Какой метод производства D аллюлозы порошка?

1 d-аллюлозный обзор

D аллюлоза-гексозный сахар и C-3 эпимер D- фруктозы. Из-за высокой сладости, низкого содержания энергии, уникальных физиологических функций и потенциальных преимуществ для здоровья, d-аллюлоза считается новым подсластителем с большим потенциалом. Он стал точкой исследования в области биосинтеза редких сахара во всем мире. Однако d-аллюлоза крайне редка в природе и ее трудно синтезировать химическим путем. Биосинтетический метод, с другой стороны, имеет простую процедуру и сделал большие прорывы в последние годы. В связи с этим автор анализирует последние научные исследования в области биосинтеза d-аллюлозы, включая физико-химические свойства, физиологические функции, применение, метаболизм in - привет, виво.и ферментатическое производство d-аллюлозы, включая источники, ферментативные свойства, кристаллические структуры, каталитические механизмы, гетерологическое выражение, а также процессы разделения и очистки ключевых ферментов.

1.1 физико-химические свойства и источники d-аллюлозы

D- аллюлоза-шестиуглеродный сахарС температурой плавления 96 °C, растворимой в воде, и плотностью 1,35 г/см3 [1]. Сладость d-аллюлозы составляет 70% от сахароза [2]. D- аллюлоза снижает сахар и может участвовать в браунинг реакций во время термической обработки. Теплотворная способность d-аллюлозы в экспериментах на крысах составила 0,029 КДЖ/г, что составляет 0,3% энергии сукроза, что указывает на то, что d-аллюлоза имеет почти нулевую энергию [3-4]. D- аллюлоза очень редка в природе, а растительные источники крайне редки [5]. Небольшие количества аллюлозы были также обнаружены в некоторых бактериях [6], а d-аллюлозы не встречаются у животных. Аллюлоза не была найдена у животных. Однако d-аллюлоза также присутствует в различных продуктах питания, таких как фруктовый сок, который прошел длительную обработку нагрева, а содержание d-аллюлозы в различных продуктах тесно связано с концентрацией сахара, температурой и временем нагрева во время производственного процесса [2, 7].

1.2 физиологические функции и метаболизм d-аллюлозы в организме

В настоящее времяФизиологические функции d-аллюлозыВключают: уменьшение поглощения d-фруктозы и d-глюкозы пищевого рациона [8-9]; Повышение резистентности к инсулину [7, 10-11]; Антиожирение [12-14]; И снижение липидов крови [15]. Исследования метаболических путей d-аллюлозы у крыс показали, что: 1. Перенос d-аллюлозы в кишечнике осуществляется при помощи транспортера глюкозы 5 и имеет более низкую аффинити к D-fructose [16-18]; 2. D- аллюлоза не участвует в метаболизме, связанном с глюкозой [19]; 3. D- аллюлоза не может метаболизироваться в печени животных и, следовательно, не может способствовать производству энергии печени [20]. Около 98% d-аллюлозы выводится из организма в виде мочи и фекалий после перорального или внутривенного введения, и лишь небольшое количество d-аллюлозы распадается на короткоцепные жирные кислоты в результате действия микроорганизмов в цеке [21].

1.3 применение d-аллюлозы

D- аллюлоза была одобрена FDA/данные отсутствуют.США в 2011 году в качестве общепризнанного безопасного продукта (GRAS) и разрешена в качестве пищевого ингредиента и пищевой добавки [4, 7]. Исследования показали, что максимальное потребление d-аллюлозы составляет 0,55 г на кг массы тела в сутки и что это не вызовет диарею у людей в этом диапазоне [8-9].

D- аллюлоза обладает большим рыночным потенциалом в пищевой промышленности из-за низкого содержания калорий, высокой сладости и сильных снижающих свойств. Например, d-аллюлоза может всеобъемлющим образом улучшить свойства белка яичного белка через реакцию майяра, такие как превосходная сила геля, эмульсирующая стабильность, пенообразующие свойства и антиоксидантная активность [22-23]. D- аллюлоза может также улучшить качество ферментированных молочных продуктов, регулируя сильный кислый вкус йогурта, вызванный избыточной ферментацией, но не влияет на пробиотическую активность штамма ферментации и пробиотические выгоды для здоровья, которые она приносит ферментированному продукту [21]. Кроме того, использование 25% d-аллюлозы в выпечке, в сочетании с другими добавками, может производить пирожные без сахара [24].

