Что такое β 13 Glucan?

Бета -1,3- глюкан — это класс высокомолекулярных полисахаридов, широко распространенных в природе, с основной цепями глюкозы, связанных бета -1,3- гликозидными связями. Некоторые естественные β 1,3- глюканы также содержат боковые цепи, связанные β 1,6- гликосидические связи в различных пропорциях и размерах. Например, боковые цепи фукоидана из коричневых водорослей содержат около 30% грау -1,6- связанные разветвленные конструкции и поэтому водорастворимы [1]. Природные β-1,3- глюканы широко распространены в грибах, бактериях и растениях. Общие 1,3- глюканы включают в себя fucoidan, carrageenan, дрожжевой глюкан, пория кокос полисахариды, shiitake грибы полисахариды, кальлозы и т.д. Из-за того, как соединены связи β 1,3- гликосидические и водородные связи между молекулами, длинноцепные β 1,3- глюканы обычно демонстрируют различные спиральные третичные структуры в их естественном состоянии [2]. Эти специальные третичные структуры наделяют β 1,3- глюканов разнообразными биологическими функциями, включая регулирование иммунитета [3], содействие распространению пробиотики кишечника [4], регулирование баланса сахара в крови и снижение уровня холестерина [5]. Биологическая деятельность β 1,3-glucan и ее специальная третичная структура привлекли широкое внимание в области продовольствия, ежедневных химических веществ и медицины.

β-1,3- глюканаза представляет собой класс ферментов, которые могут гидролизировать глюкан, связанный β-1,3- глюкановыми связями, и играет важную роль в биодеградации, реконструкции и разработке и применении β-1,3- глюкан. В природе β 1,3- глюканаза широко распространена в архаях, бактериях, грибах, высших растениях и животных. β-1,3- глюканаза имеет широкий спектр применения в пищевой и фармацевтической промышленности, таких как подготовка низкомолекулярного веса β-1,3- глюканских олигосахаридов, снижение вязкости брота ферментации пива и ингибирование послеуборочных патогенных грибов в фруктах и овощах.

Хотя исследователи провели много исследований по экспрессии и очистке, молекулярной структуре, ферзиматическим свойствам и каталитическому механизму β 1,3-glucanase, сложная структура различных типов β 1,3-glucan ограничивает ее широкое применение. Синергическое участие тбо -1,3- глюканазов из различных семейств и с различными способами действия необходимо для эффективной деградации сложных тбо -1,3- глюканов. Таким образом, глубокое понимание структуры, функции и каталитического режима различных типов β 1,3- глюканаз имеет большое значение для применения и дальнейшей молекулярной модификации β 1,3- глюканаз. В настоящем документе содержится краткая информация о ходе исследований в области структуры, функций и областей применения типичных глюканазов тз -1,3 с целью обеспечения основы для последующих исследований их каталитических механизмов и их применения в области продовольствия, медицины и других областях.

1 классификация грау -1,3 глюкана и их каталитических механизмов

β-1,3 глюканазы могут быть разделены на эндотип и экзотип в соответствии с их каталитическим режимом. Endo-β 1,3-glucanase (EC 3.2.1.39), также известный как kombu polysaccharide enzyme, представляет собой фермент, который конкретно гидролизирует β-1,3- гликозидные связи в -1,3- глюканsugar chains. Он играет ключевую биологическую роль в разложении и реконструкции грау -1,3- глюкан в природе и является семьей. Эндо1,3- грац-глюканаз гидролиз -1,3- глюкан изнутри сахарной цепи, производя серию олигосахаридов с различной степенью полимеризации. Exo-β-1,3- глюканаза (EC 3.2.1.58) гидролизирует β-1,3- глюканский субстрат Один за другим из неснижающегося конца сахарной цепи. Гидролизованные продукты, как правило, являются глюкозой или однократным олигосахаридом, и они играют вспомогательную роль в деградации β 1,3-glucan. Основываясь на эволюционных связях, обнаруженные β 1,3- глюканазы можно разделить на 12 гликозидных гидролазов (гх) в соответствии с базой данных CAZy (http://www.cazy.org/). Среди них endo-β 1,3- глюканазы можно разделить на 9 гх семей (рис. 1): г16, г17, г55, г64, г81, г128, г152, г157 и г158; Exo -β-1,3- глюканазы, которые были обнаружены, можно разделить на 6 гх семей: г3, г5, г17, г55, г128 и г132.

β-1,3- глюканазы имеют два механизма гидролиза, а именно консервативный механизм и обратный механизм [6]. Каталитический процесс сохраняемого механизма гидролиза состоит из двух этапов. Во-первых, глютамическая кислота остатков в активном центре действует как общая кислота (донор электронов), чтобы обеспечить протон кислорода гликосидической связи, чтобы удалить группу выхода, сломать β-1,3- гликосидической связи, и сформировать фермент-гликозидный промежуточного продукта.

Впоследствии глютамическая кислота, остающаяся в активном центре, выступает в качестве широкой основы, помогая молекуле воды в борьбе с гетероатомным углеродом фермент-гликозидного промежуточного вещества. Наконец, грава -1,3- гликозидная связь субстрата гидролизируется, образуя конечный гидролитический продукт. Механизм удержания так называется, потому что конформация субстрата сохраняется двумя инверсиями гетероатомного углерода. Инвертирующий механизм 1,3- глюканазы включает два сохраняемых каталитических остатка, общую кислоту и общую основу. Во время реакции общая кислота сначала подает протон аномерному углероду субстрата, в то время как общая основа удаляет протон из молекулы воды, повышая его нуклеофиличность и способствуя его атаке на центр аномерной группы, тем самым разрывая гликосидическую связь и генерируя гидролитический продукт (рис. 2).

2. Источники и подготовка 1,3- глюкана

-1,3- глюкан В основном получают из грибов, бактерий, растений, насекомых и моллюсков. В таблице 1 резюмируются типичные графы -1,3- глюконазы из различных источников, которые, согласно сообщениям, могут применяться. Основными бактериями, которые, согласно сообщениям, производят β-1,3- глюканазу, являются пирококк furiosus [7], Paenibacillus polymyxA/данные отсутствуют.[8], Bacillus lehensis G1 [9], Streptomyces sp. [10] и т.д. Грибы и растения также являются важными источниками грава -1,3- глюканазы, включая аспергилл фумигатус [11], триходерма аспереллум [12], фанерохет хриспорий [13], ячмень [14], виноград [15] и т.д.

Природные источники грава -1,3- глюканов являются обильными, стабильными по природе и проявляют специфическую каталитическую активность, демонстрируя уникальный потенциал применения. Например, β 1,3- глюканаза, производимая Paenibacillus terrae [16], может эффективно сдерживать рост патогенных грибов растений и играть важную роль в защите растений. β-1,3- глюканаза, полученная из Arca β ata [17] имеет -1,3- глюканаза имеет высокую активность и оказывает иммуноусиливающее воздействие на фактор некроза опухоли.

