Исследование по подготовке нанолипосамального коэнзима Q10

Аннотация: коэнзим Вопрос 10(Q10), также известный как ubiquinone, может ингибировать переокисление липидов кожи, чтобы задержать старение кожи, и был добавлен в косметику в качестве важного антистареющего активного ингредиента. Тем не менее, коэнзим Q10 легко разлагаться в присутствии света, и большинство актуальных препаратов коэнзим Q10, доступных на рынке, являются обычными эмульсиями или гелями, которые отличаются низкой фотоустойчивостью и отсутствием медленного и контролируемого высвобождения свойств, и не могут эффективно осуществлять эффективность кожного фермента Q10. В этой статье мы подготовили наноструктурированный липидный носитель коэнзима Q10 (Q10- нанополипомы), оптимизировали процесс назначения и подготовки, исследовали стабильность Q10- нанополипомов и сырья Q10, а также провели экстракорпоральные и трансдермальные исследования по Q10- нанополипомам.

1.1 обзор C. C.oenzyme Q10

1.1.1 физико-химические свойства коэнзима Q10

Коэнзим Q10 (Q10), также известный как ubiquinone, химически известен как 2,3- диметил -5- метил -6- декас -isopentenylbenzoquinone. Молекулярная формула C59H90O4, а молекулярный вес 863.36. Структурная формула показана на рис. 1-1. Структурная формула показана на рис. 1-1, где Q представляет химическую группу хинона, а 10 - количество изопреноидов в хвосте. Это желтый или светлый оранжево-желтый кристаллический порошок при комнатной температуре, без запаха и вкуса, точка плавления 48,0-52,0. Он неустойчив к свету и легко распадается на красное вещество при воздействии света, в то время как более устойчив к температуре и влажности. Коэнзим Q10 - жирорастворимое витаминно-подобное вещество, растворимое в хлороформе, тетрахлорметане и бензоле, растворимое в ацетоне, нефтеродном и этиловом эфирах, незначительно растворимое в этаноле, нерастворимое в воде и метаноле из-за его длинной изосферной цепи [1].

Рис. 1-1 структурная формула коэнзима Q10

1.1.2 фармакологические эффекты и применение коэнзима Q10

Коэнзим Q10 был обнаружен в 1957 году, когда он был изолирован от митохондриальных липидов сердечной мышцы крупного рогатого скота [2]. Коэнзим Q10 широко встречается в большинстве эвкариотических организмов. Coenzyme Q10 является важным транспортером водорода в дыхательной цепи, является частью электронной транспортной цепи, способствует клеточной дыхания и имеет важное значение для производства атф. В организме человека 95% энергии вырабатывается через дыхательную цепь [3,4]. Таким образом, самые высокие уровни коэнзима Q10 обнаруживаются в органах с высоким спросом на энергию, таких как сердце, печень и почки животных, а в растениях — в основном в листьях и семенах [5,6]. Кроме того, коэнзим Q10 ускоряет клеточный метаболизм и обладает антиоксидантной активностью, ингибируя пероксидацию [7].

Коэнзим Q10 обладает фармакологическими эффектами, такими как выемка свободных радикалов [8-10], стабилизация биопцилмов для поддержания целостности кальциевого канала [11], повышение мышечного иммунитета для продления времени выживания [12], содействие обучению и памяти животных [13], а также поощрение микроциркуляции [14] и т.д. Коэнзим Q10 клинически используется при лечении сердечно-сосудистых заболеваний, таких как застойная сердечная недостаточность [15-17] и стенокардия печторис [18], профилактике кардиохирургии [19], мигрени [20], хронического гепатита [10], паркинсона и др#39; болезни s [21] и пародонтальные заболевания [22]. В настоящее время применяется при лечении сердечно-сосудистых заболеваний, таких как застойная сердечная недостаточность [15-17], стенокардия печторис [18], кардиохирургия [19], мигрень [20], хронический гепатит [10], паркинсон и др#39; болезни s[21] и пародонтальные заболевания [22].

Количество коэнзима Q10 в организме меняется с возрастом, достигая максимума в возрасте 20 лет, а затем уменьшается с возрастом, падая примерно до 42% от 20- летнего уровня в возрасте 77 лет [7], поэтому его необходимо пополнять из внешних источников. В связи с противораковыми [23,24] и антиусталостными [25] эффектами коэнзим Q10 используется в нутрицевтических препаратах и в качестве добавки в пище [26].

Кроме того, доказано, что антиоксидантные и прометаболические эффекты коэнзима Q10 полезны для кожи [27]. Coenzyme Q10 способствует переносу электронов в дыхательной цепи эпителиальных клеток и производства A/данные отсутствуют.TP, накапливает свободные радикалы и подавляет липидное пероксирование кожи, замедляя тем самым старение кожи. Коэнзим Q10 более эффективен, чем витамин е и витамин в, в питании и оживлении кожи [28]. С увеличением возраста уменьшение коэнзима Q10 в организме приведет к легкости старения кожи, образованию пигментации и морщин, поэтому все больше и больше косметических продуктов стали добавлять коэнзим Q10 [29].

1.2 прогресс в разработке актуальных составов коэнзима Q10

Китайская фармакопея включает в себя пероральные и инъекционные препараты коэнзима Q10 [1], и FDA еще не одобрил использование коэнзима Q10 в качестве лекарства для клинического лечения в США в 2004 году правительство японии впервые одобрило использование кожного фермента Q10 в продуктах по уходу за кожей. В настоящее время Coenzyme Q10 стал важным антистареющим активным ингредиентом, используемым в косметике. Известные отечественные и зарубежные косметические компании запустили серию продуктов по уходу за кожей, содержащих coenzyme Q10, такие как B.eiersdorf запущен Nivea Q10 крем для лица и глаз, Shiseido запустили Q10 увлажнивающий крем для покрытия кожи, DHC перечислил Q10 молодежь восстанавливающая красивую воду и эмулзию, в дополнение к Gossel, Mansurat, Avon, Корея Sokoban и т.д., запустили косметику, содержащую Q10, чтобы завоевать долю рынка. Кроме того, Kose, Mansurat, Avon и Korea Somang все запустили косметику, содержащую Q10, чтобы захватить долю рынка. Доля продуктов по уходу за кожей coenzyme Q10 на международном косметическом рынке растет из года в год.

