Как производить D Arabinose?

D. Д. Арабинитол является важным природным продуктом, который широко встречается в лишайных растениях и некоторых пищевых грибов. Однако его естественное содержание невелико и требует больших объемов сырья в традиционных процессах, что серьезно сказывается на его экономической выгоде и делает его непригодным для крупномасштабного производства [1,2]. Химический каталитический метод использует никель в качестве катализатора для прохождения реакций редокса, снижая уровень арабинозы до уровня д-арабинитола. В настоящее время это наиболее распространенный метод промышленного производства д-арабинитола [3]. Несмотря на то, что химический каталитический метод может достичь промышленного масштаба на рынке и технология производства относительно зрела, производственный процесс требует использования дорогостоящих катализаторов и строгого контроля таких условий, как высокая температура (100 градусов) и высокое давление (40 — 60 бар) [4]. Это не только загрязняет окружающую среду, но и затрудняет разделение и очистку последующих продуктов, что приводит к высоким производственным издержкам [5].

По сравнению с химическим каталитическим методом производственные условия, необходимые для биологического производства d-арабинитола, являются более мягкими. Преобразование веществ достигается за счет роста и метаболизма микроорганизмов, полученный продукт легко отделить и очистить, а чистота и урожайность д-арабинитола можно повысить [6, 7], что в большей степени соответствует концепции экологичности, экономичности и экологичности. Существуют два основных биологических метода: микробная ферментация и преобразование клеток покоя. Метод микробной ферментации в основном генерирует д-арабинитол путем преобразования таких субstrates, как глицерол, ксилоза, лактоза, глюкоза и ксилитол в процессе роста и метаболизма микробов [8, 9]. Метод преобразования клеток отдыха в основном опирается на сбор и обогащение культурной бактериальной жидкости для подготовки клеток отдыха, и использует различные ферменты, присутствующие в клетках отдыха для преобразования d-арабинитола.

Короче говоря, каждый из методов производства d-арабинитола имеет свои особенности, но биологический метод имеет преимущества быть зеленым, экономичным и экологически чистым, поскольку он обеспечивает преобразование веществ посредством нормального роста и метаболизма микроорганизмов. Кроме того, продукты биологического метода легко отделить и очистить, что повышает чистоту и урожайность D-arabinitol. Хотя химический каталитический метод по-прежнему является основным методом производства, биологический метод стал или становится более перспективной альтернативой.

1. Текущее состояние исследований биологического производства D-arabitol

Высокоосмотично-герметичные дрожжи являются основным микроорганизмом в природе, который может производить D-arabitol. Под высоким осмотическим давлением дрожжевые клетки могут синтезировать и накапливать полиолы, чтобы справиться с обезвоживанием стресса, тем самым защищая клетки от повреждений. В 1956 году спенсер и др. обнаружили, что высокоосмотически-герметичные дрожжевые материалы могут производить различные полиолы путем ферментации глюкозы, в Том числе D-< < арабитол > >[10]. В 1969 году Onishi В то же время- эл. - привет.обнаружили, что глюкоза может быть преобразована в ксилитол под действием микроорганизмов и что D-arabinitol является промежуточным продуктом [11, 12]. Это открытие заложило теоретическую основу для биологического производства ксилитола и привлекло широкое внимание ученых внутри страны и за рубежом.

В настоящее время проводятся исследованияПроизводство D-arabinitolОсновное внимание уделяется скринингу штаммов и оптимизации ферментации. Например, сонг вайбин и др. проверили штамм Saccharomyces cerevisiae, который производит D-arabinitol из пыльцы, и улучшили скорость преобразования после оптимизации условий ферментации [12]. Li Ze et al. изолировали штамм пичиа пасторис L-84 из почвенных микроорганизмов, устойчивых к высокому осмотическому давлению и производящих d-арабинитол, и провели крупномасштабную ферментацию в ферментере [13]. Саха и др. использовали штамм глютиниса родоторулы nrry -27624, полученный путем скрининг из дикой ячеистой структуры, для оптимизации условий ферментации и, наконец, достижения ферментации глюкозы для производства d-арабинитола с коэффициентом преобразования 48% [14][15].