D- аллюлоза также имеет широкий потенциал применения в других областях. Например, материалы растительного происхождения, изготовленные из d-аллюлозы, могут использоваться в качестве постоянных, водонепроницаемых, экологически чистых, светопередающих пленок для оптических устройств и жидкостных кристаллических дисплеев [25]. D- аллюлоза также является первым обнаруженным репрессантом насекомых на основе сахара и оказывает определенное позитивное воздействие на сдерживание роста паразитов [26-27]. D- аллюлоза является также предшественником других гексасов и играет чрезвычайно важную роль в производстве d-аллоса [28-29], а d-аллитола [30[1]играет чрезвычайно важную роль.

2. Биологический метод фермента

Метод химического синтеза d-аллюлозы имеет общие недостатки, которые трудно преодолеть, такие как трудности в изоляции, многие побочные продукты и образование химических отходов. Поэтому метод производства зеленого и экологически чистого биологического фермента постепенно получает широкое внимание во всем мире.

2.1.1 источник семейных ферментов дразы

Семейство D-tagatose 3- эпизодический стереть(DTEases) является ферментом, который катализирует изомеризацию моносакхаридов кето на позиции C3, а также основным ферментом для производства редких сахаров [32]. Семейство ферментов DTEase включает: D-tagatose 3- epimdelete (DTEases) [33], D-allulose 3- epimdelete (DAEase) [35], ketose 3- epimdelete [36], все из которых имеют общее свойство катализатора преобразования D-fructose в D-allulose.

Генная кодировка DTEase была последовательно изолирована от - клостридиумcellulolyticum H10[37], Ruminococcus sp.[38], Clostridium scindens[34] и DesmosporA/данные отсутствуют.sp.[35], но все еще существует необходимость в изучении большего количества источников и более эффективной DTEase[32, 37, 39-40] для промышленного производства d-аллюлозы.

2.1.2 ферменты DTEase

Из семейства DTEase ферментов D-allulose-3- эпизодический стереть(DTEase) имеет наибольшую эффективность в катализации реакции D-fructose на D-allulose. Каталитическая эффективность (ккат/км) DAEases C. cellulolyticum и A. tumefaciens составляет соответственно 186,4 и 205 л /(mmol·min), что выше, чем DTEase (D-tagatose 3-epimerase) из Clostridium sp. (141,4 л /(mmol·min)) и Ruminococcus sp. (51 л /(ммоль · мин)) [34,37-38], см. таблицу 1.

Ионы металлов закрепляются путем привязки к d-фруктозе и играют решающую роль в преобразовании d-фруктозы в d-аллюлозу. Остатки Asp183 и His209 эффективно связывают субстрат через ионы металлов. Семейство DTEase ферментов имеет значительно разную степень зависимости от ионов металлов Mn2+, Co2+ и Mg2+ [41, 44 — 45]. Тем не менее, ферзиматическая активность DAEase от C. целлюлолита и DTEase от C. scindens строго зависит от ионов металлов Mn2+ и Co2+[35, 37].

2.1.3 кристаллическая структура дразнилки

Среди DTEase семейства ферментов, DAEases от A. tumefaciens и C. cellulolyticum проявляют наиболее близкую форму тетрамера. В тетрамере DAEase между остатками аминокислоты в двух подсоединениях образованы 34 водородные связи. Высокая каталитическая активность DAEase объясняется широкой зоной, доступной для растворителей, что вызвано обширным взаимодействием двух димеров фермента DTEase семейства [42]. Кроме того, осмеяние, выраженное рекомбинантными штаммами, по-прежнему обладает превосходными ферментативными свойствами. Гетерологическое выражение DAEase от C. cellulolyticum H10 имеет более длительный период полураспада, более высокие кинетические параметры и более высокую термоустойчивость [37].

Четвертичное расположение даизы представляет собой асимметричную единицу, состоящую из четырех идентичных подгрупп A, B, C и D. активный участок содержит четыре остатка Иона металла, октахедральную координацию двух молекул воды. Эти четыре подгруппы представляют собой димеры, связанные друг с другом кристальной симметрией, в которых подгруппы а и D взаимодействуют друг с другом, как в тесном контакте с подгруппами в, так и с. активный участок даизы подвергается воздействию с одной и той же передней стороны димера. Эти стабильные димеры обеспечивают отличную доступную поверхность для связывания субстратов с передней стороны димера [16].

Гидрофобный канав активного участка и доступная поверхность расположены между подгруппами A и B. Подединица сбоку DAEase закрывается и подвергается воздействию на обоих концах конструкции ствола. В тетрамере даизы два димера заключены по бокам ствола. Каждый мономер (подразделы A, B, C и D) состоит из 8 повторяющихся единиц (элементов/элементов). Каждый мономер состоит из 13 ступенчатых спиралей и 8 ступенчатых складков, образующих основную структуру мономера [16].