В настоящее время государственное управление интеллектуальной собственности китая зарегистрировало 49 патентов на изобретения на коэнзим Q10, в Том числе 4 патента на косметику: своего рода эмульсию нано-микрокапсулы коэнзим Q10 и метод ее подготовки и применения (200710304523.5); Своего рода эмульсию, содержащую коэнзим Q10 и растительные экстракты и метод его приготовления (200710072068.0); Самоэмульсирующий состав коэнзима Q10 и метод его подготовки и применения (200910090001.9); Состав, содержащий коэнзим Q10 для лечения дерматологических заболеваний и метода его подготовки (200510079650.0). Коэнзим Q10 самоэмульсифицирующий состав и способ его подготовки и применения (200910090001.9); Состав, содержащий коэнзим Q10 для лечения кожных заболеваний и метода его приготовления (200510079650.0). В настоящее время на рынке китая имеется 45 видов импортной косметики, содержащей коэнзим Q10, утвержденный SFDA, и только 2 вида отечественной косметики, содержащей коэнзим Q10. Можно видеть, что исследования и разработки косметики coenzyme Q10 в китае все еще находятся на начальной стадии.

Коэнзим Q10 химически нестабилен и легко разлагается в присутствии света, что серьезно влияет на его эффективность в уходе за кожей и антистарению. В настоящее время большинство форм дозировки coenzyme Q10 на рынке являются обычными эмульсиями или гелями, которые оказывают слабое стабилизирующее воздействие на coenzyme Q10 и не имеют характеристик медленного и контролируемого высвобождения. Таким образом, как повысить стабильность активных ингредиентов по уходу за кожей, чтобы продлить их эффективную продолжительность действия; Содействовать эффективному проникновению активных ингредиентов по уходу за кожей в ткань кожи, с тем чтобы они могли попасть на целевую площадку по уходу за кожей через роговицу стратума кожи; А также для достижения медленного и контролируемого высвобождения на месте действия, чтобы в полной мере играть в уходе за кожей эффективность активного компонента, является коэнзим Q10 средства ухода за кожей, а также другие аналогичные косметические средства ухода за кожей в применении проблемы, которая должна быть решена в срочном порядке.

1.3 обзор исследований наноструктурированных липидных носителей

В последние десятилетия системы доставки нано-препаратов (НПР) все более глубоко изучаются и широко применяются. Наноэмульсии (NE), липосом, наночастицы кубической фазы (Cubosome), твердые липидные наночастицы (SLN), наноструктурированные липидные носители (наноструктурированные липидные носители, нанополипомы) и наноструктурированные липидные носители (нанополипомы) широко используются в НРД. Твердые липидные наночастицы (SLN), наноструктурированные липидные носители (нанополипомы) и другие системы транспортировки наркотиков могут использоваться для трансдермальной доставки лекарственных средств и косметических применений [30-34].

СЛН являются твердыми липидами, используемыми в качестве носителей инкапсулированных лекарственных средств, которые являются твердыми при комнатной температуре, снижая явление разделения с внешней водной фазы и значительно повышая стабильность лекарственных средств. Тем не менее, SLN подготовлен из одного или нескольких видов твердых липидов находятся в высокой энергии α or β&#- 39; Конфигурация на ранней стадии подготовки и в процессе длительного хранения трансформируется в низкоэнергетическую и более упорядоченную конфигурацию, что приводит к уменьшению дефектной решетки и трансформации высокоупорядоченного состояния, что приведет к утечке препарата. Кроме того, пропускная способность SLN не является высокой, а содержание воды в водной дисперсии-высоким [35].

Нанополипомы были разработаны на базе SLN. Он добавляет жидкие липиды к твердым липидам, которые также могут оставаться твердыми при комнатной температуре [36,37]. Добавление жидких липидов нарушает совершенство решетки, образуя, таким образом, множество дефектных решеток, и лекарства могут содержаться в межлипидных цепях или дефектных решетках, поэтому пропускная способность нанолипидов выше, чем у SLNs [38]. Интродукция жидких липидов позволяет избежать утечки наркотиков из-за перекомпоновки решетки, что значительно повышает стабильность загрузки наркотиков [39]. Кроме того, поскольку нанополипомы все еще находятся в твердом состоянии, они могут преодолеть недостатки SLN, унаследовать преимущества SLN, такие как медленный и контролируемый выпуск. Нанополипомы могут применяться к оральным, инъецируемым, трансдермальным, глазным, мукозальным и другим способам доставки наркотиков, широко изучались и применялись, а метод приготовления пригоден для масштабного производства, что очень перспективно для индустриализации [40].

1.3.1 липидные материалы для подготовки нанополипомов

Твердые липиды для приготовления нанополипомов такие же, как SLN, такие как глицерол моностеарат, глицерол тристеарат, глицерол тристеарат, жирные кислоты, такие как стеарическая кислота, холестерин, китообразный воск и т.д. Выбор жидких липидов может улучшить загрузку лекарственных средств и стабильность нанополипомов. Разумный отбор жидких липидов может повысить пропускную способность и стабильность нанополипомов. При выборе жидких липидов необходимо учитывать растворимость препарата в них и родство жидких липидов с твердыми липидами. Широко используемые жидкие липиды включают каприловый триглицерид, олеиновую кислоту, изопропилпалмитат, витамин е, изопропилмириат, соевое масло и так далее. Смешанные липидные материалы могут также использоваться для увеличения дефектов решетки и, таким образом, улучшения загрузки и стабильности лекарственных средств [41].

