Безопасны ли экстракты Cistanchis Tubulosa в здоровой пище?

Cistanchetubulosa-сушеныймясистыйстебльс чешуйчатыми листьями Cistanche tubulosa (шренк)- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да- да. R. Wight — вечная паразитическая трава [1]. Систанче тубулоса (шренк.) R. Wight — многолетнее паразитарное растение [1]. Он имеет эффект тонизирующего воздействия на почки и янь, благотворно влияет на сущность и кровь, увлажняя кишечник и слабительное [2], и также известен как «пустынный женьшень». Современные фармакологические исследования также показали, что она имеет различные фармакологические эффекты, такие как улучшение почечной функции, антиусталость, снижение артериального давления, антистарение, регулирование иммунной функции [3-4].

Чистанчи тубулосаИмеет долгую историю использования в синьцзяне из-за его замечательной фармакологической деятельности. В 2005 году Japan' министерство здравоохранения и социального обеспечения (мзсо) утвердило его заявку на продовольствие. Разработка соответствующих продуктов питания для здоровья имеет высокую ценность. Является ли Cistanchis tubulosa экстракт безопасным сырьем для здоровой пищи, и какова его безопасность и потребление дозы?

В этом исследовании безопасность экстракта цистанчи тубулозы оценивалась с помощью тестов на острую пероральную токсичность, а -mes, полиморфического эритроцитного микронуклея костного мозга мышей, анализа деформации сперматозоидов мышей и тератогения, с тем чтобы обеспечить надлежащую научную основу для его разработки и применения.

1. Материалы и методы

1.1 основные инструменты, оборудование И реагенты

MD200-3 верхняя посуда электронный баланс, электронное взвешивание, CXA Olympus двухзрачный микроскоп, XTL-I тип непрерывного зума стереомикроскоп, 500 парафиновый роторный резак, TS-12H биологическая тканевая автоматическая обезвоживающая машина, BM-VI биологическая тканевая морозильная машина, LEIT220 микроскоп, мириад BC-3000 анализатор гематокрита, мириад BC-2800Vet анализатор гематокрита, roch -400 автоматическая биохимия. Анализатор кровяных клеток, Myers бк - 2800vet анализатор кровяных клеток, Roche-400 автоматическая биохимия.

1.2 методы работы

1.2.1 испытание на острую пероральную токсичность

20 мышей куньминьской породы, масса тела 18~22 г, половина самца и половина самки. Весите 25 г экстракта цистанчи тубулозы, добавьте стерильную дистиллированную воду до 100 мл, а затем дайте экстракт мышям дважды с интервалом в 3 ч со скоростью 20 мл/кг м.т. После желудочного отвода мыши непрерывно наблюдались в течение 14 суток, а токсичность и смертность регистрировались.

1.2.2 испытание на микронуклеус полицитемии веры костного мозга мышей (пкэ)

50 мышей куньминьской породы, масса тела 25~30 г, были произвольно разделены на 5 групп, половина мужчин и половина женщин. Метод перорального гаважа использовался дважды с 24 - часовым интервалом, были установлены группы низкой, средней и высокой дозы цистанчи тубулозного экстракта (1,5, 3,0 и 6,0 г/кг м.т.), отрицательного контроля (стерилизованная дистиллированная вода) и положительного контроля (40 мл/кг м.т. Циклохоспимида, 10 мл/кг м.т. Внутрибрюшная инъекция).

 Животные были убиты в результате смещения шейки матки через 6 часов после последнего введения испытуемого вещества, и был проведен регулярный отбор проб и приготовление 10 000 ломтиков. В каждой мышке были подсчитаны 1 000 полиморфических эритроцитов костного мозга, было отмечено количество полиморфических эритроцитов, содержащих микроэлементы, и 200 полиморфических эритроцитов, было отмечено отношение числа полиморфических эритроцитов к зрелым эритроцитам (пкэ/РБК), а показатель микронуклеев был рассчитан как показатель микронуклеев (промилле). Частота микронуклея (×) = (число полицитопилических эритроцитов с микронуклеями/общее число полицитопилических эритроцитов) 100%.