2.1.4 каталитический механизм дразнилки

Каталитическое действие семейства DTEase ферментов зависит от молекулярного расположения подблоков. Их активные участки расположены на субстрате для достижения эффективных ферментативных реакций. Mn2+ и две молекулы воды и четыре аминокислоты (глу, асп, его и глу) образуют октагедральную координацию, и эти четыре аминокислотных остатка полностью сохраняются во всех кетозных 3- эпимеразах. Шесть остатков (Glul50/Glul52, Aspl83 / Aspl85, His209 / His211, Glu244 / Glu246, Glul56/ Glu158, His185/His188) от DAEase в A. tumefaciens и DTEase в P. cichorii имеют важное значение для связывания субструтов и термоустойчивости при мутагенезе, направляемом на место.

После того, как субстрат заменяет молекулу воды, активный объект подвергается диастереоизомеризации. Два остаточных продукта, Glu50 и Glu244, в сотрудничестве с Mn2+, удаляют протон D-fructose на C3, образуя промежуточное звено d-аллюлозы в виде цис-диола, и d-аллюлоза высвобождается из положения между водородной связью и молекулой воды на активной точке DAEase.

В настоящее время на ферменты семейства дтиаз вносятся молекулярные изменения с целью повышения их каталитической активности и термоустойчивости. Направленный на сайт мутагенез был использован для повышения термоустойчивости и каталитического поведения L-rhamnoseизомеров из кальдицеллюлозирупторного обсидианза в производстве d-аллюлозы. Гидрофобные остатки в около1 - около1 - петле были полностью заменены полярными аминокислотами. По сравнению с диким ферментом относительная активность мутантов V48N/G59N/I63N и V48N/G59N/I63N/F335S выше, соответственно, на 105,6% и 134,1%, чем у дикого фермента [57]. Мутагенез, управляемый участком, также улучшил тепловую устойчивость D-allulose-3- эпизодический стереть(DAEase) из DoreA/данные отсутствуют.sp. [50].

Исследования каталитического механизма семейных ферментов дтиаз все еще находятся в зачаточном состоянии, и взаимосвязь между структурой фермента и каталитической функцией требует дальнейшего углубленного изучения. Кроме того, тепловая стабильность и субстратная специфика DTEase все еще имеют некоторые недостатки. При производстве редких сахаров, субstrate специфика DTEase семейных ферментов должны быть дополнительно использованы для достижения эффективного и зеленого производства функциональных редких сахаров.

2.1.5 неоднородное выражение дразни

Большинство DTEase семейных ферментов были выявлены и изолированы от бактерий, и количество ферментов, выраженных в естественных штаммах далеко не соответствует требованиям применения. Поэтому построение экспрессивных векторов и их выражение в гетерологических организмах имеет большое значение при изучении характеристик и ферматических применений.

Bacillus subtilis, EscherichiA/данные отсутствуют.coli и дрожжи широко используются для построения рекомбинатных систем для осмеяния. В отличие от кишечной палочки, Bacillus subtilis не имеет наружной мембранны, поэтому белки, которые он выделяет, могут быть выпущены непосредственно в среду культуры. Bacillus subtilis также класс пищи и не выделяет тепло-лабильных липополисахаридов (эндотоксинов) в белках, которые он выделяет. Инженерная бактерия EscherichiA/данные отсутствуют.coli (E. coli) обладает преимуществами четкого генетического фона, полной системы векторных рецепторов, быстрого роста, простого выращивания и рекомбинатной стабильности. Кроме того, система экспрессии дрожжей имеет характеристики простых культурных условий, быстрого роста, высоких уровней экспрессии, и простой работы. После перевода протеин может быть переработан и правильно изменен. Недостатки системы выражения дрожжевых являются низкое клонирование генов выражение, длительное время ферментации, неправильная гликозилляция белка, и устойчивость к клеточному делению. Кроме того, высокая концентрация полисахаридов в супернатанте не способствует очистке рекомбинантных белков.

Ранние исследователи, как правило, использовали E. coli в качестве носителя бактерий для изучения выражения и энзимологии DTEase семейных ферментов [34, 37]. В последнее время многие исследователи используют Bacillus subtilis и дрожжи в качестве бактерий-носителей для выражения DTEase семейных ферментов для производства d-аллюлозы [35]. Ген DAEase из A. tumefaciens был выражен в E. coli и K. Марксиан (marxianus)после рекомбинации и использовался для производства аллюлозы, а урожайность d-аллюлозы достигла 230 г/л [53] и 190 г/л [56] соответственно. Для сравнения, фермент DAEase, выраженный в A. tumefaciens с использованием системы выражения E. coli, на сегодняшний день имеет самый высокий уровень выражения, как показано в таблице 2.