1.3.2 подготовка липосомных наночастиц

Нанополипомы разрабатываются на основе SLN, поэтому методы подготовки нанополипомов те же, что и методы подготовки SLN, такие как эмульсификация под высоким давлением, ультразвук, микроэмульсия, рассеивание растворителей и эмульсификация расплава [42]. Кроме того, недавно был разработан высокоскоростной микроджет. Микроджет имеет букву "Y" Или "з" Форма канава внутри и использует высокие силы сдвига и удара, возникающие в результате столкновения жидкостей внутри камеры, для пульверизации частиц вплоть до шкалы нанометра. Давление высокоскоростной микроструи выше, чем у однородного генератора высокого давления, поэтому наночастицы меньше по размеру, меньше переменных по размеру и более стабильны и однородны. Кроме того, избегается использование органических растворителей, и время подготовки является коротким, что подходит для промышленного массового производства [43].

1.3.3 преимущества нанополипомов для косметических целей

Использование технологии carrier для повышения стабильности активных ингредиентов по уходу за кожей и достижения длительного и медленного высвобождения на поверхности кожи является горячей темой косметических исследований. Наиболее исследованные носители включают микроэмульсии, полимерные микросферы/микрокапсулы, липосомы, твердые липидные наночастицы и наноструктурированные липидные носители.

Микроэмульсия представляет собой систему O/W с четким внешним видом, термодинамической и кинетической устойчивостью и подходит для различных форм дозировки, которая является идеальным носителем. Однако для стабилизации системы необходимо большое количество поверхностно-активного вещества, которое обладает определенной токсичностью и раздражением, что может вызвать некоторые неблагоприятные реакции на кожу, поэтому оно не подходит для косметического применения [44]. Кроме того, полимерные микросферы/микрокапсулы также имеют потенциальные проблемы биобезопасности носителей материалов [45].

Липосом представляет собой структуру везикля, состоящую из фосфолипидов, холестерина и т.д. Каждый слой является липидным билайером с размером частиц от 25 до 1000 нм, и липосом может иметь многослойную структуру. Поскольку фосфолипиды имеют гидрофифильные головки и гидрофобные хвосты, липосомы являются амфифильными, и водорастворимые препараты могут быть инкапсулированы в их центрах и между мембранами, в то время как мембраны билайеров могут быть загружены жирорастворимыми веществами, что имеет хорошую физиологическую совместимость и пассивное целевое назначение. Липосом когда-то был горячей темой косметических исследований, и диор был первым, кто ввел липосом-содержащая косметика в 1986 году. Однако из-за текучести мембраны липосом имеет недостатки, связанные с низкой скоростью инкапсуляции, легкой утечкой, слабой стабильностью хранения, неудовлетворительной задержкой и контролируемым высвобождением и непригодностью для промышленного крупномасштабного производства, что ограничивает его применение [32].

Нанополипомы обеспечивают преимущества вышеупомянутых систем доставки наркотиков и устраняют их недостатки. Они хорошо подходят для косметических применений, в частности:

(1) улучшение Стабильность в эксплуатации

Нанополипомы тверды при комнатной температуре, и нет распределения активных молекул между наночастицами и внешней водной фазой, поэтому стабильность нестабильных активных ингредиентов может быть улучшена. Кроме того, твердая липидная инкапсуляция может предотвратить деградацию активных веществ светом и кислородом, тем самым повышая стабильность [46].

(2) Медленные и контролируемые выбросы

Нанолипидные носители медленно и контролируемо высвобождаются. Мюллер и др. [47] пришли к выводу, что SLN, подготовленный путем термогомогенизации, имеет два процесса высвобождения. Препарат, обогащенный в скорлупе SLN, сначала выпускается внезапно, а затем инкапсулированный в скорлупе препарат выпускается медленно. Teeranachaideekul et al [48] также пришли к выводу о Том, что нанополипомы имеют те же характеристики высвобождения. Первоначальный выброс может увеличить концентрацию активных ингредиентов на коже за короткий период времени и способствовать их проникновение в кожу, в то время как последующий медленный выброс может постоянно высвобождать активные вещества для поддержания эффективной концентрации, чтобы питать кожу в течение длительного периода времени и лучше выполнять эффект ухода за кожей, что является более идеальным поведением высвобождения для косметики.

(3) целеопределение кожи

Липосомальные нанополипомы являются обезжиренными и могут способствовать прохождению активных ингредиентов через роговицу страта в эпидермис и их удержанию в более глубоких клетках эпидермис, тем самым оказывая влияние на уход за кожей [49]. Роговица stratum является основным препятствием для входа активных ингредиентов в кожу, и Chen [50] et al. обнаружили, что SLN может войти эпидермиса через интерстициальное пространство роговицы stratum и волосатой фолликул каналов. Кроме того, эффект медленного высвобождения SLN/ нанолипосом предотвращает слишком высокую концентрацию препарата, чтобы пройти через кожу в системную циркуляцию, так что активные ингредиенты могут оставаться в эпидермисе в течение длительного времени [51].

(4) физиологическая совместимость

Липидные материалы, используемые при подготовке нанополипомов, физиологически совместимы с липидами с хорошей плотностью к коже, что может способствовать проникновение активных ингредиентов в кожу и эффективно действовать на более глубокие клетки кожи, липиды являются биологически разлагаемыми, безопасными и нетоксичными [33].

