Какой метод производства D аллюлозы порошка?

1 d-аллюлозный обзор

D Allulose is A/данные отсутствуют.hexose Сахар с сахаромиA/данные отсутствуют.C-3 epimer Соединенные Штаты америкиD-fructose. Due to its high sweetness, low energy content, unique physiological functions иpotential health benefits, D-allulose is considered to be A/данные отсутствуют.new sweetener сgreat potenti- эл. - привет.It hПо состоянию на 31 декабряbecome A/данные отсутствуют.research hotspot in В настоящее времяfield Соединенные Штаты америкиrare sugar biosynthesis worldwide. However, D-allulose is extremely rare in nature иdifficult to synthesize chemically. The biosynthetic method, По состоянию наthe other hand, hПо состоянию на 31 декабряa simple procedure иhas made great breakthroughs in recent years. Therefore, the author reviews the recent research progress in the biosynthesis Соединенные Штаты америкиD-allulose, including the physicochemical properties, physiological functions, applications, in - привет, виво.metabolism, иenzymatic productiПо состоянию наof D-allulose, covering the sources, enzymatic properties, crystal structures, 3. Каталитические нейтрализаторыmechanisms, heterologous expression, and separatiПо состоянию наand purificatiПо состоянию наprocesses of the key enzymes involved.

1.1 физико-химические свойства и источники d-аллюлозы

D-Allulose is a six-carbon sugar with a melting point of 96 °C, soluble in water, and a density of 1.35 g/cm3[1]. The sweetness Из д-аллюлозыis 70% - что?of sucrose[2]. D-Allulose is a reducing sugar and can participate in browning Ответы на вопросыduring heat treatment. The calorific value of D-allulose was measured to be 0.029 kJ/g in a rat experiment, which is 0.3% of the energy of sucrose, indicating that D-allulose has almost zero energy [3-4]. D-allulose is very rare in nature, and plant sources are extremely rare [5]. Small amounts of allulose have also been found in some bacteria [6], and D-allulose is not found in animals. allulose has not been found in animals. However, D-allulose is also found in various foods, such as fruit juice that has undergone long-term heating treatment, and the content of D-allulose in various foods is closely related to the sugar concentration, temperature and heating time during the Производство и продажаprocess [2, 7].

1.2 физиологические функции и метаболизм d-аллюлозы в организме

The physiological functions of D-alluloseВключают: уменьшение поглощения d-фруктозы и d-глюкозы пищевого рациона [8-9]; Повышение резистентности к инсулину [7, 10-11]; Антиожирение [12-14]; И снижение липидов крови [15]. Исследования метаболических путей d-аллюлозы у крыс показали, что: 1. Перенос d-аллюлозы в кишечнике осуществляется при помощи транспортера глюкозы 5 и имеет более низкую аффинити к D-fructose [16-18]; 2. D- аллюлоза не участвует в метаболизме, связанном с глюкозой [19]; 3. D- аллюлоза не может метаболизироваться в печени животных и, следовательно, не может способствовать производству энергии печени [20]. Около 98% d-аллюлозы выводится из организма в виде мочи и фекалий после перорального или внутривенного введения, и лишь небольшое количество d-аллюлозы распадается на короткоцепные жирные кислоты в результате действия микроорганизмов в цеке [21].

1.3 применение d-аллюлозы

D- аллюлоза была одобрена FDA/данные отсутствуют.США в 2011 году в качестве общепризнанного безопасного продукта (GRAS) и разрешена в качестве пищевого ингредиента и пищевой добавки [4, 7]. Исследования показали, что максимальное потребление d-аллюлозы составляет 0,55 г на кг массы тела в сутки и что это не вызовет диарею у людей в этом диапазоне [8-9].

D-Allulose has broad market potential in the food industry due to its low calorie content, high sweetness and strong reducing properties. For example, D-allulose can comprehensively improve the properties of egg white protein through the Maillard reaction, such as excellent gel strength, emulsifying stability, foaming properties and antioxidant activity [22-23]. D-allulose can also improve the quality of fermented milk products, regulating the strong sour taste of yogurt caused by overfermentation, but does not affect the probiotic activity of the fermentation strain and the probiotic health benefits it imparts to the fermented product [ 21]. In addition, the use of 25% D-allulose in baking, in combination with other additives, can produce sugar-free cakes [24].