β-1,3- глюкан из Trichoderma harzianum [18] является идеальным кандидатом фермента для производства β-1,3- олигосахаридов и может быть использован для промышленной подготовки олигосахаридов. В дополнение к открытию β-1,3- глюканазы с отличными свойствами из природных источников, гетерологические технологии рекомбинантного выражения могут также использоваться для обнаружения и подготовки β-1,3- глюканазы, тем самым расширяя их источники, повышая уровень выражения и расширяя сферу применения β-1,3- глюканазы.

В настоящее время основными носителями рекомбинантного выражения β-1,3-glucan являются Escherichia coli, Pichia is, Bacillus subtilis и т.д. Система экспрессии E. coli является более технологически зрелой и относительно простой в эксплуатации, чем система экспрессии дрожжей, и широко используется при открытии и подготовке новых β 1,3-glucan. Например, β-1,3-glucan из таких источников, как антагонистические дрожжи Pichia guilliermondii [19], макрогеном музы rumen микроорганизмов [20], и псевдоним aeruginosa [21] все получены рекомбинантной подготовки в E. coli. Ферменты все получают путем рекомбинантной подготовки Escherichia coli. Грау -1,3- глюкан моглюб, полученный из магнафора оризае, может быть эффективно выражен системой кишечной палочки. и проявляет противогрибную активность [22].

Хотя прокариотическое выражение в кишечной кишечной киле имеет преимущества быстрого роста и низкой стоимости, некоторые эукариотические гены не могут быть эффективно выражены, поскольку система эукариотического выражения не может распознавать эукариотическую транскрипцию и элементы перевода и не имеет функции последующего преобразования. Таким образом, в последние годы исследователи также широко используют эукариотические экспрессионные системы для выражения β-1,3- глюканазы, такие как Pichia is и Bacillus subtilis экспрессионные системы [23]. Во время процесса промышленного самовыражения пичиа пасторис количество белка, выделяемого самим собой, относительно невелико, поэтому количество белка, выделяемого в качестве целевого, относительно велико.

Однако, поскольку некоторые β 1,3-glucan оказывают гидролитическое воздействие на стенки дрожжевых элементов, их применимость должна быть дополнительно проверена экспериментальным путем. Гетерогенная технология рекомбинантного выражения в настоящее время стала важным методом исследований и подготовки приложений β 1,3-glucan. В то же время сочетание структурной биологии, молекулярной биологии, направленной эволюции и других методов исследований для молекулярного изменения гравитационного -1,3- глюканного излучения, полученного путем гетерологической рекомбинации, может способствовать дальнейшему повышению каталитической эффективности и прикладной ценности фермента. Фэн цзяньвэй и др. [24] обнаружили термофильный грау -1,3- глюкан из компоста. В результате мутагенеза 160 аминокислот были изменены с лизина на глутамическую кислоту, что повысило активность фермента на 1 7%. Мухаммед и др. [25] использовали программы modeller и I-TASSER для выполнения гомологического моделирования 1,3- глюка из дрочжевых Wickerhamomyces normus NCYC 434. Впоследствии термостабильность модели была повышена с помощью средств SPDBViewer и автоматической отключения звука. Было установлено, что мутант E186R обладает наилучшей термостойкостью, а температура плавления увеличена на 9,58 к.

3 структура и каталитический механизм эндо1,3- глюкан

3.1 Endo- 1,3- глюкан

Endo-β-1,3-glucan, также известный как kombu полисахаридный фермент, может специально гидролизировать и резать β-1,3- гликосидические облигации произвольно из внутренней части β-1,3-glucan цепи, производя олигосахариды различной длины. Сообщалось, что эндо -β 1,3- глюканазы в основном распространены в четырех семьях гх GH16, GH17, GH64 и GH81. На сегодняшний день структура и каталитический механизм endo-β- 1,3глюканазов из шести семейств G- г,GH16, GH17, GH64, GH81, GH128 и GH158 были урегулированы. Было получено мало сообщений о структуре эндо-грау -1,3- глюканазы из г55, г152 и г157, и их подробные каталитические механизмы еще предстоит уточнить.

3.1.1 GH16 family endo-β-1,3-glucan

Все члены семьи GH16β-1,3-glucanСообщается, что эндотипные, широко распространены в бактериях, грибах и архаях, с преобладание бактериальных источников. Третичная структура г16 семейство грау -1,3- глюканазы богаты грационными складками. Эти цепи изогнуты и сложены на две обратные параллельные ламельные конструкции лицом к лицу, образуя длинный и узкий каталитический канав для связывания длинноцепных субстратов. Трехмерная структура GH16 family β 1,3-glucanase в целом представляет собой структуру бутерброда, также известную как сэндвич-структура (рисунок 3). Fibriansa В то же время- эл. - привет.[26] сообщили в 2007 году о структуре эндодействующего GH16 family β 1,3-glucanase (BglF), полученной из Nocardiopsis sp. Семейная модель GH16 β 1,3- глюканазы следуют типичному замкнутому механизму гидролиза, при этом во время реакции образуются неустойчивые ферментно-субстратные промежуточные вещества [27].

Субстратная специфика семейства GH16 β-1,3-glucan непосредственно связана с каталитической структурой канава, и они имеют различные гидролитические способности для различных субстратов. Например, грау -1,3- глюканаза зглама из морской бактерии Zobellia galactanβ ans имеет почти в 22 раза более высокую каталитическую эффективность для кельпического полисахаридного субструата (ламинарин), чем для смешанного глюкана (мл г) (грау -1,3- 1,4- глюкан) почти в 22 раза. Это объясняется тем, что каталитический центр згламы имеет конформацию вогнутого отверстия, которая способствует связыванию спирали β 1,3-glucan, а не линейной β 1,3-1,4-glucan (рис. 3B).

3.1.2 GH17 семейная эндотип β 1,3-glucan

Семейство GH17 β 1,3-glucan включает как эндотип, так и экзотип, и большинство из них эндотип, в основном из растений. В настоящее время семейная г17 - грау -1,3- глюканаза с решенной структурой полностью эндотипа. Семейная белка GH17 имеет типичную (β/α) 8 Тим (триоз-фосфатный изомер) структуру ствола (рис. 4), состоящую из 8 α-helices и 8 β-folds, которые образуют длинный и узкий каталитический паз на поверхности всего фермента, который может разместить длинноцепные субстраты и пройти через. Ступенчатые цепи в основном регионе бочковой структуры сильно сохранены, и основные различия происходят в циклических структурах и спиральных структурах на периферии белка. Семейная эндо GH17 -β-1,3- глюканазы, как и семейка GH16, следуют типичному механизму реакций гидролиза, и в процессе реакции образуется нестабильное фермент-гликозидное промежуточное вещество.

