставов. При выполнении высокоэффективных действий, таких как бег, синовиальная жидкость эластична, чтобы уменьшить нагрузку на суставы. Когда соединение находится под нагрузкой, синовиальная жидкость меняется из жидкости в эластичный корпус для защиты суставного хряща [5]. Существует много свидетельств того, что остеоартрит у пожилых пациентов вызван окислительным стрессом. Остеоартрит-это износ суставного хряща. При атаке реактивных видов кислорода длинноцепная гиалуроновая кислота распадается на фрагменты гиалуроновой кислоты, ослабляя общую структуру хряща [6].

1.2.2 способствует заживлению ран

Процесс заживления ран можно разделить на четыре этапа: гемостаз, воспаление, распространение и созревание. При нанесении травмы увеличивается количество гиалуроновой кислоты в ране. Из-за большого молекулярного веса,Гиалуроновая кислота используется в качестве ранней временной структуры[7]. На стадии воспаления поврежденные клетки начинают выделять выделения, содержащие соли, воду и белки [8]. Эта стадия характеризуется покраснением и жарой на месте травмы, болью и дисфункцией [9]. Гиалуроновая кислота прикрепляется к рецептору CD44 на поверхности лейкоцитов и эндотелиальных клеток, что приводит к уменьшению числа лейкоцитов, переносимых на место воспаления, и снижению степени отека раны [10]. Рецептор CD44 играет важную роль в воспалительной реакции, в которой гиалуроновая кислота с высоким молекулярным весом стимулирует противовоспалительную реакцию, а гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом вызывает воспалительную реакцию. В фазе распространения рана восстанавливается новой коллагеновой тканью, скрывается внеклеточная матрица, и рана начинает уменьшаться под действием миофибробластов [11]. На стадии созревания неорганизованный коллаген образует перекрестные соединения, уменьшая рубцы и повышая эластичность кожи в области раны.

1.2.3 регулирование распространения клеток, миграции и дифференциации

Гиалуроновая кислота является важным нормативным факторомВлияние на процессы распространения клеток, миграции и дифференциации. Наличие гиалуроновой кислоты способствует увлажнению местных тканей, ослабляет фиксацию клеток к внеклеточной матрице и способствует отделению клеток, миграции и даже деления. Рецепторы гиалуроновой кислоты на поверхности клетки также могут быть связаны с некоторыми киназами, связанными с движением клеток [12].

На ранних стадиях митоза уровни гиалуроновой кислоты увеличиваются, а уровни резко снижаются после того, как митоз вступает в фазу G1 (период между завершением предыдущего митоза и началом фазы синтеза). Высокие уровни гиалуроновой кислоты вызывают высвобождение факторов роста, и, формируя внеклеточную мембрану, она влияет на взаимодействие клеток и ускоряет распространение клеток [13]. Однако до сих пор не было отмечено, что гиалуроновая кислота напрямую способствует митотической активности. Эта сигнализация иРегулятивный эффект гиалуроновой кислоты связан с ее молекулярным весом- да. Разные молекулярные веса приводят к различным сигнальным путям. Гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом вызывает распространение клеток. Кроме того, гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом может усилить выражение провоспалительных факторов, в то время как гиалуроновая кислота с высоким молекулярным весом имеет обратный эффект [14].

1.2.4 ангиогенный эффект

Об этом сообщалосьГиалуроновая кислота с низким молекулярным весом может стимулировать развитиеВыражение сигнальных молекул, стимулирует распространение и миграцию сосудистых эндотелиальных клеток, а также гиалуроновая кислота с высоким молекулярным весом может сдерживать распространение и миграцию эндотелиальных клеток, тем самым оказывая антиангиогенное воздействие [15]. Однако большинство свидетельств, подтверждающих влияние гиалуроновой кислоты на рост клеток, были получены с использованием ксенотрансплантатов опухоли. Некоторые данные показывают, что инъекция гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом может сдерживать рост опухоли [16], что противоречит вышеупомянутой концепции и указывает на то, что могут существовать более сложные пути и взаимодействия, требующие дальнейших исследований.

1.2.5 антиоксидантная активность

Исследования показали, чтоГиалуроновая кислота может устранить свободные радикалыИ имеет определенную степень антиоксидантной активности. Гиалуроновая кислота с высоким молекулярным весом может защитить клетки от воздействия химически активных видов кислорода, которые, в избытке, могут повредить белки, липиды и ДНК. Некоторые антиоксидантные свойства гиалуроновой кислоты включают в себя ее способность уменьшать вызываемый ультрафиолетом апоптоз и кислотные повреждения ДНК [17]. Фэн нинг и др. [18] изучили активность супероксида сыворотки после перорального введения гиалуроновой кислоты и обнаружили, что гиалуроновая кислота обладает антиоксидантным действием В случае необходимостиvivo. Yu Haihui В то же время- эл. - привет.[19] обнаружили, что мускусная гиалуроновая кислота андриаса давидьяна обладает определенной антиоксидантной активностью В случае необходимостиvitro и может собирать DPPH.,. О, эбтс +. И уменьшить Fe3+. Некоторые ученые полагают, что антиоксидантные свойства гиалуроновой кислоты связаны с гидроксильными функциональными группами в структуре гиалуроновой кислоты, которая может поглощать реактивные виды кислорода [14].

1.2.6 противостареющий эффект

Исследования показали, что количествоГиалуроновая кислота в организме человекаС возрастом уменьшается. По сравнению с возрастом 20 лет, количество гиалуроновой кислоты уменьшается на 75% в возрасте 60 лет. Чем старше человек, тем меньше количество гиалуроновой кислоты в организме. Количество гиалуроновой кислоты в организме также варьируется среди людей того же возраста. Люди с большим количеством гиалуроновой кислоты в организме выглядят моложе, в то время как люди с симптомами старения имеют значительно меньшее количество гиалуроновой кислоты в организме [20]. Уменьшение количества гиалуроновой кислоты в коже уменьшает пространство, заполненное межклеточной гелевой матрицей, в результате чего клетки должны быть расположены близко друг к другу. Коллаген теряет воду и затвердевает, делая кожу грубой и теряет эластичность. Исследования показали, что гиалуроновая кислота может исцелять повреждения кожи, вызванные ультрафиолетовым излучением, а высокие концентрации гиалуроновой кислоты могут влиять на выражение коллагена [21].

