Как извлечь сапонины из Tribulus Terrestris?

Tribulus terrestris, также известный как Tribulus, жесткий Tribulus, или белый Tribulus- да- да. Горькая, острая, теплая природа, слегка токсичная, попадает в печень. Используется для лечения головной боли и головокружения, сыпь ветра и зуд, грудной клетки и гипохондрия distending боли, непроходимости груди и мастита, красные глаза и непроходимости глаз, потребитель-жажда и т.д. 1]. Исследования подтвердили, что Tribulus terrestris экстракт, особенноTribulus terrestris saponins, оказывает фармакологические эффекты, такие как улучшение сердечно-сосудистой системы, повышение половой функции, снижение липидов крови, снижение сахара в крови, антистарение и противоопухолевая терапия [2].

В настоящее времяИзвлечение и анализ активных ингредиентов в Tribulus terrestrisЯвляется основой для дальнейшего использования и исследований. В этой статье рассматриваются методы извлечения для всего tribulus saponins и методы анализа содержания и тестирования. Сравнивая различные методы извлечения и анализируя преимущества и недостатки каждого метода, обеспечивается основа для дальнейших исследований tribulus saponins.

1 методы извлечения для всех сапонинов в tribulus terrestris

Согласно литературным отчетам [4-8], методы извлеченияВсего сапонинов в Tribulus terrestrisИспользование главным образом методов экстракции растворителей. Методы экстракции растворителей можно резюмировать как традиционную экстракцию растворителей [145], микроволновую экстракцию [67] и ультразвуковую экстракцию [8] (микроволновую экстракцию и ультразвуковую экстракцию можно классифицировать как современные методы экстракции растворителей). Настоящий документ будет разъяснен в соответствии с тремя вышеупомянутыми методами.

1.1 традиционный метод экстракции растворителей

Метод экстракции растворителей основан на принципе аналогичных растворов, а химические компоненты извлекаются из сырья путем отбора соответствующего растворителя. Сапонины, как правило, растворимы в воде, метаноле и разбавленном этаноле, легко растворимы в горячей воде, горячем метаноле и горячем этаноле и нерастворимы в эфире, хлороформе и бензоле. Среди них, этанол и вода часто используются для извлечения сапонинов. Существует много традиционных методов извлечения сапонинов, таких как метод мацерации, метод обеззараживания и метод экстракции рефлюкса. Алкогольный метод выпадения осадков с использованием воды в качестве растворителя, как правило, используется для извлечения всех tribulus сапонинов. Метод использует воду в качестве растворителя, рефлюкса экстракции, фильтрации и концентрации для получения экстракта. Затем в экстракт добавляется этанол различных градиентов концентрации. Обычно, когда содержание алкоголя составляет от 40% до 80%, такие компоненты, как крахмаль, полисахариды, декстроин, аминокислотная слизистая резинка и белок, могут быть удалены, а сапонин остается в фильтрации [3]. Существуют также методы экстракции алкоголя, такие как метод экстракции спирта столбца и метод экстракции концентрации алкоголя.

В работе Wang Xiaoyang et al. 14 использовался метод экстракции спирта с использованием этанола в качестве растворителя для экстракции рефлюкса. В ортогональном методе испытания для предпочтительного процесса экстракции tribulus terrestris saponins использовались три метода, из которых метод экстракции спирта был рефлуксирован с 70% этанола в 3 раза, 2h каждый раз, обработанный макропористой адсорбционной смолой, концентрированной и сухой, чтобы получить продукт. Результаты показали, что содержаниеСапонин в сухом экстракте Tribulus terrestris составил 43,23%Уровень извлечения составил 80,31%. Цао жениян и др. [5 использовали ортогональный эксперимент с методом концентрации алкоголя, чтобы определить, что лучший процесс для извлечения tribulus saponins рефлукс 75% этанола три раза в течение 1 часа каждый раз. В результате общее количество сапонинов составило 52. - 19 процентов. Оба метода имеют высокую степень экстракции, но, как правило, имеют больше примесей и могут быть использованы для промышленного производства. Короче говоря, традиционный метод экстракции растворителей обычно используется для экстракции всех tribulus saponins из-за его преимуществ простоты в эксплуатации и низкой стоимости. Однако она также имеет некоторые недостатки, такие как длительное время извлечения и низкая безопасность.