Войтковиак и др. [35] получили кристаллическую структуру со-кристалла картофельного эндо -β-1,3-glucan (GLUB20-2) мутанта E259A и fucoidan (рис. 4B), которая является первой сложной кристаллической структурой семейства GH17 гликозидазе и молекулы олигосакчарида, полученной исследователями. Несмотря на то, что активный участок был мутирован, глюб20-2e259a все еще имел остаточную активность. Масс-спектрометрический анализ показал, что мутант разрезал гексозу фукоидан двумя способами, создав две фокусные молекулы трисаксарида или одну фокусную молекулу тетрасаксарида и одну фокусную дисаксаридикулу. Каталитический канав глюб20 -2 образует похожею на каньон геометрию с открытыми концами и изогнутой серединой, которая исключает возможность линейных субstrates, таких как β-1,4-glucan привязки к связующему участку. Это указывает на то, что геометрия активного расщепления участка определяет субstrate специфичность фермента.

3.1.3 GH64 family endo-β-1,3- глюкан

В настоящее время все семейные белки GH64, о которых сообщается, эндотип β-1,3- глюканазы, в основном получены из бактерий. GH64 семейная эндотип -1,3- глюканазы также известны как фукопентаоз-тип -1,3- глюканазы. Они характеризуются катализатором гидролиза грау -1,3- глюкан для производства главным образом фукопентаозы в качестве гидролиза. Семейством GH64 endo-β 1,3-glucanases используется типичный инвертазный каталитический механизм, при котором остатки аспартической кислоты вблизи каталитического центра выступают в качестве широкой основы, а остатки глютамической кислоты-в качестве кислот широкой основы для участия в реакции гидролиза. У и др. [39] получили семейство GH64 β 1,3-glucanase (LPHase) от Streptomyces matensis. LPHase состоит из двух доменов: C-terminal-это домен α/β structure, состоящий из α-helix и β-fold, а N-terminal-это домен, состоящий из двух наборов параллельных дуговых складков. Эти две области образуют u-образный каталитический канав (рис. 5).

QВ случае необходимостиZhen В то же времяal. [40] сообщили о режиме связывания семейства GH64 β 1,3-glucanase (PbBgl64A) от Paenibacillus barengoltzii с комбу гептаузи, в котором две цепи oligosaccharide образуют спираль и связывают с каталитическим канавом PbBgl64A одновременно (рис. 5- B,C). Конформация этих двух цепей почти идентична конформации тройной спирали в тройной спирали β 1,3-glucan. Это говорит о Том, что β 1,3-glucan может быть непосредственно связан в виде тройной спирали в каталитической канаве GH64 семейства endo-β 1,3-glucanase. Режим привязки GH64 family β 1,3- глюканазы к тройной спирали β 1,3- глюканского субстрата связан с процессом заболевания растений. Схож режим связывания антигрибкового сладкого белка с цепью β-1,3- глюканского спирального сахара, что указывает на новый режим связывания гликозидных гидролаз, непосредственно связывающих субстрат четырехсторонней полисахаридной структуры [41-42].

3.1.4 GH81 family endo-β-1,3- глюкан

Семейная белка GH81 широко распространена в бактериях, грибах, растениях и архаях, и все они эндо -1,3- глюкан. До сих пор кристаллические конструкции трех GH81 семейства β 1,3-glucan были решены: BhGH81 из Bacillus halodurans, CtLam81A из Clostridium thermocellum [43] и RmL am81A[44]. Энд-тип GH81 β-1,3- глюканаза состоит из трех структурных областей. Домен N-terminal имеет слогослойную структуру сэндвичей и содержит два комплекта антипараллельных слогослойных листов. Домен C-terminal имеет типичную (α/α) 6- баррельную структуру. Небольшой структурный домен между n-терминалом и c-терминалом состоит из двух противоположных друг другу слоёв и двух слоёв. Все три структурные области образуют длинный, узкий вертикальный каталитический канав (рис. 6).

Ma Junwen В то же времяal. [45] сообщили о семействе GH81 β 1,3-glucan (RmLam81A) из Rhizomucor miehei и показали его субструйный механизм распознавания и каталитический механизм. Исследования показали, что RmLam81A может связывать тройную спираль грава -1,3- глюкана и следовать типичному ретроградальному гидролизу, который обычно достигается в Один этап. Сохраняемый асpartic кислотный остаток каталитического центра действует в качестве общей кислоты для протонирования атома кислорода на гликосидической связи, в то время как глютамическая кислотная кислота действует в качестве общей основы для ее депротонирования, нарушая тем самым гликосидическую связь и завершив процесс гидролиза. Плувинаж и др. [46] сообщили о наличии семейства GH81 β 1,3-glucanase (BhGH81), полученного из галоболератной бактерии Bacillus halodurans. Мутация Glu542 в Gln или Asp466 в Asn полностью нейтрализует BhGH8, что указывает на то, что Glu542 и Asp466 являются его основными каталитическими остатками. Кроме того, сложная структура фермента с полисахаридной цепью указывает на то, что он может связывать по крайней мере две отдельные цепи β 1,3-glucan (рис. 6B), что означает, что фермент может быть в состоянии непосредственно связать к тройной спирали β 1,3-glucan (рис. 6C).

3.2 Exo- 1,3- глюкан

Exo-β-1,3-glucanase гидролиз β-1,3-glucan путем клея β-1,3-glycosidic облигации в конце цепей, последовательно, чтобы производить глюкозу или однократные олигосахариды. Установлено, что exo-тип β 1,3- глюканазы подразделяются на шесть семей гх: г3, г5, г17, г55, г128 и г132, большинство из которых принадлежат к семьям г55 и г5. Кристаллические конструкции экзо-действующих грау -1,3- глюканазов из семей GH5, GH55 и GH128 были решены, в то время как конструкции из семей GH3, GH17 и GH132 были решены редко.

Семейство GH55 β 1,3- глюканазы в основном получают из бактерий и грибов, и большинство из них экзо-действия. Семейные белки GH55 имеют две параллельные правые области между ног и спирали, которые образуют структуру, аналогичную ребрам грудной клетки. Концы N-terminal и C-terminal имеют по 7 и 10 катушек, состоящих из правых поперечных спиральных областей, связанных, соответственно, сегментом аминокислотных остатков. Остаточный элемент состоит из двух параллельных ступеней, а каталитический элемент находится между этими двумя областями (рис. 7а). Бианчетти и др. [47] пришли к выводу, что структура субстратного комплекса exo-type β 1,3- глюканазы (sacteLam55A), полученные из Streptomyces (Setreptomyces sp.), показывает, что GH55 семейства exo-type β 1,3- глюканазы имеют карманный каталитический канав с шестью гликозидными связующими узлами, который может последовательно отрезать моносакшариды глюкозы от неснижающегося конца сахарной цепи (рис. 7 B). Компания general acid сначала передает протон субстратегу#39; гетероатом углерода, в то время как общая база удаляет протон из молекулы воды, повышая его нуклеофиличность и способствуя его атаке на центр гетероатома, тем самым нарушая гликосидическую связь и производя гидролитический продукт. Papageorgiou В то же времяal. [48] обнаружили грау -1,3- глюканазу (CtLam55), полученную из термофила гетомия, и установили, что глю654 является одним из ключевых каталитических остатков благодаря структурному сопоставлению и мутагенезу, направляемому на место.

