Как синтезировать гинкго извлечь гинкголическую кислоту?

Гинкго билоба л- да. является старейшим живым видом деревьев на планете и известен как "золотое живое ископаемое". Как уникальная экономическая гимнастика в китае, она имеет несколько ценностей, как еда (белые фрукты), медицина (листья и белые фрукты) и декоративные растения. Ginkgo орехи (семена) являются известным здорового сушеные фрукты в китае. Как пища с лекарственными свойствами с высокой питательной ценностью, гинкголиды, содержащиеся в ней, являются потенциальными активными ингредиентами против вируса 2019-nCoV [1].Листья гинкго билобы богаты флавоноидами и лактонами.Экстракция гинкго билобы (EGB) с ацетонной водой в качестве экстракционного агента может дополнительно обогатить оба активных вещества для эффективного лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний [2]. Гинкго билоба — всемирно известное декоративное дерево для ландшафтного дизайна с уникальной формой листа, золотым цветом листа и прямоугольной формой дерева. В настоящее время гинкго широко развит в фармацевтической, пищевой, косметической, бонсайской и деревообрабатывающей промышленности и является одним из ключевых экономических видов деревьев для нынешнего и будущего оживления сельской экономики и строительства прекрасного китая.

С 1970 - х годов#39; ресурсы компании s ginkgo быстро росли, и существующие ресурсы составляют более 80% всего мира#39; с итого.Деревья гинкго распространены во всех провинциях(включая тех, кто был представлен из других мест), за исключением хайнань, хэйлунцзян и внутренней монголии. В настоящее время обрабатываемая площадь гинкго в китае составляет более 333 300 га ², при этом годовой объем производства составляет около 11 000 т орехов гинкго и 10 000 т сушеных зеленых листьев. Годовой объем производства в первичной промышленности по производству гинкго составляет около 2 млрд. юаней, а в вторичной промышленности по переработке гинкго и фармацевтическому производству (листьев гинкго)-более 10 млрд. юаней.

Однако из-за производства ежегодно выбрасывается около 30 000 тонн наружных семенных покрытий. Чжан синхуэй и др. [3] показали, что наружный семенной слой содержит такие активные вещества, какГинкголиновая кислота, флавоноиды, лактоны терпенов и полисахариды.В работе ItokawA/данные отсутствуют.В то же времяal. [4] показано, что гинкголиновая кислота является еще одним важным активным веществом в гинкго-билобе в дополнение к гинкголиду и гинкгофлавону. Он оказывает бактерицидное, бактериостатическое, противовоспалительное, противовирусное, насекомое-репеллентное и инсектицидное воздействие и имеет большое значение для развития. Поэтому большое количество выбрасываемых наружных семенных покрытий не только загрязняет окружающую среду, но и приводит к разбазариванию ресурсов.

В 1970 - х годах геллерман и др. [5-7] обнаружилиФенолиновая кислота гинкголид из листьев гинкго, незрелые семена и зрелые наружные семенные пальто. Последующие количественные измерения показали, что гинкголид концентрируется в зрелых наружных семенных покрышках. Ван цзе и др. [8] и ли хунцин и др. [9] использовали массовую спектрометрию для идентификации четырех гинкголиновых кислот и двух гинкголидов из кислых экстрактов гинкго. Современные медицинские исследования доказали, что гинкголиды обладают определенной аллергической токсичностью и цитотоксичностью, могут противостоять росту бактерий и грибов и имеют эффект уничтожения вредителей.

Полевые опыты доказали, что гинкголидыМогут быть разработаны как биопестициды, и они могут быть использованы в широком спектре областей, таких как медицина и косметика в будущем. Однако по сравнению с веществами с четко выраженными фармакологическими видами деятельности, такими, как флюоноиды гинкго и лактоны терпеня, пути биосинтеза, регулирующий механизм и производная эффективность гинкголиевой кислоты не были тщательно изучены, что замедлило исследования и разработку методов молекулярной биологии для ингибирования синтеза гинкголиновой кислоты и инженерное применение ферментации для получения высокой урожайности гинкголиевой кислоты, Это препятствует дальнейшему развитию гинкго.

В связи с этим автор резюмирует основные исследования по вопросу оБиологическая активность гинкголидовВ последние годы подробно описывается путь синтеза гинкголидов, который состоит из синтеза жирных кислот и поликетидного синтеза, резюмируется каталитический механизм ключевых ферментов, участвующих в синтезе, и рассматривается будущее направление исследований с целью обеспечения справочной и теоретической поддержки последующих исследований гинкголидов.

1 биологическая активность гинкголидов

Гинкголидная кислота относится к фенолическому семейству липидов, которая состоит из четырех основных категорий: алкилфенолы, алкилрезорцины, анакардные кислоты и алкилкатхолы [10]. Они представляют собой класс вторичных метаболитов в растениях. Различные виды растений могут содержать уникальные фенолические вещества. Их основная физиологическая функция заключается в Том, чтобы противостоять биотическим и абиотическим стрессам.

1.1 состав гинголида и физические и химические свойства

Гинкголиды являются важными вторичными метаболитами гинкго билобы, и принадлежат к классу лаков. Они включают в себя три компонента: гинкголиновую кислоту, гинкголь и билобол [11]. Гинкголиновая кислота представляет собой 2- гидроксий6 - алкениловую (алкиниловую) бензойную кислоту (рис. 1а) с длиной боковой цепи 13, 15 или 17 и двойной цепной связью от 0 до 2. Было выделено и выявлено в общей сложности пять типов, а именно: гинкголиновая кислота B, гинкголиновая кислота A, гинкголиновая кислота, гептадец -1- энильгинкголиновая кислота и гептадец -1- динильгинкголиновая кислота. Гинкголиды представляют собой 3- алкенилфенолы с длиной боковой цепи 15 или 17 и двойным числом облигаций боковой цепи 1, и в общей сложности существуют два типа; Гинкголические кислоты представляют собой 5- алкенилрезорцинов с длиной боковой цепи 15 или 17 и двойным количеством облигаций боковой цепи 2 (рис. 1b), и в общей сложности существуют два типа.

Такие растения, как гераниум (горторий пеларгония) в семействе гераниацидных [12] и сумак (оксидентал анакардия) в семействе анакардиальных [13], также содержат урусиолические кислоты. Длина боковой цепи алкила/алкенила и количество ненасыщенных связей, и так далее, но химическая структура аналогична структуре гинкголидов. Гинкголические кислоты являютсяОсновные вещества в экстракте гинкголидов90% всего кислотного экстракта. Пропорции пяти гинкголиновых кислот различны, в основном это гинкголиновая кислота (50%), за которой следуют гептадец -1- эниловая гинкголиновая кислота (22%) и гинкголиновая кислота (20%) [14] (рис. 2). С развитием науки и техники гинкголиновая кислота была обнаружена в листьях гинкго, наружных семенных жирах и ядрах. Общее содержание гинкго в листьях гинкго различных разновидностей (штаммов) составляет около 14,5765-23,6813 мг/г [15], а общее содержание гинкго в зрелых ядрах составляет около 0,11 мг/г [14]. А общее содержание гинголиновой кислоты во внешней семенной оболочке может достигать 28,78 мг/г [16].