Чжан Лили успешно изолировал высокопродуктивный штамм d-арабитола от Debaryomyces hansenii и создал кинетическую модель d-арабитола ферментации [16]. Нозаки проверил штамм родоторула кофмей AJ14787, который эффективно производит D-arabitol. Оптимизация ферментации была проведена путем комбинирования выращивания при переменной температуре и непрерывного кормления 700 г/л глюкозы, и, наконец, D-arabitol был получен путем ферментации 206 г/л [17]. Ченг и др. применили адаптивное развитие к штаммам Pichia скотоводов, и урожайность была увеличена на 72,7% по сравнению с диким типом [18].

M Povelainen et al. создали инженерную бактерий Bacillus subtilis ATCC31094, производящую D-arabitol, которая имеет эффективность преобразования до 38% и хорошие перспективы применения [19]. Последующие исследователи обнаружили, что генералы Candida[20], Kluyveromyces[21], Kodamea[22, 23], Hansenula[24, 25] и Debaryomyces[26] способны производить D-arabitol[27].

2. Метаболические пути биотехнологического производства д-арабинитола

В ходе текущих исследований было установлено, что такие субстраты, как глюкоза, ксилоза [28], глицерол [29, 30] и лактоза [31], могут использоваться для производства д-арабинитола. Следует отметить, что глюкоза и ксилоза относятся к двум основным запасам углерода в природе и поэтому широко рассматриваются в качестве наиболее затратоэффективных субстратов. Согласно имеющимся исследованиям, метаболический путь для производства d-арабитола из глюкозы включает в основном два синтетических пути, в то время как возможный метаболический путь для производства d-арабитола из ксилозы имеет только Один, xylitol путь. Три общих метаболических пути д-арабитола показаны на рис. 1.2.

Рис. 1. Метаболический путь дарабитола

Для метаболического процесса производства дарабитола из глюкозы существуют два синтетических пути: рибулозный путь и xylulose путь. В рамках этих процессов глюкоза сначала фосфорилируется в глюкозе -6- фосфат, а затем преобразуется в 5- фосфод-рибулоза по пути пентофосфата (ППС), который является общим прекурсором рибулозы и ксилулозы. Преобразование 5- фосфод-рибозы в d-рибулозу с помощью рибулозы киназы, а затем в d-арабинитол с помощью 2-ArDH образует путь рибулозы. В другом метаболическом пути 5- фосфод-рибоза изомеризируется в d-xyluloze -5- фосфат, а затем дефосфорилируется в D-xylulose. Затем D-arabitol 4- дегидрогеназа преобразует xylulose в D-arabitol, образуя таким образом xylulose путь [32].

Метаболический путь для производства D-arabitol из xylose в основном включает синтетический путь, xylitol путь. В этом процессе xylose редуктаза сначала преобразует xylose в xylitol. Впоследствии xylitol dehydrogenase (XDH) снижает xylitol до D-xylulose. Наконец, D-arabitol dehydrogenase (ArDH) преобразует D-xylulose в D-arabitol, тем самым завершая синтез xylitol пути.

Короче говоря, глюкоза и ксилоза, как два распространенных и недорогих субстрата в биометаболической инженерии, могут использоваться для производства д-арабинола по различным каналам, таким как путь пентофосфата, путь ксилулозы и путь ксилола. Эти метаболические пути дают исследователям богатый биосинтез-стратегии, которые помогут продолжить изучение и оптимизацию производственного процесса D-arabinitol для удовлетворения потребностей функциональных сахарных спиртов в практическом применении.

3. Факторы, влияющие на производство d-арабинитола путем микробной ферментации

В процессе ферментации урожайность д-арабинитола может быть ограничена различными факторами. В настоящее время выход d-арабинитола может быть эффективно увеличен за счет оптимизации условий ферментации, таких как pH, температура, состав источников углерода и азота, размер инокулята, скорость вращения и концентрация растворенного кислорода [33, 34]. Эти факторы тесно связаны с метаболическими процессами в производственном объекте. Благодаря корректировке этих параметров могут быть созданы идеальные условия ферментации для повышения урожайности ферментации.