3.3 GH128 family β 1,3-glucan

В последние годы были обнаружены некоторые новые β 1,3- глюканазы, которые в базе данных CAZy классифицированы как GH128 семейства. GH128 family β 1,3-glucanases относятся к суперсемейству gha и имеют углеродно-связывающую область и (α/β) 8- ствольную структуру [49]. Структура ствола самая короткая среди всех известных семейств GH128, в среднем всего 240 аминокислотных остатков [50]. Это семейство включает в себя как эндо-и экзо-действия β-1,3- глюканазы.

Сантос и др. [50] использовали группирование последовательностей сети сходства для разделения семейства GH128 на семь подгрупп и анализировали режим привязки субстратов каждой подгруппы. Они обнаружили, что режим связывания субструтов семейства GH128 β 1,3- глюканазы тесно связан с гидрофобными взаимодействиями и что между семью подгруппами сахарные цепи связывают фермент двумя различными способами: "изогнутыми" и "плоскими" [50]. Кроме того, семейство GH128 β 1,3-glucanase в третьем подсемействе также может быть непосредственно связано с тройной спиралью β 1,3-glucan chain.

3.4 другое семейство: 1,3- глюкан

В дополнение к типичным опор -1,3- глюканазы вышеупомянутых семей, небольшое число экзодействующих опор -1,3- глюканазы с типичной (опор -1) структурой бочек тима 8 было также обнаружено в семьях оп - 3 и оп - 5, и все они следуют сохраняемому каталитическому механизму. Семейство GH132 β 1,3-glucanase известно как солнечный белок и было обнаружено в филятивных грибах и дрожжах [51]. Было получено мало сообщений о семейных белках GH132, и их структуры белков и каталитические механизмы пока не ясны. GH158 family β 1,3-glucanase принадлежит к g-a superfamily. До настоящего времени сообщалось лишь об одном структурном анализе GH158 family β 1,3-glucanase. Dejean И др.[52] получили GH158 family β 1,3- глюканазу (BuGH158) от Bacteroides единообразно, которая состоит из N-terminal (β/α) 8 TIС. О.barrel domain и C-terminal иммунный глобулин (Ig)-like domain. Кроме того, фермент обладает высокой гидролитической активностью по отношению к имеющимся полисахаридам и полисахаридам кельпа.

4 применения 1,3- глюкан

4.1.1. 3- глюкан в противогрибковых приложениях

Гниль и ухудшение качества фруктов и овощей при их транспортировке, хранении и сбыте являются важным фактором, влияющим на качество, срок годности и безопасность потребления человеком. Гниль, вызванный растительными патогенными грибами, является основной причиной посмертных потерь фруктов и овощей. Грибы являются эукариотическими организмами, и клеточная стенка необходима для выживания грибковых клеток. Деградация клеточной стенки может привести к потере грибковых клеток осмотического баланса давления, поэтому разрушение целостности клеточной стенки стало потенциальной противогрибковой мерой. β-1,3- глюкан является важным антибактериальным белком, выделяемым микроорганизмами биоконтроля, и сами растения также стимулируют производство β-1,3- глюканазы в процессе сопротивляющейся грибковой инфекции [53].

β-1,3- глюканаза может разлагать β-1,3- глюкановые сахарные цепи в клеточной стенке, что приводит к разрыву или деформации мицелии патогенных грибов, что приводит к утечке протоплазмы патогенных грибов и препятствует споровому прорастанию. Кроме того, этот процесс может также приводить к высвобождению возбудителей осколков стенки грибковых клеток, вызывать иммунную индукцию растений и косвенно способствовать накоплению фитоалексинов в принимающем растении, повышая его устойчивость к болезням [54]. Биологический метод контроля, основанный на 1,3- глюканазе, может эффективно предотвращать и контролировать грибковые заболевания растений. Она обладает такими преимуществами, как отсутствие лекарственной устойчивости, ориентирование только на целевые патогены без нанесения ущерба другим полезным организмам, отсутствие остатков пестицидов и отсутствие токсичности или загрязнения. Поэтому изучение роли β 1,3- глюканазы в послеспективном сохранении фруктов и овощей и разработка новых зеленых биологических консервантов на основе β 1,3- глюканазы является одной из потенциальных тенденций развития технологий зеленой консервации фруктов и овощей.

Лу шубао и др. [55] определили активность β 1,3- глюканазы в листьях сои и ее антибактериальное воздействие на грибы. Результаты показали, что активность грава -1,3 глюканазы на заводе достигла пика через 48 часов после прививки фитофорой содже. Антибактериальный эксперимент был проведен с использованием сырого экстракта фермента β 1,3-glucanase, извлеченного через 48 часов после прививки. Было установлено, что β 1,3 - глюканаз сырого фермента раствор оказывает значительное ингибиторное воздействие на рост мицелии и споровое прорастание фитофтора соджае. Чэнь сяоюн и др. [56] показали, что β 1,3- глюканаза оказывает значительное влияние на сдерживание роста бактерий и заболеваний в фруктах, таких как яблоки, груши и бананы после сбора урожая, и может эффективно предотвращать послеуборочную гниль, вызванное грибами. Эта характеристика может использоваться для хранения и сохранения тропических фруктов. Rajninec et al. [57] обнаружили, что сырой белок β 1,3- глюканазы из дросера бината оказывает ингибиторное воздействие на рост ризоктонии солани, альтернарии солани и фузариум поае.

