Как исследовать экстракт полифенола граната?

Punica granatum L. — растение в семье Punicaceae. Это завод двойного назначения, который используется как для лекарств и продуктов питания. Произрастает в небольших странах азии, таких как Иран и Афганистан. Сборник Materia Medica показывает эффективность граната в борьбе с диареей, кровавым диареей, пролапсом и вагинальным испарением при менопаузе. Его корни, листья, цветы, фрукты, кожуры и семена могут быть использованы в медицине.

Экстракт граната содержит полифенолыС физиологическими мероприятиями, такими как антиоксиданты, антистарение, антирак, антибактериальные, увлажняющие кожу и повышающие красоту, снижение артериального давления и профилактика сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний [1-2]. Его основные ингредиенты включают в себя элагическую кислоту, пуникалагин, галлическую кислоту и т.д. Гранаты являются традиционным лекарственным травом, имеющим те же свойства, что и продукты питания, и их лекарственная и пищевая ценность все больше ценится. Тем не менее, как лекарственное растение, особенно важно выбрать соответствующие фармакологические ингредиенты. Выбор оптимального процесса извлечения конкретных целевых компонентов всегда был в центре внимания фармацевтических исследований. По мере развития науки и техники аналитические инструменты постоянно совершенствуются, с тем чтобы на основе избирательности и чувствительности испытаний можно было получать больше информации о соединениях и увеличивать количество анализируемых соединений. Ниже приводится обзор процессов экстракции и методов испытания гранатовых полифенолов за последние годы.

1 метод извлечения

1.1 метод экстракции растворителей

Метод экстракции растворителя дляПолифенолы гранатаЯвляется простым, стабильным и надежным, и подходит для извлечения большинства китайских медицинских материалов. Однако органические растворители являются дорогостоящими и загрязняют окружающую среду, и их потребление является высоким. Этот метод обычно использует метанол, этанол, ацетон и этилацетат в качестве растворителей. Эти органические растворители обладают хорошей растворимостью для полифенолов, не подвергаются химическим реакциям и легко отделяются друг от друга. Jia В то же время- эл. - привет.[3] использовали 20% этанола в качестве растворителя, соотношение жидкости к материалу 1:20 и температуру экстракции 50 °C в течение 1 ч, достигая выхода полифенола в 22,86%. Sun et al. [4] использовали 50% этанола в качестве растворителя, соотношение жидкости к материалу 25:1 и температуру экстракции 70 °C в течение 1,5 ч, достигая выхода полифенола в 16,28%. Ван и др. [5] проверили экстракционные растворители для всех полифенолов из гранатового гороха в синьцзяне, и результаты показали, что выход полифенолов является метанолом > Этанол > > Одежда, обувь, материалы и аксессуары > > аксессуары для одежды > - этилацетат.

1.2 ультразвуковая экстракция

Ультразвуковая экстракция не требует нагрева, имеет высокую скорость экстракции, короткое время экстракции, проста и проста в эксплуатации, и подходит для экстракции большинства китайских лекарственных ингредиентов. Однако обеспечение безопасности ультразвуковых приборов сопряжено с трудностями. Жао и др. Время экстракции составило 35 мин (1/7 времени дрожания экстракции), объемная доля этанола — 59%, ультразвуковая мощность — 90 вт, выход экстракции — до 321,26 мг/г. Wang et al. [7] оптимизировали процесс экстракции полифенолов гранат-перца с использованием ультразвуковой экстракции с использованием двухфакторной универсальной регрессии вращения комбинированной конструкции: концентрация этанола 50%, соотношение материалов и жидкости 1:25, время ультразвука 30 мин, мощность ультразвука 360 вт, а выход полифенолов гранат-перца достигал (21.22± 0,06)%.

