Исследование на Centella Asiatica Triterpenes

Организация < < сентелла > >Спорт и отдых(L.) Urb. В настоящее времяalso known as centellA/данные отсутствуют.asiatica, horseshoe plant, horseshoe plant, etc. It is A/данные отсутствуют.perennial plant В случае необходимостиВ настоящее времяПо вопросам семьиApiaceae. Its dried whole herb is used В случае необходимостиmedicine иhas В настоящее времяВоздействие на окружающую средуСоединенные Штаты америкиclearing away heat иdampness, detoxifying иreducing swelling. It is widely distributed В случае необходимостиChina, mainly concentrated В случае необходимостиВ настоящее времяareA/данные отсутствуют.south Соединенные Штаты америкиВ настоящее времяYangtze River[1]. Организация < < сентелла > >Спорт и отдыхis rich В случае необходимостиchemical components such as triterpenoids, flavonoids, polyacetylenes, иessential oils. Among these, 3. Тритерпеноидcomponents such as Латинская Америка и карибский бассейнacid, madecassic acid, asiaticoside, и- мэдэссосайд В настоящее времяconsidered По адресу:be its maВ случае необходимостиbioactive substances (Figure 1). They have neuroprotective, wound-healing, anti-inflammatory, antioxidant, anti-aging, anti-allergic effects, иare widely used В случае необходимостиthe treatment Соединенные Штаты америкиКожа, цвет кожиdiseases such as Кожа, цвет кожиburns, ulcers, psoriasis, иscleroderma, as well as in the beauty industry дляacne removal, soothing, freckle removal иwhitening, иБорьба со старением[2-4]. Therefore, Организация < < сентелла > >Спорт и отдыхis widely used in the preparation Соединенные Штаты америкиpharmaceutical иcosmetic additives иis А вот и нет.important wild plant resource.

В настоящее времяtriterpenoid components asiaticoside and madecassoside are the marker components Соединенные Штаты америкиОрганизация < < сентелла > >Спорт и отдыхin the 2020 edition Соединенные Штаты америкиthe Chinese Pharmacopoeia, and their total content is required to be not less than 0.8% [5]. В настоящее времяcontent Соединенные Штаты америкиthe above compounds varies greatly in Организация < < сентелла > >Спорт и отдыхИз российской федерацииdifferent origins and harvest periods[6], resulting in unstable quality Соединенные Штаты америкиОрганизация < < сентелла > >Спорт и отдыхplant resources. В случае необходимостиaddition, due to the unlimited harvesting Соединенные Штаты америкиОрганизация < < сентелла > >Спорт и отдыхwild resources, coupled сthe limitations Соединенные Штаты америкиartificial cultivation conditions and resources, as well as the low 1. Извлечениеefficiency Соединенные Штаты америкиtriterpenoid Организация < < сапонины > >such as asiaticoside and madecassoside and the complexity Соединенные Штаты америкиtheir chemical 3. Структура,the current Производство и продажаlevel still cannot meВ то же времяthe global markВ то же времяdemand дляОрганизация < < сентелла > >Спорт и отдыхtriterpenoid components, limiting their application in the food, pharmaceutical, and cosmetic industries [7-8].

Синтетическая биология и гетерологическая реконструкция биосинтетических путей являются эффективными стратегиями решения проблемы сложных натуральных растительных продуктов. Исследователи успешно использовали синтетическую биологию для получения сапонариосида B от Организация < < сентелла > >asiatica, QS-21 вакцины-диванта, - соясапонинA.,marigold glycoside - э,женьшеносида и других тритерпеноидов сапонинов [9-12]. Таким образом, данное исследование систематически организовывало биосинтетические пути Центральная Азия, тритерпеноиды и ключевые гены в ее метаболических путях, а также анализировало прогресс и перспективы метаболического регулирования и гетерологическую биосинтез вышеуказанных Организация < < сентелла > >asiatica triterpenoids с целью дальнейшего развития исследований, связанных с биосинтезом, промышленным производством и разработкой функционального продукта Центральная Азия, Центральная Азияtriterpenoids.