4.2. 1. 3- глюканный препарат функциональный олигосахариды

β-1,3-glucan, также известный как fucoidan oligosaccharides, является пищевым функциональным фактором с хорошей биологической активностью, и имеет деятельность регулирования тела и#39;s иммунитет, сопротивление инфекции, и регулирование баланса кишечной флоры. Бета -1,3- глюканские олигосахариды, подготовленные гидролизирующими имеющимися полисахаридами или полисахаридами келпа, могут быть использованы в качестве нового типа пребиотических при функциональном развитии пищевых продуктов. Кроме того, некоторые растворимые в малых молекулах бета -1,3- олигосахариды могут использоваться в качестве иммунных активаторов для стимулирования иммунной реакции растений и, таким образом, повышения устойчивости растений к болезням. Кроме того, некоторые маломолекулярные растворимые грава -1,3- олигосахариды могут использоваться в качестве иммунных активаторов для стимулирования иммунной реакции растений, тем самым повышая устойчивость растений к болезням. β-1,3-glucanase гидролиз β-1,3-glucan для подготовки β-1,3-oligosaccharides, который имеет преимущества высокой специфичности и мало побочных продуктов. Считается перспективным методом производства олигосахаридов. Ван яньсин и др. [22] обнаружили, что семейство GH55 β 1,3- глюканаза (AcGluA) может гидролизировать полисахариды келпа в серию олигосахаридов олигосахаридов, и высокие дозы олигосахаридов могут вызывать иммунную реакцию у саженцев риса, тем самым обеспечивая устойчивость к взрыву риса. Это свидетельствует о Том, что гидролитические продукты β 1,3- глюканазы оказывают значительное биорегулирующее воздействие и служат определенным ориентиром для применения β 1,3-oligosaccharides.

Ли куйкуи и др. [58] клонировали и очистили новую граву -1,3- глюканазу (гклей) из целлюлозимикробного целлюлана. Анализ субстратной специфичности и гидролитических продуктов показал, что ферменты демонстрируют самую высокую гидролитическую активность на возобновляемых полисахаридах, а основными гидролитическими продуктами являются дизакхариды и трисакхариды. Кроме того, после предварительной обработки гомогенизации эффективность разложения гклей на ксилане увеличится в 7,1 раза, что имеет определенный потенциал применения. Гао минджи и др. [18] получили от триходермы харзианума грау -1,3- глюканазу, а ферментная активность может достигать 198,57 U/ мл после 118 ч ферментации. На основе характеристик данного фермента был разработан метод подготовки многофункциональных олигосахаридов путем ферментного гидролиза тз -1,3- глюкан, что дает тз -1,3- глюканский фермента определенные перспективы применения в промышленном производстве олигосахаридов.

4.3 применение станка -1,3- глюкан в пивоваренной промышленности

Помимо своей важной роли в производстве противогрибковых и олигосахаридов, β-1,3- глюканаза может также использоваться в пивоваренной промышленности. В пивоваренной промышленности ячмень является основным сырьем для производства пива. В процессе производства некоторые микроорганизмы выделяют высокомолекулярно-весовую грау -1,3- глюкан во внеклеточное пространство, что повышает вязкость ферментационной жидкости, вызывая трудности фильтрации. В конечном итоге в пиве могут образовываться флокулентные гели, что приводит к сокращению производства пива и увеличению расходов на пивоварение. Lu Lili et al. [59] пришли к выводу, что если в процессе ферментации добавляется грау -1,3- глюканаза, то содержание глюкана с высоким молекулярным весом может быть значительно уменьшено, тем самым снижая вязкость брота ферментации, достигая цели сливного пива и улучшая процесс фильтрации.

4.4 подготовка протопластов дрожжевых составов: 1,3- глюкан

Основным химическим компонентом стенки дрожжевых элементов является β-glucan. Одним из типов является относительно обильный β-1,3-glucan, который формирует скелет дрожжевой клеточной стенки. Другой тип-это менее обильный угол -1,6- глюкан, который заполняет пространство. Ключ к подготовке протопластов дрожжей заключается в Том, чтобы сломанный нерастворимый β 1,3- глюкан в клеточной стенке, так β 1,3- глюканаза является важной подготовкой к протопластам [60]. Duan Huike et al. [61] использовали β 1,3- глюканазу, получаемую штаммом триходерма LE02, для ферзимолиза и растворимости пивных дрожжевых смесей glucan. Макро-молекулярные водорастворимые дрожжи глюкан также может быть получен с помощью технологии фермента β-1,3- глюканазы и технологии разделения ультра-фильтрации.

4.5 грау -1,3- глюкан удаляет биологические пленки

Биопленки представляют собой сложные структуры, состоящие из микроорганизмов и их внеклеточных выделений. Основные вредные бактерии в продуктах питания, такие как сальмонелла и псевдодомы aeruginosa производят биопленки, которые могут уменьшить бактериальный эффект широко используемых дезинфицирующих средств и антибиотиков, создавая риск безопасности пищевых продуктов. β-1,3-glucan является важным компонентом биофильма Candida albicans и играет важную роль во внеклеточной матрице биофильма. В отличие от этого, β-1,3- глюканаза оказывает определенное влияние на удаление биофильма и может контролировать порчи бактерий в пищевой промышленности. Нетт и др. [62] пришли к выводу, что лечение кандиды при низких концентрациях грау -1,3- глюканазы значительно усилило воздействие противогрибковых препаратов флюконазол и амфотерицин в на гриб. Митчелл и др. [63] также экспериментально продемонстрировали, что чувствительность противогрибковых препаратов постепенно повышается с гидролизом глюкана -1,3 во внеклеточной матрице, что указывает на то, что грау -1,3 глюканаза оказывает определенное влияние на удаление биологических пленки.

4.6 синергический эффект от 1,3- глюкана и читиназы

Как β-1,3- глюканаза, так и chitinase имеют эффект разложения β-1,3- глюкан и читин, а также пептидогликан в стенке грибковых клеток. Оба фермента обладают широким спектром сопротивления в защите от вредителей и болезней растений, что может сократить использование химических пестицидов и снизить загрязнение окружающей среды. Mauch et al. [64] пришли к выводу, что комбинированное действие читиназы и β 1,3- глюканазы имеет лучший антибактериальный эффект, чем отдельные ферменты, что указывает на то, что оба фермента имеют синергетический эффект, препятствуя росту патогенных бактерий. В работе Cota et al. [65] сделан вывод о Том, что синергический эффект β-1,3- глюканазы и читиназы может существенно противостоять воздействию Alternaria alternata на хранящиеся помидоры. Это показывает, что β-1,3- глюканаза и читиназа оказывают синергическое воздействие на послеуборочную антибактериальную консервацию фруктов и овощей и обладают большей антибактериальной способностью, чем Один штамм, поэтому имеют хорошие перспективы применения.

5. Выводы

Поскольку β-1,3-glucan может конкретно гидролизировать β-1,3-glucan, он имеет важные перспективы применения в области функциональной подготовки олигосахаридов, сохранения фруктов и овощей, биомедицины, и устойчивости растений к болезням. Исследователи уже изучили структуру, функции и применение ряда различных семейно-гравюрных -1,3- глюканазов. В этом контексте основное внимание в последующих исследованиях по 1,3- глюканазам будет уделено способам получения новых 1,3- глюканазам с хорошими свойствами применения и достижения их эффективной подготовки к ферментации.