1.3 извлечение с помощью микроволн

Использование микроэлектрических источников энергии позволяет экономить энергию, уменьшает загрязнение окружающей среды, имеет высокую тепловую эффективность и не требует предварительной обработки, например сушки, упрощения процесса и сокращения инвестиций. Он известен как "зеленый процесс экстракции" и используется для экстракции ализарина из растений и для проведения мониторинга процессов и контроля качества полимеров и их добавок. Однако оборудование дорогое и неудобное в обслуживании. Сонг и др. [8] получили сырой экстракт с содержанием полифенола 19,548 г /100 г при оптимальных условиях извлечения (40% этанола, мощность извлечения 242 вт, время извлечения 60 с и соотношение материалов и жидкости 1:5). Liu et al. [9] использовали микроволновую экстракцию для извлечения полифенолов из гранат-шпиля. И ортогональное испытание было использовано для определения оптимального процесса экстракции, как 30% этанола раствор, соотношение материалов и жидкости 1:20, экстракционная мощность 300 вт, экстракционная температура 60 градусов, время экстракции 100 с, и выход полифенола до 26,91%.

1.4 экстракция сверхкритической жидкости

Экстракция сверхкритических жидкостей является методом экстракции и разделения с использованием сверхкритических жидкостей в качестве растворителей. Этот метод работает при температуре, близкой к комнатной, и особенно подходит для извлечения и разделения чувствительных к жаре природных продуктов и разделения летучих веществ. Он также подходит для разделения и извлечения твердых веществ. Его общим растворителем является CO2, который обладает превосходными свойствами, такими как низкая вязкость, высокая диффузивность, высокая плотность и высокая растворимость. Feng et al. [10] сравнивают сверхкритическую экстракцию CO2, ультразвуковую экстракцию, микроволновую экстракцию и экстракцию мацерации для экстракции галлиевой кислоты из гранатового шелуха с содержанием 0,396%, 0,311%, 0,271% и 0,498% соответственно. Можно видеть, что сверхкритическая добыча CO2 имеет относительно высокую эффективность.

1.5 метод фермента

Метод фермента имеет преимущества мягких условий экстракции, высокой избирательности, высокой скорости экстракции, энергосбережения и охраны окружающей среды, простой и практически осуществимый процесс, но он имеет относительно строгие требования к условиям экстракции, а определение типа фермента и определение оптимального pH, температуры и концентрации являются относительно строгими. Ван и др. [11] использовали метод фермента для изучения полифенолов в гранатовом кожуре. Было проведено одно факторное исследование для изучения воздействия различных концентраций целлюлазы, пектиназы, сложного фермента, времени ферментативного гидролиза, температуры ферментативного гидролиза и pH ферментативного гидролиза на урожайность полифенолов. Для оптимизации технологических параметров была использована двухуровневая обобщенная комбинированная конструкция регрессии вращения. Результаты показали, что факторами, влияющими на урожайность полифенолов, является время ферзиматического гидролиза > Концентрация фермента > PH > г-н > Температура энзиматического гидролиза, было установлено, что выход полифенола достиг (23,87 градиента 0,08)%, когда концентрация качества комплексного фермента составляла 0,25 мг/мл, время энзиматического гидролиза — 150 мин, температура — 50 градиента, а pH фермента — 6,0. Коэффициент извлечения был на 16,84% выше, чем при использовании растворителя.

2 исследования по методам обнаружения

2.1 метод фурфуральдегида

Принцип метода фолин фенола для определения полифенолов заключается в Том, что сокращение фенольных гидроксильных групп, количество фенольных гидроксильных групп и количество цветных химических веществ, образующихся с окисляющим реагентом, линейно связаны в определенном диапазоне. Этот метод имеет преимущества низкого потребления реагента, удобная работа, высокая чувствительность и хорошая стабильность, но подготовка реагента является более проблематичным.