(5) эффект закрытия

Исследования показали, что наночастицы размером менее 400 нм обладают окклизивным действием, которое может образовывать закрытую пленку на поверхности кожи, замедлять испарение кожной воды, способствовать усвоению активных ингредиентов при уходе за кожей и обладать хорошими увлажняющими свойствами. Чем меньше размер наночастиц и чем выше концентрация, тем сильнее окклазивный эффект [52].

(6) Эффект рассеивания света

Наночастицы с высокой кристалличностью обладают эффектом рассеивания света, который может отражать ультрафиолетовые лучи, защищать кожу от повреждений и замедлять фотостарение кожи [47]. В настоящее время косметика nanosunscreen, содержащая СЛН и нанополипомы, продается в европе и соединенных штатах.

(7) высокая пропускная способность и хорошая стабильность хранения наркотиков

Нанополипомы, содержащие жидкие липиды, имеют более высокую пропускную способность по сравнению с СЛН и липосомами и стабильны и менее подвержены утечке наркотиков.

2 исследования о процессе назначения и подготовки нанолипидов Q10

2.1 введение 1

Наноструктурированные липидные носители — это новое поколение липидных наноносителей, разработанных на основе твердых липидных наночастиц. Нанополипомы не только имеют высокую пропускную способность, но и обладают хорошими свойствами медленного и контролируемого высвобождения, которые могут стабилизировать активное вещество, а также имеют эффект закрытия кожи, который очень подходит для косметических применений [33].

Коэнзим Q10 - жирорастворимое витаминное вещество желтого-оранжево-желтого кристаллического порошка; Без запаха и вкуса; Легко разлагается светом. Он растворим в трихлорметане, бензоле, ацетоне, эфире или нефтяном эфире, очень незначительно растворим в этаноле и нерастворим в воде. Коэнзим Q10 является важным транспортером водорода в клеточной дыхательной цепи, активизируя клеточную вентиляцию и ускоряя производство атф. Q10 присутствует в большинстве тканей человека, при этом самые высокие уровни обнаружены в печени, сердце, почках и поджелудочной железе. Доказано, что коэнзим Q10 проникает глубоко в кожу и может использоваться в косметике для содействия метаболизму кожи и ингибирования липидного пероксирования. Однако из-за нестабильной химической природы легко разлагаться в присутствии света, что серьезно влияет на его эффективность в уходе за кожей [7].

В этой статье,Q10 нанолипидыБыли подготовлены с использованием физиологически совместимых липидов для повышения фотоустойчивости Q10, содействия эффективному проникновению активных ингредиентов для ухода за кожей в ткань кожи и обеспечения полной эффективности ухода за кожей Q10.

В этой главе исследуется процесс назначения и подготовки нанолипидов Q10. Конструкция ответной поверхности использовалась для отбора нанолипидов Q10 с использованием размера частиц в качестве оценочного индекса, а процесс подготовки был оптимизирован путем изучения воздействия высокой скорости и времени сдвига, высокого давления микроструй высокого давления и числа циклов на размер частиц. Подготовленные нанолипиды Q10 характеризовались теа, DSC и XRD.

2.2 материалы и инструменты

2.2.1 материалы

Коэнзим Q10 сырье препарат (Q10, фармацевтический класс, синьчанг фармацевтической фабрики, чжэцзян фармацевтической Co;)

Labrafac Lipophile WL1349 (MCT, Caprylic Capric Triglyceride, Gattefosse, Франция); Tego Care 450 (полиглицерил -3, дистерат метилглюкозы, голдшмидт, Германия);

PreciroLATO-5 (ATO-5, смесь моно -, диглицеридов и триглицеридов стеарической и пальмитной кислот, гаттефосс, Франция);

Безводный этанол (аналитически чистый, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.); Все остальные являются коммерчески доступными аналитически чистыми или хроматографически чистыми реагентами.

2.2.2 измерительные приборы

Zetasizer лазерный измельчитель частиц (Nano-ZS90, Malvern, UK);

Циркуляционный вакуумный насос (SHZ-D Ⅲ, Gongyi IYUHUA Instrument Co., Ltd.); M-100PCE high pressure micro-jet (Microfluidics, США);

Магнитный преобразователь постоянного температурного нагрева типа коллектора (DF-101S, Zhengzhou Great Wall Science, Industry and Trade Co., Ltd.); Роторный испаритель (ре52, шанхайский биохимический приборочный завод < < яронг > >);

Tecnai G2 20 transmission electron microscope (FEI, Нидерланды); Электронный баланс (Beijing Sartorius Instrument System Co., Ltd.);

High Shear смешивание и Эмульсирующая машина (BME100L, Shanghai Weiyu Mechanical &. Электротехническая производственная Co;

Система Agilent 1100 HPLC: G1310A pump, G1314A UV detector, G1326-AA105 autosampler, рабочая станция Agilent Chromatography (агилент, США);

Хроматографическая колонка: элитная ODS2 C18 колонка 250 мм графы 4,6 мм гиперсиля (размер частиц 5 графы); Система свободной сушки лабконко 6л (лабконко, США);

Ультразвуковой пульверизатор клеток (JY98-III, шанхайский институт биотехнологии им. Синьжи, Китай); Ультра-фильтрационная труба (30 кда, миллипор, США);

DSC-7 дифференциальный теплоанализатор (перкин-Элмер, США);

D/MAX III B порошковый дифрактометр (" ригаку корпорейшн ", Япония);

0.45 гравюрные микропористые мембраны и мембранные фильтры (шанхайский завод по производству очищающих материалов Xingya) и т.д.