1.2 метод микроволновой экстракции

Экстракция с помощью микроволновых волн является новым методом экстракции, который использует микроволновые волны для экстракции веществ. При этом методе микроволновые волны излучаются в растворитель и проходят через стенки камеры, чтобы попасть внутрь клетки. Поскольку полярные растворители и клеточные жидкости поглощают микроволновую энергию, температура внутри и вблизи клетки повышается, а давление испарителей увеличивается. Когда давление превышает несущую способность стенки клетки, стенка клетки разрывается, а активные ингредиенты, находящиеся внутри клетки, высвобождаются из клетки и переносятся в растворитель.

Эта технология подходит для извлечения природных веществ и может удовлетворять требованиям высокой эффективности, скорости и избирательности без ограничений. Li et al. [6 использовали ортогональный метод для оптимизации условий извлечения euphol. Оптимальными условиями процесса были объем пробы 0,18-1,15 мм, время извлечения 5 мин, микроволновая мощность 500 вт, соотношение твердой жидкости 1:20 (г · мл -¹) и измеренное содержание стерола 91,3%. Таким образом, экстракция с помощью микроволны является более быстрой и эффективной, чем традиционные методы, с преимуществами равномерного нагрева, экономии растворителей, простоты процесса и широкого применения. Однако она все еще имеет определенные ограничения в теории и применении. В настоящее время технологии и оборудование микроволновой экстракции редко используются в промышленном производстве и нуждаются в дальнейшем развитии [7].

1.3 метод ультразвуковой экстракции

Ультразвуковые волны создают высокоскоростной, сильный кавитационный эффект и возбуждают действие, разрывая клетки в лекарственных травах и вызывая проникновение растворителя в клетки, ускоряя тем самым распад эффективных ингредиентов лекарственных трав в растворителе. Применение этого метода при экстракции натуральных ингредиентов лекарственных средств получило более широкое распространение в последние годы. При извлечении сапонинов можно избежать разрушения структуры агликона. По сравнению с традиционным методом ультразвуковая экстракция имеет очевидные преимущества с точки зрения времени и скорости экстракции. Этот метод также использовался во многих исследованиях доИзвлеките все трибулы сапонины- да. Чжан джухон и др. [8 использовали ультразвуковое экстракцию с разбавленным этанолом в качестве растворителя в течение 30 минут для измерения общего содержания всех сапонинов в Tribulus terrestris. Затем очищается с помощью макропористой адсорбционной смолы. Первый набор данных показал, что максимальное содержание всех tribulus saponins составило 2,8%. Этот метод не только сокращает время экстракции и улучшает скорость экстракции, но и гарантирует, что ультразвуковая экстракция не изменит структуру активных ингредиентов. Поэтому ультразвуковая экстракция является одним из широко используемых современных методов экстракции растворителей.

Таким образом, сравнивая и анализируя упомянутые выше три различных метода извлечения, можно увидеть их соответствующие преимущества и недостатки, которые служат ориентиром для процесса извлеченияЭффективное извлечение всех сапонинов из Tribulus terrestris- да. См. таблицу 1.

2 методы анализа и тестирования для всех сапонинов из Tribulus terrestris

Общие методы анализаTribulus terrestris total saponins включает в себя ультрафиолетовую спектрофотометрию[10-13], высокопроизводительная жидкостная хроматография [14,5], капиллярный электрофорез [161 и др. Кроме того, ожидается, что метод бумажного чипа будет также применяться для определения tribulus terrestris total saponins.