Нан и др. [12] использовали галлическую кислоту в качестве стандарта для определения содержания полифенола в листьях гуавы. Когда фолиновые реагенты разбавлялись 10 раз, 40% Na2CO3, время реакции составляло 7 мин, а температура реакции 50 °C, существовала хорошая линейная зависимость между содержанием полифенола и поглощением в пределах 0-500 мг. Du et al. [13] использовали этот метод для определения содержания полифенола в гранатовом кожуре. Концентрация реагента составила 0,6 моль/л, 0,150 г/мл Na2CO3, и реакция была проведена в темноте при 25 градусах в течение 50 мин. длина волны обнаружения составила 765 нм. Существует хорошая линейная зависимость между концентрацией галлиевой кислоты и значением поглощения в диапазоне 1-6 мг/л. Zhu et al. [14] использовали галлическую кислоту в качестве стандарта для определения содержания полифенола в гранатовом кожуре. 1.00 мл ферингового реагента, 3.00 мл 10,0 г /100 мл Na2C03, температура реакции 25 °C, время реакции 120 min, измерение длины волны 672 нм, в диапазоне 10-100 μg/mL, концентрация галлической кислоты имеет хорошую линейную зависимость с абсорбацией.

2.2 спектрофотометрия

Спектрофотометрия очень специфична, проста и быстра, с хорошей воспроизводимостью, но не очень точна. Он подходит для качественного и количественного анализа наиболее активных ингредиентов в китайских травяных лекарственных средствах. Ван и др. [15] использовали ультрафиолетовую спектрофотометрию для определения общего содержания таннина в гранатовом кожуре. Галлическая кислота использовалась в качестве контрольного вещества, и длина волны обнаружения составляла 760 нм. Существует хорошая линейная зависимость с поглощением в диапазоне 0,0502-0,2526 градиента/мл (r = 0,9996). Янг и др. [16] использовали ультрафиолетовую спектрофотометрию для определения содержания галлиевой кислоты, основного компонента гранатовой и гранат-кожуры.

Результаты показали, что содержание галлиевой кислоты в гранатовой кожуре несколько выше, чем в гранатовой кожуре. Ванг [17] использовал спектрофотометрию для определения содержания гидролизованного полифенола в экстракте семян граната и обнаружил, что существует хорошая линейная зависимость между концентрацией пирогальевой кислоты и поглощением в диапазоне 0,014-0,07 мг/мл (r = 0,999 2). Содержание гидролизованного полифенола в экстракте семян граната составило 7,55%. Чжан и др. [18] использовали метод casein для определения содержания таннина в гранатовом кожуре. Результаты показали, что содержание таннина имеет хорошую линейную зависимость в диапазоне 1,02-6,12 г/мл (r = 0,9993), скорость восстановления пробы составила 97,4%, а осб — 1,21% (n = 6). Чжоу и др. [19] сравнили урожайность полифенола гранатовой коры с использованием различных методов экстракции путем измерения содержания полифенола с помощью колориметрического метода феррического тартрата. Результаты показали, что микроволновая экстракция полифенолов гранатового гороха в двухфазной водной системе на основе этанола-аммония имеет более высокую урожайность.

2.3 высокопроизводительный капиллярный электрофорез

Этот метод имеет характеристики высокой эффективности колонн, быстрой скорости разделения, высокой избирательности и простой инструмент. Однако воспроизводимость разделения зависит от небольшого объема впрыска, плохой подготовки, низкой чувствительности и того факта, что электрофорез может варьироваться в зависимости от состава пробы. Чжоу и др. [20] использовали непокрытый капиллярный столб, буферный раствор 30 ммоль/л аммония бутанолата -30 ммоль/л дикалия фосфата (20:9), напряжение разделения 20 кв, длину волны обнаружения 254 нм, температуру колонки 25 °C и условия инжекции 25 мбар и 5,0 с. Было определено содержание элагической кислоты в экстракте гранат-кожуры. Обнаруженная концентрация элагической кислоты находилась в диапазоне 0,039 8-0,318 4 мг/мл, и концентрация имела хорошую линейную связь с пиковой зоной (r = 0,999 3).