Таким образом, физиологические функции гиалуроновой кислоты тесно связаны с ее молекулярным весом. Гиалуроновые кислоты с различными молекулярными весами играют разную роль в физиологических функциях, таких как заживление ран, регулирование распространения клеток, миграция, дифференциация, ангиогенез и антиоксидантная активность. Низкий молекулярный весГиалуроновая кислота вызываетВоспалительные реакции, вызывают распространение клеток, стимулируют распространение и миграцию сосудистых эндотелиальных клеток, а гиалуроновая кислота с высоким молекулярным весом обладает лучшей антиоксидантной активностью, чем гиалуроновая кислота с низким молекулярным весом. Это различие в физиологической функции приводит к различиям в ее конечном применении в продуктах.

2 структура и свойства гиалуроновой кислоты

2.1 структура гиалуроновой кислоты

Гиалуроновая кислота является высокой молекулярнойМасса кислый мукополисахарид состоит из чередующихся глюкозных единиц, соединенных градом -1,3- гликозидическими соединениями и n-ацетилглюкозаминовыми соединениями градом -1,4- гликозидическими соединениями. Первичная структура гиалуроновой кислоты показана на рис. 1 [22]. Гиалуроновая кислота, единственная обнаруженная в настоящее время не содержащая серы гликозаминогликаны, отличается от обычных гликозаминогликанов тем, что синтезируется через клеточные мембранные поверхностные белки, а не через целлюлозу#39; с аппарат голги [23].

2.2 физические и химические свойства гиалуроновой кислоты

Гиалуроновая кислота является белым аморфным твердым веществомС общими свойствами кислотных мукополисахаридов. Он растворим в воде, но не растворим в органических растворителях, таких как этанол [24]. Водные растворы гиалуроновой кислоты имеют специфические реологические свойства с хорошей вязкостью. В качестве мономеров существуют низкие концентрации или малая молекулярная гиалуроновая кислота с незначительными изменениями вязкости. Высокая молекулярная масса и высокая концентрация гиалуроновой кислоты имеет хорошую вязкость [25], и обладает неньютоновскими характеристиками жидкости, что делает ее очень подходящей для синовиальной жидкости. Вязкость синовиальной жидкости связана с концентрацией гиалуроновой кислоты [13].

Разумное изменение молекулярного веса и концентрации раствора гиалуроновой кислоты может обеспечить более высокую вязкость. Из-за наличия водородных связей между моносахаридами в цепочке молекул гиалуроновой кислоты гиалуроновая кислота при низких концентрациях может также образовывать уникальную структуру сети из ячеистых соединений, позволяющую гиалуроновой кислоте адсорбировать примерно в 1000 раз собственную влагу, обладающую мощными увлажняющими свойствами [26]. Гиалуроновая кислота с различными молекулярными весами имеет различные физические и химические свойства.Гиалуроновая кислота с высоким молекулярным весомИмеет более высокую вязкость, в то время как случайная изогнутая структура длинноцепной гиалуроновой кислоты более стабильна, а короткие цепи с большей вероятностью расширятся [27]. Метод и биологический путь, посредством которого клетки проводят различие между высоким молекулярным весом и гиалуроновой кислотой с низким молекулярным весом, до сих пор неизвестны.

3 подготовка и очистка гиалуроновой кислоты

3.1 источники гиалуроновой кислоты

3.1.1 источники тканей животных

Источники тканей животных могут быть разделены на наземные и морские источники. В настоящее время гиалуроновая кислота извлекается главным образом из наземных тканей животных, таких как петух, пуповина человека, мембрана яичной скорлупы и свиная кожа. Расчески петуха широко используется для экстракции гиалуроновой кислоты, потому что это ткань животного с высоким содержанием гиалуроновой кислоты. Из-за ограниченного предложения тканей наземных животных крупномасштабное производство невозможно. Исследователи постоянно пытаются извлечьГиалуроновая кислота из других тканей животныхИли других источников сырья. Морские биологические ресурсы, такие, как остатки животных, отходы и побочные продукты, всегда пользовались широким вниманием ввиду их долгосрочных экономических и экологических выгод.

Они обладают значительным потенциаломИсточник таких веществ, как гиалуроновая кислота[28]. Исследователи извлекли гиалуроновую кислоту из биологических тканей, таких как глазная vitreous морских организмов, таких как глаза караката, кальмара, тунца, лягушки кожи, слизь Рыбы, и водной юмора пресноводных мидий [19, 25, 29]. Yi et al. [29] впервые извлекли гиалуроновую кислоту из глазных vitreous тунца с конечным коэффициентом извлечения 0,013%. И хайхуэй ю и др. [19] извлекли его из поверхностной слизи китайского гиганта саламандера. Когда количество добавляемой трипсин составляло 1,5%, выход гиалуроновой кислоты составлял 1,7041 мг/г. Структура добытой гиалуроновой кислоты была такой же, как и у стандартного продукта. По сравнению с тканями наземных животных, таких как петух и пуповины, уровень экстракции был низким, но он может быть использован в качестве стабильного источника экстракции гиалуроновой кислоты.

3.1.2 путь микробного ферментации

Гиалуроновая кислота широко распространена в клеткахОболочка бактерий, защищающая клетки от повреждения кислородом. Предыдущие исследования гиалуроновой кислоты в бактериях были в основном направлены на изучение состава и функции оболочки. Сисайдо в японии первым применил метод ферментации при промышленном производстве гиалуроновой кислоты. Синтез гиалуроновой кислоты в клетке сложный и непрерывный. Глюкоза преобразуется в глюкофосфат-глюкофат глюкофат-уридин, а затем в прекурсоры уридин-дифосфат-ацетилглюкозамин и уридин-дифосфат-глюкозамин с помощью различных ферментов, таких как изомеры и глюкозамин-глюкозамин-глюкозамин и другие ферменты, для производства веществ-прекурсоров уридин-дифосфат-ацетил-глюкозамин и уридин-дифосфат-глюкозамина, которые попеременно добавляются в цепочку молекул гиалуроновой кислоты под действием синтазы гиалуроновой кислоты [30].