1.2.3 мышь Тест на деформацию спермы

Двадцать пять мужчин чистенькой порода куньмин мышей, масса тела 26-33 г, были произвольно разделены на пять групп. Количество испытуемого вещества, препарат раствора и гаваж были такими же, как и при анализе микронуклея, а положительный контроль (45 мл/кг м.т. циклохоспимида) вводился внутрибрюшно в течение 11,25 мл/кг м.т. Один раз в день в течение 5 суток подряд. 30 дней после последнего введения испытуемого вещества положительный контроль вводился в брюшную полость в 11,25 мл/кг м.т. Животные были преданы смерти через 30 дней после последнего введения испытательного материала, и 5000 сперматозоидов с полной структурой были подсчитаны в фильтрации яичников, окрашенных эозином, и была подсчитана частота аберрантных сперматозоидов (%). Частота аберрантных сперматозоидов (%) = (число аберрантных сперматозоидов/общее число сперматозоидов) × 100%.

1.2.4 раздел 1.2.4 Проверка эймса

Тест на эймс был проведен с выявленными штаммами та97, та98, та100, та102 и микросомальными ферзимами крыс (S9), вызываемыми полихлорированным дифенилом (ПХД). Было пять групп доз (0,008, 0,040, 0,200, 1.000, 5.000 мг/блюдо), спонтанная группа ревертантов, группа контроля растворителей (дистиллированная вода) и группа позитивного контроля (мутагены). - S9: та97 и та98 были 2,4,7- тринитрофентаноном (0,2 - градиент/блюдо), та100 - азидом натрия (1,5 - градиент/блюдо) и та102 - митомицином с (4 - градиент/блюдо). +S9: та97, та98 и та100 — 2- аминофен (10 гранул/блюдо), та102 — 1,8- дигидроксиантрахинон (50 гранул/блюдо). Наблюдайте изменения в количестве колоний ревертантов в каждой группе.

1.2.5 тератогенное испытание

Чистый сорт су 100 самки крыс, масса тела 208~380 г, 60 самцов крыс, масса тела 302~450 г, соотношение спаривания 2:1 между самцами и самками.

Не менее 12 беременных крыс в каждой группе получали в дозах 0,25, 0,50 и 1,00 г/кг м.т. На 20 - й день беременности матка была вырезана и взвешена, количество мертворождений и живых плода было зарегистрировано и исследовано, масса тела и длина плода были зарегистрированы, а внешний вид плода был исследован на предмет каких-либо аномалий. 50% плода были подвергнуты осмотру скелета, а остальные 50% - первичному осмотру.

1.3 обработка статистических данных

Данные были преобразованы и статистически проанализированы с использованием pems3.1 для win-windows. Для общего сопоставления была использована односторонняя анова, если было установлено, что расхождения данных совпадают, и Dunnett' тест s использовался для сопоставления дозационных групп с контрольной группой, если было установлено, что отклонение совпадает. Если дисперсия не является однородной, то вместо нее используется непараметрический (ранговая сумма) тест. Для подсчета данных использовался метод chi- квадрата. Полихроматический тест эритроцитов микронуклея костного мозга мышей и тест аберрации сперматозоидов мышей были проведены в соответствии с Poisson' распределение s с испытательным уровнем α = 0,05. Уровень испытания был α= 0,05.

2. Результаты поиска по системе

2. Работа. 1 испытание на острую пероральную токсичность 

После откорма в дозе 10 г/кг м.т., никаких побочных признаков не наблюдалось в течение 14 дней. Не было явных симптомов отравления и смерти. Анатомическая экспертиза основных органов не выявила существенных аномальных изменений. Максимальная допустимая доза (МТР) при испытании на острую пероральную токсичность как у мышей, так и у мышей составляла > 10 г/кг мт. Экстракт цистанчи тубулозы практически нетоксичен.

2.2 мышь Тест полиморфофильного эритроцитного микронуклея костного мозга

После введения препарата микронуклеус костного мозга у мышей как в мужской, так и в женской дозировке существенно не изменился (количество исследуемых пцив составило 5000), а разница между скоростью эритрофильных микронуклея в каждой дозировке и отрицательной контрольной группе статистически не значительна (P >) 0,05 в то время как доля микронуклеев в группе позитивного контроля была выше, чем в группе отрицательного контроля, со статистически значимой разницей (P <) 0.01. Результаты микронуклеинового анализа цистанчевого туберкулеза были отрицательными. Результаты анализа микронуклея экстракта Cistanche tubiflora были отрицательными, как показано в таблице 1.