2.4 высокопроизводительная жидкостная хроматография

Высокопроизводительная жидкостная хроматография (HPLC) является чувствительной, быстрой и точной. В принципе, он может использоваться для разделения и анализа органических соединений с высокой температурой кипения, низкой термоустойчивостью и относительной молекулярной массой ≥400. Однако пробу необходимо предварительно обработать перед впрыском. Liu et al. [21-22] использовали высокопроизводительную жидкую хроматографию обратной фазы (RP-HPLC) для одновременного определения содержания галлиевой кислоты, элагической кислоты, пуникалагина и элагической кислоты в гранатовом кожуре и соке. Количество впрысков галлиевой кислоты, элагической кислоты, пуникалиновой и элагической кислоты находилось в диапазоне 0,020-0,320 градиента, 0,038-0,608 градиента, 0,074 ~ 1,184 градиента, 0,039 ~ 0,624 градиента, и концентрации указывают на хорошую линейную связь с соответствующими пиковыми областями (r составляет 0,999-7, 0,997-1, 0,997-8 и 0,999-4, соответственно). Он может использоваться в качестве метода обнаружения четырех компонентов полифенола в гранатовом соке и гранатовом кожуре. Ding et al. [23] определяют содержание элагической кислоты в экстракте гранат-шпиля с помощью HPLC.

При оптимальных условиях обнаружения элагическая кислота имела хорошую линейную зависимость от пиковой площади в диапазоне 5,36-171.40 грава/мл, поэтому ее можно использовать для определения содержания элагической кислоты в экстракте гранат-шпиля. Lei et al. [24] использовали ГПЛК для определения содержания элагической кислоты в плазме крыс после перорального введения экстракта листа граната. Результаты показали, что элагическая кислота у крыс распределялась в соответствии с двухслойной моделью с низкой концентрацией пероральной крови, поглощаемой в основном через желудок, в течение короткого времени до пика, быстрого поглощения, быстрого распределения и устранения. Поглощение элагической кислоты листьями граната превышало поглощение самой элагической кислоты.

Luo et al. [25] использовали RP-HPLC для одновременного определения содержания пуникалина и элагической кислоты во влагалищном экстракте гранат-кожуры. Пуникалин имел хорошую линейную зависимость в диапазоне 0,098-0,610 мг/мл (r = 0,999 1), элагическая кислота в 0,011 ~ 0,060 мг/мл (r = 0,999 8) имеет хорошую линейную зависимость. Этот метод является точным, простым и имеет сильную специфику. Он устанавливает метод контроля качества вагинальных таблеток, полученных из гранатовой кожуры. Li et al. [26] использовали rc -HPLC для определения компонента таннина punicalagin в гранатовом кожуре, и было установлено, что количество пуникалагина является высоким (10%), что соответствует стандарту не менее 10% массовой доли таннина, предусмотренному в издании 2005 года "people"#39; китайская республика фармакопея. Parida Abliz et al. [27] использовали ГПЛК для определения содержания галлиевой кислоты в синьцзян-гранатовой кожуре, что показало хорошую линейность в диапазоне 9-90 мл, что указывает на точность и надежность метода.

2.5 жидкая хроматография-массовая спектрометрия

Жидкостная хроматография-массовая спектрометрия (лк-мс) сочетает в себе мощные возможности разделения и анализа жидкостной хроматографии (лк) с чувствительными возможностями идентификации и структурного анализа масс-спектрометрии (мс), обеспечивая надежную и точную информацию об относительной молекулярной массе и структуре. Xu et al. [28] использовали лк-мс для идентификации основных полифенолов в натуральном гранатовом соке. Предварительный анализ показал, что гранатовый сок содержит элагическую кислоту, пуникалин, апигенин, апигенин -7- o -β- d -glucopyranoside, rutin, 3,3',4' 5,7- пентагидроксифлаванон и 3,3',4' 5,7- пентагидроксифлаванон -6- д-глюкопираносайд. Бегоя серда и др. [29] разработали метод анализа HPLC-MS-MS для выявления биодоступности и метаболитов основного компонента полифенола граната пуникалагин у крыс. Это был первый отчет о всасывании элагитаннинов в плазму.