D- аллюлоза также имеет широкий потенциал применения в других областях. Например, материалы растительного происхождения, изготовленные из d-аллюлозы, могут использоваться в качестве постоянных, водонепроницаемых, экологически чистых, светопередающих пленок для оптических устройств и жидкостных кристаллических дисплеев [25]. D- аллюлоза также является первым обнаруженным репрессантом насекомых на основе сахара и оказывает определенное позитивное воздействие на сдерживание роста паразитов [26-27]. D- аллюлоза является также предшественником других гексасов и играет чрезвычайно важную роль в производстве d-аллоса [28-29], а d-аллитола [30[1]играет чрезвычайно важную роль.

2. Биологический метод фермента

По химическому оружиюsynthesis method of D-allulose has common disadvantages that are difficult to overcome, such as difficulties in isolation, many by-products, and the generation of chemical waste. Therefore, the green and environmentally friendly biological enzyme production method has gradually received widespread attention worldwide.

2.1.1 источник семейных ферментов дразы

Семейство D-tagatose 3- эпизодический стереть(DTEases) является ферментом, который катализирует изомеризацию моносакхаридов кето на позиции C3, а также основным ферментом для производства редких сахаров [32]. Семейство ферментов DTEase включает: D-tagatose 3- epimdelete (DTEases) [33], D-allulose 3- epimdelete (DAEase) [35], ketose 3- epimdelete [36], все из которых имеют общее свойство катализатора преобразования D-fructose в D-allulose.

Генная кодировка DTEase была последовательно изолирована от - клостридиумcellulolyticum H10[37], Ruminococcus sp.[38], Clostridium scindens[34] и Desmospora sp.[35], но все еще существует необходимость в изучении большего количества источников и более эффективной DTEase[32, 37, 39-40] для промышленного производства d-аллюлозы.

2.1.2 ферменты DTEase

Из семейства DTEase ферментов D-allulose-3- эпизодический стереть(DTEase) имеет наибольшую эффективность в катализации реакции D-fructose на D-allulose. Каталитическая эффективность (ккат/км) DAEases C. cellulolyticum и A. tumefaciens составляет соответственно 186,4 и 205 л /(mmol·min), что выше, чем DTEase (D-tagatose 3-epimerase) из Clostridium sp. (141,4 л /(mmol·min)) и Ruminococcus sp. (51 л /(ммоль · мин)) [34,37-38], см. таблицу 1.

Ионы металлов закрепляются путем привязки к d-фруктозе и играют решающую роль в преобразовании d-фруктозы в d-аллюлозу. Остатки Asp183 и His209 эффективно связывают субстрат через ионы металлов. Семейство DTEase ферментов имеет значительно разную степень зависимости от ионов металлов Mn2+, Co2+ и Mg2+ [41, 44 — 45]. Тем не менее, ферзиматическая активность DAEase от C. целлюлолита и DTEase от C. scindens строго зависит от ионов металлов Mn2+ и Co2+[35, 37].

2.1.3 кристаллическая структура дразнилки

Среди DTEase семейства ферментов, DAEases от A. tumefaciens и C. cellulolyticum проявляют наиболее близкую форму тетрамера. В тетрамере DAEase между остатками аминокислоты в двух подсоединениях образованы 34 водородные связи. Высокая каталитическая активность DAEase объясняется широкой зоной, доступной для растворителей, что вызвано обширным взаимодействием двух димеров фермента DTEase семейства [42]. Кроме того, осмеяние, выраженное рекомбинантными штаммами, по-прежнему обладает превосходными ферментативными свойствами. Гетерологическое выражение DAEase от C. cellulolyticum H10 имеет более длительный период полураспада, более высокие кинетические параметры и более высокую термоустойчивость [37].

Четвертичное расположение даизы представляет собой асимметричную единицу, состоящую из четырех идентичных подгрупп A, B, C и D. активный участок содержит четыре остатка Иона металла, октахедральную координацию двух молекул воды. Эти четыре подгруппы представляют собой димеры, связанные друг с другом кристальной симметрией, в которых подгруппы а и D взаимодействуют друг с другом, как в тесном контакте с подгруппами в, так и с. активный участок даизы подвергается воздействию с одной и той же передней стороны димера. Эти стабильные димеры обеспечивают отличную доступную поверхность для связывания субстратов с передней стороны димера [16].

Гидрофобный канав активного участка и доступная поверхность расположены между подгруппами A и B. Подединица сбоку DAEase закрывается и подвергается воздействию на обоих концах конструкции ствола. В тетрамере даизы два димера заключены по бокам ствола. Каждый мономер (подразделы A, B, C и D) состоит из 8 повторяющихся единиц (элементов/элементов). Каждый мономер состоит из 13 ступенчатых спиралей и 8 ступенчатых складков, образующих основную структуру мономера [16].