(1) я Система выражения E. coli: система выражения E. coli имеет преимущества низкой стоимости и высокой эффективности выражения. Семейство DTEase ферментов может быть пережарен в кишечной палочке в качестве растворимых белков. Фермент рекомбинантной дтиазы отделен и очищен с помощью хроматографии аффинити, а выход d-аллюлозы составляет 120-218 г/л, со скоростью преобразования 24%-33% [34]. Урожайность и эффективность преобразования фермента DAEase, выраженные в рекомбинантной Escherichia coli с использованием метода цельной реакции от Agrobacterium tumefaciens, составили 230 г/л и 33%, соответственно [53].

(2) система выражения Bacillus: рекомбинант Bacillus subtilis несет ген daeasy кодирования может чрезмерно далегкое фермент в высокой эффективности и недорогим способом. Рекомбинатный делегт, иммобилизованный на матрице смолы анионной биржи, может способствовать стабильному и эффективному производству аллюлозы. Активность рекомбинатов, выраженная в Bacillus subtilis B. subtilis, составляет 58,6 U/ мг, что выше, чем в E. coli (8,95 U/ мг). Кроме того, регулирующий элемент ослепления также влияет на количество и активность фермента. В Bacillus subtilis B. subtilis вектор pMA5- Pxy/A-RDPE может стабильно выражать ослепление при ферментной активности 95 U/ мл. Это значение выше фермента, выраженного в E. coli E. coli с вектором pBluescript-SK-DTE [54].

3. Система выражения дрожжей:

Экзогенный ген DAEase может быть сильно выражен в рекомбинате S. cerevisiae [55] и - клайверомисесmarxianus [56]. Выражение вектор pRS424-TEFpr-ss-xy/A, который несет в себе ген осмециенса а. тумефациенса, может выразить белок с относительной молекулярной массой 33 000 в с. cerevisiae AN120 [55]. Ген xylose изомеров из T. thermophilus и ген DAEase из A. tumefaciens совместно выражаются в дрожжевых спорах для усиления синергетического катализатора. Два рекомбинантных фермента были обездвижены и d-аллюлоза была произведена с использованием d-глюкозы в качестве субстрита [55]. Рекомбинантный изомер xylose катализирует преобразование d-глюкозы в d-фруктозу, а рекомбинантная оспа преобразует d-глюкозу в d-аллюлозу. Янг и др. предоставили ценный подход к регенерации модифицированных клеток к. марксиана, которые могут производить d-аллюлоза рециклическим каталитическим способом [56]. Рекомбинант к. марксиан произвел 190 г/л d-аллюлозы из субstrate концентрации 750 г/л D-fructose в течение 12 часов, и около 100 г остаточной D-fructose был преобразован инженерами бактерий в 34 г этанола. Кроме того, была предложена идея производства d-аллюлозы цельным биокатализом [56].

2.2 отделение и очистка d-аллюлозы

Разделение и очистка d-аллюлозы в основном включает в себя следующие два метода: первый метод-это ионная обменная смола. Матрица смолы аниона exchange и хроматография подвижного слоя одновременно использовались для иммобилизации фермента DAEase для производства d-аллюлозы из d-фруктозы в качестве субстрата. С помощью ионно-обменных смол диализ, R. sphaeroides SK011 клетки могут производить 6,5 г/л d-аллюлозы из первоначальной субстратной концентрации 50 г/л D-fructose [39]с производительностью 0,82 г · н -1. Для смешанной системы, содержащей D- аллюлозу и D- фруктозу, D- аллюлоза сначала была преобразована в глуконическую кислоту, а затем очищена до 91,2% анионной обменной смолой [57].

Второй метод использует биологический метод для очистки d-аллюлозы. В смешанной системе, содержащей d-аллюлозу и d-фруктозу, d-аллюлозу получают с помощью дрожжей для потребления оставшейся d-фруктозы и производства этанола. Кроме того, для отделения и очистки d-аллюлозы использовались сочетание осмотического испарения, хроматографии обмена катионных соединений и биологических методов с чистотой до 86,2% [58].

3. Обсуждение

D- аллюлоза является C-3 эпимером D-fructose, который имеет много физиологических функций и широко используется в пище, медицине и здравоохранении. После того как в апреле 2019 года улх США приняло благоприятную меру по исключению аллюлозы из подсчета добавленного сахара и общего количества сахара, крупные компании начали проявлять большой интерес к аллюлозы. В настоящее время, мир 's основные производители d-аллюлозы, в Том числе южной кореи's CJ CheilJedang, В настоящее времяUK' с тейт & Лайл и джапан и#39. S Matsutani Group, все используют биологические методы для производства d-аллюлозы. Поэтому создание генетически модифицированных бактерий, которые могут стимулировать производство d-аллюлозы, является важной основой для индустриализации d-аллюлозы. Хотя аллюлозы в настоящее время могут легально использоваться лишь в нескольких странах, они, несомненно, станут одним из основных заменителей сахара в будущем.