2.6 прочие расходы

Tang et al. [30] использовали комплексометрический метод для определения содержания таннинов в гранатовом кожуре и установили, что содержание различных полифенолов в различных разновидностях гранатового кожура существенно различается. Ван и др. [31] использовали прусский синий метод для определения содержания полифенолов в 8 видах фруктов, таких как гранаты. Результаты показали, что содержание полифенолов и таннинов в экстракте положительно коррелируется с его антиоксидантными свойствами. Зенг и др. [32] использовали метод фосфомолибдического кислотно-казеина для определения общего содержания таннина в гранатовом кожуре. Этот метод имеет характеристики высокой специфичности, простоты и простоты работы, стабильных результатов и хорошей воспроизводимости. Ji et al. [33] использовали капиллярный электрофорез для одновременного обнаружения двух компонентов элагической кислоты и пуникалина в экстракте гранат-шпиля. По сравнению с HPLC тест t показал, что разница между двумя группами данных не является статистически значимой, а коэффициенты корреляции обоих методов составляют > 0,998, что свидетельствует о высокой точности.

3. Резюме

В настоящее время существует несколько методов извлечения полифенолов граната, включая экстракцию растворителей, экстракцию с помощью ультразвука, экстракцию с помощью микроволн, экстракцию сверхкритической жидкости и ферзиматические методы. Среди них метод экстракции растворителей является традиционным методом экстракции гранатовых полифенолов, который является наиболее широко используемым. Этот процесс является относительно простым, стабильным и надежным, однако органические растворители потребляются в больших объемах, что является дорогостоящим и загрязняет окружающую среду. Ультразвуковая экстракция является более экономичным с точки зрения затрат времени и энергии методом, чем растворитель, с высокой скоростью экстракции и быстрой скоростью экстракции, и широко применяется. Сверхкритическая экстракция жидкости имеет отличные транспортные свойства, высокую проницаемость, высокую скорость экстракции и мягкие условия эксплуатации. Особенно подходит для отделения теплочувствительных веществ, но крупные единовременные капиталовложения, низкая доходность продукции, и применяется только для извлечения нескольких ингредиентов; Добыча с помощью микроволн экономит энергию, труд и время, является экологически чистой и устойчивой технологией; Ферментативные реакции отличаются высокой спецификой, мягкими условиями, высокой интенсивностью добычи, экологичностью и энергосбережением и имеют большой потенциал развития. Конечно, необходимы дальнейшие исследования, чтобы найти лучший способ извлечения, разделения и очистки гранатовых полифенолов.

В настоящее время основными методами определения содержания полифенола в гранатах являются метод фолина фенола, спектрофотометрия, высокопроизводительный капиллярный электрофорез, HPLC, rc -HPLC и dc-ms. Метод фолина фенола является весьма чувствительным, но менее конкретным; Метод спектрофотометрии очень специфичен, быстр и стабилен, имеет хорошую воспроизводимость, но менее чувствителен; Высокопроизводительный капиллярный метод электрофореза имеет высокую эффективность колонн, быструю сепарацию, небольшой объем впрыска, низкое потребление реагента; HPLC имеет характеристики высокого давления, высокой эффективности, высокой скорости, высокой чувствительности и широкий диапазон применения. Однако в силу ограничений, связанных с эффективностью колонки, она обычно используется для одновременного количественного определения одного или двух компонентов и не подходит для одновременного определения нескольких компонентов; Технология лк-мс стала сегодня одним из важнейших методов разделения и идентификации благодаря мощному потенциалу анализа и идентификации. Она играет еще более важную роль в области аналитической химии, однако ее оборудование является дорогостоящим и требует высококвалифицированных операторов, поэтому оно пока еще не получило широкого распространения.