2.1.4 каталитический механизм дразнилки

Каталитическое действие семейства DTEase ферментов зависит от молекулярного расположения подблоков. Их активные участки расположены на субстрате для достижения эффективных ферментативных реакций. Mn2+ и две молекулы воды и четыре аминокислоты (глу, асп, его и глу) образуют октагедральную координацию, и эти четыре аминокислотных остатка полностью сохраняются во всех кетозных 3- эпимеразах. Шесть остатков (Glul50/Glul52, Aspl83 / Aspl85, His209 / His211, Glu244 / Glu246, Glul56/ Glu158, His185/His188) от DAEase в A. tumefaciens и DTEase в P. cichorii имеют важное значение для связывания субструтов и термоустойчивости при мутагенезе, направляемом на место.

После того, как субстрат заменяет молекулу воды, активный объект подвергается диастереоизомеризации. Два остаточных продукта, Glu50 и Glu244, в сотрудничестве с Mn2+, удаляют протон D-fructose на C3, образуя промежуточное звено d-аллюлозы в виде цис-диола, и d-аллюлоза высвобождается из положения между водородной связью и молекулой воды на активной точке DAEase.

В настоящее время на ферменты семейства дтиаз вносятся молекулярные изменения с целью повышения их каталитической активности и термоустойчивости. Направленный на сайт мутагенез был использован для повышения термоустойчивости и каталитического поведения L-rhamnoseизомеров из кальдицеллюлозирупторного обсидианза в производстве d-аллюлозы. Гидрофобные остатки в около1 - около1 - петле были полностью заменены полярными аминокислотами. По сравнению с диким ферментом относительная активность мутантов V48N/G59N/I63N и V48N/G59N/I63N/F335S выше, соответственно, на 105,6% и 134,1%, чем у дикого фермента [57]. Мутагенез, управляемый участком, также улучшил тепловую устойчивость D-allulose-3- эпизодический стереть(DAEase) из Dorea sp. [50].

Исследования каталитического механизма семейных ферментов дтиаз все еще находятся в зачаточном состоянии, и взаимосвязь между структурой фермента и каталитической функцией требует дальнейшего углубленного изучения. Кроме того, тепловая стабильность и субстратная специфика DTEase все еще имеют некоторые недостатки. При производстве редких сахаров, субstrate специфика DTEase семейных ферментов должны быть дополнительно использованы для достижения эффективного и зеленого производства функциональных редких сахаров.

2.1.5 неоднородное выражение дразни

Большинство DTEase семейных ферментов были выявлены и изолированы от бактерий, и количество ферментов, выраженных в естественных штаммах далеко не соответствует требованиям применения. Поэтому построение экспрессивных векторов и их выражение в гетерологических организмах имеет большое значение при изучении характеристик и ферматических применений.

Bacillus subtilis, Escherichia coli и дрожжи широко используются для построения рекомбинатных систем для осмеяния. В отличие от кишечной палочки, Bacillus subtilis не имеет наружной мембранны, поэтому белки, которые он выделяет, могут быть выпущены непосредственно в среду культуры. Bacillus subtilis также класс пищи и не выделяет тепло-лабильных липополисахаридов (эндотоксинов) в белках, которые он выделяет. Инженерная бактерия Escherichia coli (E. coli) обладает преимуществами четкого генетического фона, полной системы векторных рецепторов, быстрого роста, простого выращивания и рекомбинатной стабильности. Кроме того, система экспрессии дрожжей имеет характеристики простых культурных условий, быстрого роста, высоких уровней экспрессии, и простой работы. После перевода протеин может быть переработан и правильно изменен. Недостатки системы выражения дрожжевых являются низкое клонирование генов выражение, длительное время ферментации, неправильная гликозилляция белка, и устойчивость к клеточному делению. Кроме того, высокая концентрация полисахаридов в супернатанте не способствует очистке рекомбинантных белков.

Ранние исследователи, как правило, использовали E. coli в качестве носителя бактерий для изучения выражения и энзимологии DTEase семейных ферментов [34, 37]. В последнее время многие исследователи используют Bacillus subtilis и дрожжи в качестве бактерий-носителей для выражения DTEase семейных ферментов для производства d-аллюлозы [35]. Ген DAEase из A. tumefaciens был выражен в E. coli и K. Марксиан (marxianus)после рекомбинации и использовался для производства аллюлозы, а урожайность d-аллюлозы достигла 230 г/л [53] и 190 г/л [56] соответственно. Для сравнения, фермент DAEase, выраженный в A. tumefaciens с использованием системы выражения E. coli, на сегодняшний день имеет самый высокий уровень выражения, как показано в таблице 2.