Точка плавления гинкголиковой кислоты 41-42 градуса. При комнатной температуре,Чистая гинкголиновая кислота является жирной или порошкообразной по внешнему виду, и плохо растворимы в полярных растворителях, таких как вода или этанол, но легко растворимы в неполярных растворителях, таких как легкий нефтяной эфир. Осаждается в виде кристаллов в насыщенном нефтяном эфире растворителя [17]. В растворе гидроксиловые и карбоксиловые группы бензола фенольной кислоты ионизируют для получения слабой кислоты, которая может подвергаться реакции эстерификации и сапонификации. Гинкголиновая кислота, прошедшая эстерификацию или сапонификацию, легче извлекать и отделять, достигая эффекта очистки. Точка плавления гинголиевой кислоты составляет около 136 градусов, а точка кипения-около 500 градусов. При температуре 200 °C карбоксиловая группа бензола феноловой кислоты будет подвергаться декарбоксилационной реакции на выброс CO2, которая может быть отделена методом градиента температуры. Поэтому, согласно исследованиям физических и химических свойств, при переработке продуктов гинкго часто используются такие методы, как "приготовление пищи на горячем воздухе", "ультразвуковое извлечение фенольной кислоты гинкго с адсорбцией смолы" и "совместимость китайских лекарственных трав" для удаления фенольных кислот с целью детоксикации. Chen et al. [18] последние результаты исследований показывают, что лаксен, иммобилизованный на новый тип электроспинового нановолокна, может катализировать деградацию фенольной кислоты гинкго. Однако вышеупомянутые методы обработки дефеноловой кислотой имеют такие недостатки, как высокая стоимость и сложность эксплуатации, и не подходят для крупномасштабной детоксикации.

1.2 биологическая активность гинкголидов

Гинкголиды имеют антибактериальные, инсектицидные,Аллергические, цитотоксичные и антиканцерологические эффекты. Их разнообразная биологическая деятельность может использоваться в сельскохозяйственном производстве, здравоохранении и других областях.

1.2.1 антибактериальный эффект

Гинкго кислота 6- алкилсалициловая кислота, который имеет широкий спектр антибактериальных свойств. Оказывает ингибиторное действие на Bacillus subtilis, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Shigella dysenteriae, псевдодомы aeruginosa, а также на различные грам-негативные и грам-позитивные бактерии [19-20]. Кислотный экстрагент оказывает ингибиторное воздействие на грибок блита рисовой полости, грибок увядающего помидора, яблочный антраконос, пятнистый грибок кукурузного листа и красный грибок плесени, а его антибактериальный эффект сопоставим с антигрибковым действием некоторых противогрибковых препаратов [21]. Xu Lichun et al. [22] показали, что эффективный коэффициент ингибирующей грибки составляет 0,1% гингоиновой кислоты (15:1) и 92%, в то время как эффективность клотримазола составляет лишь 68%. Muroi et al. [23] показали, что гинкгоиновая кислота оказывает синергическое воздействие на стандартные антибактериальные препараты, убивая резистентную к метициллину стафилококковую ауреусу, а бактерицидальная активность комбинации по меньшей мере в 100 раз выше, чем у одного препарата в течение 48 часов.

1.2.2 инсектицидный эффект

Доказано, что гинкголидная кислота оказывает значительное смертоносное воздействие на афхиды, качанные мотыльки, паучьи клещи, мулберберные клещи, рисовые бобры и другие жующие зубчатые части насекомых [20]. В ходе теста по контролю за апхидами ши цитянь [24] пришел к выводу, что смертельный эффект экстракта гинголидной кислоты сопоставим с эффектом пестицида имидаклоприд. Денг еченг и др. [25] использовали различные полиграции экстрактов экзокарпов при проведении испытаний на токсичность и обнаружили, что они оказывают сильное смертельное воздействие на коричневый плантоппер, персиковый афхид, красный паук и личинки бабочек капусты.

1.2.3 аллергические последствия

В 1934 году Hill et al. [26] сообщили, что активное вещество в гинкго оказывает сильное эрозивное воздействие на кожу. В 1969 году геллермен изолировал фенолические кислоты лака от орехов кешью и семян гинкго, соответственно, и указал, что они оказывают сильное сенсибилизирующее воздействие на кожу [5]. Ченг лян и др. [27] сообщили, что гинкголиновая кислота (C15:1) метаболизируется в гинкголид, который затем окисляется, образуя катехол, вызывая аллергическую реакцию. Vincieri et al. [28] показали, что гинкголиновая кислота может подавлять активность различных дегидрогенов в метаболизме глюкозы. Ахлемейер и др. [29] нашли этоГинкго кислота оказывает конкурентное ингибиторное действиеНа глицерол -3- фосфатной дегидрогеназе. Некоторые ученые полагают, что гинкголиновая кислота имеет биполярную природу (гидрофилическую и липофильную) и может подавлять активность ферментов, связанных с телом или органами, тем самым влияя на обмен веществ и вызывая аллергию [30].

1.2.4 цитотоксичность

Гинкголид имеет как гидрофильные, так и липофильные группы, которые могут соединяться с клеточной мембраной через мембрану и вызывать смерть клеток. Al- yahya et al. [31] использовали экстракт гинкго, содержащий гинкго кислоту, для проведения испытания на токсичность крыс-самцов, и результаты показали, что экстракт может привести к потере хромосом, например клеток микроорганизмов, влияя на нормальную репродуктивную функцию крыс. Ахлемейер и др. [29] обнаружили, что гинкголидная кислота обладает нейротоксичностью и может привести к смерти клеток нейробластомы цыпочек. В последние годы исследователи провели отдельные исследования токсичности различных гинкго-кислот. Цзян и др. [32] обнаружили, что кислота джинкго (C15:1) может вызывать окислительный стресс и повреждения клеток печени крыс, вызывая нарушения обмена пурина. Яо и др. [33] пришли к выводу о Том, что токсичность гептадицилиденовой гинкго (C17:1) для клеток гепг2 прямо пропорциональна времени и дозе и повышает цитотоксичность, опосредовывая метаболизм CYP1A и CYP3A. Исследования показали, что среди гинкголидов гинкголиевая кислота (C13:0), гинкголиевая кислота (C15:1) и гептадицилиденовая гинкголиевая кислота (C17:1) являются более токсичными, а другие фенолиевые кислоты могут действовать в сочетании с тремя гинкголидными кислотами для повышения цитотоксичности.

1.2.5 эффект антиканцера

Гинкголиды обладают цитотоксичностью и могут играть роль антиканцера- да. Qiao et al. [34] пришли к выводу, что гинкго-кислота может стимулировать активацию аденозина монофосфатно-активированного белка киназы (ампк) для сдерживания распространения и миграции. Liang et al. [35] пришли к выводу, что гинкго-кислота может препятствовать росту раковых клеток желудка, препятствуя регулируемому роз пути STAT3/JAK2. Liu et al. [36] показали, что гинкго-кислота может блокировать переход раковых клеток толстой кишки от фазы деления клеток G0/G1, что приводит к смерти раковых клеток. Эксперименты с клетками В случае необходимостиvitro показали, что гинкго-кислота может препятствовать распространению и миграции раковых клеток и активировать соответствующие ферменты для содействия апоптозу. И может стать адъювантным противораковым препаратом для лечения опухоли в будущем.

2 биосинтеза гинкголида

В 1970 - х годах геллерман из миннесотского университета в США использовал метод маркировки 14C для проведения aПредварительная разведка гинголидной кислотыПуть синтеза. В 1990 - х годах Walters et al. [37] использовали газожидкую хроматографию (GLC-ловушки) для анализа помеченных монометил эфиров, извлеченных из жидкой хроматографии (HPLC), и определили конкретные синтетические этапы Урушиол (2- гидроксий -6- мел (en) ил-бензоиновая кислота) в герании. Singhal [38] и Narnoliya et al. [39] дополнительно исследовали типы и функции ключевых ферментов в синтезе - урушиол.