Ссылка:

[1] Sumner MD, elliot-euer M, Weidne C, et al. Влияние потребления гранатового сока на миокардиальную пеффузию у пациентов с ишемической болезнью сердца [J]. Am J кардиол,2005,96:810-814.

[2] - сирам. Нп, Адамс (США) - с, 1. Хеннинг - см, et  al.  В случае необходимости Витаро-антипролиферативная, апоптотическая и антиоксидантная деятельность пуникалагина, элагической кислоты и всего гранатового экстракта укрепляется в сочетании с другими полифенолами, содержащимися в гранатовом соке [J]. J Nutr Biochem,2005,16(6):360-367.

[3] цзя дункин, яо кай, тан вэй и др. Оптимизация условий экстракции полифенола из гранатовой шелушки [J]. Лесная химическая промышленность, 2006, 26(3): 123-126.

[4] сун лэнпинг, чжан бин, чжао дацин и др. Оптимизация процесса экстракции полифенолов из гранатовой шелушки [J]. Упаковка и пищевая техника, 2007, 25(4): 20-23.

[5] ван сяоюй, гао сяоли, маерден махмути. Экспериментальное исследование по экстракции полифенолов из гранатовой кожуры в синьцзяне [J]. Китайская этническая и народная медицина, 2008, 18(1): 8-10.

[6] чжао яньхун, ли цзянке. Создание математической модели экстракции полифенолов из гранатового шелуха с помощью ультразвука с использованием метода поверхностной реакции [J]. Переработка сельскохозяйственной продукции, 2009 (3): 126-131.

[7] ван хуабин, бао сяовей, хан хайся и др. Исследование о процессе экстракции полифенолов из гранатовой кожуры в синьцзяне [J]. Продукты питания и оборудование, 2010, 26 (5): 137 — 140.

[8] сон вэйвэй, цзяо широнг, чжоу цзя и др. Микроволновая экстракция полифенолов из гранатового гороха и изучение антиоксидантных и антибактериальных эффектов экстракта [J]. Современные науки и технологии, 2008, 24(1): 23-27.

[9] лю хон, ао бо, фан шухуэй и др. Экспериментальное исследование по микроволновой экстракции полифенолов из гранатового кожуха в хуили, сычуань [J]. Пищевая промышленность и ферментация, 2008, 36(26): 11172-11173.

[10] Feng W Q, Li H. сравнение четырех методов извлечения галлиевой кислоты из гранатового шелуха [J]. Китайская медицина Herald, 2008, 14(8): 16-17.

[11] Wang H B, Wang S, Fu L. исследование по экстракции полифенолов из гранатового шелуха методом ферзиматики [J]. Китайский журнал пищевой науки, 2012, 12(6): 56-65.

[12] нан чжи, ли юанжи, хе луокян и др. Оптимизация условий определения содержания полифенола в листьях гуавы [J]. Переработка сельскохозяйственной продукции, 2009(3): 181-192.

[13] дю дандан, ли цзянке. Оптимизация условий определения содержания полифенола в гранатовой кожуре фолином-цветометрией [J]. Journal of Northwest A&F University: Natural Science Edition, 2011, 39(5): 190-196.

[14] чжу кайпин, ся дешуй. Определение содержания полифенолов в экстракте гранат-шпиля фолином-цветометрией [J]. Спектральная лаборатория, 2012, 29(3): 1356-1360.

[15] ван кейн, цзоо хунди, ян лимин. Определение общего содержания таннина в гранатовой кожуре с помощью ультрафиолетовой спектрофотометрии [J]. Журнал гиянского колледжа традиционной китайской медицины, 2007, 29(6): 66-67.

[16] ян цяоху, цзя хайин, ю хайтао и др. Сравнение определения содержания галлиевой кислоты в гранате и гранатовом горохе [J]. Китайский журнал этнической медицины, 2003, 9(1): 34-35.

[17] ван хунвэй. Определение содержания гидролизованного полифенола в экстракте гранатовых семян [J]. Журнал шаньцю, 2009, 25(6): 80-82.