(1) я Система выражения E. coli: система выражения E. coli имеет преимущества низкой стоимости и высокой эффективности выражения. Семейство DTEase ферментов может быть пережарен в кишечной палочке в качестве растворимых белков. Фермент рекомбинантной дтиазы отделен и очищен с помощью хроматографии аффинити, а выход d-аллюлозы составляет 120-218 г/л, со скоростью преобразования 24%-33% [34]. Урожайность и эффективность преобразования фермента DAEase, выраженные в рекомбинантной Escherichia coli с использованием метода цельной реакции от Agrobacterium tumefaciens, составили 230 г/л и 33%, соответственно [53].

(2) система выражения Bacillus: рекомбинант Bacillus subtilis несет ген daeasy кодирования может чрезмерно далегкое фермент в высокой эффективности и недорогим способом. Рекомбинатный делегт, иммобилизованный на матрице смолы анионной биржи, может способствовать стабильному и эффективному производству аллюлозы. Активность рекомбинатов, выраженная в Bacillus subtilis B. subtilis, составляет 58,6 U/ мг, что выше, чем в E. coli (8,95 U/ мг). Кроме того, регулирующий элемент ослепления также влияет на количество и активность фермента. В Bacillus subtilis B. subtilis вектор pMA5- Pxy/A-RDPE может стабильно выражать ослепление при ферментной активности 95 U/ мл. Это значение выше фермента, выраженного в E. coli E. coli с вектором pBluescript-SK-DTE [54].

3. Система выражения дрожжей:

The exogenous DAEase gene can be highly expressed in recombinant S. cerevisiae [55] and - клайверомисесmarxianus [56]. The expression vector pRS424-TEFpr-ss-xy/A, which carries the DAEase gene Из российской федерацииA. tumefaciens, can express a protein with a relative molecular mass of 33 000 in S. cerevisiae AN120 [55]. The xylose 1. Изомеры (изомеры)gene Из российской федерацииT. thermophilus and the DAEase gene Из российской федерацииA. tumefaciens are co-expressed in yeast spores to enhance synergistic catalysis. The two recombinant enzymes were immobilized and D-allulose was produced Использование программного обеспеченияD-glucose as the substrate [55]. The recombinant xylose isomerase catalyzes the conversion of D-glucose to D-fructose, and the recombinant DAEase converts D-fructose to D-allulose. Yang et - эл. - привет.provided a valuable approach to regenerate modified K. marxianus cells, which can produce D-allulose in a recycling catalytic manner [56]. The recombinant K. marxianus produced 190 g/L D-allulose from a substrate concentration of 750 g/L D-fructose within 12 h, and about 100 g of residual D-fructose was converted by the engineered bacteria into 34 g of ethanol. In addition, the idea of producing D-allulose by whole-cell bioIii. Катализаторыhas also been proposed [56].

2.2 отделение и очистка d-аллюлозы

The separation and purification of D-allulose mainly includes the following two methods: The first method is ion exchange resin. Anion exchange resin matrix and simultaneous moving bed chromatography were used to immobilize DAEase enzyme to produce D-allulose from D-fructose as a substrate. Using ion exchange resin dialysis, R. sphaeroides SK011 2. Камерыcan produce 6.5 g/L D-allulose from an initial substrate concentration of 50 g/L D-fructose [39], with a production rate of 0.82 g·h-1. For a mixed system containing D-allulose and D- fructose, D-allulose was first converted to gluconic acid and then purified to 91.2% by anion exchange resin [57].

Второй метод использует биологический метод для очистки d-аллюлозы. В смешанной системе, содержащей d-аллюлозу и d-фруктозу, d-аллюлозу получают с помощью дрожжей для потребления оставшейся d-фруктозы и производства этанола. Кроме того, для отделения и очистки d-аллюлозы использовались сочетание осмотического испарения, хроматографии обмена катионных соединений и биологических методов с чистотой до 86,2% [58].

3. Обсуждение

D- аллюлоза является C-3 эпимером D-fructose, который имеет много физиологических функций и широко используется в пище, медицине и здравоохранении. После того как в апреле 2019 года улх США приняло благоприятную меру по исключению аллюлозы из подсчета добавленного сахара и общего количества сахара, крупные компании начали проявлять большой интерес к аллюлозы. В настоящее время, мир 's основные производители d-аллюлозы, в Том числе южной кореи's CJ CheilJedang, the UK' с тейт & Лайл и джапан и#39. S Matsutani Group, все используют биологические методы для производства d-аллюлозы. Поэтому создание генетически модифицированных бактерий, которые могут стимулировать производство d-аллюлозы, является важной основой для индустриализации d-аллюлозы. Хотя аллюлозы в настоящее время могут легально использоваться лишь в нескольких странах, они, несомненно, станут одним из основных заменителей сахара в будущем.

