Каковы методы тестирования галактоолигосахаридного порошка?

Galacto- олигосахариды(GOS) образуются путем соединения 2-8 моносакшаридов через окологликсидические облигации, образуя прямоцепную олигосакшариду. Они не могут быть перевариты и поглощены в верхнем пищеварительном тракте человеческого тела, и могут непосредственно входить в толстую кишку. После обширных исследований, проведенных учеными в стране и за рубежом, установлено, что галактоолигосахариды обладают рядом питательных преимуществ, включая низкую энергию, способствующую росту бифидобактерий в кишечнике, улучшающую усвоение минералов и профилактику остеопороза, улучшающую липидный обмен веществ, профилактику и лечение запоров, будучи менее кариогенными, генерируя питательные вещества, улучшая состояние питания, повышая иммунитет, усиливая антиопухолевые и антистареющие эффекты, И т.д. [1-2].

Широко используются галактоолигосахаридыВ японии в качестве подсластителя сахар заменитель, пищевой ингредиент, и функциональный пищевой ингредиент, и добавляются к различным видам пищи. Министерство здравоохранения и по делам населения#39. Китайская республика утвердила правительство судана в качестве нового ресурсного продукта питания, который позволяет добавлять его в детское питание, молочные продукты, напитки, хлебобулочные изделия и конфеты (министерство здравоохранения)#39; заявление китайской республики n 20 от 2008 года, министерство здравоохранения и по делам народа#39; объявление китайской республикой 12 от 2007 года [3].

Поскольку галактоолигосахариды представляют собой смесь олигосахаридов на основе галактоза со степенью полимеризации от 2 до 8 и более чем 15 компонентов [4], существуют определенные трудности в их обнаружении с использованием внешних стандартов, поэтому технология обнаружения галактоолигосахаридов находится в центре исследований по обнаружению олигосахаридов. Ниже описываются состояние, проблемы и направления исследований в области технологии обнаружения галактоолигосахаридов внутри страны и за рубежом.

1 состояние исследований методов обнаружения олигосахаридов

Галакто-олигосахариды — олигосахаридыА технология разделения и обнаружения олигосахаридов всегда была в центре внимания научных исследователей. Ричард с. и др. [5] использовали бумажную хроматографию для обнаружения лактулозы и соевого олигосахарида в грудном молоке в 1986 году, такамицу чака и др. [6] использовали тонкослойную хроматографию для выделения альгината олигосахаридов, а сплехтно-этал б [7] использовали тонкослойную хроматографию для анализа олигосахаридов в продуктах трансгликвиляции.

Было проведено относительно больше исследований по методам разделения и обнаружения олигосахаридов с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) [8]. ПЖК в основном использует характеристики олигосахаридов, которые легко растворяются и могут быть эффективно разделены на сахарных колоннах, аминоколонках и гелевых колоннах. Как правило, он обнаруживается с помощью дифференциального преломляющего указателя. По мере развития технологии Antonopoulos A В то же времяal [9] использовали испарительный детектор рассеивания света (ELSD) для обнаружения олигосахаридов. Предел обнаружения ELSD на 1-2 порядковые величины выше, чем у дифференциального рефрактометра, и имеет лучшую перспективу. Хиротака Kakita и др.

С развитием технологий были также проведены исследования по разделению и структурному анализу олигосахаридов с использованием масс-спектрометрии. Лин цинбао и др. [11] использовали газовую хроматографию-массовую спектрометрию для определения моносакшаридного состава джуджубе олигосахаридов. Результаты показали, что моносакшаридный состав джуджуба олигосахаридов состоит из арабинозы, роговицы, ребусы, манносы, галактозы и глюкозы. В то же время состав моносакваридов в джуджубе состоял из фруктозы и глюкозы, что дало хорошие результаты. Броберг а [12] для анализа олигосахаридов использовалась высокопроизводительная жидкостная хроматография тандема ионно-ловушечная масс-спектрометрия. Ин лю и др. [13]использовали жидкую хроматографию и жидкую хроматографию тандем электрораспылительной масс-спектрометрии ионизации для отделения и идентификации олигосахаридов.

