Как исследовать экстракт полифенола граната?

Пуника гранат л. is a plant in the family Punicaceae. It is a dual-purpose plant that is used for both medicine and food. It is native to countries in Asia Minor such as Iran and Afghanistan, and has a cultivation history of nearly 2,000 years in China. В настоящее времяCompendium of Materia Medica records the efficacy of pomegranate in “stopping diarrhea, bloody diarrhea, prolapse, and vaginal discharge in menopause.” Its roots, leaves, flowers, fruits, peels, and seeds can all be used in medicine.

Pomegranate extract contains polyphenols with physiological activities such as antioxidant, anti-aging, anti-cancer, antibacterial, skin-moisturizing and beauty-enhancing, blood pressure lowering and prevention of cardiovascular and cerebrovascular diseases [1-2]. Its main ingredients include ellagic acid, punicalagin, gallic acid, etc. Pomegranate is a traditional medicinal herb with similar properties to food, and its medicinal and edible value is being increasingly valued. However, as a medicinal plant, it is particularly important to select the appropriate pharmacological ingredients. Selecting the best process to extract specific targВ то же времяcomponents has always been the focus of pharmaceutical research. With the development of science and technology, analytical instruments are constantly being improved, so that more information about compounds and an increase in the types of compounds that can be analysed can be obtained based on the selectivity and sensitivity of the tests. A review of the extraction processes and testing methods for pomegranate polyphenols in recent years is provided below.

1 метод извлечения

1.1 метод экстракции растворителей

The solvent extraction method for pomegranate polyphenolsЯвляется простым, стабильным и надежным, и подходит для извлечения большинства китайских медицинских материалов. Однако органические растворители являются дорогостоящими и загрязняют окружающую среду, и их потребление является высоким. Этот метод обычно использует метанол, этанол, ацетон и этилацетат в качестве растворителей. Эти органические растворители обладают хорошей растворимостью для полифенолов, не подвергаются химическим реакциям и легко отделяются друг от друга. Jia et - эл. - привет.[3] использовали 20% этанола в качестве растворителя, соотношение жидкости к материалу 1:20 и температуру экстракции 50 °C в течение 1 ч, достигая выхода полифенола в 22,86%. Sun et al. [4] использовали 50% этанола в качестве растворителя, соотношение жидкости к материалу 25:1 и температуру экстракции 70 °C в течение 1,5 ч, достигая выхода полифенола в 16,28%. Ван и др. [5] проверили экстракционные растворители для всех полифенолов из гранатового гороха в синьцзяне, и результаты показали, что выход полифенолов является метанолом > Этанол > > Одежда, обувь, материалы и аксессуары > > аксессуары для одежды > - этилацетат.

1.2 ультразвуковая экстракция

Ультразвуковая экстракция не требует нагрева, имеет высокую скорость экстракции, короткое время экстракции, проста и проста в эксплуатации, и подходит для экстракции большинства китайских лекарственных ингредиентов. Однако обеспечение безопасности ультразвуковых приборов сопряжено с трудностями. Жао и др. Время экстракции составило 35 мин (1/7 времени дрожания экстракции), объемная доля этанола — 59%, ультразвуковая мощность — 90 вт, выход экстракции — до 321,26 мг/г. Wang et al. [7] оптимизировали процесс экстракции полифенолов гранат-перца с использованием ультразвуковой экстракции с использованием двухфакторной универсальной регрессии вращения комбинированной конструкции: концентрация этанола 50%, соотношение материалов и жидкости 1:25, время ультразвука 30 мин, мощность ультразвука 360 вт, а выход полифенолов гранат-перца достигал (21.22± 0,06)%.

1.3 извлечение с помощью микроволн

Использование микроэлектрических источников энергии позволяет экономить энергию, уменьшает загрязнение окружающей среды, имеет высокую тепловую эффективность и не требует предварительной обработки, например сушки, упрощения процесса и сокращения инвестиций. Он известен как "зеленый процесс экстракции" и используется для экстракции ализарина из растений и для проведения мониторинга процессов и контроля качества полимеров и их добавок. Однако оборудование дорогое и неудобное в обслуживании. Сонг и др. [8] получили сырой экстракт с содержанием полифенола 19,548 г /100 г при оптимальных условиях извлечения (40% этанола, мощность извлечения 242 вт, время извлечения 60 с и соотношение материалов и жидкости 1:5). Liu et al. [9] использовали микроволновую экстракцию для извлечения полифенолов из гранат-шпиля. И ортогональное испытание было использовано для определения оптимального процесса экстракции, как 30% этанола раствор, соотношение материалов и жидкости 1:20, экстракционная мощность 300 вт, экстракционная температура 60 градусов, время экстракции 100 с, и выход полифенола до 26,91%.