Although there have been major breakthroughs in the research of the biological enzyme method дляD-allulose, in particular the rapid development of gene mining and cell construction technology, the industrial prospects дляthe biological production of D-allulose remain uncertain. Subsequent research can be carried out in the following two areas: 1) screening DTEase family enzymes with high activity and stability through gene mining methods, establishing efficient high-throughput screening methods, and molecularly modifying DTEase family enzymes to better meet the needs of industrialization, thereby achieving efficient conversion of D-fructose and D-allulose; 2) since the industrial preparation of D-allulose faces the problem of removal of residual D-fructose in the mixture after enzymatic catalysis, the separation and purification of D-allulose increases its production cost. At present, there are relatively few studies on the separation and purification and crystallization of D-allulose, indicating that downstream industrialization is relatively lagging behind. It is necessary to further reduce the industrial production cost of D-allulose and improve the production efficiency of D-allulose by simplifying downstream process steps, such as separation and purification, crystallization, drying and other process steps.

На рис. 1 показана более совершенная экологичная технология переработки d-аллюлоз [16]. Вся система реакции разделена между биореактором A (для гидролиза сукроза и ферментативного преобразования в d-аллюлозу) и биореактором B (для производства этанола, разделения d-аллюлозы и распространения дрожжевых материалов). Сырого сахарного тростника или сладкого сорго сока используется в качестве сырья для производства сукроуз. Используемые искусственные дрожжи содержат природный изостерер сукроза и рекомбинантный экзогенный ген ферментов семейства DTEase, поэтому искусственные дрожжи могут производить d-глюкозу и d-фруктозу путем гидролиза сукроза с помощью изостерера сукроза. D-fructose преобразуется в D-allulose семейным ферментом DTEase на 55~60 градусов, а остальные d-глюкоза и D-fructose ферментируются для производства этанола на 27-30 градусов, и этанол может быть собран и использован в качестве топлива. Преимущества этого метода заключаются в низкой стоимости сырья, использовании промежуточных продуктов, производимых в процессе, насколько это возможно, сокращении громоздких этапов разделения и очистки, а также сокращении образования отходов, снижении потребления энергии и повышении урожайности сахара.

Перспективы на будущее

В настоящее время d-аллюлоза производится на промышленных тоннах в китае, японии, южной корее, соединенных штатах и соединенном королевстве. Чтобы выделиться в условиях жесткой конкуренции в промышленности, предприятия, производящие d-аллюлозы, должны совершенствовать технологию каждого звена в этом процессе. В настоящее время основными производственными барьерами являются низкая активность изомера, низкий коэффициент преобразования и низкая частота повторного использования. Поэтому повышение ферментной активности, стабильности и каталитической эффективности должно стать ключевыми целями будущих исследований и разработок семейства DTEase ферментов. Себестоимость d-аллюлозы может быть снижена за счет совершенствования процессов деколонизации, опреснения, кристаллизации и сушки. Рациональный дизайн или модификация необоснованных процессов с использованием эффективных высокопроизводительных технологий скрининга является прямым способом изменения структуры семейства ферментов дтиаз. Улучшая семейства ферментов DTEase и улучшая производственный процесс, себестоимость d-аллюлозы может быть снижена, а цена на нее снижена, что обеспечивает легкую поставку d-аллюлозы потребителям.

Ссылка на сайт

[1] фукада к, исии т, танака к, и др. Вестник химического общества японии,2010,84(6):678-678.

[2] шима, кимура I, изумори к. псикосеконтенты в различных пищевых продуктах и их происхождение [J]. Исследования в области пищевой науки и техники,2006,12(2):137 — 143.

[3] MATSUO T,SUZUKI H,HASHIGUCHI M, и др. Журнал диетологии и витаминологии,2002,48(1):77-80.

[4] 8. МуW,Чжан (Китай)W,FENG Y,et - эл. - привет.Последние достижения в области применения и биотехнологического производства D-psicose[J]. Прикладная микробиология и биотехнология,2012,94(6):1461 — 1467.

[5] бенджамин дж. Айерс, жаклин холлиншид, Александр в. савиль и др. Фитохимия,2014,100(2):126 — 131.