Несмотря на значительные достижения в исследовании биологического фермента d-аллюлозы, в частности быстрое развитие генной добычи и технологии клеточной конструкции, промышленные перспективы биологического производства d-аллюлозы остаются неопределенными. Последующие исследования могут быть проведены в следующих двух областях: 1. Скрининг DTEase семейных ферментов с высокой активностью и стабильностью с помощью методов генной добычи, создание эффективных высокопроизводительных методов скрининга, и молекулярное изменение DTEase семейных ферментов для лучшего удовлетворения потребностей индустриализации, тем самым обеспечивая эффективное преобразование D-fructose и d-аллюлозы; 2. Поскольку при промышленной подготовке d-аллюлозы возникает проблема удаления остаточного d-фруктозы в смеси после ферзиматического каталитического нейтрализатора, разделение и очистка d-аллюлозы увеличивает себестоимость ее производства. В настоящее время проведено относительно мало исследований по вопросам разделения, очистки и кристаллизации d-аллюлозы, что свидетельствует о Том, что процесс индустриализации на последующих этапах относительно отстает. Необходимо и далее снижать себестоимость промышленного производства d-аллюлозы и повышать эффективность производства d-аллюлозы путем упрощения последующих технологических этапов, таких как разделение и очистка, кристаллизация, сушка и другие технологические этапы.

На рис. 1 показана более совершенная экологичная технология переработки d-аллюлоз [16]. Вся система реакции разделена между биореактором A (для гидролиза сукроза и ферментативного преобразования в d-аллюлозу) и биореактором B (для производства этанола, разделения d-аллюлозы и распространения дрожжевых материалов). Сырого сахарного тростника или сладкого сорго сока используется в качестве сырья для производства сукроуз. Используемые искусственные дрожжи содержат природный изостерер сукроза и рекомбинантный экзогенный ген ферментов семейства DTEase, поэтому искусственные дрожжи могут производить d-глюкозу и d-фруктозу путем гидролиза сукроза с помощью изостерера сукроза. D-fructose преобразуется в D-allulose семейным ферментом DTEase на 55~60 градусов, а остальные d-глюкоза и D-fructose ферментируются для производства этанола на 27-30 градусов, и этанол может быть собран и использован в качестве топлива. Преимущества этого метода заключаются в низкой стоимости сырья, использовании промежуточных продуктов, производимых в процессе, насколько это возможно, сокращении громоздких этапов разделения и очистки, а также сокращении образования отходов, снижении потребления энергии и повышении урожайности сахара.

Перспективы на будущее

В настоящее время d-аллюлоза производится на промышленных тоннах в китае, японии, южной корее, соединенных штатах и соединенном королевстве. Чтобы выделиться в условиях жесткой конкуренции в промышленности, предприятия, производящие d-аллюлозы, должны совершенствовать технологию каждого звена в этом процессе. В настоящее время основными производственными барьерами являются низкая активность изомера, низкий коэффициент преобразования и низкая частота повторного использования. Поэтому повышение ферментной активности, стабильности и каталитической эффективности должно стать ключевыми целями будущих исследований и разработок семейства DTEase ферментов. Себестоимость d-аллюлозы может быть снижена за счет совершенствования процессов деколонизации, опреснения, кристаллизации и сушки. Рациональный дизайн или модификация необоснованных процессов с использованием эффективных высокопроизводительных технологий скрининга является прямым способом изменения структуры семейства ферментов дтиаз. Улучшая семейства ферментов DTEase и улучшая производственный процесс, себестоимость d-аллюлозы может быть снижена, а цена на нее снижена, что обеспечивает легкую поставку d-аллюлозы потребителям.

Ссылка на сайт

[1] фукада к, исии т, танака к, и др. Вестник химического общества японии,2010,84(6):678-678.

[2] шима, кимура I, изумори к. псикосеконтенты в различных пищевых продуктах и их происхождение [J]. Исследования в области пищевой науки и техники,2006,12(2):137 — 143.

[3] MATSUO T,SUZUKI H,HASHIGUCHI M, и др. Журнал диетологии и витаминологии,2002,48(1):77-80.

[4] 8. МуW,Чжан (Китай)W,FENG Y,et - эл. - привет.Последние достижения в области применения и биотехнологического производства D-psicose[J]. Прикладная микробиология и биотехнология,2012,94(6):1461 — 1467.