В настоящее время большинство исследований по биологическому производству d-арабинитола сосредоточено на ферментации d-арабинитола из глюкозы, и меньше исследований по производству d-арабинитола из ксилозы. Известно, что многие дрожжи производят D-arabinitol во время роста глюкозы, но мало дрожжи, как известно, производят D-arabinitol из xylose. В 2018 году Jagtap et al. [28] впервые сообщили, что родоспоридиум торулоиды IFO0880 могут производить d-арабинитол из ксилозы в среде, богатой азотом. Это первый раз, когда было обнаружено, что природные дрожжевые может использовать xylose в качестве единственного источника углерода для производства D-arabinitol, подтверждая наличие xylitol пути в метаболическом процессе биологического производства D-arabinitol. В этом процессе xylose сначала преобразуется в xylitol с помощью xylose редуктазы. Впоследствии xylitol снижается xylulose XDH до D-xylulose. Наконец, ард переводит д -xylulose в д-арабинитол.

Более высокая начальная концентрация субстрата может оказывать осмотическое давление на штамм ферментации, стимулируя обратную реакцию биопреобразования и тем самым повышая урожайность d-арабитола. Например, при ферментации Debaryomyces hansenii SBP-1 использование 150 г/л xylose может увеличить урожайность D-arabitol в 2,23 раза по сравнению с использованием 70 г/л xylose. При ферментации дебариомицисом hansenii nrry -7483 использование глицерина 1,5% может увеличить производство д-арабитола в 4-5 раз по сравнению с 0,5% глицерола [35]. Во время роста и обмена веществ Венесуэла (боливарианская республика)sp. H2 [36] производство d-арабинитола значительно возросло с увеличением концентрации глюкозы, при этом оптимальной начальной концентрацией сахара было 250 г/л глюкозы. Однако слишком высокая концентрация субстратов может также нанести ущерб синтезу d-арабитола. Например, при выращивании зайгосахаромициса рухii JM-C46 производство d-арабитола не увеличивалось, когда концентрация глюкозы увеличилась с 200 г/л до 250 г/л.

Источники азота являются ключевыми элементами микробных ферментационных систем и тесно связаны с регулированием роста и метаболизма микробов. Например, оптимальным источником азота для Candida sp. H2[37] и Candida quercitrusa является дрожжевой экстракт, в то время как сульфат аммония является оптимальным источником азота для Pichia Manchurica[38] и Debaryomyces Hansenii. Кумдам [39] и ломан [40] пришли к выводу, что добавление соответствующего количества источника азота в среду может увеличить производство d-арабитола. Аналогичным образом, Jagtap et al. обнаружили, что родоспоридиум торулоидов IFO0880 может конвертировать xylose для производства высоких титров d-арабитола в средах, богатых азотом. Выход D-arabitol увеличился с увеличением содержания азота в среде. Однако высокие концентрации азота могут отрицательно сказываться на производстве d-арабитола штаммами клайверомициса охмери [41].

При микробной ферментации добавление нужного количества ионов металлов может поддерживать баланс осмотического давления внутриклеточной жидкости, повышать активность внутриклеточных ферментов, способствовать микробному росту и метаболизму. Иосикава изучил влияние ионов металлов на производство D-arabinitol Кандида quercitrusa и обнаружил, что ионы кальция способствуют производству D-arabinitol. Причина заключается в Том, что ионы кальция проникают в клетку и повышают активность ферментов в процессе роста клеток и обмена веществ. В другом исследовании, кумдам [42] и сундарамурти обнаружили, что ионов цинка, железа, марганца и меди могут способствовать метаболизму роста штаммов дебариомицидов непальцев и пичи манчурицы и увеличить производство d-арабинитола.

3.1 ксилитол дегидрогеназа

Ксилитол дегидрогеназа является ключевым ограничивающим цены ферментом в биосинтезе для производства d-арабинитола. XDH играет жизненно важную роль в метаболизме xylose микроорганизмами для производства D-arabinitol. В качестве обратимого фермента редокс каталитическая активность XDH зависит от кофакторов NAD+ и NADH [43, 44].