2.3 экспериментальные методы и результаты

2.3.1 физико-химические свойства коэнзима Q10 api

Коэнзим Q10 - желтый по отношению к оранжево-желтому кристаллическому порошку; Без запаха и вкуса; Легко разлагается светом. Он растворим в трихлорметане, бензоле, ацетоне, эфире или нефтяном эфире, очень незначительно растворим в этаноле и нерастворим в воде. Температура плавления 48-52 градуса [1].

2.3.2 конструкция и Оптимизация предписаний

2.3.2.1 отбор липидов

Размер частиц, скорость инкапсуляции и пропускная способность наноструктурированных липидных носителей сильно зависят от липидов. Нанополипомы были подготовлены с использованием лабрача липофила WL 1349 (MCT) в качестве жидкого липида, тего Care 450 в качестве поверхностно-активного вещества, а также ато -5 и гексадеканоидного кислотного гексадецилового эфира (кадмиегексадеканоата), который чаще используется в косметической промышленности в качестве твердого липида, для сравнения различий в размере частиц, пди и смысле применения.

Вес 6,00 г твердого липида, 1,65 г MCT, 2,00 г Tego уход 450 и 2,80 г Coenzyme Q10. Липиды и препараты растворены в 10 мл безводного этанола и перенесены в грушевидную фляжку. Баллон был тщательно вымыт соответствующим количеством безводного этанола и перенесен на грушевидную фляжку. Баллон был тщательно вымыт соответствующим количеством безводного этанола и перенесен на грушевидную фляжку. Кроме того, принять предписанное количество Tego уход 450 и добавить его к дистиллированной воде, и нагреть его в водяной ванне на 85 ℃ для производства водной фазы. Водяная фаза была залита в нефтяную фазу, и обе фазы были смешаны хорошо магнитным колебанием при 85℃ в течение получаса, а затем продукт был распространен дважды с высокоскоростным эмульгатором сдвига в 6000 об/мин в течение 4 мин и микроструей высокого давления в 1200 бар. Результаты показаны в таблице 2-1:

Таблица 2-1 различия в размере частиц, пди и смысле использования нанополипомов, полученных из различных твердых липидов.

Размер частиц наночастиц, изготовленных из твердого липида ATO-5, оказался больше, чем частицы, изготовленные из твердого липида гексадециновой кислоты, в тех же условиях, и ощущение наночастиц было плохим, поэтому гексадециновая кислота была выбрана в качестве основного материала нанополипомов q10.

2.3.2.2 конструкция предписаний

Согласно принципу экспериментальной конструкции Box-Benhnken, три фактора, которые оказывают большое влияние на препарат, а именно гексадециловый кислотный гексадециловый эфир, МКТ, и дозировка гексадециллового эфира тего 450, были установлены в диапазоне 3,00-6,00 для гексадециллового эфира, 0,30-3,00 для МКТ и 1,00-3,00 для тего 450, согласно эталону [48]. 10 ч.00 м., MCT 10 ч.30 м.-10 ч.00 м., Tego care 450 10 ч.00 м.-10 ч.00 м., и был разработан трехфакторный, трехуровневый эксперимент по анализу поверхности чувствительности. Предписание в отношении конструкции приводится в таблице 2-2.

Таблица 2-2 предписания основаны на принципе "бокс-беннкен"

2.3.2.3 размер частиц и возможное определение Zeta

Водяная дисперсия Q10-NCL разбавлялась в 300 раз сверхчистой водой, а размер частиц и пди водной дисперсии q10 - нанолипосом измерялись с помощью лазерного прибора для определения размера частиц под углом 90 ° и при температуре 25 ° и повторялись 11 раз. Соответствующее количество водной дисперсии q10 - нанолипосом было добавлено в u-образную электрофорезную клетку, и проводимость была скорректирована более чем на 50 градусов/см с солью 0,9%, а потенциал зетов был измерен при температуре 25 градусов. Потенциал зетов был измерен при температуре 25 градусов. Изменения размера частиц измерялись в день подготовки через 10 дней и через 40 дней, и полученные результаты показаны в таблице 2-3.

Таблица 2-3 изменения размера частиц, пди, потенциала зетов и размера частиц для различных предписаний

2.3.2.4 определение пропускной способности лекарственных средств

Коэнзим Q10 незначительно растворим в этаноле, в то время как липидные материалы для подготовки наночастиц растворимы в этаноле, поэтому этанол был выбран в качестве эмульгатора. 0,1 г водной дисперсии q10 - нанолипосом всасывается в объемную колбу объемом 50 мл, и объем фиксируется этанолом. После полного растворения flocculent осадка ультразвуком в течение 20 мин, пропускная способность препарата была определена HPLC с использованием октадецилсиланового силикатного геля в качестве наполнителя, мобильная фаза: метанол: этанол =3:7, скорость потока 1 мл/мин, длина волны обнаружения 275 нм, а объем инжекции 20 гравюр.

2.3.2.5 определение скорости инкапсуляции

Коэффициент инкапсуляции q10 - нанопосом Был определен ультра-фильтрацией. Была использована ультра-фильтрационная труба 30 кда, 1 мл Q10- нанолипосомной водной дисперсии и центрифуга при 5000 об/мин в течение 30 мин. содержание Q10 в супернатанте было определено методом HPLC, а скорость инкапсуляции была рассчитана по следующей формуле, а результаты скорости инкапсуляции и пропускной способности препарата показаны в таблице 2-4.

Таблица 2-4 результаты измерения скорости инкапсуляции и загрузки лекарственных средств различными предписаниями

2.3.2.6 анализ поверхности срабатывания

Из таблицы 2-3 и таблицы 2-4 видно, что между коэффициентами инкапсуляции, пропускной способностью лекарственных средств и изменением размера частиц в различных предписаниях в разное время не существует больших различий. Поэтому мы выбрали размер частиц в качестве зависимой переменной и провели анализ поверхности реакции с помощью эксперта-конструктора, результаты которого показаны в таблице 2-5.

