Исследование по синтезу бета-каротина

Бета-каротинis a carotenoid, an orange-yellow fat-soluble compound. It is one of the most common and most stable natural pigments in nature. It is widely found in plants and is a polyene compound. It is an antioxidant with detoxification effects and an essential nutrient for maintaining the health of humans and animals. It strengthens the immune system, thereby enhancing the immunity of humans or animals and promoting animal growth. Beta-carotene is a precursor of vitamin A and can be converted into vitamin A in the body after entering the body of animals.

Beta-carotene is a fat-soluble pigment that can have a yellow to red color depending on its concentration. It can be used as a food additive or animal feed additive. Beta-carotene has been recommended by the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives as a food additive and nutritional supplement and is classified as a Class A nutritional food fortifier. Beta-carotene can be used as an animal feed additive to enhance the animal'. Иммунная система, повышение выживаемости выращиваемых животных, повышение репродуктивной способности животных, улучшение производственных показателей, повышение цвета домашнего скота, птицы и продуктов водного животного происхождения, повышение темпов роста животных и качества мяса. Сообщается, что внутренний и международный спрос на грау-каротин из года в год растет, и это имеет хорошие экономические выгоды на международном рынке. Поэтому в настоящей статье рассматриваются методы экстракции, синтеза и разделения грава-каротина и их применение в кормовой промышленности.

1. Химическая структура и свойства грава-каротина

Грау-каротин, с молекулярной формулой C40 H56 и относительной молекулярной массой 536,88, имеет температуру плавления 176-180 граус, небольшой специфический или посторонний запах и пурпурный красный или темно-красный кристаллический порошок. Раствор разбавителя-от оранжевого до желтого. Она нерастворима в воде, пропиленгликоле и глицерине, незначительно растворима в этаноле и эфире, растворима в хлороформе, гексане, углероде, ацетоне, бензоле и нефти. Он нестабилен в присутствии света и тепла и легко окисляется. 

2 производство грау-каротина

2. 1 процесс экстракции природного грава-каротина

2.1.1 экстракция с использованием органических растворителей

Метод экстракции с использованием органических растворителей является наиболее традиционным методом экстракции натуральных пигментов. Принцип состоит в Том, чтобы выбрать подходящий растворитель на основе принципа like dissolves like, а затем нагреть смесь на период времени для растворения гравия-каротена в растворителе. Широко используемые растворители включают нефтяной эфир, ацетон, этилацетат и хлороформ. Конкретные шаги: предварительно обработанные пробы взвешивают пробы, добавляя жидкость при определенном соотношении между нагревом и извлечением при подходящей температуре и во времени → filtering → → → → → β-carotene. Этот метод прост в использовании и требует небольшого количества инструментов и оборудования. Широко используется для извлечения грава-каротина из некоторых растений. Однако извлечение органических растворителей имеет недостатки, связанные с использованием большого количества растворителя, которое занимает длительное время, приводит к большему загрязнению окружающей среды, характеризуется низким коэффициентом рекуперации органического растворителя и наносит определенный ущерб пигменту.

Zhang Yan et al. used single factor and orthogonal experiments to investigate the effects of extraction solvent, extraction time, extraction temperature, liquid-to-material ratio and extraction times on the extraction of β-carotene from white lotus powder. The results showed that the optimal extraction conditions for β-carotene from white lotus powder were ethyl acetate as the organic extraction solvent, extraction time 180 min, temperature 45 °C, liquid-to-material ratio 1:6, extracted twice, and the extraction rate can reach 679. 864 μg / g.

У янмяо и др. использовали низкосортный чай в качестве сырья и определили оптимальный процесс с помощью однофакторного тестирования. Оптимальный процесс заключается в следующем: температура экстракции 50 градусов, соотношение жидкости к материалу 1 градус, время экстракции 60 мин, экстракция дважды, скорость экстракции может достигать 80%. Грау-каротин в экстракте был проанализирован высокой производительностью жидкостной хроматографии (HPLC), и содержание грау-каротин было обнаружено около - 0,2%. Сапонификация и хроматография колонок использовались для получения грау-каротина с чистотой 22%.