Стрептококковый зоэпидемик из группы с является основным источником гиалуроновой кислоты [31]. В силу своей патогенности и эндотоксинов в штаммах дикого типа стало обычной практикой в фактическом производстве модифицировать штаммы дикого типа и производить гиалуроновую кислоту через непатогенные штаммы [32]. Основными средствами деформационной терапии являются генная инженерия, мутагенез и протопластовое разведение. Джин и др. [33] улучшили способ синтеза гиалуроновой кислоты в Bacillus subtilis, интегрировав полученный пиялом гиалуронидаз LHyal ген, регулируя выражение LHyal путем оптимизации последовательности и n-терминального синтеза его меток, и получая высокопродуктивный штамм, который накапливает гиалуроновую кислоту до 19,38 г/л после 100 ч ферментации в 3 л ферментер. Wei Chaobao et al. [34] выбрали Streptococcus zooepidemicus, который имеет короткий производственный цикл и высокую прочность, для строительства на этой основе, и получил высокую урожайность штамм, который может облегчить проблему растворенного кислорода во время ферментации. В настоящее время синтез гиалуроновой кислоты достигается за счет гетерологического выраженияГиалуроновая кислотная синтаза в различных носителях, таких как Bacillus subtilis[35], Lactobacillus [36] и Bacillus glutamicum [37].

3.2 подготовка гиалуроновой кислоты

3.2.1 подготовка гиалуроновой кислоты из животных тканевых источников

В настоящее времяПроизводство гиалуроновой кислотыИз животных тканей источников часто включает в себя извлечение тканей. Полный процесс включает в себя предварительную обработку, извлечение, разделение и очистку, сушку и т.д. Технология обработки относительно зрелая, метод экстракции прост, и большая часть извлеченной гиалуроновой кислоты имеет высокий молекулярный вес [38], высокую вязкость и хорошие увлажняющие свойства. В основном используется в фармацевтической и косметической промышленности. Основными методами экстракции являются экстракция соли и фермента. Добавление неорганических солей и ферментов может нарушить комплектацию гиалуроновой кислоты и белков в тканях животных. Кроме того, ферменты могут гидролизировать примеси, такие как белки и нуклеиновые кислоты, что полезно для экстракции гиалуроновой кислоты [39].

Калканделен и др. [40] успешноИзвлечение гиалуроновой кислотыИз расчески курицы путем обесцвечивания однородной ткани с помощью ацетона и многократного ее извлечения с помощью раствора ацетата натрия. Однако метод экстракции тканей является сложным, а коэффициент экстракции низким. Извлечение фермента стало горячей точкой исследований из-за его высокой эффективности. В настоящее время широко используемые ферменты для экстракции включают нейтральные протеазы, пепсин, трипсин, папен и др. ургева и др. [41] сравнивают результаты экстракции гиалуроновой кислоты из мембран яичной скорлупы с использованием пепсина, трипсина и папайна. Результаты показали, что трипсин был более эффективен, чем два других фермента. При PH-температура воздуха8,37 гранус и трипсинной дозировке 50 U/g для ферзимолиза мембран яичной скорлупы скорость экстракции гиалуроновой кислоты составила 44,82 мг/г мембраны яичной скорлупы. Для получения лучшего эффекта экстракции в экспериментах часто используются ферментные смеси или ультразвук. Чэнь шенцзюнь и др. [42] использовали ультразвук (200 вт, 30 КГЦ), чтобы помочь трипсину и сложной протеазе извлечь из глаз тилапии. После оптимизации урожайность гиалуроновой кислоты составила 11,44%, что примерно на 5% выше, чем при простом энзиматическом гидролизе.

3.2.2 подготовка микробной гиалуроновой кислоты

Процесс микробной ферментации включает в себя в основном следующие этапы: семенная культура, ферментация, разделение и очистка, а также сушка. В настоящее время исследования по повышению эффективности экстракции микробной ферментации направлены главным образом на выращивание превосходных штаммов, выбор подходящих культурных сред и оптимизацию условий ферментации. Было проведено много исследований по вопросам полученияВысокая урожайность гиалуроновой кислотыКонтроль за состоянием среды культуры и процессом ферментации. По сравнению с приготовлением гиалуроновой кислоты путем экстракции тканей, одно из преимуществ метода микробной ферментации заключается в Том, что молекулярный вес гиалуроновой кислоты можно контролировать в процессе ферментации. Это также основное содержание текущих исследований по процессу ферментации гиалуроновой кислоты. Регулирование молекулярного веса гиалуроновой кислоты зависит от синтазы гиалуроновой кислоты и относительной силы ее привязанности к субстрату, соотношения концентрации веществ-прекурсоров гиалуроновой кислоты к концентрации гиалуроновой кислоты синтазы [43]. Фрукт -6- фосфат, получаемый из источников углерода, может использоваться для синтеза молочной кислоты, ингибирования роста бактерий и синтеза гиалуроновой кислоты. Существует возможность ингибировать другие пути, конкурирующие с гиалуроновой кислотой за источники углерода (например, гликолитические пути), чтобы больше источников углерода можно было использовать для синтеза гиалуроновой кислоты, тем самым увеличивая производство гиалуроновой кислоты и молекулярный вес [44].

Баланс метаболических потоков может влиять на молекулярный вес гиалуроновой кислоты [45]. Были проведены исследования условий ферментации, влияющих на производство гиалуроновой кислоты и молекулярный вес, таких как температура, аэрация, pH, скорость перемешивания и т.д. Были проведены определенные исследования по условиям ферментации, которые влияют на урожайность и молекулярный вес гиалуроновой кислоты, такие как Liu Jinlong et al. [46], которые изучали влияние условий ферментации на молекулярный вес гиалуроновой кислоты, синтезированной Streptococcus equi subsp. - зооэциум. Режим пакетной культуры ферментации в большей степени способствует производству гиалуроновой кислоты с высоким молекулярным весом, чем режим культуры глюкозы. В диапазоне 0-45% концентрации растворенного кислорода относительный молекулярный вес увеличился на 109,4% с повышением уровня растворенного кислорода. Низкие температуры способствуют синтезу гиалуроновой кислоты, а урожайность и молекулярный вес гиалуроновой кислоты относительно высоки при низких температурах. При 33 градусах, урожайность и молекулярный весГиалуроновая кислота составляет 4,41 г/лИ 2.54-106, соответственно. PH оказывает разное влияние на урожайность и молекулярный вес гиалуроновой кислоты. Наибольшая урожайность гиалуроновой кислоты (3,72 г/л) была достигнута при pH 7, а наименьшая (3,01 г/л)-при pH 8. Тем не менее, самый высокий молекулярный вес (2.38×106) был получен при pH 8, что указывает на то, что высококачественная гиалуроновая кислота может быть достигнута путем регулирования условий ферментации в процессе производства.