2.1 биосинтетический путь гинкголида

Геллерман и др. [6-7] полагают, что ароматическое кольцо и длинноцепная алкил/алкениловая группа гинкголида синтезируются поэтапно, согласно экспериментальному выводу, они делятся на три части: ① malonyl-CoA и acetyl-CoA форма свободного пальмитойла-coa и олеойла-coa через жирокислотный синтез; Инкголиновая кислота синтезируется путем поликетидного синтеза для образования гинкголиевой кислоты; ③ ginkgolic acid теряет карбоксильную группу бензола кольцо и окисляется и снижается доВещества, такие как гинкгол.

Гераниум () — растение из семейства гераниациевых. Его трихомы только секрете шикимическая кислота (гомолог гинкгоиновой кислоты), что делает его лучшим видом для изучения пути синтеза шикимической кислоты. Дикий гераний выделяет шикимическую кислоту с насыщенной боковой цепью, в то время как устойчивые к насекомым виды выделяют шикимическую кислоту с мононенасыщенной боковой цепью (C15:1 и C17:1). Исследования показали, что ненасыщенная кислота урусиола в гераниумах идентична по молекулярной структуре двум гинкголическим кислотам (гинкголическая кислота (C15:1) и гинкголиевая кислота (C17:1)), за исключением разницы в положении двойной связи. Hesk et al. [12] сравнили дифференциальные гены и метаболиты дикого и насекомого-устойчивого гераниума и выявили молекулярный механизм урушиола синтеза. Исследователи использовали технологию RNA-seq для создания транскриптомной базы данных cDNA гераниума, и определили ключевые гены для синтеза, чтобы быть поликетид синтазы Ⅲ (PKS Ⅲ) ген и стеарил-акт Desaturase (SAD) ген путем сравнения генной аннотации и дифференциального анализа выражения. Путь регулированияСинтез гинголидаПоясняется на примере гиптадецилиденеггольской кислоты (15:1) и гептадецилиденеггольской кислоты (17:1).

2.1.1 синтез алкильной боковой цепи

В настоящее времяСинтез гинголидов основан в первую очередь на синтезе пальмитолейной кислотыИ олеиновая кислота, то есть синтез алкильной боковой цепи (рис. 3) ферментация хранящего сукроза в фосфинифинипирувате, аллостерическое изменение пирувата киназы (пирувация киназы) для образования пирувата из цитоплазмы в плазтид, а также катализатор пирувационной дегидрогеназы (пирувация дегидрогеназы, PDH) для образования ацетила-коа обеспечивают исходную молекулу 2с для жирных кислот. Ацетил-коа катализируется с помощью карбоксилазы ацетил-коа (Ace- tyl-CoA carboxylase, ACC) для образования малонил-коа. Трансацилаза (TA) заменяет молекулу коа кислотным белком (ACP), образуя малонил -ACP. Malonyl-ACP теряет свою карбоксильную группу, став acetyl-ACP, и конденсируется в цикле с помощью β-Ketoacyl-ACP synthase III. Положение в области прав человека(KAS III), образуя стартовый материал 4C acyl-ACP.

4C acil -ACP многократно конденсируется методом β- ketoacil -ACP synthase I (KAS I) для образования palmitoil -ACP (C16:0 ACP), который затем дегидрогенируется методом Δ9- stearoil -ACP desaturase (SAD) для образования palmitoleic-ACP (Δ9 C16:1 ACP). Сад дегидрогенизируется до уровня palmitoleic acid-ACP (Δ9 C16:1 ACP), а затем катализируется с помощью ketoacyl synthase II (β-Ketoacyl-ACP synthase Ⅱ, KASⅡ), образуя oleic acid-ACP (Δ11 C18:1 ACP). Palmitoil-acp и oleoil-acp в пластидах соответственно диацилируются тиостеразой A (TE/FatA) и тиостеразой B (TE/FatB) для образования свободных ненасыщенных жирных кислот [40]. Наконец, свободные жирные кислоты преобразуются в паллитойл-коа (Δ9 C16:1CoA) и олейл-коа (Δ11 C18:1CoA) с помощью синтазы acol-coa (ACS) в наружной мембране плазмы и передаются в цитоплазу, чтобы стать двумя важными прекурсорами гинголических кислот.

Тем не менее,Пути синтеза жирных кислот гинкголиновой кислотыИ жеранилжеранил-это другое. Прекурсорами для синтеза гинголиевой кислоты (C15:1) и гептадециллиденголиевой кислоты (C17:1) являются пальмитолейная кислота (Δ9 C16:1) и олеиновая кислота (Δ11 C18:1), в то время как прекурсорами для синтеза двух моноэниловых боковых цепочек олеиновой кислоты являются пальмитолейная кислота (Δ11 C16∶1) и олеиновая кислота (Δ13 C18∶1). Общие жирные кислоты (пальмитолейная кислота (ω 9 C16 Δ1) и олеиновая кислота (∶ 11 C18 Δ1)) могут образовываться во многих диких растениях и водорослях из пальмитойла-акт (C16∶0 ACP) путем опреснения, поликетона и других реакций. Шульц и др. [41] обнаружили, что новый тип гераниловой ашп-дезатуразы в гераниуме дегидрогенизирует миристическую кислоту акт (C14:0 ашп), образуя миристическую кислоту акт (Δ9 C14:1), а затем проходит поликетид и другие реакции, образуя две мононенасыщенные жирные кислоты (palmitoleic acid (Δ11 C16:1) и oleic acid (Δ13 C18:1)). Таким образом, синтетический путь предтечей жирных кислот гинголиевой кислоты легче исследовать, чем путь пеларгоновой кислоты в гераниумах.

Singhal [38] выявил и проверил выражение генов, связанных с синтезом мононенасыщенных жирных кислот (пальмитолейная кислота и олеиновая кислота) в герании. Результаты показали, что, когда генное выражение кислотно-переносимых белков (ACPs), кетоацилсинтазов (KASs) и тиостеразов (TEs) в тканях было высоким, содержание жирных кислот и урсолиновой кислоты также было высоким. Кислотный белок Acyl carrier (ACP) является сохраняемым промежуточным носителем, который занимает центральное место в процессе синтеза жирных кислот. Он работает с acyl- acp desaturase (AAD) для опреснения acyl цепи, изменяя соотношение насыщенных и ненасыщенных жирных кислот. Он также может выступать в качестве ограничивающего тариф фермента вместе с кетоакыл-акт синтазы (кас) для регулирования скорости синтеза феноловой кислоты.

2.1.2 синтез кольца из фитилбензола

Синтез кольца фитилбензола является ключевым шагом в формировании фенолических кислот из более высоких жирных кислот. Путь синтеза показан на рис. 4. Взяв в качестве примера гаммацеролиновую кислоту (C15:1), во-первых, пальмитоил (Δ9 C16:1) из жирной кислоты использует малонил-коа в качестве субстрата и под действием поликетида Syn- thase Ⅲ (PKSⅢ) четыре атома углерода добавляются к acyl end через двухступенчатую конденсацию; Во-вторых, кетоновая группа на позиции с3 уменьшается с помощью кетоновой редуктазы (PKS- ketoacyl-CoA редуктаза, KR) до гидроксиловой группы, а двойная связь формируется с помощью дегидратазы (PKS- deгидратазы, DH), удаляет молекулу воды для формирования двойной связи; В-третьих, после конденсации и полимеризации в конце acyl добавляются еще два атома углерода. В это время ион водорода в положении с2 перемещается ближе к группе кетонов в положении C7 для поддержания стабильности промежуточной структуры, состоящей из 4,15 диена; В-четвертых, обеспечивая, чтобы группа кетонов с1 не декарбоксилат, цикраса (PCS-cyclase) катализирует циклизацию Иона водорода на с2 с группой кетонов на с7, подобно конденсации алдола, и под действием обезвоживания образуется двойная связь (PCS-обезвоживание); В-пятых, эноиловая редуктаза (PCS-эноиловая редуктаза, ER) стимулирует формирование двойной связи и ароматизацию кетоновой группы на шестиугольном углеродном кольце. Он и карбоксиловая группа с1 вместе образуют структуру бензоиновой кислоты; Наконец, образуется мононенасыщенная боковая цепь для производства урсолиновой кислоты (C15:1) [37, 39].