2. Работа. 3 тест на деформацию спермы у мышей

Скорость аберрации сперматозоидов у мышей мужского Пола существенно не изменялась каждой группой доз, и разница не была статистически значимой при сравнении с отрицательной группой контроля (P >) 0,05, в то время как коэффициент отклонения спермы у положительной контрольной группы был выше, чем у отрицательной контрольной группы, и разница была статистически значимой (P <) 0,01. - 1. Разница была статистически значимой (P <) 0.01, что указывает на то, что экстракт цистанчи тубулозы не оказывает какого-либо аномального воздействия на сперматозу мышей, как показано в таблице 2.

2.4 испытание на эймс   

Количество колоний-мутантов в каждой группе доз не более чем в два раза превышало количество самопроизвольных колоний-мутантов, и не было никакой зависимости дозы-отражения, в то время как количество самопроизвольных колоний-мутантов в позитивной контрольной группе было значительно больше, чем в самопроизвольных колониях-мутантов. Таким образом, мутагенное воздействие не наблюдалось в штаммах та97, та98, та100 и та1024 с добавлением S9 или без него, как показано в таблице 3.

Таблица 1Результаты анализа микронуклея на полихроматические эритроциты костного мозга мышей (x- ±s, n=5)

Примечание: по сравнению с отрицательной контрольной группой * P < 0.05.

Таблица 2Результаты теста на деформацию спермы у мышей

Примечание: по сравнению с отрицательной контрольной группой * P < 0.05.

Таблица 3Результаты теста Ames (x- ±s)

2. Работа. 5 тератогенный тест

Сравнение показателей и коэффициентов мертворождений беременных крыс и плода в каждой группе доз с соответствующими показателями контрольной группы не является статистически значимым (P >). - 0,05; Во внутренних органах плода в каждой группе не было обнаружено никаких деформаций, однако осмотр скелета животных в каждой группе доз и контрольной группе показал, что грудная клетка отдельных плода не была полностью осцифицирована. Согласно стандарту оценки тератогенности GB15193-2003, тератогенного эффекта в каждой группе доз обнаружено не было.

3. Iii. Выводы и рекомендации

Обеспечение более адекватной основы для развитияСопутствующие продукты Cistanchis tubulosaВ этом исследовании была проведена оценка безопасности экстракта цистанчи тубулозы. Испытание на острую пероральную токсичность показало, что экстракт цистанчи тубулозы является практически нетоксичным при максимально допустимой дозе (МТР) > 10 г/кг мт; Результаты трех тестов на генотоксичность (тест микронуклея костного мозга (BMMT), тест на аномалии спермы (SAT) и тест эймса (AMT)) были отрицательными, что указывает на то, что образец не является мутагенным. Результаты трех тестов на генотоксичность (тест микронуклея костного мозга, тест деформации спермы и тест эймса) были отрицательными, что указывает на отсутствие мутагенного эффекта у образца. Cistanchis tubulosa экстракт имеет хорошую безопасность и может быть использован для разработки здоровой пищи.

Справочные материалы:

[1] национальная фармакопеевая комиссия. Национальная фармакопея людей#39; китайская республика: часть I [и]. Издание 2010 года. Пекин: химическая промышленность пресс, 2010: 126.

[2] хоу чжихуа, чан го вэнь. Ход фармакологических исследований по цистанчиакису [J]. Журнал китайской национальной медицины, 2003, 9(4) : 3-4.

[3] цзинь сюлиан, чжан цинжун. Прогресс химического состава чистанчикии [J]. Китайский журнал традиционной китайской медицины, 1994, 19(11): 695-697.

[4] ли юн, сян юаньцзюнь, цзя сяогуань и др. Влияние экстракта цистанчи тубулозы на кровяное давление, кислотность эритроцитной мембраны и вязкость всей крови у крыс, питаемых высокой солью [J]. Исследования и разработки природных продуктов, 2009, 21(5): 220 — 222.