1.4 экстракция сверхкритической жидкости

Экстракция сверхкритических жидкостей является методом экстракции и разделения с использованием сверхкритических жидкостей в качестве растворителей. Этот метод работает при температуре, близкой к комнатной, и особенно подходит для извлечения и разделения чувствительных к жаре природных продуктов и разделения летучих веществ. Он также подходит для разделения и извлечения твердых веществ. Его общим растворителем является CO2, который обладает превосходными свойствами, такими как низкая вязкость, высокая диффузивность, высокая плотность и высокая растворимость. Feng et al. [10] сравнивают сверхкритическую экстракцию CO2, ультразвуковую экстракцию, микроволновую экстракцию и экстракцию мацерации для экстракции галлиевой кислоты из гранатового шелуха с содержанием 0,396%, 0,311%, 0,271% и 0,498% соответственно. Можно видеть, что сверхкритическая добыча CO2 имеет относительно высокую эффективность.

1.5 метод фермента

Метод фермента имеет преимущества мягких условий экстракции, высокой избирательности, высокой скорости экстракции, энергосбережения и охраны окружающей среды, простой и практически осуществимый процесс, но он имеет относительно строгие требования к условиям экстракции, а определение типа фермента и определение оптимального pH, температуры и концентрации являются относительно строгими. Ван и др. [11] использовали метод фермента для изучения полифенолов в гранатовом кожуре. Было проведено одно факторное исследование для изучения воздействия различных концентраций целлюлазы, пектиназы, сложного фермента, времени ферментативного гидролиза, температуры ферментативного гидролиза и pH ферментативного гидролиза на урожайность полифенолов. Для оптимизации технологических параметров была использована двухуровневая обобщенная комбинированная конструкция регрессии вращения. Результаты показали, что факторами, влияющими на урожайность полифенолов, является время ферзиматического гидролиза > Концентрация фермента > PH > г-н > Температура энзиматического гидролиза, было установлено, что выход полифенола достиг (23,87 градиента 0,08)%, когда концентрация качества комплексного фермента составляла 0,25 мг/мл, время энзиматического гидролиза — 150 мин, температура — 50 градиента, а pH фермента — 6,0. Коэффициент извлечения был на 16,84% выше, чем при использовании растворителя.

2 исследования по методам обнаружения

2.1 метод фурфуральдегида

Принцип метода фолин фенола для определения полифенолов заключается в Том, что сокращение фенольных гидроксильных групп, количество фенольных гидроксильных групп и количество цветных химических веществ, образующихся с окисляющим реагентом, линейно связаны в определенном диапазоне. Этот метод имеет преимущества низкого потребления реагента, удобная работа, высокая чувствительность и хорошая стабильность, но подготовка реагента является более проблематичным.

Nan et al. [12] used gallic acid as a standard to determine the polyphenol content of guava leaves. When the Folin reagent was diluted 10 times, 40% Na2CO3, the reaction time was 7 min, and the reaction temperature was 50 °C, there was a good linear relationship between the polyphenol content and the absorbance within 0–500 mg. Du et al. [13] used this method to determine the polyphenol content in pomegranate peel. The reagent concentration was 0.6 mol/L, 0.150 g/mL Na2CO3, and the reaction was carried out in the dark at 25 °C for 50 min. The detection wavelength was 765 nm. There was a good linear relationship between the concentration of gallic acid and the absorbance value in the range of 1–6 mg/L. Zhu et al. [14] used gallic acid as a standard to determine the polyphenol content of pomegranate peel. 1.00 mL of Fering reagent, 3.00 mL of 10.0 g/100 mL Na2C03, reaction temperature 25 °C, reaction time 120 min, measuring wavelength 672 nm, in the range of 10-100 μg/mL, the concentration of gallic acid has a good linear relationship with absorbance.

2.2 спектрофотометрия

Спектрофотометрия очень специфична, проста и быстра, с хорошей воспроизводимостью, но не очень точна. Он подходит для качественного и количественного анализа наиболее активных ингредиентов в китайских травяных лекарственных средствах. Ван и др. [15] использовали ультрафиолетовую спектрофотометрию для определения общего содержания таннина в гранатовом кожуре. Галлическая кислота использовалась в качестве контрольного вещества, и длина волны обнаружения составляла 760 нм. Существует хорошая линейная зависимость с поглощением в диапазоне 0,0502-0,2526 градиента/мл (r = 0,9996). Янг и др. [16] использовали ультрафиолетовую спектрофотометрию для определения содержания галлиевой кислоты, основного компонента гранатовой и гранат-кожуры.