2.1 ультрафиолетовая спектрофотометрия

Наиболее распространенным методом является ультрафиолетовый спектрофотометрический методОпределение содержания всех tribulus saponins- да. Этот метод позволяет не только измерять цветные вещества, но и точно измерять бесцветные вещества с консольными конструкциями [9]. Ли ян и др. [10 использовали мономерный сапониновый компонент Tribulus terrestris в качестве эталонного вещества, цветным реагентом был E реагент и этаноловым раствором серной кислоты, длина волны определения составляла 520 нм, и результаты показали, что существует хорошая линейная зависимость между количеством эталонного вещества и значением поглощения в диапазоне 0,06-0,2 мг. Ли ин и др. При сравнении различий в качестве травель различного происхождения общее содержание сапонина в плодах травель определялось с помощью ультрафиолетового спектрофотометра. Используя диосгенин в качестве эталонного вещества, был исследован выбор цветового разработчика с использованием HCIO₄: ваниллин (5%), как 4:1. Результаты показали, что диосгенин имеет хорошую линейную зависимость в диапазоне 7,52-150,4 грава, с высокой скоростью восстановления и прочной стабильностью.

Чжан пин и др. [12 использовали ультрафиолетовую спектрофотометрию для определенияОбщее содержание сапонина в Tribulus из разных источников- да. Tribulus terrestris был использован в качестве контролирующего вещества, и результаты показали, что линейное соотношение было хорошим в диапазоне 7,52-150,4 грава. Чжан суджун и др. [13 использовали ультрафиолетовую спектрофотометрию с диосмином в качестве эталонного вещества и детектора длиной волны 310 нм и цветоразработчик HCIO₄ для определения общего содержания сапонина в фруктах и стеблях и листьях Tribulus terrestris в разное время сбора урожая, чтобы сравнить результаты. Было установлено, что общее содержание сапонина стеблей и листьев Tribulus terrestris было гораздо выше, чем у фруктов, а общее содержание сапонина стеблей и листьев было самым высоким в июле. Короче говоря, ультрафиолетовый спектрофотометрический метод имеет преимущества относительно простого оборудования и работы, низкой стоимости, быстрой скорости анализа и высокой чувствительности по сравнению с другими методами спектроскопического анализа, поэтому он часто используется для анализа сапонина.

2.2 высокопроизводительная жидкостная хроматография

С популяризацией высокоэффективной жидкостной хроматографии все больше и больше компонентов сапонина обнаруживаются с помощью этого метода. Высокопроизводительная жидкая хроматография использует жидкость в качестве подвижной фазы, а нагнетательный насос высокого давления используется для транспортировки одного или смешанного растворителя, буфера или другой подвижной фазы, в результате чего образец подвергается испытанию на перемещение, с тем чтобы его компоненты были отделенны друг от друга. Высокочувствительный детектор преобразует это в обнаруживаемый сигнал, что позволяет проводить качественный и количественный анализ. Среди них детектор должен определяться лабораторными условиями и свойствами самого сапонина. Для некоторых сапонинов, таких как диосгенин, которые не обладают характерным ультрафиолетовым поглощением и не могут быть обнаружены с помощью ультрафиолетового детектора, следует использовать детектор рассеивания света. Li Haoyue et al. 114 использовали HPLC в сочетании с колориметрией для контроля качества Tribulus terrestris. Велчский лп-СИ 8 колонка была использована с метанолом: вода (80:20) в качестве подвижной фазы. Tribulus terrestris saponins были обнаружены и изучены с использованием Tribulus terrestris saponin в качестве индекса. Результаты показали, что как в методе ПЖК, так и в колориметрическом методе Tribulus saponin имеет хорошее линейное соотношение между 0,820 и 7,380 градиента и 24,600 и 86,100 градиента, со средним коэффициентом восстановления 99,3% и 99,5%. Этот метод отличается простотой и простотой в работе, быстротой, высокой эффективностью разделения, высокой чувствительностью и точными результатами измерений. Он подходит дляОпределение содержания трибулы.

2.3 капиллярный электрофорез

Капиллярный электрофорез представляет собой жидкий метод хроматографии, при котором ионы или ядерные частицы приводятся в действие высоковольтным электрическим полем и отделяются друг от друга капилляром. Среди них широко используется высокоэффективный капиллярный электрофорез. В анализе традиционной китайской медицины и натуральных лекарственных средств, будь то анализ сырых трав или готовых лекарственных средств, с его уникальными преимуществами в разделении и анализе, был достигнут определенный прогресс в разделении и количественном определении эффективных компонентов традиционной китайской медицины и натуральных лекарственных средств [161]. С ростом популярности технологии CE она превосходит HPLC с точки зрения экспериментальной стоимости, эффективности разделения, скорости разделения, микроколичественной оценки и адаптируемости. Она имеет преимущества высокой эффективности анализа, небольшого объема впрыска, простой работы, низкой стоимости анализа, а капиллярная колонна не легко загрязнена. [171.] Этот метод широко используется при разделении и определении содержания активных ингредиентов натуральных лекарственных средств. Тем не менее, в настоящее время не так много сообщений об использовании капиллярного электрофореза кНайдите все сапонины Tribulus terrestris.