Кроме того, Feng Yongmei et - эл. - привет.[14] использовали смолу обмена катионов 001×7 для отделения и очистки смеси олигосахаридов (GOS), а затем использовали хроматографию тонкого слоя для анализа результатов очистки. Камода с и др. [15] использовали лазерный флюоресцентный детектор для анализа n-связанных олигосахаридов, разделенных капиллярным электрофорезом, а также добились хороших результатов. Dreisewerd K et al [16]также получили хорошие результаты, используя тонкослойную хроматографию для отделения олигосахаридов от raw cow' с молоком, а затем с использованием матричной лазерной десорбции/ионизации времени полета масс-спектрометрии для анализа.

Ниже приводится подробное введение в методы обнаружения галактоолигосахаридов, которые основаны на более широко изученных аналитических методах: тонкослойная хроматография, газовая хроматография, жидкостная хроматография и ионная хроматография.

1.1 тонкослойная хроматография

Ли юмей и др. [17] проанализировали продукт трансглюкозидазной трансглюкозидазной ферментации с содержанием галактоолигосахарида 30%. Использовались два метода: тонкослойная хроматография и ВЖК. Для тонкослойной хроматографии использовалась пластинка силикатного геля 60, а развивающимся растворителем был n- бутанол: этанол: вода = 5,3:2 (по объему). Цвет составлял 20% серной кислоты раствор + 0,5% 3,5- дигидрокситолуола. Сахар был испечен на 120 градусов в течение 3-5 минут, а затем ImageJv1.28 программного обеспечения для количественного анализа.

Lu Wenwei et al. [18] используют тонкослойную хроматографию и регулируют развивающийся агент на: n- бутанол: n- пропанол: этанол: вода = 2: 3: 3: 2 (отношение объема) для анализа содержания олигосахарида галактозы (содержание более 20%) в продукте трансглицезилатации.

Xu Mudan et al. [19] использовали восходящую тонкослойную хроматографию с использованием силикагеля G и n- бутанола: вода = 85:15 в качестве развивающегося растворителя для определения содержания каждого сахарного компонента в продуктах трансглицезилатации (содержание олигосахарида галактозы более 20%) с использованием раствора анилин-дифениламин-фосфорная кислота в качестве цветового детектора.

Li Zhengyi et al. [20] использовали тот же тонкослойный метод хроматографии, что и Li Yumei et al. [17] для анализа содержания олигосахаридов в низколактозном молоке. Из-за высокого уровня гидролиза лактозы, превышающего 70%, содержание гос превышало 20%, поэтому вмешательство лактозы было очень незначительным. Была использована колонка анализа сахара Aminex HPX-42C (300 мм градиента 7,8 мм), а состояние HPLC было следующим: сверхчистая вода в качестве подвижной фазы, температура колонки 70 градиента. Хроматографические пики перенесенных дисаксаридов и лактозы частично совпали, что привело к более низкому уровню обнаружения содержания галактоолигосахарида и более высокому уровню обнаружения содержания лактозы.

У хао и др. [21] провели систематическое исследование по анализу олигосахаридов и их производных высокопроизводительной тонкослойной хроматографии. Были проведены эксперименты по оптимизации толщины тонкого слоя, солевого эффекта стационарной фазы, концентрации связующего вещества силикагеля, метода выборочного отбора и отбора разрабатываемого агента, оптимизации цветового разработчика и т.д., с тем чтобы определить подходящий метод. Однако этот метод подходит для проб с высоким и низким содержанием олигосахарида и низким содержанием лактозы и галактозы.