Результат показал, что содержаниеgallic acid in pomegranate peel was slightly higher than that in pomegranate. Wang [17] used spectrophotometry to determine the hydrolyzed polyphenol content in pomegranate seed extract, and found that there was a good linear relationship between the concentration of pyrogallic acid and the absorbance in the range of 0.014 to 0.07 mg/mL (r = 0.999 2). The hydrolyzed polyphenol content in pomegranate seed extract was 7.55%. Zhang et al. [18] used the casein method to determine the tannin content in pomegranate peel. The results showed that the tannin content had a good linear relationship in the range of 1.02–6.12 g/mL (r = 0.9993), the recovery rate of the sample was 97.4%, and the RSD was 1.21% (n = 6). Zhou et al. [19] compared the polyphenol yields of pomegranate peel using different extraction methods by measuring the polyphenol content by the ferric tartrate colorimetric method. The results showed that the microwave-assisted extraction of pomegranate peel polyphenols in an ethanol-ammonium sulfate aqueous two-phase system had a higher yield.

2.3 высокопроизводительный капиллярный электрофорез

Этот метод имеет характеристики высокой эффективности колонн, быстрой скорости разделения, высокой избирательности и простой инструмент. Однако воспроизводимость разделения зависит от небольшого объема впрыска, плохой подготовки, низкой чувствительности и того факта, что электрофорез может варьироваться в зависимости от состава пробы. Чжоу и др. [20] использовали непокрытый капиллярный столб, буферный раствор 30 ммоль/л аммония бутанолата -30 ммоль/л дикалия фосфата (20:9), напряжение разделения 20 кв, длину волны обнаружения 254 нм, температуру колонки 25 °C и условия инжекции 25 мбар и 5,0 с. Было определено содержание элагической кислоты в экстракте гранат-кожуры. Обнаруженная концентрация элагической кислоты находилась в диапазоне 0,039 8-0,318 4 мг/мл, и концентрация имела хорошую линейную связь с пиковой зоной (r = 0,999 3).

2.4 высокопроизводительная жидкостная хроматография

Высокопроизводительная жидкостная хроматография (HPLC) является чувствительной, быстрой и точной. В принципе, он может использоваться для разделения и анализа органических соединений с высокой температурой кипения, низкой термоустойчивостью и относительной молекулярной массой ≥400. Однако пробу необходимо предварительно обработать перед впрыском. Liu et al. [21-22] использовали высокопроизводительную жидкую хроматографию обратной фазы (RP-HPLC) для одновременного определения содержания галлиевой кислоты, элагической кислоты, пуникалагина и элагической кислоты в гранатовом кожуре и соке. Количество впрысков галлиевой кислоты, элагической кислоты, пуникалиновой и элагической кислоты находилось в диапазоне 0,020-0,320 градиента, 0,038-0,608 градиента, 0,074 ~ 1,184 градиента, 0,039 ~ 0,624 градиента, и концентрации указывают на хорошую линейную связь с соответствующими пиковыми областями (r составляет 0,999-7, 0,997-1, 0,997-8 и 0,999-4, соответственно). Он может использоваться в качестве метода обнаружения четырех компонентов полифенола в гранатовом соке и гранатовом кожуре. Ding et al. [23] определяют содержание элагической кислоты в экстракте гранат-шпиля с помощью HPLC.

При оптимальных условиях обнаружения элагическая кислота имела хорошую линейную зависимость от пиковой площади в диапазоне 5,36-171.40 грава/мл, поэтому ее можно использовать для определения содержания элагической кислоты в экстракте гранат-шпиля. Lei et al. [24] использовали ГПЛК для определения содержания элагической кислоты в плазме крыс после перорального введения экстракта листа граната. Результаты показали, что элагическая кислота у крыс распределялась в соответствии с двухслойной моделью с низкой концентрацией пероральной крови, поглощаемой в основном через желудок, в течение короткого времени до пика, быстрого поглощения, быстрого распределения и устранения. Поглощение элагической кислоты листьями граната превышало поглощение самой элагической кислоты.