Таблица 2-5 результаты анализа чувствительности поверхности

Где A-количество гексадекановой кислоты гексадецилэфира, B-количество МКТ, а C-количество тего Care 450.

Как показано в таблице 2-5, значение f модели составляет 6,96, значение p- 0,009, что означает, что модель изготовлена со значительной разницей и лишь 0,09% этого значения может быть получено в результате воздействия внешних условий. Значение p менее 0,05 означает, что влияние этого пункта на результаты является значительным, а более 0,10 означает, что оно не является значительным, поэтому A, C, C2 являются важными влиятельными факторами. Значение f неправильного термина составляет 1,75, а значение p- 0,2952, что означает, что неправильный термин не является значительным и что он является высоким. На рис. 2-1 показана поверхность чувствительности размера частиц при взаимодействии различных факторов воздействия.

Производные поверхностные уравнения чувствительности:

Размер зерна = 188,82401 + 9,08800 x A + 4,42116 x B - 57,33553 x C - 1,15834 x A x

B-4.89541×A×C-6.01464×B ×C+0.58637×A2+5.26515×B2+19.02422×C2

Гипотетически оптимальным рецептом был: гексадециловый кислотный гексадециловый эфир 3,00%, МКТ 1,09%, тего Care 450 2,07%, Q10 2,80%, вода 91,04%, а гипотетическая частица размером 147,5 нм.

2.3.3 оптимизация процесса подготовки

2.3.3.1 выбор процесса подготовки

Существует множество методов подготовки нанополипомов, таких как эмульсификация при высоком давлении, звукоизоляция, микроэмульсификация, рассеивание растворителей и эмульсификация расплава [42]. Тонкопленочное ультразвуковое исследование было предложено использовать для подготовки небольшого количества липосом ввиду его простоты и пригодности для производства небольших доз. Однако было установлено, что количество используемых липидов является слишком большим и липиды осаждаются во время звукового процесса, поэтому данный метод был заменен на микроструйную обработку под высоким давлением. Наночастицы, подготовленные методом микроструи высокого давления, имели меньшие размеры, а различия в размерах частиц были незначительными и стабильными.

2.3.3.2 выбор температуры подготовки

Точка плавления гексадециловой кислоты гексадецилового эфира находится между 52-56 градиентом, а точка плавления коэнзима Q10 - между 48-52 градиентом, чтобы сделать препарат и липидного смешивания температура приготовления должна быть выше, чем температура плавления 20-30 градиентом, поэтому 85 градиентом был выбран в качестве температуры приготовления.

2.3.3.3 выбор методов подготовки фазы масла

Для подготовки нефтяного этапа использовались два метода:

① ℃ the solid lipid, liquid lipid and coenzyme Q10, add ethanol and stir, pour into a pear- образная фляга at 75 for 20 min, wait until the ethanol completely испаряется, а затем заливается в водную фазу смешивания.

② ℃ solid lipids, liquid lipids и coenzyme Q10 85 water bath for 30min, wait until the lipids and coenzyme Q10 completely melted into the water phase.

Сравнение двух методов подготовки фазы масла, масляная пленка, образовавшаяся после подвески и испарения в первом методе, не была однородной, некоторые твердые вещества прилипли к стенке колбы, а некоторые вещества остались в колбе после растворения с этанолом в колбе, а затем переноса в колбу, что затруднило обеспечение точности, особенно для небольшого количества МКТ. Поскольку точка плавления coenzyme Q10 находится между 48-52 ℃ и устойчива к высокой температуре, а точка плавления гексадециловой кислоты гексадецилэфира находится между 52-56 ℃, он может быть расплавлен после 30 мин водяной ванны при 85 ℃. Второй метод является более простым и точным, поэтому второй метод был выбран для подготовки фазы масла.

2.3.3.4 выбор высокой скорости и времени сдвига

Скорость вращения и время высокого сдвига влияют на размер частиц и пди производимых наночастиц. 4 скорости вращения 5000 об/мин, 6000 об/мин, 7000 об/мин и 8000 об/мин были выбраны для сдвига наночастиц на 1 мин, 2 мин, 3 мин, 4 мин, 5 мин, 8 мин, 12 мин и 15 мин соответственно для сравнения изменений размера частиц. Результаты показаны на рис. 2-2.

Результаты экспериментов показывают, что чем больше высокая скорость сдвига, тем меньше размер частиц. Для повышения эффективности подготовки была выбрана высокая скорость сдвига 8000 об/мин. Из данных на рис. 2-2 видно, что длительность времени при 8000 об. / мин не сильно влияет на размер частиц, поэтому время сдвига было выбрано как 1 мин.

2.3.3.5 выбор давления микроструи высокого давления и число циклов

При подготовке наноструктурированных липидных носителей давление и количество циклов высокоскоростных микроструй оказывают большое влияние на размер частиц и пди производимых наночастиц. Давление микроструи высокого давления было выбрано на уровне 1000 бар, 1200 бар и 1600 бар в течение 1, 2, 3, 4 и 5 циклов, соответственно, для изучения воздействия на размер частиц и определения оптимальных условий процесса. Результаты показаны на рис. 2-3.

Чем выше давление высокоскоростного микроструи, тем меньше размер частиц. Однако избыточное давление может привести к повреждению самого прибора, и наночастицы, приготовленные на 1600 бар, были меньше наночастиц, приготовленных на 1200 бар для того же числа циклов, но разница была незначительной. Для продления срока службы прибора было выбрано 1200 бар на 3 цикла.