1.2 газовая хроматография

С развитием газовой хроматографии и технологии дериватизации, некоторые люди также используют газовую хроматографию для разделения и обнаружения углеводов. Из-за высокого молекулярного веса и высокой температуры кипения сахара полисахариды сначала гидролизируются в моносакшариды, а затем реагенты дериватизации используются для дериватизации моносакшаридов в вещества, которые легко испаряются, а газовая хроматография используется для выделения и количественной оценки. Таким образом, газовая хроматография в основном используется для анализа состава и содержания моносакваридов, и работа является относительно сложной.

Лю цянфу [22-23] гидролизировал и дерифицировал выделенный и очищенный олигосахарид галактозы и проанализировал его с использованием газовой хроматографии. В эксперименте использовалась капиллярная колонна OV1701 кварца (30 м, id 0,32 мм), а примерная структура отделителя была определена на основе соотношения пиковых зон измеряемой глюкозы и галактозы. Однако количественный метод не приводится.

1.3 жидкостная хроматография

Высокопроизводительная жидкостная хроматография в настоящее время является наиболее распространенным методом обнаружения моносакхаридов и олигосакхаридов. Ранее упоминавшиеся исследователи также использовали жидкую хроматографию в сочетании с тонкослойной хроматографией для анализа олигосахаридов в трансглицезилационных продуктах. Например, ли юмей и др. [17] также использовали ГПЛК для анализа олигосахаридов в продуктах трансгликвиляции. Сироп был отфильтрован через мембрану фильтра 0.22, а тристиллированная вода была использована в качестве мобильной фазы. Температура колонки была 80 °C, и была использована колонка анализа сахара Aminex HPX-42A (300 мм ° 7.8 мм). Lu Wenwei et al. [18] также использовали ГПЛК для определения содержания олигосахарида галактозы в продукте трансгликозиляции. Мобильная фаза составляла 5 ммоль/л серной кислоты, температура колонны была 50 °C, а колонка была Aminex HPX 87H.

Баррозу бегона и др. [24] использовали онлайн высокопроизводительную жидкую хроматографию/масс-спектрометрию времени полета для анализа структуры и типа олигосахаридов, полученных из гликобелков, и анализировали n-и o-связанные олигосахариды, с хорошими результатами.

Luo Qian et al. [25] изучили метод предстолбцовой дериватизации олигогалактозы с использованием 1- фенила -3- метила -5- пиразолона (PMP) и использовали хроматографию силикагеля в сочетании с хроматографией тонкого слоя для отделения и обнаружения олигогалактозы в сыром сахарном сиропе. Использование ультрафиолетового детектора длиной волны 245 нм, галактозы, глюкозы лактозы, трисаксаридов, тетрасаксаридов и пентасакаридов. Этот метод может использоваться для косвенной количественной оценки.

У хонцзин и др. [26] использовали высокопроизводительный жидкостный хроматограф обратной фазы с водой в качестве подвижной фазы для отделения и анализа смеси крахмала, содержащей 2-6 глюкозных полимеров, полученных при ферзиматическом гидролизе, а также добились хороших результатов.

Ли джинфан и др. [27] изучили метод определения содержания олигогалактозы в молочных продуктах и сиропах с помощью высокопроизводительной жидкостной хроматографии. Вода и ацетонитрил использовались в качестве мобильной фазы, а аминозная колонна использовалась для отделения глюкозы, галактозы и лактозы от других веществ. Содержание олигогалактозы в пробе рассчитано путем измерения и расчета содержания галоктозы, полученной при ферзиматическом гидролизе олигогалактозы. Относительные стандартные отклонения глюкозы, галактозы, лактозы и олигосахарида составили 2,72%, 4,16%, 1,16% и 4,26% соответственно. Коэффициент линейной корреляции этого метода составил 0,9990-0,9995, а коэффициент восстановления - 95%-110%. Данный метод не решает проблему отделения галоктозы и глюкозы в растворе пробы после гидролиза, а также не определяет коэффициент преобразования галоктозы в олигосахариды, поэтому имеет ограниченное значение.