[6] Чжан л, му W, цзян б, и др D- тагатоз -3- эпистерер из родобактерских спароидов, которые превращают d-фруктозу в D-psicose[J]. Биотехнологические письма,2009,31:857-862.

[7] чжан у, ю S,ZHANG T,et - эл. - привет.Последние достижения в области d-аллюлозы: физиологические функции, приложения и биологическое производство [J]. Тенденции в пищевой науке и технике,2016,54(54):127 — 137.

[8] хосаин а, ямагути ф,HIROSE K, и др. редкий сахар D-- псикоза.предотвращает прогрессирование и развитие диабета в модели T2DM Otsuka Long-Evans Tokushima жирных крыс [J]. Проектирование, разработка и терапия лекарственных средств,2015,9:525-535.

[9] ]  3. Хоссейн - а, ямагути - ф, мацуо T,et, - эл. - привет. Редкие случаи заболевания  sugar  D- аллюлоза: потенциал Роль организации объединенных наций and  В терапевтических целях Контроль за состоянием окружающей среды В поддержании ожирения и сахарного диабета 2 типа [J]. Фармакология и фармацевтика Медицина,2015,155:49-59.

[10] хосаин м а, китагаки с, накано д, и др. редкий сахар D- псикозаулучшает чувствительность инсулина и глюкозу у сахарного диабета 2 типа Otsuka Long-Evans Tokushima жирных (OLETF) крыс [J]. Биохимические и биофизические исследования Communica- tions,2011,405(1):7-12.

[11] окиаи м, наканиши у, ямада т и др. ингибирование через диетическую D- псикозанакопления жира в организме взрослых крыс питается высокососной диетой [J]. Биотехнология и биотехнология Биохимия,2013,77(5):1123 — 1126.

[12] CHUNG Y M,LEE J H,KIM D Y,et - эл. - привет.Диетическая D- псикозапонизила висцеральную массу жира у ожиренных крыс с высоким содержанием жира [J]. Журнал Food Science,2012,77(2):H53-H58.

[13] CHUNG MY,OH DK,LEE KW. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии, 2012,60(4):863-869.

[14] IIDA T,YAMADA T,HAYASHI N,et - эл. - привет.Снижение накопления брюшного жира у крыс на 8- недельное употребление недавно разработанного подсластителя из кукурузного сиропа с высоким содержанием фруктозы [J]. Пищевая химия,2013,138(2-3):781-785.

[15] очий м, ониши к, ямада т и др. д-псикоза увеличивает затраты энергии и уменьшает накопление жира в организме крыс, питающихся высокососусной диетой [J]. International Journal of Food Sciences and Nutrition,2014,65(2):245-250.

[16] В настоящее время  С, сяо, Ч, чжу X,et, - эл. - привет. Ii. Обзор  on  Д-аллюлоза: в игре vivo  Метаболизм, каталитический Механизм, инженерные работы  Деформационная конструкция, технология биопроизводства [J]. Границы биоинженерии и биотехнологии,2020,8:26.

[17] - в бегах. С, н, т Д, чжао J,et и - эл. - привет. Функциональные полигидроксиалканоатенано-бусины as  a  Стабильный биокаталыст for  Рентабельное производство редкого сахара D-allulose[J]. Технология биоресурсов,2019,289:9-18.

[18] KISHIDA K,MARTINEZ G,IIDA T,et - эл. - привет.D-allulose — субстрат транспортера глюкозы 5 - го типа (GLUT5) в тонком кишечнике [J]. Пищевая химия,2019,277:604-608.

[19] IWASAKI Y,SENDO M,DEZAKI K, и др. Nature Communications,2018,9:17-25.

[20] MAENG H J,YOON J H,CHUN K M,et - эл. - привет.Метаболическая стабильность d-аллюлозы в биорелевантных средах и гепатоцитах: сравнение с fructose и эритритолом [J]. Продукты питания,2019,8:13-18.

[21] кимото-нира х, мория н, хаякава С, и, и - эл. - привет. Последствия редких заболеваний Сладкая ди-аллюлоза on  Производство кислот И пробиотическая деятельность молочных молочных кислотных бактерий [J]. Журнал молочных наук,2017,100(7):5936-5944.

[22] и#39; харуен с, хаякава с, огава м. свойства белка яичного белка, измененные редкими кетогексозами в результате реакции майяра [J]. Международный журнал пищевой науки и Технологии,2015,50(1):194-202.