2.4 метод определения бумажных чипов

Технология microfluidic с бумажным чипом является новым типом технологии microfluidic, который широко используется в медицинской диагностике, тестировании безопасности пищевых продуктов, мониторинге окружающей среды и других областях благодаря своей простой и быстрой обработке, простоте использования и низкой стоимости. Основной принцип заключается в формировании каналов на поверхности бумаги для направления жидкости I18. Среди них наиболее распространенным методом в настоящее время является формирование каналов на фильтрующей бумаге с использованием гидрофобных материалов, то есть составление карты гидрофилипно-гидрофобного контраста на бумаге для создания микромикролитражных капиллярных каналов на бумаге [19]. Решения могут приводиться в конкретные районы капиллярной силой, поэтому никакого внешнего оборудования не требуется. Широко используемые методы обнаружения включают главным образом фотометрическое обнаружение [201, флюоресценция, электрохемилюминесценция и электрохимические методы обнаружения, среди которых фотометрическое обнаружение является наиболее интуитивным и широко используемым методом.

Wu Jian et al. [2 использовали бумажный чип для обнаружения эффективного ингредиента phloretin в Fructus Gardeniae и добились удовлетворительных результатов. Hao Zhenxia et al. 1221 использовали микрофлюидический бумажный чип для быстрого обнаружения содержания полифенолов чая, с тем чтобы устранить разницу во времени разработки цвета во время испытания. С помощью этого метода, различные разбавленные образцы чая были быстро протестированы в течение 3 минут с момента начала реакции цветообразования, и полученные результаты были в хорошем согласии с обычным методом. Согласно многочисленным литературным отчетам, технология микрофлюидов с бумажными чипами по сравнению со стандартным методом значительно сокращает время, не требует профессионального лабораторного оборудования и может быть использована для обнаружения на месте, что имеет определенную практическую ценность. Таким образом, бумажные чипы могут быть использованы в быстром анализе и выявлении традиционной китайской медицины, и имеют широкие перспективы применения. В настоящее время естьНет литературы, сообщающей об обнаружении tribulus terrestris total saponins, и этот метод может стать приграничной областью исследований в аналитическом определении.

3. Заключение и перспективы

Сравнение преимуществ и недостатковТри метода извлечения tribulus terrestris total saponinsМожет служить справочным материалом для соответствующих исследователей, которые могут выбрать соответствующий метод извлечения в соответствии с различными потребностями. Ультрафиолетовая спектрофотометрия и высокофазные жидкостные хроматографические методы для тестирования tribulus terrestris total saponins были широко использованы из-за преимуществ их популярных инструментов и оборудования и простой работы. Капиллярный электрофорез и бумажная микрофлюидическая технология являются новыми методами разделения и анализа. Капиллярный электрофорез имеет широкие перспективы применения в анализе естественных лекарственных средств, и в этой области достигнут значительный прогресс. Технология бумажного микрофлюидида используется в различных областях исследований благодаря ее преимуществам, которые являются быстрыми и простыми. С развитием науки и техники методы извлечения и обнаружения будут и далее совершенствоваться и лучше служить научным исследованиям и разработкам в области натуральных лекарственных средств и традиционной китайской медицины.

Ссылки на статьи

[1] национальная фармакопеевая комиссия. Фармакопея людей и#39; китайская республика (часть I) [м]. Пекин: China Medical Science and Technology Press, 2010. 330.

[2] ли баолонг, ван кан, цзэн вэй и др. Прогресс в исследовании фармакологических эффектов Tribulus terrestris [J]. Журнал Jilin College of Pharmacy, 2011, 32(4): 223-225.