2. 1. 2 сверхкритическая экстракция жидкости

Сверхкритический CO2 является наиболее распространенным типом сверхкритической жидкости. В этом методе используется влияние температуры и давления на растворимость сверхкритических жидкостей. Сверхкритические жидкости, превышающие критическую температуру и давление, имеют текучесть газа и растворимость жидкости. После контакта с образцом экстрагент может избирательно растворять компоненты с различными полярностями, точками кипения и относительными молекулярными массами из образца последовательно. Затем при другой температуре и давлении сверхкритическая жидкость превращается в обычный газ, снижая растворимость целевого продукта и вызывая его полное или почти полное осаждение, тем самым достигая цели разделения и очистки. Преимущества этого метода заключаются в Том, что он является дешевым и легким в получении, безопасным и надежным, простым в использовании, не содержит остатков растворителя, нетоксичен, безвреден и не загрязняет окружающую среду и широко используется при добыче некоторых природных продуктов.

Яо пин и др. использовали шпинат в качестве сырья и сверхкритическую технологию извлечения CO2 для извлечения грава-каротина. Основными факторами, влияющими на скорость экстракции, были изучены и проанализированы ортогональные эксперименты, и оптимальными условиями процесса экстракции грава-каротина из шпината были определены дозировка агента entrainment в 10%, температура экстракции 40 гранат, давление экстракции 20 мпа и время экстракции 120 мин. в этих условиях экстракция грава-каротина достигла 5,04 мг /100 г.

Су хайцзянь и др. использовали сверхкритический метод CO2 для извлечения каротеноидов из отходов табачных листьев. С использованием коэффициента извлечения каротеноидов в качестве индикатора и на основе экспериментов с одним фактором метод поверхностной реакции "бокс-бенкен" использовался для оптимизации давления, температуры, времени извлечения и расхода CO2. Результаты показывают, что взаимодействие температуры экстракции, давления экстракции и расхода CO2 оказывает очень значительное влияние на экстракцию каротеноидов в табачных листьях; Значительное влияние оказывает давление экстракции. Оптимальными технологическими условиями, полученными в результате оптимизации, были давление всасывания 23,53 мпа, время всасывания 1,72 ч, температура всасывания 50,00 °C и расход CO2 8,05 л/ч. В этих условиях коэффициент извлечения каротеноидов в табачных листьях составил 285,1 градиента /100 г.

2. 1. 3 ультразвуковая экстракция

Ультразвуковая экстракция осуществляется с использованием сильных колебаний, кавитационного и теплового эффекта ультразвука. Кавитационные пузыри образуются ультразвуковой осцилляцией, и кавитационные пузыри продолжают перемещаться в кацилляционной среде. Во время движения они продолжают расти, а затем лопнуть. Когда они лопнут, они поглощают энергию в звуковом поле и выпускают ее в очень короткое время и в очень небольшом пространстве, создавая высокотемпературную среду и среду высокого давления, сопровождаемую ударной волной. Это приводит к разрыву клеток, высвобождению их содержимого и растворению целевого продукта в растворителе. Ультразвуковая экстракционная технология значительно сокращает время экстракции по сравнению с традиционной экстракцией органических растворителей, имеет более высокую скорость экстракции, проста в эксплуатации, имеет низкие затраты на процесс экстракции, широко адаптируема и имеет относительно небольшое количество примесей в экстракте. В последние годы этот метод широко используется при экстракции натуральных продуктов и экстракции активных ингредиентов из лекарственных трав.

Чжоу миньцянь и др. изучали процесс ультразвуковой экстракции грау-каротина из дунальеллы салины. В качестве оценочного показателя использовалась урожайность грау-каротина. На основе однофакторного тестирования ортогональные эксперименты были использованы для определения оптимальных условий процесса извлечения грава-каротина из дуналиэллы салины под совокупным воздействием температуры экстракции, времени экстракции, времени ультразвукового повышения и соотношения жидкости к материалу. То есть соотношение жидкости и твердого вещества 1:6 (г: мл), время ультразвукового повышения 70 с, температура экстракции 20 градусов, а время экстракции 9 минут.