[23] янь-з, чжан-н, гуан-и др., сравнительное исследование воздействия d- псикозы и d- фруктозы в реакции майяра с грау-лактоглобулином [J]. Наука о продовольствии и биотехнология,2013,22(2):341-346.

Ли п, о х, ким S Y,et - эл. - привет. Последствия для окружающей среды of D-allulose  as  a  В чем дело? Заменить: on  the  Физико-химические, текстовые и Сенсорные свойства пирожных [J]. Журнал пищевой промышленности и консервации,2020,44(6),e14472.

[25] - такей. - с, ханабата - м. Экологически чистые, водоотталкивающие, светопрозрачные Фильм о фильме Полученный в результате from  psicose  Использование программного обеспечения Литография наноимпринта [J]. Материалы письма,2015,143:197-200.

[26] харада м, кондо е, хаяши х и др. д-альлоза и д-псикоза усиливают действие метронидазола на трихомонад [дж]. Паразитологические исследования,2012,110(4):1565 — 1567.

[27] - сато? - да. М., куроуз - эйч, ямасаки T,et, al.  B. потенциальные возможности Сибирская язва :D-psicose 3. Ингибиты Подвижность, рост and  Репродуктивная зрелость личинок L1 каенорхабдита элеганса [J]. Журнал натуральных лекарственных средств,2008,62(2):244-246.

[28] FENG Z,MU W,JIANG B. характеристика рибозе -5- фосфатного изомера преобразования D-psicose в d-allose из Thermotoga lettingae TMO[J]. Биотехнологические письма,2013,35:719-724.

[29] YEOM S J,SEO E S,KIM Y S,et al. Увеличение производства D-allose мутантом R132E рибозе -5- фосфатного изомера из клостридиевой термоцеллюма [J]. Прикладная микробиология и биотехнология,2011,89(6):1859 — 1866.

[30] HAN W,ZHU Y,MEN Y,et al. Производство аллитола из D-psicose новым изолированным штаммом Klebsiella oxytoca G4A4 [J]. Журнал основ микробиологии,2014,54(10):1073-1079.

[31] Организация < < соэнгас > > - р, идзумори - к, симона. Ми, и, и al.  3. Килиани reactions  on  - на свежем воздухе Углеводы (углеводы) Здание в здании 3. Блоки От d-tagatose и D-psicose[J]. Письма тетраэдра,2005,46(34):5755-5759.

[32]  Дзя (JIA)  М, му  Ч, чу,  F,et и  al.  A  D-psicose   3-epimerase  with  Нейтральная сторона PH-температура воздуха  - оптимальный вариант  from    Clostridium   Общая сумма ассигнований   for  D-psicoseproduction: клонирование, выражение, очищение и определение характеристик [J]. Прикладная микробиология и биотехнология,2014, 98(2):717-725.

[33] чжан л, му у, цзян б и др От родобактерских сфароидов that  Конвертирует d-фруктозу в D-psicose[J]. Биотехнологические письма,2009,31(6):857-862.

[34] MU W,ZHANG W,FANG D,et al., характеризация фермента D-psicose,D-psicose 3-epimerase, из Clostridium sp.[J]. Биотехнологические письма,2013,35(9):1481 — 1486.

[35] чжан W, фан D,XING Q,et al Clostridium scindens 35704[J]. Плус 1,2013,8,e62987.

[36] YOSHIDA H,YOSHIHARA A,SUZUKI T, и др. Февраль Open Biol,2019,9:257-265.

[37] MU  Ч, чу, F,XING Q,et al.  Клонирование, выражение и 3. Определение характеристик of  a  D-psicose  3-epimerase  from   Clostridium cellulolyticum H10[J]. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии,2011,59(14):7785-7792.

[38] чжу Y,MEN Y,BAI W,et al Sp. в Escherichia coli И его потенциальное применение в производстве D-psicose [J]. Биотехнологические письма,2012,34(10):1901-1906.

[39] ZHANG  L, цзянь, Китай B, му Ч, и al.  1. Биопроизводство - D-psicose using  1. Пропускная способность cells  Новых изолированных территорий Rodobacter sphaeroides SK011[J]. Границы химической инженерии в китае,2009,3(4):393-398.

[40] PARK C,KIM T,HONG S, и др. Plos One,2016,11(7),e0160044.

[41] ян дж., тянь с, чжан т., и др. разработка системы выражения пищевой продукции для d- аллюлозы 3- эпимотрический препарат с тандемом изофермента генов в коринебактерии глутамиция и его применение в преобразовании тростниковых мелассы в d- аллюлозы [J].

Биотехнология и биоинженерия,2019,116(4):745-756.