Однако из-за сложности природных градиентов 1,3- глюканских субстратов каталитическая эффективность существующих градиентов 1,3- глюканских субстратов по-прежнему нуждается в дальнейшем повышении, а ферментативный гидролиз некоторых нерастворимых градиентов 1,3- глюканских субстратов по-прежнему затруднен. Кроме того, исследования по структуре и функциям ферментов являются важной основой для изучения каталитического механизма ферментов, разработки каталитических свойств ферментов и проведения исследований по молекулярной модификации ферментов. С учетом сложности природных грац -1,3- глюкановых субстратов и разнообразия грац -1,3- глюканаз семейств наблюдается тенденция к изучению различий в связующих и каталитических механизмах различных грац -1,3- глюканаз семейств, прояснение механизма признания грац -1,3- глюканазы для сложных молекул глюкана и изучение комбинированной каталитической системы, основанной на грац -1,3- глюканазе, в целях обеспечения эффективного применения грац -1,3- глюканазы. 1,3- глюканаза является тенденцией развития для его эффективного применения.

Ссылка:

[1] кадам с у, тивари б к, о 'доннелл с п. извлечение, структура и биофункциональная деятельность ламинарина из коричневых водорослей [J]. International Journal of - продукты питанияScience and Technology, 2015, 50(1): 24-31. DOI:10.1111/ijfs.12692.

[2] миёши - к, уезу - к, Сакурай к и др. Предложение о новой форме гидрогенного соединения для поддержания тройной спирали кёрдлана [J]. Химия и фармацевтика Биоразнообразие, 2004, 1(6): 916-924. DOI:10.1002/cbdv.200490073.

[3] фу юньбинь, чжао сяомин, ду югуан. Прогресс в исследованиях биологической активности и применения полисахарида кидрамона и его производных [J]. Наука о еде, 2012, 33(7): 315 — 319.

[4] шимидзу дж., цучихаши н., кудо к., и др. Диетическое курдлан увеличивает распространение бифидобактерий в цеке крыс [J]. Биотехнология и биохимия, 2001, 65(2): 466 — 469. DOI:10.1271/bbb.65.466.

[5] ю ё нхуа, сюй фейфей, лин лин и др. Прогресс в исследовании гиполипиэпидемического эффекта оат-ду-глюкан [J]. Журнал клинических и патологических наук, 2022, 42(2): 486-491. DOI:10.3978 / j.issn.2095-6959.2022.02.034.

[6] дэвис г, генриссат б. структуры и механизмы гликозильных гидролазов [дж]. Структура, 1995, 3(9): 853-859. DOI:10.1016/S0969- 2126(01)00220-9.

[7] ILARI. ЯA, FIORILLO A, ANGELACCIO S и др. Кристаллическая структура эндоглюканазы Famil16 из гипертермофильной основы субстрата Признание [J]. Февраль Journal, 2009, 276(4): 1048-1058. DOI:10.1111/ j.1742-4658.2008.06848.x.

[8] юань, чжан х, чжан х и др. Разлагающий GH5 β-1,3- 1,4- глюканаза PpBglu5A для глюкана в Paenibacillus polymyxa KF-1[J]. Биохимия процессов, 2020, 98: 183-192. Дата :10.1016/ j.procbio.2020.08.008.

[9] джаафар н - р, Хоири н. М, исмаил N F и др. Функциональные возможности системы Характеристика и товарная специфика эндо -1,3- глюканазы Из щелокофильной бактерии Bacillus lehensis G1[J]. 1. Фермент И микробных технологий, 2020, 140. : 109625.

[10] ши п, яо г, ян п и др. Клонирование, определение характеристик и противогрибковая активность эндо1,3- грац-д-глюканазы из Streptomyces sp. S27[J]. Прикладная микробиология и биотехнология, 2009, 85(5): 1483 — 1490. DOI:10.1007/s00253-009-2187-1.

[11]HARTL L, GASTEBOIS A,AIMANIANDAV и др. Характеристика закрепленного на гпи эндо β 1,3-glucanase Eng2 Aspergillus fumigatus[J]. Грибковая генетика и биология, 2011, 48(2): 185 — 191. DOI:10.1016/j.fgb.2010.06.011.

[12]DA SILVA AIRES - р,STEINDORFF A - с,RAMADA M H S и др. Биохимическая характеристика 27 кда 1,3- граво-д-глюканаза из триходермаасперелла, вызванная клеточной стенкой ризоктонии солани [J]. Углеводы полимеры, 2012, 87(2): 1219-1223. DOI:10.1016/ j.carbpol.2011.09.001.

[13] ишида т, фушинобу с, каваи р и др. Кристаллическая структура гликозидных гидролаз семейства 55 грау -1,3- глюканазы из басидиомицета Phanerochaetechrysosporium[J]. Журнал биологической химии, 2009, 284(15): 10100-10109.

[14] VARGHESE J N, GARRETT T P, COLMAN P M, et al. Три - - Размерные структуры двух растений: грац-глюканские эндогидролазы с отчетливой субстратной спецификой [J]. Труды национальной академии Науки соединенных штатов америки, 1994, 91(7): 2785-2789. 

[15] ромеро - я, Фернандес-кабальеро C, C,C, Гони о, и др. Функциональность класса I β-1,3- глюканаза из кожи столового винограда Ягоды [J]. Наука о растениях, 2008 174(6): 641-648. Дата :10.1016 / j.plantsci.2008.03.019.

[16] YU W Q, ZHENG G P, QIU D. Д.W, et al. Paenibacillus terrae NK3-4: потенциальный агент биоконтроля, который производит β-1,3- глюканазу [J]. Биологический контроль, 2019, 129: 92 — 101. DOI:10.1016/j.biocontrol.2018.09.019.

[17]1. ЛиC, WEN Y, Он и есть... И др. Очистка от загрязнения И определение характеристик Из нового грава -1,3- глюканазы из арка-надута и его иммунитет - Усиление воздействия [J]. Пищевая химия, 2019, 290: 1-9. DOI:10.1016/ j.foodchem.2019.03.131.

[18] гао минджи, ян цзяцзюнь, чжао юэ и др. Выражение своего мнения Термостабильный грау -1,3- глюканазес триходерма харзианум в пичиа пасторис и использование при гидролизе олигоглукозидов [J]. В рамках процесса Биохимия, 2021, 107: 74 — 82.

[19] чжан - д, - привет. - привет. - д, В чем дело? S,  et  al.  Клонирование, характеристика и выражение гена exo-1,3-β-glucanase из антагонистических дрожжей, штамм M8 Pichia guilliermondii штамм против серой плесени на яблоках [J]. Биологический контроль, 2011, 59(2): 284 — 293. Дата :10.1016/j.biocontrol.2011.06.018.