1 Организация < < сентелла > >asiatica triterpenoid saponins и их фармакологическая деятельность

Тритерпеноидные сапонины являются естественными соединениями с тритерпеноидным скелетом из шести изопреновых единиц (C5H8), к которым прикреплен Один или несколько сахарных соединений или других групп [13]. Центр азии и азии#39. Тритерпеноиды являются его основными активными ингредиентами. На сегодняшний день более 40 соединений тритерпеноидов были успешно изолированы и структурно идентифицированы из Centella asiatica. Эти соединения в основном классифицируются как урсаны и олаананы [14]. Тритерпеноиды сапонины содержат агликосы и гликозиды. Агликоны в центральной азии — это в основном азиатская кислота, мадекассийская кислота, арюнолиновая кислота, терминальная кислота, мадазиатская кислота, лсотанкуническая кислота, изоазиатская кислота и др. [14]. В тритерпене сапонинс гидроксиловая группа с -28 агликоне обычно связана с сахарной цепочкой с различными структурами через эфирное соединение для формирования эфирного гликозида [15].

The highest content is asiaticoside, madecassoside, and asiaticoside B (asiaticoside B), which can account for 80% or more Соединенные Штаты америкиthe total asiaticoside content [16]. Centella asiatica - кислота;and hydroxycentella asiatica acid are ursane-type - тритерпене.saponins. The C-28 position is linked to a single glucose to form the monosaccharide glycoside quadranoside Ⅳ and centelloside C. The C-28 position is linked to glucose-glucose to form the disaccharide asiaticoside E and centellasaponin - B,and C-28-linked glucose-glucose-rhamnose as trisaccharides asiaticoside and asiaticoside E. Arjunolic acid and arjunic acid are oleanane-type triterpene saponins. The C-28-linked single glucose (arjunoГлюкозид (glucoside)II, chebuloside Ⅱ), disaccharide (asterbatanoside B, centelloside D), and glucose-glucose-rhamnose chain (scheffoleoside A.,asiaticoside B) are the corresponding monosaccharide, disaccharide, and trisaccharide isomers of asiatic acid and madecassic acid, respectively. There are a large number of isomers of 3. Урсанеand oleanane structure isomers in asiatic acid, which have very similar physical and chemical properties. It is difficult to separate the isomers using common chromatographic conditions.

Поэтому исследователи обычно добавляют определенную концентрацию β-cyclodextrin (β-CD) или γ-cyclodextrin (γ-CD) в мобильную фаза. Используя свои характеристики гидрофилического снаружи и липофильного внутри, изомеры встроены в него, и комплексация включения вызывает различные стерильные помехи, тем самым позволяя отделить изомеры с различным временем удержания [17-19]. Кроме того, помимо пентациклических тритерпенов и их гликозидов, существуют также некоторые тетрациклические тритерпены сапонины, такие как notoginsenoside SFt3, notoginsenoside SFt4 и другие тетрациклические тритерпены типа dammarane [20-21]. Автор резюмировал тритерпеноидные компоненты Centella asiatica с номерами кас и соответствующей литературой (таблица 1). Структурные формулы можно получить в SCI Finder (https://scifinder-n.cas.org/).

The rich triterpene saponin content of Centella asiaticaДает ему широкий спектр фармакологических мероприятий, таких как антинейродегенеративные, антидепрессанты и антитревожные средства, антиэпилепсия и т.д., и оказывает хорошее влияние на лечение заболеваний обмена веществ, органов дыхания, пищеварения и т.д., особенно при лечении заболеваний кожи [2]. Экстракт Centella asiatica и его тритерпены оказывают определенное лечебное и смягчающее воздействие на акне, облысение, витилиго, атопический дерматит, заживление ран, рубцовый ремонт и т.д. [22]. Исследователи обнаружили, что азиатская кислота, мадекассийская кислота, asiaticoside и madecassoside в экстракте centella asiatica обладают определенными траншедермальными поглощающими свойствами и нетоксичны. Они были добавлены в различные препараты для лечения кожных заболеваний [22]. Гидрогели, содержащие экстракт Centella asiatica и электроспинные желатиновые мембраны, способствуют заживлению ран, влияя на распространение фибробластов и синтеза коллагена, и демонстрируют более высокие темпы заживления ран, чем необработанные составы [23-24].