1.4 ионная хроматография

Ионная хроматография является относительно новым методом обнаружения моносакхаридов и олигосакхаридов. Он имеет преимущества высокой чувствительности и хорошей эффективности разделения. Ионно-хроматографический метод обнаружения галактоолигосахаридов был впервые опубликован американским аоха в качестве официального стандартного метода. Другие исследования по ионно-хроматографическому методу обнаружения галактоолигосахаридов в основном направлены на совершенствование стандартного метода аоха.

1.4.1 американский стандарт аоха 45.4.12-2001.02 

Теоретической основой стандарта AOAC 45.4.12-2001.02 "определение транс-галактоолигосахаридов (TGOS) в отдельных пищевых продуктах" является использование специальной, эксклюзивной грац-галактозидазы для гидролиза лактозы и галактоолигосахаридов в образце, с глюкозой и галактозой в качестве продуктов. Затем содержание галоктозы в гидролизе лактозы рассчитывается с использованием содержания лактозы, обнаруженного в пробе. Содержание галактозы из источника гидролиза лактозы. Наконец, общее содержание галоктозы в растворе вычитается из свободного и лактозного содержания гидролиза, полученного из галоктозы, а затем приращение галоктозы умножается на коэффициент для расчета содержания галоктоолигосахаридов (гос) в пробе. Действие и этапы расчета настоящего стандарта являются следующими:

Измерить количество свободной галоктозы и лактозы с помощью ик;

- рассчитать количество галоктозы, полученной из лактозы;

Парагидролиз лактозы и TGOS в образце;

Измерить общее количество галоктозы в гидролисате с помощью ик;

⑤ Calculate GALGOS = галт-GALfree-GALLAC;

⑥ Calculate TGOS = k × GALGOS.

Примечание: здесь k = (180 + 162 н)/(180 н), где n-среднее число единиц галактозы в молекуле олигосахарида галактозы.

Существуют две технические проблемы с этим стандартным методом обнаружения олигосахарида галактозы:

(1) расчетный коэффициент в стандарте AOAC 45.4.12-2001.02 рассчитывается на основе степени полимеризации олигосахаридов. Однако на практике степень полимеризации олигосахаридов точно измерить невозможно из-за сложности олигосахаридных компонентов, вызванной различными производственными процессами. Поскольку единого коэффициента пересчета не существует, этот метод может лишь дать представление о методе испытания и не имеет большого значения для обобщения.

2. Поскольку количественная основа заключается в увеличении галактозы в пробе, то количество лактозы или углеводов, содержащих галактозу, в пробе, подлежащей испытанию, является наиболее важным фактором, влияющим на точность результатов испытаний (как поясняется в стандарте). Содержание лактозы в продуктах питания, особенно в порошковом молоке (≥40 г /100 г), значительно превышает содержание гос (≤1 г /100 г), поэтому содержание галактозы, получаемое в результате гидролиза лактозы, превышает 20 г /100 г. Содержание галоктозы, полученное в результате гидролиза GO- с,не превышает 5% от общего содержания галоктозы. Анализ результатов обработки проб и инструментального анализа показывает, что это увеличение на 5% может рассматриваться как очень хорошие параллельные результаты. Он не может использоваться для расчета содержания GOS, поэтому этот метод не подходит для образцов с высоким содержанием лактозы.

1.4.2 другие методы ионной хроматографии

Исследования по определению содержания галактоолигосахаридов с использованием ионной хроматографии в основном основаны на стандарте аоха 45.4.12-2001.02. Основные исследования проведены по типу столбца, градиенту и концентрации подвижной фазы, количеству градиента-галактозидазы и др. Некоторые исследователи также использовали ионную хроматографию-массовую спектрометрию для некоторых исследований.

Bruggnk C et al [29] использовали ионообменную хроматографию и одноквадропольную масс-спектрометрию в тандеме для изучения разделения и анализа моносакхаридов, дисакхаридов, трисакхаридов и олигосакхаридов в образцах цикория кофе, меда и пива.