Экстракция тканей животных и микробная ферментация являются двумя наиболее распространенными методами производства гиалуроновой кислоты. Экстракция тканей используется для экстракции гиалуроновой кислоты из тканей животных. Этот метод часто использовался в первые дни, но процесс экстракции сложен, урожайность гиалуроновой кислоты низка, есть ограничения на источники сырья. С развитием науки и техники ферментация стала основным методом промышленного производства гиалуроновой кислоты из-за ее преимуществ низкой стоимости, высокой урожайности и простоты крупномасштабного производства. С постоянным совершенствованием метода подготовки, люди и#39; спрос на гиалуроновую кислоту постепенно сместился с высокой урожайности на высокое качество. В настоящее время исследования сосредоточены на производстве гиалуроновой кислоты с конкретным молекулярным весом с помощью генной инженерии, мутагенеза и других методов удовлетворения потребностейГиалуроновая кислота в различных применениях- да. Создание эффективного и безопасного метода приготовления гиалуроновой кислоты для получения гиалуроновой кислоты с определенным молекулярным весом, соответствующей различным сценариям применения, станет точкой исследования.

3.3 отделение и очистка гиалуроновой кислоты

Независимо от того, используется ли метод экстракции тканей или метод ферментации, добытая сырая гиалуроновая кислота содержит некоторые белки, нуклеиновые кислоты и другие примесей, которые необходимо отделить и очистить, чтобы получитьЧистая гиалуроновая кислота- да. Согласно принципу разделения и очистки, он может быть грубо разделен на три метода: осадки, фильтрация и адсорбция.

3.3.1 осадки

Основными методами выпадения осадков являются четырехслойное выпадения соли аммония и органических растворителей. Принцип четвертичного метода очистки соли аммония заключается в Том, что четвертичная соль аммония и гиалуроновая кислота имеют различные заряда в водном растворе. Они образуют сложный и осаждаемый раствор низкой соли, но отделяются и растворяются в высокой соли, тем самым достигая цели удаления примесей, которые не являются сложными с гиалуроновой кислотой. Широко используемые четвертиечные соли аммония включают цетилпиридиниевый бромид (CPB), цетилтриметиламмоний бромид (CTAB), цетилпиридиниевый хлорид (CPC) и другие длинноцепные четвертиечные соли аммония [47]. Этот метод оценкиОчистка дает гиалуроновую кислоту высокой чистотыС хорошими результатами, и может удалять примеси, которые не сочетаются с четвертичными солями аммония. Метод содержания органических растворителей в осадках в основном влияет на диэлектрическую константу среды, вызывая внутри-и межмолекулярное агрегирование, тем самым достигая цели удаления белков [48]. 

По сравнению с ограниченными реагентами, такими как хлороформ и ацетон, этанол используется более широко ввиду его безопасности и низкой стоимости. Песня Lei et al. [49] оптимизировала факторы, влияющие на чистоту гиалуроновой кислоты после экстракции этанола, объединив фильтрацию пластины и рамы вПолучить гиалуроновую кислоту высокой чистотыСостав: 93,71%. Кавальканти и др. [50] исследовали влияние соотношения этанола к броту ферментации на диэлектрическую константу и влияние pH на очистку гиалуроновой кислоты. При pH 4 и соотношении жидкости ферментации этанола 2:1 чистота гиалуроновой кислоты составляла 55%, скорость восстановления 85%, а осадки органического растворителя использовались для начальной очистки гиалуроновой кислоты с хорошими результатами.

3.3.2 фильтрация

Принцип фильтрации заключается в удержании частиц на пористой мембране в зависимости от размера частиц. По сравнению с осадками органических растворителей фильтрация не связана с потреблением органических растворителей, является простой в применении и может быть индустриализована. Однако эффект фильтрации от удаления белка сам по себе не является хорошим, и по мере очистки будет происходить запор, что ограничивает его применение в очистке гиалуроновой кислоты. Тангенциальная фильтрация или использование фильтрующих средств могут значительно уменьшить блокировку пор [51]. GOZKE et al.[52] предложили метод электрофильтрации, сочетающий мембранную фильтрацию и электрофорез. Электромагнитное поле оказывает сильное стимулирующее воздействие на фильтрацию гиалуроновой кислоты. По сравнению с традиционной фильтрацией, коэффициент концентрации, основанный на осмотической массе пробы, увеличивается почти в 4 раза за то же экспериментальное время. Кроме того, этот метод фильтрации не окажет негативного воздействия на молекулярную структуру и средний молекулярный вес гиалуроновой кислоты, открывая новые возможности для ее последующего поступленияПроцесс очистки гиалуроновой кислоты.

3.3.3 адсорбция

Адсорбция-это метод очистки гиалуроновой кислоты, основанный на селективном удержании соединений на поверхности пористого твердого вещества. Широко используемые адсорбенты включают активированный уголь, смолы и силикатный гель. Активированный уголь является идеальным материалом для отделения и очистки гиалуроновой кислоты, поскольку он обладает сильной адсорбцией белков и нуклеиновых кислот и слабой адсорбцией нейтральных полисахаридов с высоким молекулярным весом. Wei Linna et al. [53] использовали этаноловые осадки в сочетании с адсорбцией с помощью активированного угля в процессе извлечения гиалуроновой кислоты с плато зокор - салфетки. Скорость восстановления извлекаемой гиалуроновой кислоты может достигать 72,73%. В работе CAVALCANTI et al. [50] сделан вывод о Том, что структура гиалуроновой кислоты при различных значениях рн оказывает важное воздействие на характеристики осадков. При pH 4 скорость восстановления гиалуроновой кислоты составляла 85%, а при pH 7 — 7%Коэффициент восстановления гиалуроновой кислоты составил 70%- да. При использовании активированного угля корректировка pH до соответствующего значения может повысить скорость восстановления гиалуроновой кислоты.