[5] бенджамин дж. Айерс, жаклин холлиншид, Александр в. савиль и др. Фитохимия,2014,100(2):126 — 131.

[6] Чжан л, му W, цзян б, и др D- тагатоз -3- эпистерер из родобактерских спароидов, которые превращают d-фруктозу в D-psicose[J]. Биотехнологические письма,2009,31:857-862.

[7] чжан у, ю S,ZHANG T,et - эл. - привет.Последние достижения в области d-аллюлозы: физиологические функции, приложения и биологическое производство [J]. Тенденции в пищевой науке и технике,2016,54(54):127 — 137.

[8] хосаин а, ямагути ф,HIROSE K, и др. редкий сахар D-- псикоза.предотвращает прогрессирование и развитие диабета в модели T2DM Otsuka Long-Evans Tokushima жирных крыс [J]. Проектирование, разработка и терапия лекарственных средств,2015,9:525-535.

[9] ]  3. Хоссейн - а, ямагути - ф, мацуо T,et, - эл. - привет. Редкие случаи заболевания  Сахар с сахаром D- аллюлоза: потенциал Роль организации объединенных наций и В терапевтических целях Контроль за состоянием окружающей среды В поддержании ожирения и сахарного диабета 2 типа [J]. Фармакология и фармацевтика Медицина,2015,155:49-59.

[10] хосаин м а, китагаки с, накано д, и др. редкий сахар D- псикозаулучшает чувствительность инсулина и глюкозу у сахарного диабета 2 типа Otsuka Long-Evans Tokushima жирных (OLETF) крыс [J]. Биохимические и биофизические исследования Communica- tions,2011,405(1):7-12.

[11] окиаи м, наканиши у, ямада т и др. ингибирование через диетическую D- псикозанакопления жира в организме взрослых крыс питается высокососной диетой [J]. Биотехнология и биотехнология Биохимия,2013,77(5):1123 — 1126.

[12] CHUNG Y M,LEE J H,KIM D Y,et - эл. - привет.Диетическая D- псикозапонизила висцеральную массу жира у ожиренных крыс с высоким содержанием жира [J]. Журнал Food Science,2012,77(2):H53-H58.

[13] CHUNG MY,OH DK,LEE KW. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии, 2012,60(4):863-869.

[14] IIDA T,YAMADA T,HAYASHI N,et - эл. - привет.Снижение накопления брюшного жира у крыс на 8- недельное употребление недавно разработанного подсластителя из кукурузного сиропа с высоким содержанием фруктозы [J]. Пищевая химия,2013,138(2-3):781-785.

[15] очий м, ониши к, ямада т и др. д-псикоза увеличивает затраты энергии и уменьшает накопление жира в организме крыс, питающихся высокососусной диетой [J]. International Journal Соединенные Штаты америкиFood Sciences иNutrition,2014,65(2):245-250.

[16] В настоящее время  С, сяо, Ч, чжу X,et, - эл. - привет. Ii. Обзор  По состоянию на Д-аллюлоза: в игре vivo  Метаболизм, каталитический Механизм, инженерные работы  Деформационная конструкция, технология биопроизводства [J]. Границы биоинженерии и биотехнологии,2020,8:26.

[17] - в бегах. С, н, т Д, чжао J,et и - эл. - привет. Функциональные полигидроксиалканоатенано-бусины По состоянию на 31 декабря a  Стабильный биокаталыст для Рентабельное производство редкого сахара D-allulose[J]. Технология биоресурсов,2019,289:9-18.

[18] KISHIDA K,MARTINEZ G,IIDA T,et - эл. - привет.D-allulose — субстрат транспортера глюкозы 5 - го типа (GLUT5) в тонком кишечнике [J]. Пищевая химия,2019,277:604-608.

[19] IWASAKI Y,SENDO M,DEZAKI K, и др. Nature Communications,2018,9:17-25.

[20] MAENG H J,YOON J H,CHUN K M,et - эл. - привет.Метаболическая стабильность d-аллюлозы в биорелевантных средах и гепатоцитах: сравнение с fructose и эритритолом [J]. Продукты питания,2019,8:13-18.

[21] кимото-нира х, мория н, хаякава С, и, и - эл. - привет. Последствия редких заболеваний Сладкая ди-аллюлоза По состоянию на Производство кислот И пробиотическая деятельность молочных молочных кислотных бактерий [J]. Журнал молочных наук,2017,100(7):5936-5944.

[22] и#39; харуен с, хаякава с, огава м. свойства белка яичного белка, измененные редкими кетогексозами в результате реакции майяра [J]. Международный журнал пищевой науки и Технологии,2015,50(1):194-202.