Азиатская кислота может значительно уменьшить выражение воспалительных факторов реакции, таких как TNF-a и IL-1 β, а также выражение местных факторов иммунной реакции, таких как мгэ, ингибирующая гиперкератизация, мачты и инфильтрация воспалительных клеток [25]; Кислота hydroxycentella asiatica может уменьшить проявление провоспалительных цитокинов IL-1b и TLR2, способствовать секреции AQP3, лор и IVL при помощи гератиноцитов и секреции гиалуроновой кислоты при фибробластировании кожи человека, демонстрируя большой терапевтический потенциал атопического дерматита [26]. Экстракт Centella asiatica оказывает значительное влияние на антикожный процесс старения, антиокисления и улучшения увлажнения кожи. Это также снижает пигментацию кожи и повышает ее жизнеспособность. Она добавляется к различным продуктам по уходу за кожей и косметическим изделиям и имеет большие перспективы на рынке [27].

JIANG H В то же время- эл. - привет.[28] подтвердили, что asiaticoside значительно лечат фотостарение кожи путем ингибирования ROS и TGF-β1/Smad сигнализируя пути, чтобы замедлить фотостарение. Экстракт Centella asiatica может эффективно бороться со старением кожи, повышая жизнеспособность клеток, стабилизируя длину теломера и сдерживая накопление гликационных веществ [29]. Гидроксидная asiaticoside может эффективно улучшить увлажнение кожи, увеличивая экспрессию акварина 3 и гиалуроновой кислоты, тем самым эффективно улучшая увлажнение кожи [26]. Кроме того,Centella asiatica complex extract effectively reduces skin damage and pigmentation, and shows brightening and regenerating effects. Centella asiatica saponin significantly increased superoxide dismutase activity and vascular endothelial growth factor expression in rat experiments, optimizing microcirculation, enhancing skin vitality, and inhibiting tyrosinase mRNA/данные отсутствуют.translation and MITF binding to DNA.,reducing melanin Производство и продажаand tyrosinase gene expression, effectively combating pigmentation. In short, the above studies have highlighted the medical and cosmetic application B. потенциальные возможностиof Centella asiatica extract in skin protection and repair.

2 накопление тритерпене сапонинов в Centella asiatica

Вторичные метаболиты, накапливаемые в растениях, являются не только веществами, необходимыми для их собственного роста, но и важной частью системы защиты растений от патогенных атак и экологического стресса. Благодаря их значительной биологической деятельности обнаруживается все больше и больше вторичных метаболитов растений, которые используются в качестве фармацевтических ингредиентов и пищевых добавок. Процесс накопления в значительной степени зависит от различных факторов, таких как генетика, индивидуальные различия, экологические факторы, время сбора урожая и т.д. Содержание asiaticoside и madecassoside в Centella asiatica, собранное в разное время, сильно различается. Liu Xiaoqi В то же время- эл. - привет.[72] проанализировали урожай Centella asiatica, собранный за 12 месяцев года, и обнаружили, что содержание сухого вещества, листьев и азиатикозида и мадэкозида в листьях Centella asiatica, собранный в период с июля по сентябрь, было значительно выше в течение года, а общий урожай, собранный в период с Марта по май, был значительно выше урожая, собранного в период с ноября по январь.

Wan Lingyun В то же время- эл. - привет.[73] изучили состав листьев Centella asiatica в возрасте 10, 20, 30 и 40 дней и обнаружили 14 тритепеньских сапонинов, которые показали значительные различия в различных стадиях роста. Хан сяоян и др. обнаружили содержание азитикозида и мадэкозида в корнях, стеблях и листьях центральной азитицы. Результаты показали, что накопление этих двух соединений в различных частях является одинаковым, с наибольшим содержанием в листьях, за которыми следуют стебли и корни. Было также установлено, что содержание asiaticoside было несколько выше содержания madecassoside в различных частях [74]. При метаболическом анализе различных частей корней, стеблей и листьев Centella asiatica содержание азитикозида в листьях было значительно выше, чем в стеблях, за которыми следуют стебли, и наименьшее в корнях [75].