Окончательными условиями процесса стали водяная ванна-ажиотация водной и нефтяной фаз на 85 градусов в течение 20 мин, высокая скорость сдвига 8000 об. / мин в течение 1 мин и микроструя высокого давления на 1200 бар в течение 3 циклов. Q10- нанолипосом В результате этого процесса были измерены размер частиц, пди, потенциал зетов, скорость инкапсуляции и нагрузка на лекарственный препарат, а измеренный размер частиц составил (151,7 грану2,31) нм (рис. 2-4), что близко к прогнозируемому размеру, что указывает на точность уравнения поверхности реакции и успешность оптимизации. Потенциал зетов был (-44.1±1.68) mV (рис. 2-5). Чем выше потенциал зетов, тем больше отталкивание заряда между частицами и более стабильным составом. Уровень инкапсуляции составил 100%, а загрузка препарата — 2,51%.

2.3.4 передача электронной микроскопии (теа) q10 - нанопоросомов

Микроскопическая морфология q10 - нанополипомов Был замечен теа. Только что приготовленные q10 - нанопосом Были разбавлены 300 раз сверхчистой водой, ультразвуковой разбросанной в течение 20 мин, и 1 капль был принят на медную сетку, окрашены 1% фосфотунцевой кислотой раствор, сухая при комнатной температуре, а затем наблюдалась под теа. Фотографии показаны на рис. 2-6.

2.3.4 передача электронной микроскопии (теа) q10 - нанопоросомов

Микроскопическая морфология q10 - нанополипомов Был замечен теа. Только что приготовленные q10 - нанопосом Были разбавлены 300 раз сверхчистой водой, ультразвуковой разбросанной в течение 20 мин, и 1 капль был принят на медную сетку, окрашены 1% фосфотунцевой кислотой раствор, сухая при комнатной температуре, а затем наблюдалась под теа. Фотографии показаны на рис. 2-6.

2.3.5 изучение физического состояния Q10 в Q10- нанопосомах

2.3.5.1 дифференциальный сканирующий калориметрический анализ (DSC)

Лиофилизированный порошок гексадекановой кислоты гексадецилового эфира Q10, физической смеси и Q10- нанолитосома был помещен в 40 - гравитационную алюминиевую чашку и протестирован под защитой аргона. Расход газа составил 50 мл/мин, скорость сканирования — 5 градусов/мин, а диапазон температуры сканирования — 0 градусов -90 градусов. Точность температуры и энергии прибора DSC была калибрована с использованием индиума в качестве стандартного материала. Результаты показаны на рис. 2-7.

Пики теплопоглощения гексадекановой кислоты гексадецилэфира (53,43 гранул) и коэнзима Q10 (55,33 гранул) появились в физической смеси на уровне 45,88 гранул и 52,45 гранул в соответствии с отношением рецепта, а лиофилированный порошок нанолипосом Q10 показал только Один пик абсорбции (49,59 гранул). Предполагается, что взаимодействие липидов и наночастиц привело к изменению физической фазы, а интенсивность пиков теплопоглощения значительно снизилась, что указывает на формирование новой физической фазы.

2.3.5.2 анализ дифракции рентгеновского порошка (XRD)

Ku-k α radiation был использован при напряжении 40 кв, трубчатый ток 50 ма, диапазон сканирования 3o - 65o(2θ), и угол сканирования 10o(2θ)/min, и результаты показаны на рис. 2-8.

Как показано на рис. 2-8, диффурационные пики гексадеконосановой кислоты гексадецилэфира являются значительными в физической смеси, однако пиковые формы пустых нанополипомов и нанолипидов Q10 практически одинаковы, и нет явных диффурационных пиков Q10, и все диффурационные пики значительно ослаблены, что указывает на то, что Q10 инкапсулируется в нанополипомах и существует в аморфном состоянии, что согласуется с результатами DSC.

В ходе этого эксперимента микроскопическая морфология нанолипидов Q10 наблюдалась в рамках проекта тем, и полученные в электронном микроскопе изображения показали, что наночастицы в водной дисперсии нанолипидов Q10 являются круглой или эллипсоидальной, а размер частиц находится в диапазоне 100 нм, что меньше значения, измеренного лазерным измельчителем частиц, и предполагается, что это связано с гидрационным слоем на поверхности наночастиц. Результаты анализа DSC и XRD показали, что Q10 был инкапсулирован в нанолипидах в аморфном состоянии и существовал в аморфном состоянии. Анализ DSC и XRD показал, что Q10 инкапсулирован в нанопосом и существует в аморфном состоянии.

Справочные материалы:

[1] китайская фармакопеевая комиссия.  Фармакопея людей и#39; китайская республика (издание 2010 года), Пекин: Chemical Industry Press, 2010.

[2] крейн F, Hatefi Y, Lester R и др. Изоляция хинона от говяжьего сердца mitochondria[J]. Biochimica et biohysica Acta, 1957, 25 (1): 220-221

[3] Ernster L, Dallner G. биохимические, физиологические и медицинские аспекты функции убихинона [J]. Biochimica et biohysica Acta, 1995, 1271 (1): 195-204

[4] сан яншуанг, вэй минджи. Биохимический механизм и клиническое применение коэнзима Q10[J].  China Medical Journal, 2006, 7: 371 — 373

[5] аберг ф, аппелквист эль, даллнер г и др. Распространение и редокс состояния бихинонов в тканях крыс и человека [J]. Архивы биохимии и биофизики, 1992 год, 295 (2): 230- 234

[6] Shindo Y, Witt E, Han D и др. Энзимические и неэнзимические антиоксиданты в эпидермисе и дермисе кожи человека [J]. The Journal of investigation dermatology, 1994, 102 (1): 122-124