[18] чжан сяоин, парида аблиз, чжу ян и др. Определение содержания таннина в гранатовой кожуре различного происхождения в синьцзяне методом casein [J]. Наука о еде, 2009, 30(8): 260 — 262.

[19] чжоу аньцюнь, тан цзиньлян, фэн вуцюнь и др. Исследование урожайности полифенолов, извлекаемых из гранат-кожуры различными методами [J]. Китайская медицина Herald, 2011, 17(12): 68-69.

[20] чжоу бенхун, у чжэньхуа, ли сяоцзюнь и др. Определение элагической кислоты в гранатовом кожуре путем высокопроизводительного капиллярного электрофореза [J]. Китайская аптека, 2005, 16(24): 1893 — 1894.

[21] лю чжэньпин, чэнь сяньгуй, пэн хайян и др. Одновременное определение четырех компонентов полифенола в гранатовом кожухе методом RP-HPLC [J]. Китайская аптека, 2013, 24(3): 238-240.

[22] лю чжэньпин, чэнь сяньгуй, пэн хайян и др. Определение четырех компонентов полифенола в гранатовом соке с помощью RP-HPLC [J]. Китайский журнал пищевой науки, 2013, 13(1): 183-187.

[23] динь нан, гао сяоли. Определение содержания элагической кислоты в экстракте гранат-шпиля с помощью HPLC [J]. Журнал синьцзян медицинского университета, 2012, 35(6): 770-772.

[24] лэй F, Xing D, Xiang L, et al. Фармакокинетическое исследование элагической кислоты в экстракте листа граната у крыс [J]. Оценка наркотиков, 2005, 2(1): 38-41.

[25] Лу юцин, ли ян, ре имугули абдулла и др. Одновременное определение содержания пуникалина и элагической кислоты во вагинальных ффервесентных таблетках, содержащих экстракт гранат-перца, с помощью RP-HPLC [J]. Китайская травяная медицина, 2011, 42(10): 2011 — 2013.

[26] ли хайся, чжан хонг лин, лю янзе и др. Определение содержания пуникалина в гранатовом горошине с помощью RP-HPLC [J]. Китайская травяная медицина, 2006, 37(5): 780-781.

[27] Parida Abliz, Zhang Lijing, Reena Kasim, et al. Определение галлиевой кислоты в гранатовом кожуре из синьцзяна с помощью высокопроизводительной жидкой хроматографии [J]. Национальная медицина, 2007, 18(10): 2455-2456.

[28] сюй цзинь, вэй цзиню, го цзифен и др. Выделение и идентификация некоторых полифенолов в гранатовом соке [J]. Китайский журнал пищевой науки, 2010, 10(1): 190-199.

[29] бегоя серда, Рафаэль лорач, хосе дж. Оценка биодоступности биодоступности и метаболизма у крысы пуникалагина, антиоксидантного полифенола из гранатового сока [J]. Первоначальный взнос,2003 год,42(1):19-28.

[30] тан Лили, лю линвей, сунь липан и др. Экстракция и анализ состава полифенолов в гранатовом горохе [J]. Исследования и разработки в области продовольствия, 2010, 31(5): 121 — 125.

[31] ван чжиюань, ли цинбяо, ян цуйсян и др. Содержание полифенола и антиоксидантные свойства восьми плодов [J]. Исследования и разработки природных продуктов, 2007, 19(6): 1040-1043.

[32] цзэн ин, у фэн, чжоу бенхон. Определение общего содержания таннина в гранатовом горошине фосфомолибдическим кислотно-касеиновым методом [J]. Китайский фармацевт, 2010, 12(13): 1775-1776.

[33] цзи байхуэй, ян сяосяо, ни синцзянь и др. Определение элагической кислоты и пуникалина в гранатовом кожуре путем капиллярного электрофореза [J]. Журнал аналитического тестирования, 2013, 32(3): 367-371.