Электрофорез является широко используемым методом разделения белков, и его эффективность разделения зависит от геля. По сравнению с другими операциями, он имеет более низкую эффективность очистки гиалуроновой кислоты. Хроматография ионообменных обменов также является одним из широко используемых методов очистки биологических макромолекул. Этот метод мягкий и не вызывает изменений в молекулярной структуре, но относительно дорогой. Необходимо выбрать подходящие смолы 1. Обмен валютыи условия обмена, и операция является сложной. Используется в основном при производстве медицинской гиалуроновой кислоты. Ни ханшенг и др. [54] использовали сильную катионно-кислотную смолу в сочетании с твердой базовой анионной смолой, модифицированной с группой хистидин. Белки с примесямиСырая гиалуроновая кислотаБыли очищены путем адсорбции путем обмена с сильно кислым катионным обменником в кислотном растворе и очищены раствором хлористого натрия. Содержание белка в полученной высококачественной гиалуроновой кислоте составляет менее 0,075%, средний молекулярный вес — более 9,41 гравита105, а выход очищенного веса — 58%~61%.

Разделение и очистка является важным шагом в подготовке высококачественной гиалуроновой кислоты высокой чистоты. В настоящее время относительно мало исследований о воздействии различных операций по очистке на чистоту гиалуроновой кислоты в процессе очистки. CAVALCANTI et al. [51] выразили степень очистки в виде процентной доли гиалуроновой кислоты или белка в растворе и резюмировали изменение чистоты гиалуроновой кислоты в процессе очистки.

В настоящее времяБрот ферментации гиалуроновой кислотыНа основе зоэпидемика стрептококка впервые была проведена операция по осаждениям изопропанолом с содержанием белка 14,1%; Операция по адсорбции силикагеля с содержанием белка 4,5%; И модуль фильтра древесного угля, сочетающий фильтрацию и адсорбцию, с содержанием белка всего 0,6%. Наконец, содержание белка достигло 0,06% после фильтрации диализа. Каждый метод разделения и очистки имеет свои преимущества и недостатки. В реальном промышленном производстве для достижения максимального эффекта часто используется разумное сочетание нескольких методов разделения и очистки в зависимости от источника сырья и различных требований к конечной продукции.

4 применение гиалуроновой кислоты

4.1 применение в пищевой промышленности

Гиалуроновая кислота широко используется на японском продовольственном рынке. В дополнение к здоровой пищи, он также широко используется вОбычные продукты, такие как напиткиМягкие конфеты и джем. На американском продовольственном рынке гиалуроновая кислота используется в основном в качестве пищевой добавки [55]. В настоящее время основными продуктами, содержащими гиалуроновую кислоту в китае, являются продукты здорового питания, а основным эффектом является повышение влажности кожи. Ча шенхуа и др. [56] разработали своего рода птицу#39;s гнездо может с гиалуронатом натрия в качестве основного сырья, который может эффективно улучшить влажность кожи без других побочных реакций. Основными видами на рынке являются капсулы, пероральное администрирование и порошковые напитки. После того как гиалуроновая кислота поглощается через оральное пищеварение, увеличивается прекурсор синтеза гиалуроновой кислоты в организме, что увеличивает содержание гиалуроновой кислоты в организме и концентрирует ее в тканях кожи, тем самым повышая бритость#39;s водоудерживающая способность, смягчающая роговицу страта, повышающая эластичность кожи и уменьшающая морщины [57].

4.2 применение в косметике и предметы первой необходимости

Гиалуроновая кислота в больших количествах встречается в организме человека и других живых тканях. Он обладает чрезвычайно сильными увлажняющими свойствами и в основном используется в косметике в качестве увлажняющего средства, сгустителя и эмульгатора [58−59]. В настоящее время почти все виды косметических препаратов на рынке содержат гиалуроновую кислоту. Гиалуроновая кислота может легко сформировать гидратированную пленку на коже для повышения смазки кожи, содействия всасыванию активных веществ кожей, и в определенной степени образование пленки может изолировать бактерии, что благотворно влияет на противовоспалительные и восстановительные процессы кожи и задерживает старение кожи [60]. Гиалуроновая кислота является компонентом, который существует в самой ткани кожи, что является более безопасным. Кроме того, поскольку гиалуроновая кислота оказывает противовоспалительное и восстановительное действие во рту, она может быть добавлена к зубной пасте для обеспечения определенной степени увлажнения и эффективности [61]. В настоящее времяПрименение гиалуроновой кислоты в повседневных нуждахПостоянно расширяется и углубляется.

4.3 применение в медицинских целях

Гиалуроновая кислота является важным компонентомСиновиальной жидкости в суставах и играет важную физиологическую роль в совместной защите. Аномальный синтез или метаболизм гиалуроновой кислоты в суставах может привести к заболеваниям суставов. В это время может быть введена экзогенная гиалуроновая кислота для дополнения синовиальной жидкости и улучшения физиологической функции суставов [62]. Благодаря своим уникальным физическим и химическим свойствам и биосовместимости гиалуроновая кислота широко используется в офтальмологических операциях, связанных с сетчаткой и катарактой.

Гиалуроновая кислота используется в качестве наполнителя в медицинской эстетике для инъекций под кожу с целью устранения морщин и шрамов на лице и придания лицу пухлого внешнего вида [63]. Гиалуроновая кислота спрей может быть использован для ремонта пациента и#39; лицо после лазерной хирургии, эффективно восстанавливает повреждения кожного барьера [64].Производные гиалуроновой кислотыТакже широко используются в офтальмологических препаратов. Например, гиалуронат натрия может заменить роль слезоточивой слизи и используется для лечения заболеваний сухих глаз и облегчения симптомов сухих глаз [65]. Исследования показали, что тело и#39. Содержание гиалуроновой кислоты будет увеличиваться при возникновении многих заболеваний. Поэтому клинически уровень гиалуроновой кислоты в сыворотке может быть использован для отражения изменений в различных заболеваниях, что имеет большое значение для вспомогательной диагностики.