Ма шаоджун и др. использовали сладкую апельсиновую кожуру в качестве сырья для извлечения каротеноидов с использованием ультразвуковой технологии. Бокс-бенкенский ортогональный тест был использован для анализа воздействия на состав каротеноидов высокопроизводительной жидкостной хроматографии. Результаты показали, что метод сушки кожуры был холодным-сушкой, размер частиц составлял от 100 до 120 сеток, соотношение жидкости к твердым составляло 1:50 (г: мл), мощность ультразвука — 270 вт, время ультразвука — от 7 до 10 мин, температура ультразвука — от 30 до 50 градусов, экстракция — от 4 до 5 раз. Оптимизировано, содержание каротеноидов варьировалось от 0. 130 к 0. 150 мг/г, проверенное значение равно 0. 152 мг/г высокопроизводительный жидкостный хроматографический анализ показал, что ультразвуковая экстракция не оказала значительного воздействия на основные компоненты каротеноидов в условиях испытаний.

2. 1.4 метод извлечения с помощью микроволн

Микроволны представляют собой высокочастотные электромагнитные волны с частотой от 300 МГЦ до 300 ГГЦ. Они имеют мощную проникающую силу и могут проникать в экстракционную среду непосредственно в микротрубные связки и системы клеток железа материала образца, создавая высокие температуры внутри клеток и вызывая внутреннее давление, превышающее клетки &#- 39; Способность выдерживать его, тем самым разрывая клетки и выпуская активные ингредиенты внутри. Кроме того, электромагнитное поле, создаваемое микроволнами, может ускорить скорость распространения извлекаемых молекул из внутренней части образца в интерфейс между элементами выборки и растворителем, ускоряя тем самым скорость высвобождения целевого продукта. Микроволновая экстракция использует небольшое количество проб, экономит энергию, вызывает меньше загрязнения, имеет простой процесс, является высокоэффективной, сокращает время экстракции и проста в последующей деятельности. В качестве новой технологии добычи она имеет явные преимущества в добыче природных продуктов и широко используется в добыче различных природных продуктов в последние годы.

Wang Ying et al. used a mixture of ethyl acetate and absolute ethanol to extract β-carotene from carrots by microwave. The effects of the liquid-to-material ratio, microwave time and microwave power on the extraction rate were investigated. The results showed that the optimal process conditions for β-carotene extraction were a liquid-to-material ratio of 1:5 (g:mL), a microwave time of 40 s and a microwave power of 400 W. Under the optimal conditions, the extraction rate can reach 47.8%.

Chen Lei et al. извлекли гравитационный каротин из вольфберри с помощью экстракции с помощью микроволн, проверили растворитель для экстракции гравитационного каротина и изучили влияние микроволновой энергии, времени экстракции, соотношения жидкостей к твердым и температуры экстракции на скорость экстракции гравитационного каротина. На основе одного фактора процесс экстракции был оптимизирован ортогональным тестом. Результаты показали, что оптимальными параметрами процесса являются мощность СВЧ 400 вт, время 80 с, температура 25 ° с, соотношение жидкости и твердого тела 1:15. В этих условиях коэффициент извлечения грава-каротина составляет 0,55%.

2. 1. 5 метод фермента реакции

Метод ферментной реакции использует специфику ферментов для производства грава-каротина. Широко используемые ферменты включают целлюлазу и пектиназу. Растительные клетки состоят из большого количества целлюлозы и пектина. Целлюлаза может лизы клеточных стенок растений, и при использовании в сочетании с пектиназой, она может эффективно уменьшить сопротивление передачи массы барьеров, таких как клеточные стенки и цитоплазмы к внешней диффузии эффективных ингредиентов в клетках, так что более эффективные ингредиенты выпускаются. По сравнению с традиционными методами экстракции, ферзиматический метод имеет более высокую скорость экстракции и более мягкие условия экстракции.

Юань сюхон и дрМорской бакторн фруктВ качестве сырья для изучения оптимальных условий извлечения и очистки каротеноидов композитным ферментом. Результаты показали, что оптимальными условиями для экстракции морских букторнов каротеноидов композитным ферментом являются целлюлаза: пектиназа 2:1 (г: г), ферзиматическая температура 30 °C, ферзиматическое время 25 мин, количество фермента 0,20%, ферзиматический pH 7, и скорость экстракции в этих условиях составила 89,88%. Содержание каротеноидов было увеличено с 23,08% до 69,53% путем очистки сырого экстракта каротеноидов путем сапонификации, а сапонифицированные каротеноиды были дополнительно очищены хроматографией колонны силикагеля, в результате чего содержание увеличилось с 69,52% до 84,36%.