[7] кран FL. Биохимические функции коэнзима Q10 [J]. Журнал американского колледжа питания, 2001, 20: 591-598

[8] ян сюэй, су янган, чэнь хаочжу. Фармакология и клиническое применение коэнзима Q10[J]. Китайский журнал фармакологии, 1994, 10(2): 88-91

[9] сунь сяофан, хан янмэй, ду цзинду и др. Антилипидное пероксирование coenzyme Q10 у стареющих мышей [J].  Китайский журнал практической китайской и западной медицины, 2004, 4(17): 3112-3113

[10] цянь сюэ, ван цзуцяо, Коран пин и др. Фармакология и применение коэнзима Q10[J]. Еда и наркотики, 2006, 8:16-19

[11] ван чуньлин. Применение коэнзима Q10 при лечении заболеваний сердца [J]. Новая медицина, 1991, 22 (7): 377-379

[12] сюй цзя, Мэн цзя, фу цзяньюнь и др. Роль коэнзима Q10 в иммуномодуляции [J].  China Health Inspection Journal, 2007,17: 222 — 224

[13] яо вэн-бинг, ван хуа, ши цзюнь и др. Исследование влияния coenzyme Q10 на изучение памяти животных [J].  Журнал китайского фармацевтического университета, 2004, 35(1): 73-76

[14] чжан гопин, ким хюймин, мори масао и др. Экспериментальное исследование по улучшению микроциркуляционных нарушений коэнзимом Q10 у крыс [J].  Тираж китая, 2005, 9(1): 33-35

[15] яо шуюань, жэнь цзянхуа, као маойин. Защитное воздействие coenzyme Q10 на миокардий ischemia- perfusion [J]. Журнал уханского университета, 2004, 25(1): 34 — 37

[16] Tran M, Mitchell TM, Kennedy VT, et a1. Роль коэнзима Ql0 в хронической сердечной недостаточности, стенокардии и гипертонии [J]. Фармакотерапия, 2001, 21(7): 797-806

[17] сюй бао-фэн, чжи вэй-хуа. Лечение тугоплавной сердечной недостаточности при легочных заболеваниях с помощью вазодилатора coenzyme Q10[J]. Huaxia Medical Science, 2000, 13(4): 423-425

[18] ма цзяньфан, лю сяопэн, ли даньшэн и др. Влияние коэнзима Q10 на свободные радикалы у пожилых пациентов с ишемической болезнью сердца [J]. Журнал сердечно-сосудистой реабилитационной медицины, 2000, 9(5): 52-53

[19] джиджибхой ф, Кит м, фриман м и а1. Nutritional supplementation with Myo Vive replete essential cardiac myocyte nutrients and reduces left ventricular size in patients with left ventricular dysfunction[J]. American Heart Journal, 2002, 143(6): 1092-1100

[20] Sandor PS, Di Clemente L, Coppola G и др. Эффективность коэнзима Q10 в профилактике мигрени: рандомизированное контролируемое испытание [J]. Неврология, 2005, 64 (4): 713 — 5

[21] чжао чунью, чжао баодун, ван яцзюнь и др. Роль coenzyme Q10 в Parkinson' болезнь s [J].  Китайский журнал неврологии, 2003, 36 (4): 314

[22] mкри JT, Hanioka T, Shizukuishi S, et al. Терапия коэнзимом Q10 для пациентов с пародонтальным заболеванием [J]. Journal of public health dentistry, 1993, 43 (5): 659-666

[23] портакал о, озкая о, боза б и а1. Статус коэнзима Ql0 и антиоксиданта в тканях пациентов с раком молочной железы [J]. Клиническая биохимия, 2000, 33(4): 279 — 284

[24] локвуд к, месегарард с, у зу. Видимая частичная ремиссия рака в группе риска hJ sh [J]. Молекулярные аспекты медицины, 1994, 15: 231 — 240

[25] ван циронг, гу бо, ян зеи и др. Влияние антиоксидантных добавок на физическую функцию бегунов на средние расстояния [J]. Китайский журнал спортивной медицины, 2005, 24(1): 125

[26] чжу цинь, ся шуцинь, сюй шиин. Антиусталостное действие коэнзима Q10 нано-опомо-укрепленных спортивных напитков у мышей [J]. Продукты питания и оборудование, 2007, 23: 44 — 48

[27] у. хоппе, дж. Бергеманн, в. димбек и др. Coenzyme Q10, кожный антиоксидант и energizer [J]. Биофакторы, 1999: 371 — 378

[28] чжоу цюань, тянь госян. Применение коэнзима Q10 в дерматологии и косметике [J]. Медицина геральд, 1997,16:32-33

[29] е цин, чжан бинхон. Свойства coenzyme Q10 и его применение в косметике [J]. Вкус и аромат косметики, 1999: 32-34

[30] Mason TG, Wilking J, Meleson K, et al. Наноэмульсии: образование, структура и физические свойства [J]. Журнал физики: конденсированная материя, 2006, 18: 635

[31] севц г. липид везиклол и другие коллоиды как носители лекарственных средств на коже [J]. Углубленные обзоры хода осуществления программ, 2004 год, 56: 675-711

[32] вице-президент торчилин. Последние достижения липосом в качестве фармацевтических перевозчиков [J]. Nature Reviews Drug Discovery, 2005, 4: 145 — 160

[33] Pardeike J, Hommoss A, Muller RH. Липидные наночастицы (SLN, NLC) в косметических и фармацевтических кожных изделиях [J]. Международный журнал фармацевтики, 2009, 366: 170 — 184

[34] Shah JC, Sadhale Y, Chilukuri DM. Гели кубической фазы как системы доставки лекарств [J]. Углубленные обзоры освоения наркотиков, 2001 год, 47: 229-250