Luo et al. [25] использовали RP-HPLC для одновременного определения содержания пуникалина и элагической кислоты во влагалищном экстракте гранат-кожуры. Пуникалин имел хорошую линейную зависимость в диапазоне 0,098-0,610 мг/мл (r = 0,999 1), элагическая кислота в 0,011 ~ 0,060 мг/мл (r = 0,999 8) имеет хорошую линейную зависимость. Этот метод является точным, простым и имеет сильную специфику. Он устанавливает метод контроля качества вагинальных таблеток, полученных из гранатовой кожуры. Li et al. [26] использовали rc -HPLC для определения компонента таннина punicalagin в гранатовом кожуре, и было установлено, что количество пуникалагина является высоким (10%), что соответствует стандарту не менее 10% массовой доли таннина, предусмотренному в издании 2005 года "people"#39; китайская республика фармакопея. Parida Abliz et al. [27] использовали ГПЛК для определения содержания галлиевой кислоты в синьцзян-гранатовой кожуре, что показало хорошую линейность в диапазоне 9-90 мл, что указывает на точность и надежность метода.

2.5 жидкая хроматография-массовая спектрометрия

Жидкостная хроматография-массовая спектрометрия (лк-мс) сочетает в себе мощные возможности разделения и анализа жидкостной хроматографии (лк) с чувствительными возможностями идентификации и структурного анализа масс-спектрометрии (мс), обеспечивая надежную и точную информацию об относительной молекулярной массе и структуре. Xu et al. [28] использовали лк-мс для идентификации основных полифенолов в натуральном гранатовом соке. Предварительный анализ показал, что гранатовый сок содержит элагическую кислоту, пуникалин, апигенин, апигенин -7- o -β- d -glucopyranoside, rutin, 3,3',4' 5,7- пентагидроксифлаванон и 3,3',4' 5,7- пентагидроксифлаванон -6- д-глюкопираносайд. Бегоя серда и др. [29] разработали метод анализа HPLC-MS-MS для выявления биодоступности и метаболитов основного компонента полифенола граната пуникалагин у крыс. Это был первый отчет о всасывании элагитаннинов в плазму.

2.6 прочие расходы

Tang et al. [30] использовали комплексометрический метод для определения содержания таннинов в гранатовом кожуре и установили, что содержание различных полифенолов в различных разновидностях гранатового кожура существенно различается. Ван и др. [31] использовали прусский синий метод для определения содержания полифенолов в 8 видах фруктов, таких как гранаты. Результаты показали, что содержание полифенолов и таннинов в экстракте положительно коррелируется с его антиоксидантными свойствами. Зенг и др. [32] использовали метод фосфомолибдического кислотно-казеина для определения общего содержания таннина в гранатовом кожуре. Этот метод имеет характеристики высокой специфичности, простоты и простоты работы, стабильных результатов и хорошей воспроизводимости. Ji et al. [33] использовали капиллярный электрофорез для одновременного обнаружения двух компонентов элагической кислоты и пуникалина в экстракте гранат-шпиля. По сравнению с HPLC тест t показал, что разница между двумя группами данных не является статистически значимой, а коэффициенты корреляции обоих методов составляют > 0,998, что свидетельствует о высокой точности.

3. Резюме

В настоящее время существует несколько методов извлечения полифенолов граната, включая экстракцию растворителей, экстракцию с помощью ультразвука, экстракцию с помощью микроволн, экстракцию сверхкритической жидкости и ферзиматические методы. Среди них метод экстракции растворителей является традиционным методом экстракции гранатовых полифенолов, который является наиболее широко используемым. Этот процесс является относительно простым, стабильным и надежным, однако органические растворители потребляются в больших объемах, что является дорогостоящим и загрязняет окружающую среду. Ультразвуковая экстракция является более экономичным с точки зрения затрат времени и энергии методом, чем растворитель, с высокой скоростью экстракции и быстрой скоростью экстракции, и широко применяется. Сверхкритическая экстракция жидкости имеет отличные транспортные свойства, высокую проницаемость, высокую скорость экстракции и мягкие условия эксплуатации. Особенно подходит для отделения теплочувствительных веществ, но крупные единовременные капиталовложения, низкая доходность продукции, и применяется только для извлечения нескольких ингредиентов; Добыча с помощью микроволн экономит энергию, труд и время, является экологически чистой и устойчивой технологией; Ферментативные реакции отличаются высокой спецификой, мягкими условиями, высокой интенсивностью добычи, экологичностью и энергосбережением и имеют большой потенциал развития. Конечно, необходимы дальнейшие исследования, чтобы найти лучший способ извлечения, разделения и очистки гранатовых полифенолов.