[23] янь-з, чжан-н, гуан-и др., сравнительное исследование воздействия d- псикозы и d- фруктозы в реакции майяра с грау-лактоглобулином [J]. Наука о продовольствии и биотехнология,2013,22(2):341-346.

Ли п, о х, ким S Y,et - эл. - привет. Последствия для окружающей среды Из д-аллюлозы По состоянию на 31 декабря a  В чем дело? Заменить: По состоянию на the  Физико-химические, текстовые и Сенсорные свойства пирожных [J]. Журнал пищевой промышленности и консервации,2020,44(6),e14472.

[25] - такей. - с, ханабата - м. Экологически чистые, водоотталкивающие, светопрозрачные Фильм о фильме Полученный в результате Из российской федерации psicose  Использование программного обеспечения Литография наноимпринта [J]. Материалы письма,2015,143:197-200.

[26] харада м, кондо е, хаяши х и др. д-альлоза и д-псикоза усиливают действие метронидазола на трихомонад [дж]. Паразитологические исследования,2012,110(4):1565 — 1567.

[27] - сато? - да. М., куроуз - эйч, ямасаки T,et, - эл. - привет. B. потенциальные возможности Сибирская язва :D-psicose 3. Ингибиты Подвижность, рост и Репродуктивная зрелость личинок L1 каенорхабдита элеганса [J]. Журнал натуральных лекарственных средств,2008,62(2):244-246.

[28] FENG Z,MU W,JIANG B. характеристика рибозе -5- фосфатного изомера преобразования D-psicose в d-allose из Thermotoga lettingae TMO[J]. Биотехнологические письма,2013,35:719-724.

[29] YEOM S J,SEO E S,KIM Y S,et - эл. - привет.Увеличение производства D-allose мутантом R132E рибозе -5- фосфатного изомера из клостридиевой термоцеллюма [J]. Прикладная микробиология и биотехнология,2011,89(6):1859 — 1866.

[30] HAN W,ZHU Y,MEN Y,et al. Производство аллитола из D-psicose новым изолированным штаммом Klebsiella oxytoca G4A4 [J]. Журнал основ микробиологии,2014,54(10):1073-1079.

[31] Организация < < соэнгас > > - р, идзумори - к, симона. Ми, и, и al.  3. Килиани Ответы на вопросы По состоянию на - на свежем воздухе Углеводы (углеводы) Здание в здании 3. Блоки От d-tagatose и D-psicose[J]. Письма тетраэдра,2005,46(34):5755-5759.

[32]  Дзя (JIA)  М, му  Ч, чу,  F,et и  al.  A  D-psicose   3-epimerase  с Нейтральная сторона PH-температура воздуха  - оптимальный вариант  Из российской федерации   Clostridium   Общая сумма ассигнований   для D-psicoseproduction: клонирование, выражение, очищение и определение характеристик [J]. Прикладная микробиология и биотехнология,2014, 98(2):717-725.

[33] чжан л, му у, цзян б и др От родобактерских сфароидов - что? Конвертирует d-фруктозу в D-psicose[J]. Биотехнологические письма,2009,31(6):857-862.

[34] MU W,ZHANG W,FANG D,et al., характеризация фермента D-psicose,D-psicose 3-epimerase, из Clostridium sp.[J]. Биотехнологические письма,2013,35(9):1481 — 1486.

[35] чжан W, фан D,XING Q,et al Clostridium scindens 35704[J]. Плус 1,2013,8,e62987.

[36] YOSHIDA H,YOSHIHARA A,SUZUKI T, и др. Февраль Open Biol,2019,9:257-265.

[37] MU  Ч, чу, F,XING Q,et al.  Клонирование, выражение и 3. Определение характеристик Соединенные Штаты америки a  D-psicose  3-epimerase  Из российской федерации  Clostridium cellulolyticum H10[J]. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии,2011,59(14):7785-7792.

[38] чжу Y,MEN Y,BAI W,et al Sp. в Escherichia coli И его потенциальное применение в производстве D-psicose [J]. Биотехнологические письма,2012,34(10):1901-1906.

[39]  ZHANG  L, цзянь, Китай B, му Ч, и al.  1. Биопроизводство - D-psicose Использование программного обеспечения 1. Пропускная способность 2. Камеры Новых изолированных территорий Rodobacter sphaeroides SK011[J]. Границы химической инженерии в китае,2009,3(4):393-398.

[40] PARK C,KIM T,HONG S, и др. Plos One,2016,11(7),e0160044.

[41] ян дж., тянь с, чжан т., и др. разработка системы выражения пищевой продукции для d- аллюлозы 3- эпимотрический препарат с тандемом изофермента генов в коринебактерии глутамиция и его применение в преобразовании тростниковых мелассы в d- аллюлозы [J].