Li Jianwen et al. [30] определили содержание олигосахарида в сыром сахарном сиропе с помощью высокоэффективной ионной хроматографии с помощью пульсирующей амперометрической детекции на основе метода aoac2001.02 и оптимизировали градиент улюента.

Сюй ли и др. [31] изучили метод определения содержания олигогалоктозы в сиропе методом ионной хроматографии с помощью колонки карбопак па10 (2 мм гравитационного 250 мм) и амперометрического детектора с использованием градиентного элюдирования водой, раствора 250 нмоль/л NaOH и ацетата натрия 1 моль/л в качестве эталонного метода AOAC-2001.02. Было определено содержание каждого компонента (лактозы, галактозы, глюкозы и олигогалактозы) в сиропе. Содержание каждого компонента (лактозы, галактозы, глюкозы и олигосахаридов) в сиропе.

2 проблемы с существующими методами

2.1 универсальность выборки

Хотя существует много методов обнаружения галактоолигосахаридов, они в основном используются для проб с высоким содержанием галактоолигосахаридов, таких как галактоолигосахаридов сырого сиропа и инвертных сахарных продуктов. В Том числе стандарты аоха, образцы пищевых продуктов также в основном обнаружения галактоолигосахарида в пробах пищевых продуктов с низким содержанием лактозы и низким содержанием галактозы.

2.2 применимость внешнего стандартного метода

В промышленном производстве лактазы используются различные источники, и производственные процессы, используемые каждым производителем, также в определенной степени различаются, что приводит к сложности типов и пропорций олигосахаридных компонентов. Использование внешних стандартных методов обнаружения сопряжено с такими техническими трудностями, как сложность подготовки стандартов и высокие технические требования к хроматографической сепарации. Поэтому внешний стандартный метод вряд ли может быть использован для исследования методов обнаружения.

2.3 эмпирический коэффициент пересчета

Грау-галактозидаза используется для гидролиза лактозы и олигосахаридов в пробе, а содержание олигосахаридов в пробе рассчитывается по увеличению галактозы. Коэффициент пересчета должен рассчитываться с использованием среднего числа галоктозных единиц (средняя степень полимеризации галоктозных единиц) в олигосахаридах в выборке. В связи со сложностью состава олигосахарида в настоящее время не существует универсального коэффициента пересчета, поэтому даже при измерении увеличения галактозы по олигосахаридам невозможно рассчитать содержание олигосахарида в выборке.

2.4 содержание лактозы в образце

Учитывая идею использования метода AOAC-2001.02, мы должны обнаружить увеличенное количество галоктозы, полученной из олигомерной галоктозы в образце. Поэтому, если содержание бесплатных галактозы, лактозы или олигосахаридов, содержащих галактозу в пробе, является очень высоким, например молочных продуктов, необходимо рассмотреть вопрос об удалении бесплатных галактозы, лактозы или олигосахаридов, содержащих галактозу в пробе. Однако этот вопрос не изучался в вышеупомянутых исследованиях.

3 направления исследования метода обнаружения олигосахаридов в пище

Поскольку единственным опубликованным на международном уровне стандартом обнаружения олигосахаридов является AOAC 45.4.12 -2001.02 "определение трансгалактуолигосахаридов (TGOS) в отдельных пищевых продуктах", в китае не существует национального или промышленного стандарта обнаружения олигосахаридов. Результаты других исследований имеют больше недостатков при применении к определению олигосахаридов в продуктах питания. Поэтому исследование метода обнаружения олигосахаридов в продуктах питания должно быть основано на методе аоха, с упором на решение следующих двух проблем.

3.1 средняя степень полимеризации коммерческих олигосахаридов

Изучая состав олигосахарида и его долю в коммерческом олигосахариде сырья, можно определить и рассчитать среднюю степень полимеризации олигосахаридов, а затем можно рассчитать коэффициент пересчета для расчета содержания олигосахаридов с использованием приращения галактозы для решения задачи подсчета результатов метода аоак.