[20] кальяни D  C,  - райхенбах. Ти, аспеборг H,  et  Al. Гомодимерная бактериальная exo-β,3- глюканаза, полученная из микробиома мус-rumen, имеет структурную структуру, аналогичную дрожжевой exo-β,3- Глюканазы [J]. Фермент и микробные технологии, 2021, 143: 109723. DOI:10.1016/j.enzmictec.2020.109723.

[21]YI P, YAN Q, JIANG Z, et al. Первая гликозидовая гидролаза семейства 50 endo-β- 1,3d -glucanase из псевдодомы aeruginosa[J]. Фермент и микробные технологии, 2018, 108: 34 — 41. DOI:10.1016/ j.enzmictec.2017.09.002.

[22] ван яньсин, чжао юцян, ван сяоуэн и др. Функциональная характеристика романа ламинарипентаоз-производящий грау -1,3- глюканаз моглуб и его биоконтроль над магнапорте оризае [J]. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии, 2021, 69(33): 9571-9584.

[23] чэн чженсян. Выражение β-1,3- глюканазы в Pichia is [D]. Харбин: харбинский технологический институт, 2013: 5-10.

[24] фэн цзяньвэй, сюй шенюань, фэн руйруи и др. Идентификации и идентификации Структурный анализ термофильной графы -1,3- глюканазы компоста [J]. Биоресурсы и биопереработка, 2021, 8(1): 102 — 112. DOI:10.1186/ s40643- 21-00449-4.

[25] Мухаммед м. т., сын с. д., İ ZGU F. трехмерная структура Предсказание паномикоцина, романа exo-β-1,3- глюканазы, изолированные от аномалий викерхамомициса NCYC 434 и вычислений Исследования мутагенеза под руководством сайта с целью повышения его термоустойчивости для терапевтического применения [J]. Вычислительная биология и химия, 2019, 80: 270 — 2777. Дата :10.1016/j.compbiolchem.2019.04.006.

[26]FIBRIANSAH G, MASUDA S, KOIZUMI N, et al. Кристаллическая структура 1,3 ангстрома романа endo-β-1,3- глюканаза семейства гликозидных гидролаз 16 из alkaliphilic Nocardiopsis sp. деформация F96[J]. Белки, 2007 год,69(3): 683-690.

[27] вуонг Т V, Вильсон д. б. гликозидные гидролазы: каталитическая база/нуклеофильное разнообразие [J]. Биотехнология и биоинженерия, 2010, 107(2): 195 — 205. DOI:10.1002/bit.22838.

[28]ILARI A, FIORILLO A, ANGELACCIO S и др. Кристальная структура семейства 16 эндоглюканазы из гипертермофильной пирококковой фурии-структурной основы распознавания субструатов [J]. The FEBS Journal, 2009, 276(4): 1048-1058. DOI:10.1111/j.1742-4658.2008.06848.x.

[29] ода м, инаба с, камиян и др. Структурная и термодинамическая характеристика эндо1,3- гравитационная глюканаза: анализ механизма распознавания субстратов [J]. Протеомика бба-белки, 2018, 1866(3): 415 — 425.

[30]JENG W Y, WANG N C, LIN C T и др. Кристаллические конструкции здания Laminarinase каталитический домен от Thermotoga maritima MSB8 в комплексе с ингибиторами основных остатков для выбора 1,3 и 1,4 глюканов [J]. Журнал биологической химии, 2011, 286(52): 45030-45040.

[31]HONG T Y, HSIAO YY, MENG M, et al. В настоящее время 1.5 ангстромовая структура эндо1,3- грац-глюканазы от стрептомициес сиояенсис: эволюция активной структуры участка 1,3- грац-глюкано-связывающая специфика и гидролиз [J]. Acta Crystallographica Section D: структурная биология, 2008, 64: 964-970. DOI:10.1107/s0907444908021550.

[32] блихер л, пратс е т, гомиш т с ф и др. Молекулярная основа термостабильности и термофилиальности ламинариназов: рентгеновская структура гипертермостабильной ламинариназы из родотермуса марина и моделирование молекулярной динамики [J]. Журнал физической химии B, 2011, 115(24): 7940-7949. DOI:10.1021/jp200330z.

[33] лабурел а, джем м, Джуди а и др. В результате взрыва в грау-глюканасезгламе из зобелии галактаниарцы сформировался изогнанный активный участок, приспособленный для эффективной деградации ламинаринов водорослей [J]. Журнал биологических исследований Химия, 2014, 289(4): 2027 — 2042.

[34]YANG - джей,XU Y Q, MIYAKAWA T и др. Молекулярная основа для распознавания субстратов и катализа морской бактериальной ламинариназы [J]. Прикладная и экологическая микробиология, 2020, 86(23): 15. DOI:10.1128/aem.01796-20.

[35] войтковик а, витек к, хенниг дж и др. Структуры действующего мутанта завода 1,3- грава-глюканаза в комплексе с олигосахаридами продуктов гидролиза [J]. Acta Crystallographica Section D: биологическая кристаллография, 2013, 69: 52 — 62. DOI:10.1107/s0907444912042175.

[36] реджевер-бречо т - V, Чеж зек (Чешская республика) - м, - барре. A., et  Al. Кристаллическая структура с разрешением 1.45 — a основной эндо аллергена — β-1,3- глюканазы банана как молекулярной основы латексового фруктового синдрома [J]. Белки, 2006, 63(1): 235 — 242.

[37] жареные F, BECKER S, ROBB C S и др. Адаптивные механизмы, обеспечивающие конкурентные преимущества морским бактериям во время микроцветения водорослей [J]. ISME Journal, 2018, 12(12): 2894-2906. DOI:10.1038/s41396-018-0243-5.

[38] такасима т, таку т, яманака т и др. Кристаллическая структура и биохимические характеристики CJP38, a β-1,3- глюканазы и аллергена криптомерии японики пыльцы [J]. Молекулярная иммунология, 2019, 116: 199 — 207.

[39]WU H M, LIU S W, HSU M T и др. Структура, механическое действие и основные остатки фермента gh64, производящего ламинарипентаоз: 1,3- глюканаза [J]. Журнал биологической химии, 2009, 284(39): 26708-26715.

[40] цинь чжен, ян Дон, ты син и др. Механизм распознавания тройной спиральной гравюры -1,3- глюкан на гравюру -1,3- глюканазу [J]. Химическая связь, 2017, 53(67): 9368 — 9371. DOI:10.1039/c7cc03330c.

[41] гош - р, 13. Чакрабарти В. : с. - кристалл Структурный анализ NP24-I: тауматинный белок [J]. Планы, 2008, 228(5): 883-890. DOI:10.1007/s00425-008-0790-5.

[42] хенриссат B,  - гаррон. M  - я. Как это сделать? a  Гликозидная гидролаза распознает спиральный полиглюкан [J]. Структура, 2017, 25(9): 1319-1321. Дата :10.1016/j.str.2017.08.004.