Широко используется гиалуроновая кислотаПродукты питания, косметика, предметы первой необходимости и лекарства- да. Его применение в функциональных продуктах по уходу за кожей, офтальмологии и ортопедии является относительно зрелым. Ее применение в пищевой промышленности по-прежнему имеет огромный потенциал. Пероральная гиалуроновая кислота мягче, чем внешнее применение и инъекция, и может стимулировать жизненную активность изнутри. В январе 2021 года национальная комиссия по здравоохранению одобрила добавление гиалуроновой кислоты в качестве нового сырья для производства продуктов питания, которые должны быть добавлены в обычные продукты питания. Это говорит о Том, что применение гиалуроновой кислоты в пищевом секторе будет иметь масштабный рост. Кроме того, на молекуле гиалуроновой кислоты имеется много модифицированных участков, и модификация ее активных групп, таких как перекрестное соединение, эстерификация и трансплантация, дает ей лучшие физико-химические свойства и устойчивость к ферментационному гидролизу [66], что позволяет использовать гиалуроновую кислоту в более сложных средах. С техническим прогрессом применение гиалуроновой кислоты в различных областях будет все более углубляться.

5. Выводы и перспективы

Гиалуроновая кислота имеет важные физические и химические свойства и физиологические функции. Она имеет широкое применение и большой рыночный спрос. Общемировой объем продаж гиалуронового кислотного сырья демонстрирует тенденцию к росту. В настоящее время основными методами промышленного производства гиалуроновой кислоты являются извлечение тканей животных и микробная ферментация. Метод микробной ферментации имеет преимущества низкой стоимости и простоты массового производства. С постоянным расширением сценариев применения гиалуроновой кислоты и растущим спросом на рынке, создание эффективного и безопасного процесса экстракции и очистки гиалуроновой кислоты, изменение молекул гиалуроновой кислоты для получения конкретных продуктовГиалуроновая кислота молекулярного весаТе, которые отвечают различным сценариям применения, станут "горячими точками" исследований.

Ссылка на сайт

[1] чжан к, цзянь ь,  Чжан з. п. прогресс в исследованиях по структуре, свойствам, моди -  В целях развития и 3. Применение - гиалуронический Кислота [J]. - полимер (полимер) [электронный ресурс] 2015,9:217. 226.

[2] Чон о, сон с джей, ли к и др. Механические свойства и  Поведение деградации гидрогелей гиалуроновой кислоты пересекается на  В различных областях B. перекрестная увязка Плотность [J]. Углеводы (углеводы) Полимеры,2007, 70(3):251. 257.

[3] Коган G, Š OLTEС. S- L,STERN R, и др. Гиалуроновая кислота: природный биополимер с широким спектром биомедицинских и промышленных применений1. Биотехнологические письма,2006,29(1):17. 25.

[4] Кауман м 'к, ли HG, швертфегерк л и др. Содержание и размер гиалуронана в биологической Жидкости и ткани [J]. Горизонты в иммунологии,2015(6):261.

[5] HLAVACEK M. роль синовиальной фильтрации жидкости хрящевым возрастом в смазке синовиальных соединений-i. Смешанная модель синовиальной жидкости [J]. Журнал биомеханики,1993,26(10):1145/1160.

[6] Марек п, ма гратгорзата к, яцек к, и др. В настоящее время Оксидат-ive стресс у пациентов с остеоартритом колена попытка оценки возможных компенсационных эффектов, происходящих в развитии болезни-nt [J]. Медицина,2019,55(5):150.

[7] Войт джей, вики р. гиалуроник Кислотные производные и их лечение Воздействие на окружающую среду По состоянию на - бернс, - эпителия. - хирургическое вмешательство - раны, и Хронические раны: систематический обзор и мета-анализ рандомизированных испытаний под тележкой [J]. Ремонт и восстановление ран,2012,20(3):317-331.

[8] HOTAMISLIGILG S. воспаление, метафламация и im — мунометаболические нарушения [J]. Природа,2017,542(7640):177. 185.

[9] KOJOUHAROV H V, TREJO I, CHEN B M. моделирование ef- fects воспаления при заживлении переломов костей [C]/ американский Инсти-тут В области физики Конференция по торговле и развитию - в сериале. Соединенные Штаты америки Институт международных отношений Серия конференций физики, 2017.

[10] Гришма с п, рохан б, Чарльз D E. численное - в вестибюле Лейкоцитной прокатки, 2.2 сцепление с дорогой И облигации, 1. Формирование вооруженных сил На поверхности с различным p- селективным покрытием [J]. Мобильный пресс, 2019, 116(3): 18.

[11] Лэнден н икс, ли ди Q, STAHLE M. переход от In-фламация к распространению: критический этап при заживлении ран [J]. С помощью сотовой связи и 10. Молекулярная структура Жизнь и здоровье Научные науки: Cmls,2016,73(20):3861− 3885.

[12] Джон ч. и., абатанджело г. функции гиалурона  A/данные отсутствуют.в ремонте ран [J]. Ремонт и восстановление ран,1999,7(2): 79. 89.

[13] Хей е, химено к и, гуан г и др. Пространственно-временные рамки Con-trol вискоэластичности в фотонастраиваемых гидрогелях гиалуроновой кислоты [J]. Биоакромолекулы,2019,20(11):4126−4134.

[14] DOVEDYTIS M, LIU Z J, бартлетт с. гиалуроновая кислота и ее биомедицинское применение: обзор [J]. Инженерное восстановление,2020,1:102. 113.

[15] Слевин м, крупинский дж, гаффни дж и аль-гиалуронан-при посредничестве посредников Ангиогенез (англо-ангиогенез) В случае необходимости - сосудистые сосуды Заболевания: Открытие для себя RHAMС. О.и CD44 рецепторы сигнализирующие пути [J]. Матричная биология: журнал международного общества матричной биологии, 2007, 26(1): 58-68.