Поликетидные синтазы типа III. Положение в области прав человека(ПКС III) — ферменты, ограничивающие скорость синтеза фенолических липидов (алкилфенолы, алкилресоры — килы, урушиолы, алкилкатехолы и др.) [42]. Chalcone synthase (CHS) и Штильбен (stilbene)synthase (STS) являются двумя наиболее репрезентативными суперсемействами. STS — две из самых представительных суперсемей. Они могут катализировать конденсацию и циклизацию цепочек акрила соответственно на позициях C1 и C6 (конденсация клайзен) и C2 и C7 (конденсация алдола), образуя фенолические вещества. Однако мороновые кислоты могут катализировать конденсацию Иона водорода в положении с2, а кетоновая группа-в положении C7, сохраняя при этом карбоксильную группу в положении C1 для образования бензоиновой кислоты. Такая реакция поликетида на циклизацию, которая сохраняет карбоксильную группу бензольных колец, относительно редка на растениях. Поэтому дальнейшие исследования на поликетидных синтазах типа III (PKS III), циклозе (PKS- cyclase) и кетоакыл-редуктазе (PKS-ketoacyl- coa редуктазе, KR) могут еще больше раскрытьМеханизм синтеза гинголиновой кислоты, а содержание фенолических кислот в тканях гинкго можно контролировать путем сочетания физических и химических или биотехнологических методов.

2.2 ключевые гены фермента для синтеза феноловой кислоты

В настоящее время основные доклады об исследованиях ключевых генов фермента для синтеза феноловой кислоты поступают из урушиола, хотя и имеютсяНесколько сообщений о гинкголидах- да. Путь синтеза феноловой кислоты состоит из 2 частей: синтез жирной кислоты и синтез ароматического кольца. Среди них кислотно-носитель белка (азп), стеароил десатуразы (сад), кетоацил-азп синтазы (касс), поликетид-синтазы типа III (ПКС III) и циклозы (ПКС-циклозы) являются ключевыми ферментами, которые определяют скорость и соотношение содержания урушиола синтеза.

2.2.1 кислотно-переносимый белок (азп)

Acyl carrier белок (ACP) относится к большой семье носителей белков. В качестве смешанного белка он может ассоциироваться с различными белково-ферментными комплексами для передачи цепочек из одного ферментного центра в другой. Он также выступает в качестве кофактора для стеаройл-акт дезатуразы (SAD) и акыл-акт гидролазы (ааа) и играет важную роль в путях синтеза жирных кислот (FAS) и поликетидного синтеза (PKS).

Li Mengjun et al. [43] проанализировали структуру генов кислотного белка у 17 видов, включая арабидопсис талиана, клайсин Макс, ориза сатива и зеа мейс, и классифицировали их по пяти категориям. Среди них на генное семейство plasmid-- типашп (область кодирования состоит из 4 экзонов и 3 интронов) и генное семейство mitochondrial-- типашп (область кодирования состоит из 2 экзонов и 1 интрона) приходится наибольшая доля от общего числа. Они оба имеют очень сохраненные serine сайт, который может связать к 4'- фосфопантетеин аддуктирует кофакторную группу и активирует голо-акт для работы. Третичная структура семейства белков ашп в основном последовательна и состоит из четырех замкнутых слоев. Три из них (I, II, IV) параллельны друг другу, в то время как α helix (III) перпендикулярна центру helix, образуя гидрофобную структурную полость, обеспечивающую защитную гидрофобную структуру для различных цепей acyl [44].

α helix Ⅱ может взаимодействовать с ketoacyl-ACP synthase Ⅱ (β-Ketoacyl-ACP synthase Ⅱ, KAS Ⅱ) для дальнейшего расширения acyl chain, и известен как спираль распознавания. Сингал [38] провел транскриптомное секвенирование геранионов и проверил две полные асп-белковые последовательности cDNA (Pxh1 и Pxh2), связанные с синтезом урусиольной кислоты. Проверка экспрессии генов и фитогенетический анализ показали, что гены Pxh1 и Pxh2 высоко выражены в триховой ткани гераниума и являются весьма гомологичными для биосинтеза азк 14- углеродной 1- эленовой кислоты (Δ9 C14:1), который ускоряет опреснение жирных кислот в роковой кислоте.

2.2.2 кетоакыл-акт синтаза (касс)

Под действием синтазы жирных кислот (FAS) комплекс малонил-акт используется в качестве субстрата для формированияПрекурсоры гинголиевой кислоты, пальмитолейная кислота (Δ9 C16:1) и олеиновая кислота (Δ11 C18:1), через несколько циклов конденсации. Комплекс состоит из трех синтазов кетоакыл-акт (KASs), которые относятся к суперсемейству конд-ферментов. Это все гидрофобные липобелки, содержащие сохраненный кас структурный домен, и никаких сигналов пептида. Кас III катализирует полимеризацию малонил-коа и ацетил-коа, образуя первоначальную ациловую цепь (3- кетобутырил-акт); Кас I катализирует полимеризацию ациловой цепи и малонил-акт для образования жирных кислот с 6с - 16с; А кас II катализирует конденсацию малонил-акт и пальмитической кислоты до уровня 18с жирных кислот.

На таких растениях, как перилла [45] и горный хлопок [46], кас II представляет собой слегка кислотный несериальный белок с длиной аминокислоты около 500 aa. Он определяет соотношение C16:C18 жирных кислот и может регулировать холодную стойкость растений. Исследователи получили семь синтазных генов ketoacil-acp (KASs) из транскриптома пеларгония ксантия, из которых PxKASⅠa, PxKASⅠb и PxKASⅠc имеют высокое и стабильное выражение в триховой ткани пеларгония ксантия, в то время как генное выражение в других тканях является низким. Дальнейшая обработка трихомов с температурными градиентами (18, 23 и 28 °C) показала, что выражение трех генов снижается с повышением температуры, и была позитивно коррелирована с содержанием жирных кислот (palmitoleic acid (Δ11 C16:1) и oleic acid (Δ13 C18:1)) и урусиола, или участвует в пути синтеза урусиола. Эволюционный анализ показывает, что генная семья кас гераниума очень гомологична для генов кетоацил синтазы (кас) арабидопсиса таиланна и глицин Макс, и соответствующий каталитический механизм относительно ясен. Тем не менее, было проведено несколько молекулярных исследований по кас синтазы гинкголида кетоакил-акт (KAS). Как прекурсор palmitoleic acid (Δ9 C16:1) и oleic acid (Δ11 C18:1) изКислота гинкго(C15:1) и гептадесеноидная кислота (C17:1) регулируются синтазой гинкго-кетоакыл-акт, поскольку важные монообогащенные ненасыщенные жирные кислоты еще предстоит глубоко исследовать.

2.2.3 стиройл-акт дезатуразы (SAD)

Stearol-acp desaturase (SAD) — единственное известное семейство растворимых desaturase в растениях, которое регулирует соотношение насыщенных и ненасыщенных жирных кислот. Среди них наиболее широко изученной на растениях является технология Δ9 stearoil-acp desaturase. Он ускоряет дегидрогенацию позиций C9 и C10 в цепочке acyl, образуя первую двойную связь. Печальный белок является гомоодимером, состоящим из охраняемого домена, принадлежащего семье desaturase acol-acp, и охраняемого домена, принадлежащего семье ферритин. Четыре дуги в этом регионе образуют четырехспиральный узел, который скрывает симметричный фэ-о-фэ двухжелезный кластерный каталитический центр. Вместе они образуют активный центр фермента по дегидрогенации ациловой цепи [47]. Белково-кристаллическая структура показывает, что печальный фермент имеет глубокий канав, простирающийся от молекулярной поверхности до интерьеров, который может разместить 18с ациловую цепь и связать с центром черной металлургии в нижней части канава, чтобы пройти редокс реакции. Эта канавочная структура может также выдерживать реакции 16с и 14с ациловых цепей, но каталитический коэффициент оборота низок [48].