At present, the main methods for determining the polyphenol content of pomegranates include the Folin phenol method, spectrophotometry, high-performance capillary electrophoresis, HPLC, RP-HPLC, and LC-MS. The Folin phenol method is highly sensitive, but less specific; the spectrophotometry method is highly specific, fast and stable, and has good reproducibility, but is less sensitive; the high-performance capillary electrophoresis method has high column efficiency, fast separation, a small injection volume, low reagent consumption; HPLC has the characteristics of high pressure, high efficiency, high speed, high sensitivity, and a wide range of applications. However, due to the limitations of column efficiency, it is commonly used to simultaneously quantify one or two components and is not suitable for simultaneously determining multiple components; LC-MS technology has become one of the most important separation and identification methods today due to its powerful analysis and identification capabilities. It plays an even more important role in the field of analytical chemistry, but its equipment is expensive and requires highly trained operators, so it is not yet widely available.

Ссылка:

[1] Sumner MD, elliot-euer M, Weidne C, et al. Влияние потребления гранатового сока на миокардиальную пеффузию у пациентов с ишемической болезнью сердца [J]. Am J кардиол,2005,96:810-814.

[2] - сирам. Нп, Адамс (США) - с, 1. Хеннинг - см, et  al.  В случае необходимости Витаро-антипролиферативная, апоптотическая и антиоксидантная деятельность пуникалагина, элагической кислоты и всего гранатового экстракта укрепляется в сочетании с другими полифенолами, содержащимися в гранатовом соке [J]. J Nutr Biochem,2005,16(6):360-367.

[3] цзя дункин, яо кай, тан вэй и др. Оптимизация условий экстракции полифенола из гранатовой шелушки [J]. Лесная химическая промышленность, 2006, 26(3): 123-126.

[4] сун лэнпинг, чжан бин, чжао дацин и др. Оптимизация процесса экстракции полифенолов из гранатовой шелушки [J]. Упаковка и пищевая техника, 2007, 25(4): 20-23.

[5] ван сяоюй, гао сяоли, маерден махмути. Экспериментальное исследование по экстракции полифенолов из гранатовой кожуры в синьцзяне [J]. Китайская этническая и народная медицина, 2008, 18(1): 8-10.

[6] чжао яньхун, ли цзянке. Создание математической модели экстракции полифенолов из гранатового шелуха с помощью ультразвука с использованием метода поверхностной реакции [J]. Переработка сельскохозяйственной продукции, 2009 (3): 126-131.

[7] ван хуабин, бао сяовей, хан хайся и др. Исследование о процессе экстракции полифенолов из гранатовой кожуры в синьцзяне [J]. Продукты питания и оборудование, 2010, 26 (5): 137 — 140.

[8] сон вэйвэй, цзяо широнг, чжоу цзя и др. Микроволновая экстракция полифенолов из гранатового гороха и изучение антиоксидантных и антибактериальных эффектов экстракта [J]. Современные науки и технологии, 2008, 24(1): 23-27.

[9] лю хон, ао бо, фан шухуэй и др. Экспериментальное исследование по микроволновой экстракции полифенолов из гранатового кожуха в хуили, сычуань [J]. Пищевая промышленность и ферментация, 2008, 36(26): 11172-11173.

[10] Feng W Q, Li H. сравнение четырех методов извлечения галлиевой кислоты из гранатового шелуха [J]. Китайская медицина Herald, 2008, 14(8): 16-17.

[11] Wang H B, Wang S, Fu L. исследование по экстракции полифенолов из гранатового шелуха методом ферзиматики [J]. Китайский журнал пищевой науки, 2012, 12(6): 56-65.

[12] нан чжи, ли юанжи, хе луокян и др. Оптимизация условий определения содержания полифенола в листьях гуавы [J]. Переработка сельскохозяйственной продукции, 2009(3): 181-192.

[13] дю дандан, ли цзянке. Оптимизация условий определения содержания полифенола в гранатовой кожуре фолином-цветометрией [J]. Journal of Northwest A&F University: Natural Science Edition, 2011, 39(5): 190-196.

[14] чжу кайпин, ся дешуй. Определение содержания полифенолов в экстракте гранат-шпиля фолином-цветометрией [J]. Спектральная лаборатория, 2012, 29(3): 1356-1360.