Этот фермент в основном находится в дрожжи, которые фермент xylose для производства xylitol, такие как Paecilomyces taphios, Candida shehatae, и Pichiastipitis [45]. Важными источниками XDH являются также филяментные грибы, такие как фузариум оксиспорум и нойросфора красса. Следует отметить, что активная центровая последовательность этих XDHs различных видов в значительной степени сохраняется [46].

Масаказу и др. [47] клонировали ген XDH из Gluconobacter oxycans ATCC621, чжан и др. [48] изучили ген XDH в Gluconobacter oxycans NH-10 и Qi et al. [49] клонировали ген XDH из Gluconobacter oxycans CGM CC 1.49.

Эти исследователи клонировали гены XDH из различных штаммов и успешно выразили их в Escherichia coli BL21. Они также изучили ферментативные свойства XDH и обнаружили, что ферментативные свойства этих XDHs из различных источников в некоторой степени схожи. Дальнейшие исследования показали, что XDH относится к короткоцепной дегидрогеназе семейства. При xylitol окислительной реакции с NAD+ в качестве кофермента оптимальный pH XDH составляет 11; В то время как в D-xylulose редукционной реакции с надх в качестве кофермента, оптимальный pH XDH составляет 5. Поэтому можно сделать вывод о Том, что оптимальный показатель pH XDH в реакции на окисление находится в диапазоне щелочности, в то время как оптимальный показатель pH в реакции на окисление находится в диапазоне кислотности.

Короче говоря, XDH биологически важен. Ферментационные свойства XDH в различных штаммах различны, но все они имеют определенную степень сходства с точки зрения последовательности белков и ферментативных свойств. Текущие исследования показывают, что XDH имеет различные оптимальные значения pH в различных условиях реакции, что обеспечивает основу для дальнейших исследований и применения фермента.

4. Молекулярная модификация

XDH обладает разнообразными каталитическими свойствами и играет важную роль в биокатализе. Однако природные ферменты все еще имеют ограничения с точки зрения активности, субстратного спектра и каталитической специфичности, что затрудняет достижение идеального уровня выхода продукции. В последние годы в ферментной модификации широко используются такие стратегии белковой инженерии, как целенаправленная эволюция, рациональный дизайн и полурациональный дизайн. Эти стратегии могут эффективно повысить эффективность ферментов для более полного удовлетворения фактических производственных потребностей.

5. Направление эволюции

С тех пор как Фрэнсис х. Арнольд впервые предложила концепцию направляющей эволюции в 1993 году, в этой области за последние десятилетия был достигнут значительный прогресс [50]. Основная идея направленной эволюции, которая играет важную роль в ферментной инженерии, заключается в моделировании естественного эволюционного процесса, введении искусственных случайных мутаций, а также в создании экрана для высокопроизводительных мутантов.

Кроме того, стратегия целенаправленной эволюции имеет то преимущество, что она может эффективно изменять функцию ферментов без глубокого понимания их структуры, функции и каталитического механизма. Основные шаги в рамках целенаправленной стратегии эволюции включают строительство мутантов и проверку библиотек мутантов. Этот процесс использует случайные мутации и методы генетической рекомбинации, такие как подверженные ошибкам ПЦР и перемещение ДНК [51].

Применение этих методов значительно повысило эффективность мутантского строительства и разнообразие мутантских библиотек. Однако осуществление стратегий целенаправленной эволюции сталкивается с некоторыми проблемами, особенно на этапе высокопроизводительной проверки [52]. Высокопроизводительный скрининг как метод быстрой идентификации и отбора мутантов высшей категории имеет решающее значение для целенаправленного процесса эволюции [53].

Высокопроизводительный метод скрининга для конкретной библиотеки мутантов должен быть специально разработан в соответствии с целевым продуктом, поэтому универсального метода скрининга не существует. Конкретная структура и проблемы процесса отбора на данном этапе, несомненно, усугубляют сложность целенаправленной стратегии эволюции. В целом, несмотря на специфический дизайн и проблемы метода высокопроизводительного скрининга, технология направленной эволюции по-прежнему считается эффективным инструментом молекулярной инженерии ферментов. Ее значительный вклад и сохраняющиеся тенденции в области развития свидетельствуют о Том, что эта область будет и впредь играть важную роль в области биотехнологии и смежных областях.