[42] LI S,Чэнь (Китай)Z,ZHANG W,et al. Международный журнал биологических макромолекул,2019,138:536-545.

[43] чжу з, ли с, лю х и др D- тагатозе 3- эпистерет из Sinorhizobium sp.[J]. Достижения РСК,2019,9(6):2919-2927.

[44] чзу з, гао д, ли с и др Для термостабильности и эффективного биокаталитического производства d-аллюлозы [J]. Микробные клеточные заводы,2019,18(1):1-10.

[45] TSENG W,Чэнь (Китай)C,HSU C,et al

31749 и идентификация важного межлицевого остатка [J]. Международный журнал биологических макромолекул,2018, 112:767-774.

[46] YOSHIHARA A,KOZAKAI T,SHINTANI T, и др. Журнал бионаук и биоинженерии,2017,123(2):170 — 176.

[47] HE W,JIANG B,MU W,et al. Производство D-allulose с D-psicose 3-epimerase выражено и показано на поверхности Bacillus subtilis спор [J]. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии,2016,64(38):7201-7207.

[48] чжан у, чжан т, цзян б и др. биохимическая характеристика D-psicose 3 — эпистерер из трепонемы примитиазас -1 И его применение на ферзиматическом производстве D -psicose [J]. Журнал науки продовольствия и сельского хозяйства,2016,96(1): 49-56.

[49] чжан у, ли х, чжан т и др Dorea sp. CAG317 с кислотным pH оптимальным и высокой удельной активностью [J]. Журнал молекулярного катализа B-Enzymatic,2015,120:68-74.

[50] ZHANG W,ZHANG Y,HUANG J, и др. Журнал агрохимии и пищевой химии,2018,66:5593-5601.

[51] PATEL S N,KAUSHAL G,SINGH S. характеристика нового гена D-allulose 3-epimerase из метагенома термальной водной среды и производства D-allulose цельноклеточным катализатором Bacillus subtilis [J]. Прикладная и экологическая микробиология-робиология,2019,1:1-8.

[52] CHEN  - Z,CHEN Дж., чжан Ч, и  al.   По улучшению положения женщин 1.2.3 термостабильность and   catalytic  Поведение в обществе  of  L-rhamnose   isomerase  От Caldicellulosiruptor obsidiansis OB47 до D-аллюлозы под руководством сайта mutagenesis [J]. Журнал сельского хозяйства и продовольствия Химия,2018,66(45):12017 — 12024.

[53] PARK C,PARK C,SHIN K,et al. Производство D-psicose из d-fructose цельными рекомбинатными клетками с высоким выражением D-psicose 3-epimerase из Agrobacterium tumefaciens[J]. Журнал бионаук и биоинженерии,2016,121(2):186 — 190.

[54] CHEN  Дж., чжу Y, ч, ф G,et и al.  На высоком уровне Организация < < интра - - > > and  В сверхклеточном состоянии production  of  D-psicose  3-epimerase  По адресу: via a  Модифицированная система xylose-inducible expression system in Bacillus subtilis[J]. Журнал промышленной микробиологии и Биотехнология,2016,43(11): 1577 — 1591.

[55] LI Z,LI Y,DUAN S, и др. Журнал промышленной микробиологии и Биотехнология,2015,42(8):1117 — 1128.

[56] ян п, чжу х, чжэн ц и др al.  1. Ячейка 1.3.1 регенерация and  Велосипеды и принадлежности catalysis  По техническим аспектам Kluyveromyces  marxianus  По состоянию на 31 декабря D -psicose-3-epimerase gene from Agrobacterium tumefaciens for D-allulose production[J]. Всемирный журнал микробиологии * * * * Биотехнология,2018,34(5):7 — 13.

[57] LI C,ZHANG C,LIN J,et al. Журнал химической технологии и Биотехнология,2018,93(5):1249 — 1260.

[58] SONG Y,NGUYEN QA,WI SG,et al. Strategy for dual production of bioethanol and D-psicose as с добавленной стоимостью products from cruciferous овощные отходы [J]. Технология биоресурсов,2017,223:34-39.

[59] HE X,ZHOU X,YANG Z,et al. Клонирование, выражение и очищение D-tagatose 3-epimerase gene из Escherichia coli JM109[J]. Выражение белка и Очистка,2015,114:77-81.

[60] LI C,LIN J,GUO Q,et al. D-psicose 3-epimerase ory overpression, im, and D-psicose biotransformation, сепарация и кристаллизация [J]. Журнал химической технологии и Биотехнология,2018,93(2):350 — 357.