Шульц и др. [41] показали роман acil-acp desaturase из библиотеки cDNA гераниума. Выравнивание генной последовательности показало высокую степень гомологии с геном castor bean stearoil-acp desaturase (SAD). Результаты генетической трансформации и проверки с использованием Escherichia coli (E. coli) показали, что новый ген может катализировать дегидрогенную дегидрогену миристической кислоты-акт (C14:0), чтобы сформировать миристическую кислоту-акт (Δ9 C14:1), так что он называется миристическая кислота-акт desaturase ген (MAD, Δ9 14:0акт desaturase). Результаты подтверждения генетической трансформации Singhal [38] экспрессии генов и табака (никотиана табак) показывают, что тетрадецил-акт (Δ9 C14:1), продукт, катализатором которого является миристическая кислота-акт desaturase (MAD), является ключевым предшественником palmitoleic-ACP (Δ11 C16:1) и oleic-ACP (Δ13 C18:1). Деятельность myristoil-acp desaturase (MAD, Δ9 14 ∶0-) Акт desaturase определяет содержание палмитойл-акт (Δ 11 C16∶1) и олеойл-акт (Δ13 C18∶1) путем обнаружения активности фермента, содержания жирной кислоты и содержания феноловой кислоты, что в свою очередь регулирует содержание двух моноэниловых боковых цепей, олеевой кислоты (C22:1 и C24:1). Кроме того, Singhal [38] установил температурный градиент (18, 23 и 28 °C) для изучения экспрессионных изменений соответствующих ферментов в триховой ткани гераниума и обнаружил, что экспрессионный уровень миристического кислотно-акт desaturase гена (MAD, Δ9 14 ∶0-.) Акт desaturase () и стироил-акт desaturase ген (SAD, Δ9 18 ∶) Выражение 0-ACP desaturase уменьшается с увеличением температуры.

Ван и др. [49] клонировали ген стиройла-акт desaturase (SAD, Δ9 18:0акт desaturase) отGinkgo билоба лист cDNAИ подверг листья гинкго билоба температурному стрессу (4, 15 и 45 градусов). Результаты показали, что генное выражение было высоким при низких температурах (4 °C) и комнатной температуре (15 °C), в то время как генное выражение при высоких температурах (45 °C) было в несколько раз ниже, чем у контрольной группы. Впоследствии лю синлян и др. [50] показали, что ген GbSAD кодирует цепочку пептидов с длиной цепи 412 aa и молекулярным весом 47 kDa. Кластерный анализ показал высокую степень сходства со стиройлом-акт desaturase (SAD) аминокислотными последовательностями других гимнаспермов. Экзогенные гормональные эксперименты показали, что экспрессия гена GbSAD регулируется не абсцизной кислотой (ABA), метилжасмонатом (MeJA) или этиленом (ETH), а активированным геном салициловой кислоты (SA), причем наибольшее значение экспрессии составляет 9,7 раза больше, чем у контрольной группы, что указывает на то, что SA может участвовать в регулировании путей синтеза жирных кислот.

Пеларгоний могилы иГинкго билоба содержит уникальную миристическую кислоту-актDesaturase (MAD, Δ9 - acp desaturase) и stearic acida-acp desaturase (GbSAD, ∶ 9 - acp desaturase) соответственно. Оба фермента чувствительны к температуре и очень активны при низких температурах. Оба фермента являются единственными водорастворимыми опреснителями растений и имеют высокую степень сходства с точки зрения их функциональной структуры. Таким образом, гомологическая функция проверки дезатуразы гинкго стил-акт (GbSAD, Δ9 18:0акт дезатуразы) дополнительно прояснит механизм синтеза гинкголидной кислоты.

2.2.4 поликетидные синтазы типа III (ПКС III)

Поликетидные синтазы делятся на три категории: ①PKS I, известные как модульные PKS, состоит из нескольких многофункциональных полипептидов, каждая из которых имеет уникальный, немногократный каталитический домен. ПКС II, также известный как итеративные или ароматические ПКС, представляет собой итеративную систему многоферментного комплекса, использующую набор многоразовых доменов для катализации образования феноловых поликетонных структур многократно в ходе повторяющихся шагов реакции. ③PKS III, известный как synthase- тип фермента chalcone, полностью отличается от первых двух типов ферментов PKS семей. Он может повторно использовать гомологические бифункциональные белки, не зависит от активации ашп и его активного сайта 4'- фосфопантетеин сульфид, и не требуется активировать субстрат acol-coa через акт для прямой реакции с acol-coa. Хотя структурные механизмы различных типов ПКС отличаются друг от друга, все они используют домен или подединицу кетосинтазы (кс) для стимулирования образования облигаций с-с, которые декарбоксилат и конденсат acylcoa для расширения углеродной цепи.

Семья ПКС III очень разнообразна. Синтазы Chalcone (CHS) и stilbene (STS) являются двумя первыми обнаруженными и наиболее репрезентативными семействами. Их последовательности аминокислот от 60% до 75% схожи [42]. Семейство chalcone synthase (CHS) широко распространено в растениях. Это гомодимерный белок с молекулярным весом 40-45 кда. Используя высококонсервированный активный центр (комбинация цис-хис-асн), он катализирует удлинение углеродной цепи CoA кумарина, используя три субструата pyruvat -CoA, образуя промежуточную структуру кольца тетрапептида [42, 51 — 52]. Водородный ион C6 тетрапептидного промежуточного кольца проходит через конденсационную реакцию клайзенов с группой кетонов C1, образуя углеродно-расчленовое кольцо, которое затем ароматизируется, образуя дифениловый кетон, также известный как шалкон (рис. 5). Шалкон является важным прекурсором синтеза флавоноидов. Сообщается, что фермент stilbene synthase (STS) присутствует в растениях и микроорганизмах (например, стрептомициты, дрожжи и бактерии). Имеет молекулярный вес около 43 кда, является димером, состоящим из 2 подгрупп, и имеет белок с конкретным сохраненным доменом IPNS(F) AGAIAGN, который является весьма гомологичным для синтазы chalcone (CHS) [53].

Фермент STS использует коу-мароил в качестве субстрата для формирования тетрапептидной промежуточной кольцевой структуры. Группа кетонов C7 промежуточного кольца тетрапептида проходит через реакцию альдола конденсации с ионным водородом C2, образуя углеродное шестиугольное кольцо, а затем ароматизируется, образуя phytoalexВ случае необходимостиresveratrol glycoside [54] (рис. 5). Singhal [38] идентифицировал синтазу типа 2 кетоacyl CoA (KCS2, синтазу кетоacyl CoA synthase 2) в герании (горторий пеляргония), ее третичная пространственная структура аналогична структуре поликетидного синтаза типа III (PKS III), И предполагается, что он участвует в реакции конденсации циклизации в пути синтеза урусиола. Кетоацил коа синтаза (KCS) — фермент, ограничивающий скорость, который катализирует первую конденсационную реакцию в синтезе очень длинных жирных кислот (VLCFAs). Исследования его геносемейства были в основном сосредоточены на модели растений Arabidopsis thaliana, и есть мало сообщений об исследованиях на других заводах. Косталлиоли и др. [55] классифицировали 21 генетический член ККС в арабидопсе на четыре подгруппы (FAE1, KCS1, FDH/ч.и CER6) на основе генной гомологии и генетического анализа эволюции. Среди них ген FAE1 был первым геном семейства KCS, клонированным джеймсом и др. [56] с использованием метода трансосон-меток. Последовательность аминокислотных соединений FAE1 весьма гомологична для других поликетидных синтазов (синтазы chalcone (CHS), синтазы squalene (STS) и синтазы типа III ketoacyl-ACP (KAS III)).