Ссылка:

[1] юбки - джей, - в норме. - г, Фигередо (фигередо) - м, et  al.  Производство и продажа Соединенные Штаты америки arabitol  Из российской федерации Gl ucose by Hansenula polymorpha[J]. Журнал по теме В области ферментации и Кольцо для биоинженерии, 1990,70(4):228-231.

[2]Moran J W, Witter L D. влияние производства сахара onDarabitol и метаболизма глюкозы в saccharomyces [J].Бактериологический журнал, 1979,138(3):823- 831.

[3]Murthy SN, Kumdam H, Gummadi SN. Производство арабитола микробными ферменами-тац-биосинтез И будущих применений [J].Международный журнал наук Basic & Прикладные исследования, 2014, 1:1-12.

[4] кумдам х, нараяна м с, гуммади с н. производство этанола и арабитола Debaryomyces Непальцы: Влияние на окружающую среду Соединенные Штаты америки В рамках процесса Параметры [J]. Министерство сельского хозяйства и развития Экспресс, 2013,3(1):23.

[5] чжан г, лайни, он п, и др. Характеристика сахарного спирта-производителя дрожжей Pichia  Anomala [J].  Журнал по теме   Соединенные Штаты америки По промышленному развитию  1. Микробиология  * * * *  Биотехнология, 2014,41(1):41 — 48.

[6] хуан вэй, ван сяодан, ли дунан и др. Прогресс в исследовании микробной ферментации D-arabitol [J]. Китай пивоварение, 2017, 36(09): 6-10.

[7] динь сяобин, ли цзунвэй, ян чжуаньцинь и др. Улучшенная бумажная хроматография для определения содержания изолюцина в жидкости, производящей фермент [J]. Наука и технологии пищевой промышленности, 2009, 30(08): 314 — 315.

[8] Akinosho H, Rydzak T, Borole A, et al. Токсикологические проблемы производства микробного биоэтанола и стратегии повышения толерантности [J]. Экотоксикология, 2015, 24(10):2156 — 2174.

[9] цянь вэйдун, нин сяосяо, ван лан и др. Метод быстрого отбора высокоурожайных дрожжевых штаммов D-arabinitol [J]. Журнал шаньси университета науки и техники, 2014(6):129 — 133.

[10] Spencer J F T, Sallans H R. производство полигидрических спиртов осмофильными дрожжевыми дрожжевыми станками [J]. Канадский журнал микробиологии, 1956, 2(2):72-79.

[11] ониши H, сузуки т. микробное производство ксилитола из глюкозы [J]. Прикладная микробиология, 1970, 18(6):1031 — 1035.

[12] сон вейбин, линь яньцин, ху хайян и др. Отбор и выявление штаммов, производящих D-arabitol, и оптимизация условий производства D-arabitol [J]. Acta Microbiologica Sinica, 2011, 51(03): 332-339.

[13] ли зе, чжао сяньцзинь, лю цзянцзюнь. Отбор и идентификация штаммов дрожжей, производящих d-арабинол [J]. Пищевая промышленность, 2012, 33(10): 27-30.

[14] го к, забедь, чжан х и др. Оптимизация ферментационной среды для нового изолированного дрожжевого штамма (Zygosaccharomyces rouxii JM-C46) и оценка факторов, влияющих на биоссинтез дарабитола [J]. Наука о продуктах питания Технологии, 019,99:319- 327.

[15] саха б с, сакакибарай, котта м. Журнал промышленной микробиологии и биотехнола-ogy, 2007,34(7):519-523.

[16] чжан Лили. Проверка высокопроизводительных дрожжевых штаммов д-арабинитола и изучение условий их ферментации [D]. Университет цзяньнань, 2009 год.

[17] нозаки х, сузуки с, цуёши н и др. Производство дарабитола компанией Metschnikowia reukaufii    AJ14787[J].     - бионаук,     B. биотехнология    и     Биохимия, 2003,67(9):1923 — 1929.