[15] ван кейн, цзоо хунди, ян лимин. Определение общего содержания таннина в гранатовой кожуре с помощью ультрафиолетовой спектрофотометрии [J]. Журнал гиянского колледжа традиционной китайской медицины, 2007, 29(6): 66-67.

[16] ян цяоху, цзя хайин, ю хайтао и др. Сравнение определения содержания галлиевой кислоты в гранате и гранатовом горохе [J]. Китайский журнал этнической медицины, 2003, 9(1): 34-35.

[17] ван хунвэй. Определение содержания гидролизованного полифенола в экстракте гранатовых семян [J]. Журнал шаньцю, 2009, 25(6): 80-82.

[18] чжан сяоин, парида аблиз, чжу ян и др. Определение содержания таннина в гранатовой кожуре различного происхождения в синьцзяне методом casein [J]. Наука о еде, 2009, 30(8): 260 — 262.

[19] чжоу аньцюнь, тан цзиньлян, фэн вуцюнь и др. Исследование урожайности полифенолов, извлекаемых из гранат-кожуры различными методами [J]. Китайская медицина Herald, 2011, 17(12): 68-69.

[20] чжоу бенхун, у чжэньхуа, ли сяоцзюнь и др. Определение элагической кислоты в гранатовом кожуре путем высокопроизводительного капиллярного электрофореза [J]. Китайская аптека, 2005, 16(24): 1893 — 1894.

[21] лю чжэньпин, чэнь сяньгуй, пэн хайян и др. Одновременное определение четырех компонентов полифенола в гранатовом кожухе методом RP-HPLC [J]. Китайская аптека, 2013, 24(3): 238-240.

[22] лю чжэньпин, чэнь сяньгуй, пэн хайян и др. Определение четырех компонентов полифенола в гранатовом соке с помощью RP-HPLC [J]. Китайский журнал пищевой науки, 2013, 13(1): 183-187.

[23] динь нан, гао сяоли. Определение содержания элагической кислоты в экстракте гранат-шпиля с помощью HPLC [J]. Журнал синьцзян медицинского университета, 2012, 35(6): 770-772.

[24] лэй F, Xing D, Xiang L, et al. Фармакокинетическое исследование элагической кислоты в экстракте листа граната у крыс [J]. Оценка наркотиков, 2005, 2(1): 38-41.

[25] Лу юцин, ли ян, ре имугули абдулла и др. Одновременное определение содержания пуникалина и элагической кислоты во вагинальных ффервесентных таблетках, содержащих экстракт гранат-перца, с помощью RP-HPLC [J]. Китайская травяная медицина, 2011, 42(10): 2011 — 2013.

[26] ли хайся, чжан хонг лин, лю янзе и др. Определение содержания пуникалина в гранатовом горошине с помощью RP-HPLC [J]. Китайская травяная медицина, 2006, 37(5): 780-781.

[27] Parida Abliz, Zhang Lijing, Reena Kasim, et al. Определение галлиевой кислоты в гранатовом кожуре из синьцзяна с помощью высокопроизводительной жидкой хроматографии [J]. Национальная медицина, 2007, 18(10): 2455-2456.

[28] сюй цзинь, вэй цзиню, го цзифен и др. Выделение и идентификация некоторых полифенолов в гранатовом соке [J]. Китайский журнал пищевой науки, 2010, 10(1): 190-199.

[29] бегоя серда, Рафаэль лорач, хосе дж. Оценка биодоступности биодоступности и метаболизма у крысы пуникалагина, антиоксидантного полифенола из гранатового сока [J]. Первоначальный взнос,2003 год,42(1):19-28.

[30] тан Лили, лю линвей, сунь липан и др. Экстракция и анализ состава полифенолов в гранатовом горохе [J]. Исследования и разработки в области продовольствия, 2010, 31(5): 121 — 125.

[31] ван чжиюань, ли цинбяо, ян цуйсян и др. Содержание полифенола и антиоксидантные свойства восьми плодов [J]. Исследования и разработки природных продуктов, 2007, 19(6): 1040-1043.

[32] цзэн ин, у фэн, чжоу бенхон. Определение общего содержания таннина в гранатовом горошине фосфомолибдическим кислотно-касеиновым методом [J]. Китайский фармацевт, 2010, 12(13): 1775-1776.

[33] цзи байхуэй, ян сяосяо, ни синцзянь и др. Определение элагической кислоты и пуникалина в гранатовом кожуре путем капиллярного электрофореза [J]. Журнал аналитического тестирования, 2013, 32(3): 367-371.