Синтазы кетол -acyl CoA (KCS) разных видов имеют разные особенности субстратов. Гинкголид а принадлежит Вещества, содержащие лаковую кислоту И его специфическая для патологии поликетидовая синтаза типа III (ПКС III) по своей функциональной структуре аналогична geranium' с тип 2 кето -acyl CoA synthase (кето -acyl CoA synthase 2). Кроме того, поликетид synthase urushiol acid и acyltransferase (STS) оба распознают группу C7 кетона в промежуточном кольце тетрапептида и ион водорода C2, чтобы пройти алдол конденсации реакции, чтобы сформировать кольцо углерода гекса-члень. Разница заключается в Том, что акцилтрансферазе (STS) проходит декарбоксилационную реакцию во время альдоловой конденсации циклической реакции, которая окисляет группу кетонов при положении с1 для высвобождения диоксида углерода, однако при поликетидной циклизации лактоновой кислоты группа кетонов с1 сохраняется, а структура бензовой кислоты формируется путем замены цоа ионным водородом (H+). Нынешний каталитический механизм еще не определен и требует дальнейших исследований.

2.2.5 поликетидные циклоназы (ПК-циклоназы)

2,4- дигидрокси -6- пенталбензоиновая кислота (оливетолиновая кислота), также известная как оливетолиновая кислота, является важным прекурсором синтеза каннабиноидов. Гагне и др. [57] пришли к выводу, что гексанол-коа стимулируется ПКС III (ТКС) каннабиса для синтеза тетрапептидной промежуточной кольцевой структуры, содержащей 12 углеродов. Если фермент ТКС продолжает катализировать, то acyl chaВ случае необходимостиконденсируется и циклизируется на позициях C2 и C7, в результате чего CO2 образуется в 3,5- дигидроксипенталбензол (оливетол); В то время как реакция конденсации и циклизации, катализируемая киказой ПКС (оливетолинная кислота СИ-класс, оак) катализирует реакцию конденсации, которая сохраняет группу карбоксила с1 до уровня 2,4- дигидроксия -6- пентилбензоиновой кислоты (оливетолинная кислота). Анализ функции белка показывает, что фермент оак содержит уникальную гравитационную-гравитационную-гравитационную-гравитационную-гравитационную-гравитационную топологию и может катализировать циклизацию группы acyl на позициях C2 и C7 и удерживать карбоксильную группу.

Оак-это новый функциональный белок, содержащий димерический α+β barrel домен (димерический α+β barrel белок, DABB), который в основном встречается в бактериях, грибах и растениях. За исключением каннабидиолиновой кислотной кипасы CsOAC из сативы каннабиса, растительные белки, похожие на дабб, в основном относятся к семейству теплоустойчивых белков (HS) и очень похожи по своей структуре на поликетидные циклоны из видов стрептомицидов [58]. Белок дабб представляет собой небольшой белок (12 кда, 101 аа), который находится в цитоплазме вместе с ПКС III, играет вспомогательную роль, направляя развитие тетрапептидного промежуточного продукта, и в конечном итоге образует вещество, содержащее структуру бензоиновой кислоты. В исследовании Gagne et al. [51] сохранена кетонная группа C1 для поликетидной циклизации лаконичного кислотного синтеза, что дает новые ориентиры и идеи для каталитического процесса образования бензоиновой кислоты.

3. Перспективы на будущее

В 1960 - х годахГинкголиды были определены в качестве одного из активных веществВ наружном семенном плаще гинкго. Благодаря популяризации высокоэффективной технологии жидкой хроматографии-масс-спектрометрии (HPLC-MS/MS) и повышению точности обнаружения NMB. Р.(технология ядерного магнитного резонанса) появилась возможность выделить и идентифицировать пять общих гинкго-кислот и четыре гинкголида из таких тканей, как листни и плоды гинкго. Гинкголиды являются лаками и обладают уникальными полярными свойствами (гидрофобными и гидрофильными), что привело к их использованию во многих областях, таких как медицина, химические вещества, красота и борьба с вредителями. В частности, гинкголиновая кислота (C15:1) была продемонстрирована Fukuda et al. [59] для предотвращения кислотности малых белков-модификаторов, связанных с ubiquitinом (SUMO), для регулирования соответствующих клеточных функций. Считается потенциальным лекарством для лечения онкологических и неврологических заболеваний и заслуживает исследований и разработок.

In В дополнение к гинкгоКроме того, урушиольные кислоты были изолированы и выявлены в таких товарных культурах, как орех кешью (C. equatorialis), сумак, фисташковые орехи и герани. Шульц и др. [60] проводили эксперименты по синтезу урусиольной кислоты. Результаты показали, что 14 с-маркированные лимонная кислота, пропионил-коа, олеойл-коа, уксусная кислота, миристическая кислота и пальмитическая кислота были инкубированы триховыми клетками пеларгониевых могил. Только олеойл-коа (C18:1) был обнаружен участие в синтезе Урусиол является эффективным источником углерода, в то время как другие вещества, как правило, синтезируют триацилглицерол для формирования липидов хранения. Поэтому пальмитолейл-коа (C16:1) и олейл-коа (C18:1) были определены в качестве важных прекурсоров для изучения синтеза лакосановой кислоты. Тем не менее, гинкголид, как фитоалексин уникальный для гинкго, имеет особый и сохраненный молекулярный эволюционный синтез пути и регулирования. В настоящее время исследования по регулированию синтеза гинкголида сосредоточены главным образом на анализе транскриптомы липидов и метаболических процессов, в то время как имеется мало докладов по исследованию механизма синтеза поликетидов и клонированию родственных генов, поэтому необходимы дальнейшие исследования.

Транскрипционные факторы MYB и WRKY могут регулировать выражение членами семейства поликетидных синтаз типа III (PKS III), влияя на изменения в содержании вторичных метаболитов с эффектом сопротивления. Ключевым парализующим ферментом в синтезе лаковой кислоты является поликетидная синтаза типа III (ПКС III), которая весьма гомологична для синтазы кетоацил коа (кс). Экерманн и др. [61] пришли к выводу, что метахлор гербицидов может деактивировать фермент, ограничивающий цены (кетолактон-синтаза CoA (KCS)), в синтезе очень длинных цепных жирных кислот (VLFAS), а также синтазы халконуса (CHS) и сквалена (STS) семейства поликетидных синтаз III. Хлорацетамид метазахлор может связывать цистеин на ключевом участке соответствующего фермента, что препятствует нормальному функционированию конденсационной реакции. В будущем химическое вещество будет проверяться с использованием метода аПодвесная камера гинкгоЛиния для определения того, может ли она также деактивировать поликетидные синтазы типа III (PKS III), синтезирующие лаконовую кислоту. Это позволит глубже понять каталитическую функцию и регулирующий механизм поликетидного синтаза типа III (ПКС III) при лаконичном кислотном синтезе. Постепенное разъяснение этих механизмов регулирования обеспечит теоретические и практические ориентиры для выращивания клеточных линий с низкой или высокой производительностью фенолических кислот.