[16] Чжун и н, катарина г, чэн л и др. Гиалурон-ик кислотный обстрел Кислотно-активен Паклитаксел пронаркотик 1. Микселы Эффект-ivy Целевой показатель и - да, конечно. Cd44 - чрезмерное давление По правам человека - грудинка; Ксенографии опухоли in vivo[J]. Биоматериалы,2016:84.250−261.

[17] Мосли р, сливер м, уокер м и др. Компарис-по антиоксидантным свойствам HYAFF ® -11p75, акваэль ® и hyaluronan к химически активным кислородным видам in vitro[J]. Bioma- terials,2002,23(10):2255−2264.

[18] фэн н, ши л, го ф х и др. Исследование по вопросу о воздействии  Пероральная гиалуроновая кислота на улучшение влажности кожи и in vivo  Антиоксидантный эффект [J]. Продукты питания и медикаменты,2016,18(6):386−390.

[19]YU H H, 1. ЛиW, TONG C Q. извлечение гиалуроновой кислоты из слизи поверхности тела гигантского саламандера и его антиоксидантной активности [J]. Agricul- переработка продукции растениеводства,2018,10:18. 21.

[20] го х п  - L, Солнце и Солнце M  L,  et  al.  3. Применение  Соединенные Штаты америки - гиалуроническая болезнь - кислота; in  В области здравоохранения  Продукты [J]. Китайский журнал биохимической фармацевтики,2002, 23(1):49. 51.

[21]WU B J, NI H  Л, чжу м л и др. Научный прогресс и применение гиалуроника  Кислота [J]. Китайский журнал эстетической пластической хирургии,2018,29(4): 252. 254.

[22] Лоран т. биохимия гиалуронана [дж]. Acta Oto- ларинголика супментум,1987,442:7. 24.

[23] чэнь - J. - с,  Ван джей кью, и и др. Исследования гиалуроновой кислоты и ее содержания  Деривативы [J].  Китайский язык (english)  Журнал по теме  Соединенные Штаты америки Наука,2015,35(2): 111. 118.

[24] Ван с. ф. статус заявления  Алуроновая кислота [J]. Китайский журнал медицинских изделий,2018,42(1): 74. 76,78.

[25] Ша к. исследования в области экстракционной техно-логии - гиалуронический - кислота; От организации объединенных наций Кожа, цвет кожи Китайской народной республики 3. Леса Лягушка [D]. Чанчунь: цзилинский сельскохозяйственный университет, 2004.

[26] JIANG S, LIANG H. Hyaluronic acid- очень популярный инструмент красоты [J]. Здоровый мир,2020(2):25 апр. 27.

[27] Мэри к. к., сиро м. экспериментальные подходы к структуре гиалур — онан [дж]. Исследования углеводов,2005,340(5):791. 809.

[28] Триведи н, багел р с, ботвелл дж., и др. Комплексный процесс извлечения топлива и химикатов из морской макроводорослей [J]. Научные доклады,2016,6(1):30728.

[29] И я, сюй джей,  Мэй джей ф и др. Исследование процесса экстракции гиалуроновой кислоты  Из тунцовых глаз [J]. Журнал чжэцзянского технологического университета, 2018,46(3):276 шт.

[30] ARINOBU - Y,ATAMAS S P, OTSUKA T, et al. Молекулярное клонирование и Характеристика предполагаемого гиалуронана мыши Syn-thase[J]. Биологическая химия,1996,271(38):23400. 23406.

[31] донателла с, илеана д и, элизабетта с и др. En- gineering S. equi subsp. Зоэпидемик к гиалуроническому склеиванию  - кислота;   и   - чондройтин  Биополимеры (биополимеры)   Соединенные Штаты америки  Биомедицинский интерес [J]. AMB Express,2017,7(1):61.

[32] PAN N C, PEREIRA H C B, SILVA M L C, et al. Улучшение-производство гиалуроникислоты стрептококковым зооэпидемиком в молассесахарном тростнике [J]. Биотехнология и Ap- plied Chemistry,2017,182(1):276−293.

[33] Цзинь п, кан з, юань п х и др. Производство специфических — молекулярно-весовых гиалуронов метаболически-инспирированных Bacillus subtilis 168[J]. Метаболическая инженерия 2016, 35: 21-30.

[34]WEI C B, DU G C, CHEN J, et al. Строительство инженерного корпуса  Штамм ферментации гиалуроновой кислоты олигосахарида стрептококка  Zooepidemicus [J]. Китайский журнал биологической инженерии,2019 год, 35(5):805 815.

[35] Адам в. вестбро к., сян р., и др. Метаболический en- gineering для повышения гетерологического производства гиалуроновой кислоты в Bacillus subtilis[J]. Метаболическая инженерия,2018,47:401−413.

[36] Сунгуро граулу с, сезгин д е, айтар с п, и др. Увеличение производства гиалуроновой кислоты в рекомбинате Lactococcus lactis[J]. Препараты биохимии и Биотехнология,2018,48(8): 734/742.

[37] Чэн ф, ю х, стефанопуло г и др. Инженер-ing Corynebacterium glutamicum для биосинтеза высокой титры hya- luronic acid[J]. Метаболическая инженерия,2019,55:276. 289.

[38] Микробный синтез гиалура — онана и читина: новые подходы [J]. Bioci Bioeng, 2005, 99(6): 521-528.

[39] Садхасивам г, мутувел а. изоляция и характер — выделение гиалуроновой кислоты из морских организмов [J]. Достижения в исследованиях в области продовольствия и питания,2014,72:61. 77.

[40] Кальканделен с, су с, саатчоглу е и др. Hyalur- производство и анализ оновой кислоты от rooster comb[C]// 2020 Med- ical Technologies Congress (TIPTEKNO). Анталия, 2020: 1. 4.

[41] ургеова е, вулганова к. сравнение ферзиматического гидролиза полисахаридов из яичных оболочек [J]. Нова — биотехнология и химика,2016,15(2):133. 141.

[42]CHEN S J, CHEN H, GAO R C и др. Технологические условия для экстракции гиалуроновой кислоты из глаз тилапии ультразвуком -as-  В городе систед 1. Ферментативная ферма Гидролиз [J]. Журнал по теме Соединенные Штаты америки В ядерной области Сельское хозяйство, 2014,28(8):1446. 1452.