Если сравнить вышеуказанные методы экстракции, то метод экстракции органических растворителей является более подходящим в тех случаях, когда экспериментальные условия относительно просты и требуется небольшое количество гравитационного каротина. Сверхкритическая экстракция жидкости более подходит, когда требуется более чистый β- каротин. Ультразвуковая экстракция и микроволновая экстракция характеризуются более высокими показателями экстракции, более коротким периодом времени и меньшим загрязнением. Эти два метода более пригодны для крупномасштабного промышленного производства, поскольку их преимущества соответствуют современным концепциям производства большинства компаний-высокой эффективности и охране окружающей среды. Поскольку условия для извлечения Грааль-каротина ферментативной реакцией являются более мягкими, Грааль-каротин с более высокой активностью может быть получен. При изучении свойств добытого грау-каротина более подходящим является метод ферзиматической реакции.

2. 2 синтез грау-каротина

2. 2. 1 микробная ферментация

Использование микроорганизмов для производства грава-каротина в основном сосредоточено в использовании триходерма рисей и красных дрожжей.

Микробная ферментация является методом, который использует технологию микробной культуры, чтобы микроорганизмы могли синтезировать грау-каротин in vivo, а затем изолировать грау-каротин от микроорганизмов. Этот метод имеет преимущества быстрого микробного роста, сильной способности производить Грааль-каротин, относительно хорошего качества полученного Грааль-каротин, легкого контроля в безопасных и нетоксичных условиях, а также быстрого и удобного измерения.

Wang Aijun et al. optimized the seed medium and fermentation medium in the method of producing natural β-carotene by fermentation of Trichoderma reesei. The results showed that: starch was selected as the medium, and ethyl acetate was used as the solvent for fermentation. The starch content was 2.3%, the pH was 6.6, and the fermentation unit was increased by 94.21%.

Сообщалось, что с помощью красных дрожжей, обработанных высоким гидростатическим давлением, ферментативная среда может быть оптимизирована путем анализа поверхности реакции для получения грава-каротин до 13,43 мг/л.

2.2.2 генная инженерия

С развитием генетической технологии, использование генетических методов для производства каротеноидов получило много внимания со стороны многих ученых в последние годы. Применение технологии генной инженерии привело к значительному увеличению объема гравитационного каротина, синтезированного в организмах, что привело к увеличению объема добываемого гравитационного каротина. Двумя распространенными прекурсорами для производства каротеноидов являются диметилаллилпирофосфат (дмапп) и изопентенилпирофосфат (ипп). В настоящее время известны два синтетических пути: путь 2- c-метил-d-эритритол (MEP), который в основном встречается в бактериях и растительных организмах; И путь метил-д-эритритол -4- фосфат (MVA), который в основном встречается в цитоплазме или эндоплазменной ретикуме архаев, грибов и растений.

Чжао цзин и др. использовали шесть искусственно регулируемых элементов с весьма различными сильными сторонами для изучения регулирования восьми генов в пути синтеза терпеноидов. Результаты показали, что оптимальная прочность регулятивного элемента варьируется для различных генов. Регулирование восьми генов увеличило производство грационного каротина в 1,2-3,5 раза. Было также установлено, что нормативные элементы надлежащей прочности могут также увеличить производство грационного каротина после регулирования генов DXR, ispG и ispH могут также увеличить производство грационного каротина. Комбинированное регулирование генов DXR и idi может увеличить производство грава-каротина в 8 раз, и в конечном итоге грава-каротина может достичь 17,59 мг/г сухой массы клеток.

2. 2. 3. Химический синтез

Химический синтез является методом искусственного синтеза грава-каротина с использованием органического химического сырья и химических реакций синтеза. В настоящее время основными маршрутами являются: использование витамина а в качестве сырья, преобразование витамина а в ксанталдегид и метилвиашин реагент, а затем конденсирование для образования грау-каротина; β-ionone как сырье, маршрут компании Roche характеризуется реакцией григнара; β-ionone как сырье, синтезированное винилом -β-ionol, C15+C2+C15 виттиг реакции.