Ссылки на статьи

[1] ма цзинь, ху сяоцянь, чэнь цянь и др. Исследование потенциала скрининга антиновой коронавирусной китайской медицины на основе Mpro и PLP [J]. Китайский журнал традиционной китайской медицины, 2020, 45(6): 1219-1224.

[2] ван сухуан, кан ан, ди люцин и др. Прогресс в фармакокинетических исследований основных активных ингредиентов экстракта гинкго билоба [J]. Китайская травяная медицина, 2013, 44 (5) : 626 — 631.

[3] чжан синхуэй, го циронг, ван гибин и др. Прогресс в исследовании семенного слоя гинкго билобы [J]. Хейлунцзян сельскохозяйственная наука, 2018(11) : 156 — 160.

[4] итокава Тоцука н, накахара К, и, и Al.anticancer (антиопухоли) Принципы гинкго билоба L.[J]. Химическая и фармацевтическая промышленность Вестник,1987,35 (7) : 3016-3020.

[5]GELLERMAN - J.L,SCHLENК. К.H. Подготовка 14 c-маркированных жирных и анакардных кислот из гинкго билобы [J]. Липидс,1969,4 (6) : 484-487.

[6]GELLERMAN - J.L,ANDERSON W H,SCHLENK H. Биосинтез анакардных кислот из ацетата в гинкго билоба [J].Lipids,1974,9(9) : 722-725.

[7]GELLERMAN J L,ANDERSON W H,SCHLENK H. Синтез анакарда Кислоты в семенах гинкго билобы [J]. 1. Биохимика et  1. Биофизика Acta,1976, 431 (1) : 16-21.

[8] ван дж., ю б., лю х и др. Изоляция и идентификация химических компонентов наружного семенного слоя гинкго билобы [J]. Китайская травяная медицина, 1995, 26(6): 290-292, 328.

[9] ли хунцин, хэ чжаофан, чжан юнмин и др. Исследования по гидроксифенолическим и гидроксифенолическим кислотным компонентам наружного семенного слоя гинкго билобы [J]. Китайская травяная медицина, 2004, 35(1): 18-20.

[10] козубек а, тыман дж. Биоактивные фенолические липиды [J]. Исследования по химии продукции нату — ral,2005,30: 111 — 190.

[11] Цао фулян. The Ginkgo Biloba Journal Соединенные Штаты америкиChina [м]. Пекин: China Forestry Publishing House, 2007.

[12] [12]HESK D,CRAIG R,MUMMA R O. Сравнение биосинных возможностей анакардной кислоты Устойчивость к насекомым И быть восприимчивым Гераниум [J]. Журнал химической экологии,1992,18(8) : 1349-1364.

[13] гедам п H, сампаткумаран п - с. Орех кешью Жидкость: Ex- traction, химия и Применение [J]. Ii. Прогресс В случае необходимости Органический пероксид (органический пероксид) Покрытия, 1986,14 (2) : 115-157.

[14] у хайся, у кайе, лю джинда и др. Очистка, идентификация и антибактериальная активность гинкголидов из семян гинкго билоба. Китайский журнал пищевой науки, 2015, 15(3): 207 — 215.

[15] тянь цп, ю у, хе гз и др. Определение общего содержания гинкго-кислоты в листьях гинкго-билобы с помощью HPLC [J]. Исследование микроэлементов и здоровья, 2015, 32(2): 36 — 37, 47.

[16] He Jingren. Исследование аллергенности и механизма действия гинкго кислоты [D]. Ухань: хуазхонский сельскохозяйственный университет, 2003.

[17] лю цзюнфэн. Исследование процесса удаления гинкголидов из порошка гинкго [D]. Тайвань и Франция#39; ан: шаньдунский сельскохозяйственный университет, 2017.

[18] чэнь H  Y, чэн, K  C, вгу R  J,et al.Enzymatic Соединенные Штаты америкиginkgolic acid По запросу:laccase imon novel electrospun nanofiber mat [J]. Журнал науки продовольствия и сельского хозяйства,2020,100(6) : 2705 — 2712.

[19] лианг лисин. Состояние и перспективы развития наружного семенного слоя гинкго [J]. Комплексное использование ресурсов китая, 2003 год, 21 (10): 12-14.

[20] чжао чэнглин. Экстракция и целебное обсуждение кислотных компонентов наружного семенного слоя гинкго [J]. Китайская травяная медицина, 1997, 28(4): 250-251.

[21] чжи юлян. Предварительное исследование по ингибированию патогенных бактерий сельскохозяйственных культур экстрактом семенного пальто гинкго билобы [J]. Anhui Agricultural Science, 2005, 33(9): 1598-1603.

[22] сюй лихун, тонг кун, гу вэйронг и др. Экспериментальное исследование по ингибированию роста грибов опосредованными веществами, извлеченными из наружного семенного слоя гинкго [J]. Традиционная китайская медицина, 1990, 13(6): 36 — 37.

[23] мурой х, кубо I. Антибактериальная активность анакардной кислоты и тотарола, а-одиночка и В случае необходимости Комбинация из двух частей с - метициллин, против Устойчив к метициллину Staphylococcus aureus[J]. Журнал по теме Соединенные Штаты америки Применение на практике Бактериология,1996,80(4) : 387-394.

[24] ши китян. Исследования по вопросам профилактики сельскохозяйственных вредителей и борьбы с ними, проводимые гинкголидами [J]. Лесная химическая промышленность, 2004, 24 (2): 84 — 87.

[25] Deng Yecheng, Xu Hanhong, Lei Ling. Контактная токсичность экстракта гинкго билоба для трех сельскохозяйственных вредителей [J]. Журнал южно-китайского сельскохозяйственного университета, 2004, 25(3): 61-63.

[26]HILL G A,MATTACOTTI V,GRAHAС. О.W D. Токсичный принцип ядовитого плюща [J]. Журнал "American chemical" Общество,1934,56(12) : 2736-2738.

[27] Ченг лян, Лу фенгчанг. Обзор исследований гинкголидов в наружном семенном слое гинкго билобы [J]. Достижения в фармацевтике, 2004, 28(5): 209-213.

[28]VINCIERI F F,VINCENZINI С. О.T,VANNI P. Извлечение активных com- фунтов из саркотесты гинкго билобаседов: ингибирование некоторых дегидро-генных видов деятельности [J]. Журнальная статья,2013,63(2) : 79-82.

[29] ахлемейер B,SELKE D,SCHAPER C и др. гинкголические кислоты вызывают нейрональную смерть и Активировать устройство Содержание белка в крови Фосфатазы типа 2c [J]. Европейский журнал фармакологии,2001,430(1) : 1-7.

[30] Ян цзяньтин, у кэ. Прогресс в исследовании аллергических компонентов гинкго билобы и их механизма сенсибилизации [J]. Наука и техника о продовольствии, 2009, 34 (6): 282 — 286.

[31]AL-YAHYA A A,AL-MAJED A A,AL-BEKAIRI A M и др. исследования репродуктивной, цитологической и биохимической токсичности гинкго билобы у швейцарских мышей-альбиносов [J]. Журнал этнофармакологии,2006,107 (2) : 222 — 228.

[32]JIANG L,SI Z H,LI M H и др (15 ∶1) у мышей [J]. Журнал пхара — мацевтический и биомедицинский анализ,2017,136: 44 — 54.

[33] яо кью Q,LI L,XU M  C, и др Метаболизм и гепатотоксичность Ginkgolicacid (17 ∶ 1) В случае необходимостиvitro[J]. Китайский журнал (english) И природных ресурсов Лекарственные средства, 2018,16(11) : 829 — 837.

[34]QIAO L N,ZHENG J B,JIN X Z,et al.Ginkgolic acid подавляет инва-активность раковых клеток толстой кишки посредством активации ампк [J]. Онкологический лет — терс,2017,14 (5) : 5831 — 5838.