Биотехнология и биоинженерия,2019,116(4):745-756.

[42] LI S,Чэнь (Китай)Z,ZHANG W,et al. Международный журнал биологических макромолекул,2019,138:536-545.

[43] чжу з, ли с, лю х и др D- тагатозе 3- эпистерет из Sinorhizobium sp.[J]. Достижения РСК,2019,9(6):2919-2927.

[44] чзу з, гао д, ли с и др Для термостабильности и эффективного биокаталитического производства d-аллюлозы [J]. Микробные клеточные заводы,2019,18(1):1-10.

[45] TSENG W,Чэнь (Китай)C,HSU C,et al

31749 и идентификация важного межлицевого остатка [J]. Международный журнал биологических макромолекул,2018, 112:767-774.

[46] YOSHIHARA A,KOZAKAI T,SHINTANI T, и др. Журнал бионаук и биоинженерии,2017,123(2):170 — 176.

[47] HE W,JIANG B,MU W,et al. Производство D-allulose с D-psicose 3-epimerase выражено и показано на поверхности Bacillus subtilis спор [J]. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии,2016,64(38):7201-7207.

[48] чжан у, чжан т, цзян б и др. биохимическая характеристика D-psicose 3 — эпистерер из трепонемы примитиазас -1 И его применение на ферзиматическом производстве D -psicose [J]. Журнал науки продовольствия и сельского хозяйства,2016,96(1): 49-56.

[49] чжан у, ли х, чжан т и др Dorea sp. CAG317 с кислотным pH оптимальным и высокой удельной активностью [J]. Журнал молекулярного катализа B-Enzymatic,2015,120:68-74.

[50] ZHANG W,ZHANG Y,HUANG J, и др. Журнал агрохимии и пищевой химии,2018,66:5593-5601.

[51] PATEL S N,KAUSHAL G,SINGH S. характеристика нового гена D-allulose 3-epimerase из метагенома термальной водной среды и производства D-allulose цельноклеточным катализатором Bacillus subtilis [J]. Прикладная и экологическая микробиология-робиология,2019,1:1-8.

[52] CHEN  - Z,CHEN Дж., чжан Ч, и  al.   По улучшению положения женщин 1.2.3 термостабильность и  3. Каталитические нейтрализаторы Поведение в обществе  Соединенные Штаты америки L-rhamnose   1. Изомеры (изомеры) От Caldicellulosiruptor obsidiansis OB47 до D-аллюлозы под руководством сайта mutagenesis [J]. Журнал сельского хозяйства и продовольствия Химия,2018,66(45):12017 — 12024.

[53] PARK C,PARK C,SHIN K,et al. Производство D-psicose из d-fructose цельными рекомбинатными клетками с высоким выражением D-psicose 3-epimerase из Agrobacterium tumefaciens[J]. Журнал бионаук и биоинженерии,2016,121(2):186 — 190.

[54] CHEN  Дж., чжу Y, ч, ф G,et и al.  На высоком уровне Организация < < интра - - > > и В сверхклеточном состоянии Производство и продажа of  D-psicose  3-epimerase  По адресу: via a  Модифицированная система xylose-inducible expression system in Bacillus subtilis[J]. Журнал промышленной микробиологии и Биотехнология,2016,43(11): 1577 — 1591.

[55] LI Z,LI Y,DUAN S, и др. Журнал промышленной микробиологии и Биотехнология,2015,42(8):1117 — 1128.

[56] ян п, чжу х, чжэн ц и др al.  1. Ячейка 1.3.1 регенерация and  Велосипеды и принадлежности Iii. Катализаторы По техническим аспектам Kluyveromyces  marxianus  По состоянию на 31 декабря D -psicose-3-epimerase gene from Agrobacterium tumefaciens for D-allulose production[J]. Всемирный журнал микробиологии * * * * Биотехнология,2018,34(5):7 — 13.

[57] LI C,ZHANG C,LIN J,et al. Журнал химической технологии и Биотехнология,2018,93(5):1249 — 1260.

[58] SONG Y,NGUYEN QA,WI SG,et al. Strategy for dual production of bioethanol and D-psicose as с добавленной стоимостью products from cruciferous овощные отходы [J]. Технология биоресурсов,2017,223:34-39.

[59] HE X,ZHOU X,YANG Z,et al. Клонирование, выражение и очищение D-tagatose 3-epimerase gene из Escherichia coli JM109[J]. Выражение белка и Очистка,2015,114:77-81.

[60] LI C,LIN J,GUO Q,et al. D-psicose 3-epimerase ory overpression, im, and D-psicose biotransformation, сепарация и кристаллизация [J]. Журнал химической технологии и Биотехнология,2018,93(2):350 — 357.