Цзинь сяо и др. использовали фуран в качестве сырья, ключевой промежуточный 2,7- диметил -2,4,6- октатриен -1,8- диалдегид для синтеза грау-каротина был синтезирован в четыре этапа: гидролиз, in situ гидролиз-виттиговая реакция, уменьшение и окисление. Промежуточная реакция была вызвана четвертичной фосфоновой солью в реакции виттига на синтез грау-каротина с общей урожайностью 43%.

Фан гисян использовал витамин а альдегид в качестве сырья. Сочетая переходный металл с витамином а альдегид, металл окисляется, карбониловая группа витамина а альдегид сокращается и соединяется с образованием двойной связи, и аβ-carotene product with a content of more than 98% was obtained, with a recovery rate of more than 80%.

3 разделение и очистка грау-каротина

Основные методы разделения и очистки грава-каротина включают в себя макропористую адсорбцию и отделение смолы, хроматографию силикагелевой колонны, отделение ионообменных смол, очистку фермента, разделение и очистку мембран, а также рекристаллизацию разделение и очистку.

Liu Huilin et al. использовали X-5 макропористую адсорбционную смолу и эфир в качестве увода для отделения и очистки гравия-каротина, получаемого клеящими красными дрожжевыми добавками RM-1, и получили гравия-каротин с чистотой 33,29%, что в 6,87 раз превышает чистоту неочищенных. Jiaoyuzhi et al. использовали обмен оксида магния колонна для изоляции и очистки грава-каротина от пшеничной муки с высоким содержанием Селена, и урожайность грава-каротина может достичь 93,37%. Xia Wei et al. использовали хроматографию столбца и рекристаллизацию для отделения и очистки грава-каротина, извлеченного из расплавленного табака или дробленого табачного экстракта, получая грава-каротин с чистотой 98% и скоростью восстановления до 80%. Танг дандан использовал β-ionone в качестве сырья для синтеза β-carotene по маршруту реакции Darzens + Wittig-Horner, а затем отделил и очистил его рекристаллизацией. Чистота грава-каротина составила 96%, как было определено HPLC, а коэффициент восстановления составил 81,58%.

Для сравнения, макропористые адсорбционные смолы имеют большую специфическую площадь поверхности, хорошую избирательность, быструю адсорбцию, мягкие условия десорбции, удобную регенерацию, длительный срок службы и экономию энергии. Ионно-обменные смолы являются возобновляемыми и относительно дешевыми, но имеют низкую избирательность. Методы хроматографии силикагеля и мембранной сепарации отличаются более высокой чистотой и более короткими производственными циклами. Метод разделения методом рекристаллизации прост в эксплуатации и позволяет экономить энергию, однако для некоторых видов грава-каротина, извлекаемого из растений, он не дает желаемых результатов.

4. Применение в кормовой промышленности

Бета-каротин является естественным пигментом that is non-toxic and harmless. It has good coloring properties and a stable and uniform color. It is a precursor of vitamin A, and its efficiency in converting to vitamin A varies greatly depending on the animal species. Beta-carotene can enhance the transmission of information between cells. Its molecule has 11 conjugated double bonds. This special structure allows it to scavenge toxic oxygen radicals and quench singlet oxygen in animals, acting as an antioxidant to cut off chain reactions. It also enhances the animal' собственный иммунитет от атак бактерий и вирусов, тем самым улучшая тело и#39. иммунная способность и повышение выживаемости животноводства; У животных каротеноиды могут препятствовать окислению липидов и защищать зародышевые клетки от повреждений, вызываемых окислительными реакциями, тем самым повышая плодородие животных и улучшая производственные показатели.

Because β-carotene is naturally yellow or orange, it is also an effective coloring agent. Adding coloring agents to feed can increase the color of livestock, poultry and aquatic animal products, such as the buttery color of milk, the color of the yolk and outer skin of poultry eggs, and the color of poultry feathers. It can also change the color of feed to stimulate the appetite of livestock and poultry. With the development of the feed industry, various feed additives are increasingly being used in compound feeds. β-carotene is one of them. As a feed additive, β-carotene can improve the growth rate of animals and the quality of meat, enhance the reproductive capacity of cows, horses and pigs, and also enhance the color and quality of fish and shrimp, and deepen the color of poultry eggs. Studies have shown that adding 50, 150 and 200 mg/kg of β-carotene to the feed of breeder chickens can increase their egg production rates by 2.15%, 2.73% and 5.97% respectively compared to the control group, and improve fertilisation and hatchability rates. The egg yolks are also darker in colour and of better quality.