[35] лян J  Р, ян - эйч. Гинкголик (Ginkgolic) Кислота (GA) 3. Подавление Желудочно-кишечный тракт Рост заболеваемости раком По запросу: 3. Побуждение Апоптоз и  - подавление; STAT3/JAK2 сигнализация регулируется Рос [дж/пр]. Биомедицина (биомедицина) * * * * Фармакотерапия,2020,125 [2020-03-21]. HTTPS: ∥doi. Org / 10.1016/j.biopha.2019.109585.

[36]LIU Y X,YANG B,ZHANG L R,et al.Ginkgolic acid вызывают взаимодействие Между апоптозом и 7. Автомехагия Регулируемые вопросы by  Соединенные Штаты америки Организация < < поколение > > В случае необходимости - толстая кишка Рак [J]. 1. Биохимическая технология и В. биофизические данные В. научные исследования Коммуникации,2018, 498(1) : 246 — 253.

[37]WALTERS D S,CRAIG R,MUMMA R O. Включение жирных кислот в биосинтез анакардных кислот гераниума [J]. Фитохимия,1990,29 (6) : 1815 — 1822.

[38] сингал - р а. 3. Идентификация и 3. Определение характеристик По состоянию на 31 декабря Участие в проекте В случае необходимости Метаболизм монолена n5 По прекурсорам По адресу: Номер n5 < < анакард > > c Кислот в кислотах in  В настоящее время Три-кусочки пеларгония x горторум [D]. - университет Соединенные Штаты америки Людовик — виль,2016.

[39]NARNOLIYA L K,KAUSHAL G,SINGH S P,et al.De novo transcriptome Анализ положения в области С ароматом роз 3. Гераниум Обеспечивает понимание метаболических процессов Специфика биосинтеза terpene и tartaric acid [J]. BMC Genomics,2017,18(1) : 1-14.

[40] У юнмэй, мао сюэ, ван шуцзянь и др. Метаболическая инженерия растений 8о -7 жирных кислот [J]. Acta Botanica Sinica, 2011, 46(5): 575 — 585.

[41] шульц д 'ж, кахун е б, шанклин дж., и др 14. :  0-acyl носитель белка жирная кислота desaturase ген необходим для про-дукции ω5 Анакардные кислоты, обнаруженные в резистентном к торту гераниуме (Pelargoni- um xhortorum) [J]. Ii. Процедура рассмотрения Соединенные Штаты америки В настоящее время Национальная академия наук Наука,1996,93(16) : 8771-8775.

[42]SHI S P,MORITA H,WANIBUCHI K,et al.Enzymatic synthesis Соединенные Штаты америкиНа территории предприятияpolyketides[J]. Текущий органический синтез,2008,5(3) : 250-266.

[43] Ли менцзюнь, ши чжаньлян, го цзинькао и др. Анализ последовательности растительных кислотно-несущих генов белка [J]. Журнал северо-китайского сельскохозяйственного университета, 2010, 25(S1): 1-6.

[44]KOGLIN A,MOFID M R,LHR F, и др. конформирующие переключатели modu — поздний белок Ii. Взаимодействие in  Пептидные антибиотические синтезы [J]. Наука, 2006,312 (5771) : 273-276.

[45] Li Lu, Liang Qian, An Xi, et al. Анализ биоинформатики семейства генов perilla β-ketoacyl ACP synthase [J]. Наука о сельском хозяйстве шаньси, 2017, 45(3): 321 — 324.

[46] хао цинтинг. Идентификация и функциональный анализ гена семейства β-ketoacyl-ACP synthase II (KAS II) в хлопчатобумажнике верхнего уровня [D]. Тайгу: шаньси сельскохозяйственный университет, 2018: 59.

[47]KACHROO A,SHANKLIN J,WHITTLE E,et al.The Arabidopsis stearoyl- acyl carrier protein-desaturase family и вклад изоформ листьев Синтез олеевой кислоты [J]. Молекулярная биология растений,2007,63(2) : 257 — 271.

[48] таха р с, исмаил I, зайнал з и др Промоутер desaturase (Des) из масляной пальмы обеспечивает специфические для конкретного плода гаса expres- sion в трансгенных помидорах [J]. Журнал физиологии растений,2012,169(13) : 1290-1300.

[49]WANG H L,CAO F L,ZHANG X W,et Al.клонирование (клонирование) и Выражение на английском языке Из стиройла-акт desaturase и двух олеатных desaturases генов гинкго би-лоба л. [J]. Корреспондент молекулярной биологии растений,2013,31 (3) : 633-648.

[50] Лю синлян, цай цзинэнг, ван хуанли и др. Реакция гена гинкго билоба груда на абиотический стресс и прокариотическое выражение [J]. Журнал северо-восточного лесного университета, 2015, 43(12): 1-6.

[51] накано с, озава - эйч, аканума G,et и аль.биосинтез of  Алифатические поликетиды по типу III поликетидные синтазы и метилтрансферазы в ба-чиллус-субтилис [J]. Бактериологический журнал,2009,191 (15) : 4916-4923.

[52] джез J  - м, Остин M  Б, феррер джей  L,et,  Al.Structural (структура) Контроль и контроль Поликетидеформации в специфичных для растений поликетидных синтазах [J]. Химия и фармацевтика Биология,2000,7 (12) : 919-930.

[53] Лю цзинь, тонг шаминг, хоу хешенг. Прогресс в исследованиях и статус применения гена qhe [J]. Тяньцзинь сельскохозяйственная наука, 2015, 21(4): 24-27.

[54]AUSTIN M B,BOWMAN M E,FERRER J, и др in  stilbene  Синтазы и синтазы Организация < < медиаты > > - велосипедизация; В частности: of  type  III  Поликетидные синтазы [J]. Химия и биология,2004,11 (9) : 1179-1194.

[55]COSTAGLIOLI P,JOUBS J,GARCIA C, и др. профилирование генов кандидатов Участвует в восковом биосинтезе в арабидопсе талиана микромассивом анали-sis[J]. Biochimica et biohysica acta,2005,1734 (3) : 247 — 258.

[56]JAMES D W,JR,LIM E,KELLER J,et al.direct пометка гена Arabi- dopsis FATTY ACID ELONGATION1(FAE1) с активатором maize transo-son [J]. Заводская ячейка,1995,7 (3) : 309-319.

[57]GAGNE S J,STOUT J M,LIU E,et al.Identification of olivetolicacid cyclase from 3. Каннабис «Сатива» («сатива»)  reveals a  Уникален в своем роде 3. Каталитические нейтрализаторы - маршрут По адресу: На территории предприятия Поликетиды [J]. Труды национальной академии наук,2012,109 (31) : 12811-12816.

[58] Мэйти, а.р., и маджи. Исследование нового многофункционального семейства белков DABB. Геномика и прикладная биология, 2018, 37(12): 5460 — 5472.

[59] фукуда I, ито а, хирай G,et и Ал.гинкголиновая кислота подавляет белок Су-увлажнение путем блокирования образования промежуточного звена е1 - сумо [J]. Химия-istry & biology,2009,16(2) : : 133-140.

[60]SCHULTZ D J,WICKRAMASINGHE N S,KLINGE C M. Глава шестая-биосинтез анакардной кислоты И биохимическую активность. В последнее время Достижения в области фитохимии. Амстердам: Elsevier,2006: 131-156.

[61] экерман с, маттес б, нимц м и др. ковалентная привязка хло-роацетамида - гербициды  По адресу: В настоящее время  Активный образ жизни Сайт на сайте 3. Цистеин of  plant  type  III  Поликетидные синтазы [J]. Фитохимия,2003,64 (6) : 1045 — 1054.