[43]GAO J J, YANG S L. В. научные исследованияIi. ПрогрессПо состоянию наВ настоящее времяproduct13. ИонСоединенные Штаты америкиhigh Mo-лекулярный  Вес (кг)  - гиалуроническая болезнь  - кислота;  По запросу:  На микробной основе  Ферментация [J]. Китайский журнал биоинженерии,2017,37(5):118 к. 125.

[44]DONG Z H. исследования по мутационной селекции и технологии ферментации гиалуроновой кислоты под контролем молекулярного веса [D]. Ханчжоу: цеджи — ang University Соединенные Штаты америкиTechnology, 2017.

[45] Карами м, шахраки м к, ранджбар м и др. Пре-парация, очистка и характеристика гиалуроновой кислоты с низким молекулярным весом [J]. Биотехнологические письма,2021,43(1):133/142.

[46]  Лю джей л, чжао г к, ли з м и др. Влияние состояния культуры на молекулярный вес гиалуроновой кислоты, синтезированной методом Streptococcus equisimilis[J]. Журнал пищевой науки и биотехнологии,2015,34(2):209. 214.

[47] Амагай I, тасиро Y, огава H. совершенствование процедуры экстракции гиалуронана из глазных ягод рыб и определение молярной системы [J]. Наука о рыболовстве,2009,75(3):805 июл. 810.

[48] Ли, ши, ян икс и др. Депротеинизация, антиоксидогенная активность и ингибиторное действие на а-амилазу полисахаридов из кукурузного шелка [J]. Биотехнол, 2019, 15(2): 83 — 90.

[49] песня L, MENG G Q, GUO Y F и др. Исследование по экстракции и пурификационному процессу гиалуроновой кислоты в броте ферментации [J]. Шаньдун сельскохозяйственные науки,2017,49(3):134. 139.

[50] Кавалканти A D D, мело B A G, OLIVEIRA R C, и др. Восстановление и чистота биогиалуроновой кислоты с высокой молярной массой через осадки Ii. Стратегии Число модулированных должностей По запросу: pH  и 3. Натрий Хлорид [J]. Биотехнол, 2019, 188: 527 — 539.

[51] Кавалканти а, мело б, феррейра б и др. Выполнение-проведение основных операций на выходе гиалуроновой кислоты purifica- tion[J]. Биохимия процессов,2020,99:160. 170.

[52] GOZKE G, KIRSCHHOFER F, PRECHTL C, et al. Электро-фильтрация  Улучшается состояние здоровья  В тупик зашел.  3. Фильтрация  Соединенные Штаты америки - гиалуроническая болезнь  - кислота;  И представляет собой альтернативный этап последующей обработки, который позволяет преодолеть технологические трудности, связанные с обычными методами [J]. Наука о жизни,2017,17(9):970 град. 975.

[53]WEI L N, WANG Y, WEI D B и др. Технология экстракции и молекулярная характеристика гиалуроновой кислоты плато зокор тис-сус [J]. Вестник биотехнологии,2017,33(3):151. 161.

[54] ни х с, ли р, он и л и др. Очистка от загрязнения Соединенные Штаты америки - гиалуроническая болезнь - кислота; По запросу: ion  exchange  Хроматография [J]. Китайский журнал фармацевтических препаратов,2001,11:5 8.

[55]LIU S, WANG J Z. The charac- teristics of hyaluronic - кислота;иits application in food[J]. Химико-конструкторские коммуникации,2018,44(8):62.

[56] Ча с ч, ван й л, лиан с с и др. В целях развития  Коллагена горной сахарной птички#39;s гнездо и его влияние на улучшение влажности кожи [J]. Пищевая промышленность,2020,41(2):129. 134.

[57]JIANG Q Y,  Линг п х, ченг и др. Распространение пероральной гиалуроновой кислоты  У животных [J]. Китайский журнал биохимической фармацевтики,2008 29(2):73. 76.

[58] чжу с, чжу у, вей в и др. Подготовка и применение гранулированного эмульгатора кумариновой кислоты [J]. Журнал организации объединенных наций Func- tional Polymers,2016,29(4):388 СТР.

[59] фу S  Y,  LI  - джей. - привет. Research  on  the  progress  of  Лицо на лице  Маска [J]. Химический менеджмент,2017,26:117. 119.

[60]MENG L L, DU T,  Ван х х и др. Научный прогресс в области применения гиалуроника  acid  in   Косметика [J].   Шаньдун (Китай)   По химическому оружию  Промышленность,2018 год, 47(18):52−54,56.

[61] сюй х и, ван х и, сяо х х и др. Применение гиалуроновой кислоты в зубной пасте [J]. Продукты для ухода за полости рта,2020,30(6):13 апр. 17.

[62] Ян у, чэнь з х, и з и и др. Последствия изменения климата Внутрисуставная инъекция гиалуроновой кислоты и плацебо в - угощение -  Соединенные Штаты америки В первой половине дня and  В середине сцены - колено. Остеоартрит: A  B. мета-анализ  На основе рандомизированных, двойных блайндов, контролируемых и клинических испытаний [J].  Китайские тканевые исследования,2021,25(23):3760−3766.

[63] лю л т, у л, зенг д л и др. Прогресс применения гиалуроновой кислоты для инжекции [J]. Журнал практической дерматологии,2020,13(6):352. 355.

[64]MA Y, PENG P, ZHAO Q. эффект применения  И безопасность спрея гиалуроновой кислоты при восстановлении кожи пациентов после лазерной хирургии лица [J]. Клинические медицинские исследования и практика,2020 г. 5(36):175. - 177.

[65] ю х л. клиническая 3. Наблюдение of  0,3% от общего числа 3. Натрий - гиалуронат Объединенные арабские эмираты С пранопрофеном в лечении сухих глаз [J]. Электронный журнал клинической медицины,2019,6(60):71.

[66]HU L J, LIU F L, LI L C, et al. Обобщение информации, представленной  Амфифильные гиалуроновые кислотные производные и их применение при поставке антиопухолевых нанопрепаратов Системы [J]. Прогресс в области фармацевтики  Наука,2017,41(11):804. 811.