Основными методами определения средней степени полимеризации олигосахаридов являются высокопроизводительная жидкостная хроматография, ионная хроматография и масс-спектрометрия.

Метод ПЖК может использовать анализ степени полимеризации и анализ аминоколонок для расчета средней степени полимеризации олигосахаридов с использованием метода нормализации площади. Метод ионно-хроматографии требует использования колонки, подходящей для отделения олигосахаридов, для отделения олигосахаридного сырья, измерения молекулярного веса (или степени полимеризации) каждого компонента, а затем расчета средней степени полимеризации олигосахаридов с использованием метода нормализации площади. Эти два метода основаны на Том, что олигосахаридный материал, используемый для исследований, преобразуется из чистой лактозы, что он не содержит галоктозы, глюкозы или олигосахаридов, кроме олигосахаридов, полученных из лактозы, что каждый олигосахаридный компонент олигосахаридного материала хорошо отделен друг от друга, что степень полимеризации каждого компонента известна, И что существует определенная ошибка, связанная с допущением о Том, что значения чувствительности каждого компонента равны.

Масс-спектрометрия требует измерения соотношения массы и заряда каждого компонента олигосахаридов, определения ионной плотности различных соотношений массы и заряда, а также расчета средней степени полимеризации олигосахаридов по отношению избыточности ионов каждого компонента полимеризации. Объектом исследования масс-спектрометрии должны быть также олигосахариды, полученные из чистой лактозы, которые не должны содержать олигосахариды из других источников. Необходимо также обеспечить, чтобы дисаксариды в лактозе и олигосахаридах были хорошо отделены друг от друга и чтобы показатели плотности ионной реакции каждого компонента степени полимеризации были одинаковыми (самое главное, количество зарядов на каждом ионе должно быть равным). Есть также определенная ошибка.

Хотя в вышеуказанных методах измерения степени полимеризации имеется определенная ошибка, анализ приемлемого уровня погрешности и работоспособности метода измерения позволит установить коэффициент пересчета олигосахаридов, аналогичный коэффициенту пересчета белков.

3.2 изучение универсальности измеримых образцов

Поскольку содержание олигосахарида в пробе должно рассчитываться путем измерения увеличения галактозы в пробе, содержание свободной лактозы и галактозы в пробе является важным фактором, влияющим на точность результатов измерения. Если фоновое содержание галоктозы является слишком высоким, то относительная доля увеличения галоктозы, полученного после гидролиза, будет низкой, а погрешность измерения будет относительно большой.

Изучение и решение интерференции удаления свободной лактозы и галактозы в предварительной обработке проб может повысить точность результатов испытаний и универсальность метода тестирования проб, особенно молочных продуктов. Удаление свободной лактозы и галактозы в пробе может быть рассмотрено методом экстракции твердой фазы, микробиологии и хроматографической подготовки. Однако, поскольку целевое вещество и лактоза и галактоза являются сахарами с одной и той же структурой, это исследование будет более сложным и потребует больших инвестиций.

Кроме того, в ходе предварительной обработки проб необходимо учитывать влияние заряженных ионов в пробе, особенно двувалентных ионов, на ионную хроматографию, а также изучать технологию удаления этих ионов.

4. Выводы

Хотя исследования в области технологии обнаружения олигосахаридов являются сложными, с постоянным улучшением людей и#39. Уровень жизни, продукты, добавленные с олигосахаридами, будут все больше цениться потребителями. Развитие и производство пищевых продуктов, добавленных олигосахаридами с пробиотическими функциями, станет трендом развития. Из текущей ситуации в области качества и безопасности продуктов питания внутри страны и потребителей#- 39; Постоянно растущий спрос на качество продуктов питания, особенно важно исследовать и разработать метод определения содержания олигосахарида в продуктах питания. Изучение и разработка стандартизированного метода тестирования содержания олигосахаридов в продуктах питания не только обеспечит предприятия подходящими методами тестирования и усилит контроль производственного процесса; Кроме того, она будет обеспечивать методы проверки для отделов контроля и инспекции качества продуктов питания и служить справочным материалом для исследований по методам проверки других компонентов олигосахарида в продуктах питания.