[18] чэн H, Lv J, ван H, и др. Генетически модифицированные дрожжи Pichiapastoris для преобразования глюкозы в ксилитол методом одноферментации [J]. Прикладная ми — кробиология и биотехнология, 2014,98(8):3539 — 3552.

[19] чжэн с, цзян б, чжан т и др. Комбинированный мутагенез и регулирование метаболизма в производстве энханседарабитола от Кандида параксилоза [J]. Журнал Indus — экспериментальная микробиология & Биотехнология, 2020,47(4):425 — 435.

[20] ван л, хой м, инь и др. Изоляция и скрининг высокопроизводительного штамма D-arabitol [J]. Журнал по темеСоединенные Штаты америкиFood Safety иQuality Testing, 2014, 5(12):4018-4025.

[21] Toyoda T, Ohtaguchi K. влияние температуры на производство дарабитола из лактозы Kluyveromyces lactis [J]. Журнал промышленной микробиологии и биотехнологии, 2011, 38(9):1179-1185.

[22] цай ли, чжан ян, чжу хуньян и др. Изоляция, скрининг и выявление штамма, производящего D-arabitol [J]. Пищевая и ферментационная промышленность, 2009, 35(01): 23-26.

[23] саха б с, котта с м  rouxii[J].    Journal   Соединенные Штаты америки  По промышленному развитию   1. Микробиология   * * * *  Биотехнология, 2007,34(7):519-523.

[24] цянь вэйдун, нин сяосяо, чжао дежи и др. Улучшение ферментации Hansenula polymorpha для производства D-arabitol с использованием комбинированной стратегии [J]. Anhui agriculture Science, 2014, 42(23): 7726-7728.

[25] ван ган, тан сяофан, чжан годун. Исследование по вопросу о преобразовании глюкозы в арабитол, проведенное хансенулой аномалой [J]. Шипин гонгье ке-джи, 2012(1):314-317.

[26] чжан Лили, ляо дефанг, дин чоньян и др. Ферментация глюкозы Hansenula polymorpha для производства D-arabitol [J]. Промышленная микробиология, 2010, 40(04):47 — 52.

[27] ду юань. Метаболическая инженерия пичи пасторис и биосинтез D-arabinitol [D]. Университет цзянсу, 2022 год.

[28]Jagtap S S, Rao C V. Production ofDarabitol fromDxylose by the oleaginous yeast Rhodosporidium toruloides IFO0880[J]. Прикладная микробиология и биотехнология — nology, 2018,102(1):143 — 151.

[29]Yoshikawa J, хабих, морита т и др. Производство дарабитола из сырого глицерола по   Candida    Quercitrusa [J].    Применение на практике   1. Микробиология   and     Биотехнология, 2014,98(7):2947 — 2953.

[30] ван уилиан, ян лианван, на шумин и др. Исследования по производству глицерола и арабитола дрожжами с высоким сопротивлением осмотического давления-iii. Условия для производства глицерола Zygosaccharomyces chevalieri Guill. 2.309 [J]. Acta Microbiologica Sinica, 1963(02):92-93.

[31] Toyoda T, Ohtaguchi K. роль лактозы в производстве дарабитола клюверомициными лактами, выращиваемыми на лактозе [J]. Прикладная микробиология и биотехнология, 2010, 87(2):691-701.

[32] сун вэнтао, сюй хуэй, лю цзянцзюнь. Влияние добавок на ферментацию D-arabitol [J]. Наука и техника о продовольствии, 2013, 38(06): 12-16.

[33]Qi X, Zhang H, Magocha T A и др. Улучшена выработка ксилитола путем выражения новелдарабитола дегидрогеназы из изолированной глуконобахтера сп. JX-05 и ко-би-преобразования цельных клеток [J]. Bioresour Technology, 2017,235:50-58.

[34]Ravikumar Y, Ponpandian LN, Zhang G, et al. Использование изомеров l- арабинозы для биологического производства дтагатозы: последние достижения и их применение [J]. Тенденции в пищевой науке и Технологии, 2021,107:16-30.

[35]Koganti S, Ju L. Debaryomyces hansenii fermentation for arabitol production[J]. Biochemical Engineering Journal, 2013,79:112-119.