[43] кумар к, Коррейя м а с, Пиреш в м - р, et  Эл. Роман Анализ разложения 1,3- глюкансби целлюлозы Термоцеллюм клостридия, выявленный в ходе исследований структуры и функций семейства гликозидных гидролаз 81 [J]. < < международный журнал > > Биологических макромолекул, 2018, 117: 890 — 901. DOI:10.1016/ j.ijbiomac.2018.06.003.

[44] чжоу пэн, чэнь чжунчжоу, ян цяохуан и др. Структура гликозидного гидролаза семейства 81 endo-β 1,3-glucanase[J]. Секция D Acta Crystallographica: структурная биология, 2013, 69: 2027-2038. DOI:10.1107/s090744491301799x.

[45] ма юнвен, Цинь чжен, чжоу - пэн, И др. Структурные исследования в области распознавания субстратов и каталитического механизма гидролазы грибкового гликозида семейства 81:1,3- глюканаза [J]. Фермент и микробные технологии, 2022, 153: 109948. [46]    Плувинаж б, филло а, массель п, и др. Структурный анализ семейства гликозидных гидролаз 81 предполагает признание им грава -1,3- глюканской четвертичной структуры [J]. Структура, 2017, 25(9): 1348-1359. DOI:10.1016/j.str.2017.06.019.

[47] BIANCHETTI C M, TAKASUKAT - э,DEUTSCH S, et al. Активный участок и ламинарин связывания в гликосайд гидролазе семейства 55[J]. Журнал биологической химии, 2015, 290(19): 11819 — 11832. DOI:10.1074/ JBC. М114.623579.

[48] PAPAGEORGIOU A C, Чэнь (Китай) J,  LI  D. < < кристалл > > Структура и биологические последствия семейства гликозидных гидролаз 55 грау -1,3- глюканаза из термофила гетомия [J]. Biochimica et biohysica acta-белки и протеомика, 2017, 1865(8): 1030-1038. DOI:10.1016/j.bbapap.2017.05.002.

[49] цзя X, ван C, ду X и др. Специфический гидролиз курдлана с новым гликозидным гидролазом семейства 128 грау -1,3- эндоглюканаза, содержащая углеводно-связывающий модуль [J]. Углеводы полимеры, 2021, 253: 117276-117286.

[50] сантуш к р, коста п, виейра п с и др. Структурные наблюдения за расщеплением β-1,3-glucan со стороны семейства гликозидных гидролаз [J]. Химическая биология природы, 2020, 16(8): 920 — 929. DOI:10.1038/s41589-020- 0554-5.

[51] GASTEBOIS A, AIMANIANDA V, Бачелье-басси С, и др. Солнечные белки принадлежат к новой семье грава -(1,3)- глюкано-модифицирующих ферментов, участвующих в грибковый морфогенез [J]. Журнал биологической химии, 2013, 288(19): 13387-13396.

[52] дижан г, тамура к, кабрера и др. Синергизм между клеточными гликозидазами поверхности и гликанно-связывающими белками диктует необходимость использования конкретных β(1,3)- глюканов бактериальными бактериями кишечника человека [J]. Мбио, 2020, 11(2): 1-21.

[53] янь ф, е х л, ли ч и др. Изоляция, очищение, клонирование генов И выражение антигрибкового белка из бациллуса амилоликефасиенса Мг - 3 [дж]. Food  - химия, 2 0 2 1, 3 4 9: 7. Работа. DOI: 10. 1 0 1 6 / j.foodchem.2021.129130.

[54]    FESEL P H, ZUCCARO A.β-Glucan: ключевой компонент стенки грибковых клеток и неуловимые растения мампин [J]. Грибковая генетика и биология, 2016, 90: 53 — 60. DOI:10.1016/j.fgb.2015.12.004.

[55] Лу шубао, пэн дунцзюнь, ван хуэй. Бактериальная активность сои β,3- глюканазы [J]. Журнал хайлунцзян байи сельскохозяйственный университет, 2008 (3): 27-29.

[56] чэнь сяоюнь, ли цзяньбинь, лин ин и др. Применение грава -1,3- глюканазы и читиназы в сохранении тропических фруктов [J]. Наука и технологии пищевой промышленности, 2008(5): 294-296.

[57] раджнинец м, фратрикова м, бозорадова е и др. Базовая грау -1,3- глюканаза дросера бината обладает антигрибным потенциалом у трансгенных табачных растений [J]. Заводы, 2021, 10(8): 1747-1762. Дата :10.3390/plants10081747.

[58] ли куйкуй, чэнь вэй, ван вэнься и др. Эффективная деградация порошка курдлана новым эндо -1,3- глюканаза [J]. Углеводы полимеры, 2018, 201: 122 — 130. DOI:10.1016/j.carbpol.2018.08.048.

[59] Lv Lili, Wang Ruibin, Wang Jialin и др. Влияние высокоэффективной градо-глюканазы на скорость фильтрации ворта [J]. Пивоваренная наука и техника, 2010(3): 75 — 77. DOI:10.13746/j.njkj.2010.03.028.

[60] линь кайцзян, руан лихуан, ван лоньинг. Исследования по подготовке протопластов дрожжей с целлюлазой [J]. Бюллетень по науке и технике, 1996 год, 12(2): 118-121.

[61] дуан хуэйке, сюн шанбо, лю хаймей. Ферментативная растворимость дрожжей β-1,3-glucan and product analysis [J]. Наука о еде, 2008, 29(1): 185 — 189.

[62] нетт джей, линкольн л, марчилло к и др. Предполагаемая роль β 1,3 глюканов в сопротивлении biofilm Candida albicans [J]. Противомикробные препараты Химиотерапия, 2007, 51(2): 510-520. DOI:10.1128/ aac.01056-06.

[63] митчелл к ф, тафф х т, куэвас ма и др. Роль матрицы ту -1,3 глюкана в противогрибковой устойчивости неальбиканцев Candida Biofilms[J]. Антимикробные агенты и химиотерапия, 2013, 57(4): 1918 — 1920. DOI:10.1128/aac.02378-12.

[64] MAUCH F, MAUCH- mani B, BOLLER T. антигрибковые гидролазы в тканях гороха: II. Ингибирование роста грибов сочетаниями читиназы и грава -1,3- глюканазы [J]. Физиология растений, 1988, 88(3): 936-942.

[65] кота I  E,  Тронкосо-рохас - р, Сотело-мундо R,  et al.  Читиназ и грау -1,3- глюканаза 1. Ферментативная ферма Мероприятия в области развития in  Реакция на инфекцию Alternaria alternata оценивается в двух Стадии развития различных разновидностей томатных фруктов [J]. Организация < < сайенс > > - садоводство, 2007,  112(1): 42-50.