Справочные материалы:

[1] Мао цзянь, сюй мудан. Функциональные физиологические характеристики пищевых продуктов и технология испытаний [м]. Пекин: химическая промышленность пресс, 2005: 103-117

[2] Van Loo J,Cummings J,Delzenne N,et al. Функциональные пищевые свойства неусваиваемых galactooligosaccharides: консенсусный доклад по проекту ENDO (DGXII AIR II-CT94-1095)[J]. British Journal Соединенные Штаты америкиNutrition, 1999, 81:121-132

[3] объявление министерства здравоохранения#39;s китайская республика (No. 12 Соединенные Штаты америки2007) [J]. Китайский журнал пищевой гигиены, 2007, 19(6): 571-573

[4] чжан чжиго. Научно-исследовательский прогресс и применение функциональных олигосахаридов [J]. Пищевые добавки китая, 2012(6): 207-213

[5]Richard C, Beach I M. определение лактулозы и сои олигосац-колец в грудном молочном корме [J]. J молочные исследования, 1986, 53: 293-299

[6] такамицу чака, Хдето акми, акихиро шбата и др. Обнаружение олигосахаридов альгината у моллюсков [J]. Biotechnol Biochem, 2006, 70(11):2793 — 2796

[7]Splechtna B, Nguyen TH, Steinbck M, et al. Производство пребиотических галактоолигосахаридов Из российской федерации - лактоза Использование программного обеспечения Бета-галактозидасы от Lactobacillus reuteri [J]. J Agric Food Chem, 2006, 54 (14): 4999-5006

[8]Shaw P E. Handbook of sugar separations in foods По запросу:HPLC[M]. Bo-ca Raton: CRC Press Inc., 1988:27-30

[9] антонопулос а, фаветта п, лафосс м и др. Характеристика io- ta-carrageenans - олигосахариды с Высокая производительность Жидкостная хроматография в сочетании с выявлением рассеивания света в результате испарения [J]. Хроматогра, 2004, 1059(1/2):83-87

[10] Хиротака какита, хироши камисима, кацуо комия и др. Симута-neous анализ моносакваридов и олигосакхаридов по высокой производительности В жидком состоянии 3. Хроматография с 1. Почтовый ящик Флюоресцентная производная [J]. Хроматогра, 2002, 961(1):77-82

[11] линь цинь бао, цзян майфенг, ян чунь. Определение моносакшаридного состава джуджуба олигосахаридов с помощью газовой хроматографии-масс-спектрометрии [J]. Наука о еде, 2009, 16: 210 — 212

[12] броберг а. высокопроизводительная жидкостная хроматография/электрораспылительный ионно-ионизационный ион-ловушка масс-спектрометрия для анализа олигосакчы-ридов, производных от восстановительного аминирования и N,N- диметиляции [J]. Карбогидр Res, 2007, 342(11):1462-1469

[13]  Ин лю, самир ургаонкар, Джон г веркаде и др. Разделение и определение характеристик  of  Число лиц, не прошедших курс обучения  - олигосахариды  Использование программного обеспечения  Жидкостная хроматография и жидкостная хроматография-электрораспылительная масс-спектрометрия [J]. Хроматогра, 2005, 1079(1/2):146-152

[14] фэн юнмэй, чан сюлиан, ван вэньхуа и др. Быстрое и эффективное разделение олигосахаридов ионно-биржевой хроматографией [J]. Технология пищевых продуктов и ферментации, 2009, 35(3): 179-182

[15] камода S,  - ишикава - р, - какехик. Капиллярный электрофорез с лазерной флюоресценцией Для более подробной информации Ii. Исследования По состоянию на N-соединено - олигосахарид Главная страница of  Терапевтические рекомбинантные моноклональные антитела [J]. Хроматогра, 2006, 1133(1/2):332-339