[36] сон вейбин, линь яньцин, ху хайян и др. Отбор и выявление штаммов, производящих D-arabitol, и оптимизация условий производства D-arabitol [J]. Acta Microbiologica Sinica, 2011, 51(03): 332-339.

[37] сон вейбин, линь яньцин, ху хайян и др. Изоляция и идентификация романа Candida sp. H2 producingDarabitoland оптимизация производства дарабитола [J]. Вей шэн у сюэ бао, 2011,51(3):332-339.

[38]Sundaramoorthy B, Gummadi SN. Скрининг новых дрожжей Pichia manchurica для производства арабитола [J]. Журнал базовой микробиологии, 2019,59(3):256-266.

[39] кумдам х, нараяна м с, гуммади с н. производство этанола и арабитола дебариомицисом непальским: Влияние на окружающую среду И параметров процесса [J].  Министерство сельского хозяйства и развития Экспресс, 2013,3(1):23-28.

[40]Loman A A, Islam S, Ju L K. производство арабитола из ферментационного гидролиза соевой муки методом ферментации Debaryomyces hansenii [J]. Прикладная микробиология и биотехнология, 2018,102(2):641 — 653.

[41] чжу H Y, сюй H, дай X Y и др. Производство дарабитола новым изолированным ко-дамаей охмери [J]. Биохимическая инженерия, 2010,33(5):565-571.

[42] кумдам х, мурти с н, гуммади с н. производство этанола и арабитола дебариомициями Непальцы: Влияние на окружающую среду of  В рамках процесса Параметры [J]. Министерство сельского хозяйства и развития Экспресс, 2013,3(1):1-12.

[43] эренсбергер а, эллингра, уилсон ди кей. Структурированная инженерия косубстратной специфичности ксилитола дегидрогеназы [J]. Структура, 2006,14(3):567-575.

[44] юань цзюньхуа. Построение генетически модифицированных бактерий на основе 1,3- пропандиола дегидрогеназы клостридиума бутирикума и биосинтеза цельных клеток 1,3- пропандиола [D]. Университет цзянсу.

[45] чэнь гаоюн, е кай, ту чжэньдун и др. Прогресс в исследовании xylitol dehydrogenase [J]. Пивоваренная наука и техника, 2011(5):4.

[46] чжан хуанхуан. Клонирование и выражение ксилитола дегидрогеназы и этанола дегидрогеназы генов глуконобактерных оксиданов и биосинтеза целых клеток ксилитола [D]. Университет цзянсу, 2018 год.

[47] сугияма м, сузуки с, тонучи н и др. Клонирование гена xylitol dehydrogenase из оксиданов глуконобактера и совершенствование производства xylitol fromD Арабитол [дж]. Бионаук, биотехнология и биохимия, 2003,67(3):584-591.

[48] чжан дж., ли с., сюй х и др. Очистка ксилитола дегидрогеназы и улучшение производства ксилитола за счет повышения активности XDH и поставок NADH в Glucono- bacteroxydans[J]. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии, 2013,61(11):2861 — 2867.

[49]Qi X, Zhu J, Yun J, et al. Улучшенное производство xylitol: выражение xylitol dehy- дрогеназы от оксиданов глуконобактера и смешанная культура клеток отдыха [J]. Jour — nal of Bioscience and Bioengineering, 2016,122(3):257 — 262.

[50] He Peng. Молекулярная модификация и анализ механизма повышения каталитической эффективности стероида P450 дигидроксилаза CYP-cl3 [D]. Университет цзяньнань, 2022 год.

[51] Лу ян. Клонирование и совместное выражение арабол дегидрогеназы и ксилитол дегидрогеназы генов Gluconobacter thailandicus D [D]. Университет цзянсу, 2016 год.

[52] чжан юфей. Исследование совместного производства 3- гидроксипропионовой кислоты и 1,3- пропандиола Lactobacillus reuteri [D]. Университет цзянсу, 2021 год.

[53] юань цзяо. Строительство генетически модифицированной бактерии на основе грава-галактозидазы и л-арабинозы изомеров и биосинтеза д-тагатозы [г]. Университет цзянсу, 2021 год.