Сообщается, что коровы кормят рацион без гравюры-каротина часто показывают "лихорадку без тепла" и задержки овуляции, фолликулярные кисты, снижение и задержка формирования лутея тела, что в тяжелых случаях может привести к репродуктивным расстройствам и стазу плаценты. Тем не менее, добавление грава-каротин в рационе может исправить эти симптомы. В процессе производства было установлено, что молоко группы с высоким уровнем каротина добавки был немного желтый цвет по сравнению с контрольной группы и группы с низким содержанием добавок. Это потому, что каротин сам по себе является пигментом, который легко хранится в жире. Группа с высоким уровнем каротина добавки также имели более высокую массовую концентрацию грава-каротина в молоке, что привело к изменению цвета молочного жира и привело к желтоватый цвет молока. Дополнение быков с определенным количеством β- каротин может увеличить количество сперматозоидов производится и улучшить подвижность сперматозоидов. И наоборот, недостаточное питание приведет к аномально высокому соотношению аномальных хромосом по сравнению с нормальной спермой.

Бета-каротин также может способствовать росту китайских крабов-мышей. Юань чуньян и другие скармировали бета-каротинообогащенный экспериментальный корм китайским крабам-комарам, который повысил качество китайских крабов-комаров, улучшил выживаемость культурных крабов и увеличил процент фагоцитоза клеток крови у китайских крабов-комаров, снизил активность супероксида сыворотки, значительно увеличив индекс яичников и диаметр оцита китайского краба-комара. Каротеноиды играют важную роль в созревании гонадов рыб, развитии эмбрионов и личинки. Исследования показали, что кормление обогащенным каротеноидом кормом в период размножения может существенно повлиять на качество яиц лосося и форели, а также на здоровье и выживание ранних личинков. Если содержание каротеноидов в яйцах лосося и форели составляет от 1 до 3 мг/кг, то вылупляемость яиц составляет около 60%; Если содержание каротеноидов в яйцах ниже этого уровня, то скорость вылупления яиц составляет менее 50%.

5. Перспективы на будущее

Бета-каротин имеет различные физиологические функции, в частности, он может увеличить тело и#39;s immune capacity, enhance the anti-cancer ability of the human immune system, promote animal growth, and improve reproductive capacity. It has been widely used in the development of animal feed, human health products and pharmaceuticals. Due to its effect of beautifying and nourishing the skin, it has also been well used in cosmetics. International demand for beta-carotene is also growing year by year, and the market demand for beta-carotene will be even greater in the future. It has a very promising market with good economic benefits. Researchers are studying the mechanism of action of beta-carotene, finding more natural sources of beta-carotene extraction and synthetic pathways, improving the yield and purity of beta-carotene, and finding more extensive uses for it. We hope that scholars will conduct further research.

Ссылки на статьи

[1] чжан ян, ши вэй, у янь и др. Оптимизация условий извлечения грава-каротина из порошка цветка белого лотоса [J]. Технология пищевых продуктов и ферментации, 2011, 47 (3): 68 — 71.

[2] у янмяо, цзэн юлин, се сяньглин и др. Исследование о процессе экстракции и очистки грава-каротина из низкосортного чая [J]. Китай Resources Comprehensive use, 2010, 28 (1): 21-24.

[3] яо пин, цзян сюйин, чжоу сяоцинь. Предварительное исследование по извлечению грава-каротина из шпината сверхкритическим CO2 [J]. Цзянсу сельскохозяйственная наука, 2012, 40 (12): 302 — 303.

[4] су хайцзянь, яо эрмин, лю лиленг и др. Оптимизация технологических условий извлечения каротеноидов из отходов табачных листьев с помощью сверхкритического CO2 с использованием метода поверхностной реакции [J]. Хубэй сельскохозяйственные науки, 2013, 52(3): 654-658.

[5] чжоу миньцянь, лю юнь, чэнь хунчжу. Исследование процесса ультразвукового усиленного экстракции грау-каротина из дуналиэллы салины [J]. Исследования и разработки в области продовольствия, 2011, 33 (12): 54 — 57.