[3] бай юньцзе, лю кунданг. Прогресс в исследованиях методов экстракции стероидальных сапонинов [J]. Современные сельскохозяйственные науки и технологии, 2015, (15): 281 — 285.

[4] ван сяоян, ли дуовей, лин ху сяньвэй и др. Оптимизация процесса извлечения Tribulus terrestris saponins методом ортогонального испытания [J]. Северо-западный фармацевтический журнал, 2008, 23(1): 24-26.

[5] цао женян, вей бинг, ли бин. Исследование о процессе извлечения Tribulus terrestris сырая сапонин [J]. Современные продукты питания, 2015, (21): 74 — 77.

[6]Li TL,Zhang ZW,ZhangL, и др. усовершенствованный поверхностный метод ex- traction и определения стероидальных сапонинов в Tribulus terrestris с помощью целенаправленной экстракции с помощью микроволн в сочетании с GC-MS[J]. - джумал. Наука о разделении,2009,32(23 — 24):4167 — 4175.

[7] хi с, чжан у, хоу м и др. Применение технологии микроволновой экстракции при экстракции эффективных компонентов традиционной китайской медицины. Фармацевтическая промышленность китая, 2014, 23(3):94-96.

[8] чжан дж., ван цз. определение общего содержания сапонина в Tribulus terrestris L. Chinese Journal of Clinical Pharmacy, 2001, 10(4): 244-246.

[9] чжан хуан, Лу джинкай. Прогресс в исследовании метода извлечения и определения содержания сапонинов [J]. Китайская современная традиционная медицина, 2006, 8(3): 25-28.

[10] Li Yan, Hu Rong, Wang Lijing и др. Исследование по определению общего содержания сапонина в Tribulus terrestris L. [J]. Журнал Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, 2014, 26(1): 59-61.

[11] ли ин. Сравнительное исследование качества Tribulus terrestris L. из различных источников [J]. Журнал ляонинского университета традиционной китайской медицины, 2012, 14(4): 225.

[1] чжан пин, чжоу сюй, ван цзябо и др. Определение общего содержания сапонина в Tribulus terrestris различного происхождения ультрафиолетовой спектрофотометрией [J]. Журнал китайских людей#39; с освободительной армией, 2010, 26(6): 533-535.

[1] жанг суцзюнь. Анализ общего содержания сапонина в Tribulus terrestris фруктов и стеблей в разное время сбора урожая [J]. Китайский журнал экспериментальной фармакологии, 2010, 16(13): 80-81.

[14] ли хаоюэ, лю шупин, ма синюэ и др. Исследование метода двойного индекса для контроля качества лекарственных материалов Tribulus terrestris [J]. Китайский фармацевт, 2015, 18(4): 552 — 554.

[15] Lv Dan, Tang Kehui, Wang Yuchi и др. Применение капиллярного электрофореза в фармацевтическом анализе [J]. Аптека пролива 2018, 30(3): 19-21.

[16] лю юанхуай. Исследования и применение капиллярного электрофореза естественных лекарственных средств [D]. Фуцзянь: фуцзянский университет, 2004.

[17] тянь тянь, хуан ишунь, линь бинцян и др. Разработка и применение технологии microfluidic с бумажными чипами [J]. Журнал аналитического тестирования 2015, 34(3): 257-267.

[18] сюй ли, рцвид  Р, балерини, вей шен. Взгляд на бумажную микрофлюидную продукцию. Нынешнее положение и будущие тенденции [J]. Biomi- crofluidics.2012,6(1):011301.

[19]Ellerbee AK,Phillips ST,Siegel A C,et  Al.количественная оценка  Колори-метрические анализы в бумажных микрожидкостных устройствах путем измерения пропускания света через бумагу [J].Anal.Chem.,2009,81(20):8447-8452.

[20] у цзянь, чжан е, чжан мэньгю. Простая подготовка бумажного чипа и его применение при обнаружении эффективных компонентов в коже фэндана [J]. Химическая проектно-конструкторская связь, 2019, 45(1): 143.

[21] хао чжэнься, цзинь Лили, чжоу сухуан и др. Микрожидкий бумажный чип для быстрого обнаружения содержания полифенола чая [J]. Аналитические инструменты, 2016, (в11): 12-13.