[16]  Dreisewerd K, Klbl S, Peter-Katalinic J, и др. Анализ материнского молока oligosaccharides  Прямо на сайте Из российской федерации Тонкий слой. Хроматографические пластинки by  Матрица с поддержкой С помощью лазерных систем Десорбция/ионизация Ортогональная-время полета масс-спектрометрия с глицеролевой матрицей [J]. М/с масс-спектром, 2006, 17(2):139-150

[17] Li Yumei, Lu Lili, Xiao Min. Идентификация штамма трангликозилазы F3, условия производства фермента и исследования трансгликозилационной деятельности [J]. Журнал шаньдунского университета: научное издание, 2009, 44(1): 1-6

[18] Лу вэньвэй, конг вэнтао, конг цзянь и др. Исследование по трансглюкозилационной активности лактобациллуса ферментума (лактоциллус ферментум) [J]. Журнал шаньдунского университета: научное издание, 2008, 43(7): 83 — 87

[19] сюй мудан, чжан джунтао, фань джинбо и др. Исследование по синтезу олигосахаридов из сырого пороха путем иммобилизованного гидролиза лактазы [J]. Наука и техника о продовольствии, 2006(1): 122-125

[20] ли чжэньи, сяо мин, Лу Лили и др. Производство низколактозного молока, содержащего олигосахариды, с помощью трансгликезилазы β-galactosidase [J]. Наука о еде, 2007, 25(5): 241 — 244

[21] у хао, дин-дин, ян сихан. Высокоэффективная тонкослойная хроматография для анализа олигосахаридов и их производных [J]. Китайская молочная промышленность, 2001, 29(2): 25-28

[22] лю цзянфу. Kluyveromyces fragilis LFS-8611, шаг-д-галактозидаза катализирует синтез олигогалактозы [D]. Вуси: цзяньнаньский университет, 2004

[23] лю цзянфу, чэнь цинсен, ван чжан. Анализ состава олигосахаридов синтезирован к. фрагменлисом ду-галактосидасе [J]. Пищевая ферментация, 2005, 31(11): 109-111

[24] баррозу - бегона, Организация < < дейкстра > > - рене, - привет. - привет. - марлике, et  al.  На линии высокопроизводительная жидкостная хроматография/масс-спектрометрическая чара — актеризация местных олигосахаридов от гликобелков [J]. Быстро и быстро Масс-спектром коммун, 2002, 16(13):1320-1329

[25] Лу цянь, ван сяодан, ван цинцин и др. Разделение и обнаружение смесей галактозы с низким молекулярным весом [J]. Наука и технологии пищевой промышленности, 2010(10):392 — 395

[26] у хунцзин, тан генюань, ли чжида и др. Определение солодовых олигосахаридных компонентов с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии [J]. Хроматография, 1994(4):289 — 290

[27] ли цзинфан, пэн мейчун. Определение содержания олигосахарида высокопроизводительной жидкостной хроматографии [J]. Наука и техника о продовольствии, 2012(7):279 — 282

[28]Slegte J. AOAC Official Method 45.4.12-2001.02, Determination of transgalactooligosaccharides (TGOS) в отдельных пищевых продуктах. American: J AOAC intern, 2002

[29]Bruggnk C, Maurer R, германн H, et al. Анализ углеводов методом анионной биржевой хроматографии и масс-спектрометрии [J]. Чро — матогра, 2005, 1085(1):104 — 109

[30] ли цзяньвэнь, ван чжу, ян юэсин. Определение содержания олигосахарида в сиропе с помощью высокопроизводительной ионной хроматографии [J]. Гигиенические исследования, 2006(5):584-586

[31] сюй ли, Пан ли, хюн хой чи. Метод определения содержания олигосахарида. Пищевая промышленность и ферментация, 2011(2):179-181