[6] ма шаоцзюнь, фу хунфей, се бицзюнь и др. Исследование по извлечению каротеноидов из апельсиновой кожуры с помощью ультразвука [J]. Наука о еде, 2010, 31 (12): 39 — 44.

[7] ван ин, чэнь ху, ван чживэй. Исследование и оптимизация процесса микроволновой экстракции грава-каротина [J]. Прикладная химическая промышленность, 2011, 40(12): 2160-2162.

[8]Chen Lei, Hou Hongbo, Li Ningning. Исследование процесса извлечения грава-каротина из вольфберри. Химическая промышленность гуандуна, 2012, 39(1): 31-32.

[9] юань сюхон, ли ян, сюй яцинь. Оптимизация экстракции и очистки картеноидов морского букторна методом ферзиматики [J]. Наука и техника о продовольствии, 2010, 35 (6): 195 — 198.

[10] ван айцзюнь, конг лингфэн, ван гооксин. Оптимизация метода ферментации для производства грава-каротина [J]. Журнал шицзязхуанского профессионально-технического колледжа, 2011, 23 (6): 46 — 48.

[11] лю хуньян, синь найхон. Научно-исследовательский прогресс в области грау-каротин [J]. Солевая и химическая промышленность, 2013, 42 (1): 18-21.

[12] Chen Lei, Hou Hongbo, Li Ningning. Научно-исследовательский прогресс в производстве грава-каротина [J]. Современные сельскохозяйственные науки и технологии, 2011 (7): 362 — 363.

[13] чжао цзинь, лю и, ли цинян и др. Многочисленные нормативные элементы регулируют выражение генов путей синтеза terpene для улучшения производства грава-каротина [J]. Китайский журнал биотехнологии, 2013, 29 (1): 41-45.

[14] тан лин, у яньвэнь, оуян цзе. Прогресс в исследовании методов производства грава-каротина [J]. Исследования и разработки в области продовольствия, 2009, 30(1): 169 — 171.

[15] цзинь сяо, сюй лян. Совершенствование процесса синтеза грава-каротина [J]. Синтетическая химия, 2012, 20(4): 494 — 496.

[16] фань гисян. Синтез гравия-каротина путем редуктивного соединения [J]. Химическая техника и оборудование, 2011 (11): 21-25.

[17] лю хуэйлин, лю шао, чжоу юэхуа и др. Отделение и очистка грава-каротина, получаемого Saccharomyces cerevisiae макропористой смолой [J]. Наука о еде, 2012, 33 (6): 83 — 86.

[18] цзяо южи, жай вэйвэй. Извлечение и очистка грава-каротина из семян пшеницы с высоким содержанием Селена [J]. Наука о еде 2011, 32(22): 124 — 127.

[19] Xia Wei, Chen Xinzhi. Отделение, очистка и определение гравия-каротина в табачных листьях [J]. Хроматография, 2004, 22 (1): 54 — 56.

[20] танг дандан. Химический синтез и исследования свойств грава-каротина [D]. Цзяньнаньский университет, 2011.

[21] чжоу фан, шао цинцзюнь. Применение каротеноидов в водных кормах [J]. Кормовая промышленность, 2007 (8): 55-56.

[22] ван дурен. Прогресс в разработке и применении грау-каротина [J]. Jiangxi Feed, 2010 (5): 1-7.

[23] у чунян, лю кечун, чжао чунян. Методы производства и ход применения грау-каротина [J]. Наука шаньдун, 2006, 19 (4): 31 — 35.

[24] чжу сюлинь, че чжэньминь, сюй вэй и др. Научно-исследовательский прогресс в области физиологической функции и технологии извлечения грау-каротина [J]. Журнал университета сихуа, 2005, 24 (1): 71-75.

[25] чжан вэйцзя, чжан бин, у яли. Влияние различных уровней предложения грава-каротина на массовую концентрацию каротиноидов в крови и молочном молоке коров [J]. Китайская молочная промышленность, 2008, 36(9): 35-37.

[26] юань чуньян, цуй цинман. Влияние β-carotene на развитие яичников и иммунных показателей китайского котенка краба [J]. Морская наука, 2007, 31 (6): 25-27.