Содержание активных ингредиентов (апартическая кислота, гидроксиаспартическая кислота и их сапонины) в Centella asiatica различного происхождения значительно различается [76]. В исследовании цельных образцов растений Centella asiatica из индии среднее азитикозидное содержание большинства образцов составляло около 3 мг ·mL-1 св., гидроксиасиатикозид - 15-20 мг ·mL-1, а общее содержание тритепеноидов-около 30 мг ·mL-1 св. [77]. Малазийский центнелла asiatica был протестирован и показал, что у него самое высокое содержание тритепеноидов в листьях с массовой долей азитикозида 11,5 мг ·mL-1 с.в. и медрессозида 16,5 мг ·mL-1 с.в. [76].

Содержание пентациклических тритерпенов во всей траве Centella asiatica в таиланде варьируется в зависимости от места культивирования и периода сбора урожая, и самое высокое общее содержание пентациклических тритерпенов составляет 37,2 мг ·mL-1 св [15]. В ходе исследования изучалось содержание азитикосайда, а также его агликонов. Было установлено, что вышеупомянутые четыре пентациклических тритерпеноида накапливаются в листьях в больших количествах и почти существуют в виде гликозидов [10]. В то же время содержание вышеупомянутых четырех компонентов в Centella asiatica, собранное в марте, июле и декабре в Trang, Songkhla, Phatthalung, Nakornsrithammarat, Ratchaburi и других местах таиланда, было обнаружено в Centella asiatica, собранное в марте, июле и декабре. Было установлено, что соотношение гликозидов и агликосов существенно различается в зависимости от места и времени сбора урожая [10]. Свет является одним из основных экологических факторов, влияющих на накопление вторичных метаболитов в растениях. Хуан янфень и др. [78] изучали влияние различных светодиодных качеств на рост Centella asiatica и содержание asiaticoside и madecassoside. Они обнаружили, что культура красного света благоприятна для роста Centella asiatica и накопления общего производства азитикозидов, а красный и синий свет (7:3) благотворно влияет на формирование и накопление азитикозидов и мадекассидов.

Хотя содержание тритепеноидных сапонинов в Centella asiatica, полученных из различных источников, во время сбора урожая и в условиях культивирования, значительно различается, эти соединения являются самыми высокими в листьях, за которыми следуют стебли, а корни всего растения имеют очень низкое содержание, что практически совпадает с результатами предыдущих исследований, указывающих на то, что тритепеноидные сапонины Centella asiatica, как правило, специально синтезируются и накапливаются в листьях, Что также соответствует лекарственным частям. Кроме того, эти факторы также влияют на соотношение содержания тритерпене сапонинов и гликозидов в Centella asiatica, что может повлиять на эффективность экстрактов Centella asiatica, так как азиатская кислота и мадекассийская кислота имеют более высокую противовоспалительную активность, чем asiaticoside и madecassoside [79], в то время как asiaticoside и madecassoside имеют хорошую активность заживления ран.

3 биосинтетические пути азиатикосайдных тритерпеноидных сапонинов

Тритерпеноиды сапонины в центральной азии подразделяются на урсаны и олананы сапонины [7]. Asiaticoside и madecassoside относятся к типу конструкции ursane triterpenoid saponin. Прекурсоры тритерпеноидных компонентов, фарнезилпирофосфат (FPP), в основном получают из мевалонатного пути (MVA), а небольшая часть-из метилеритритолового фосфатного пути (MEP) [81]. ФТП образуется главным образом путем мевалоната (MVA) и в меньшей степени путем метилеритритолового фосфата (MEP) [81 — 82]. FPP катализируется синтезазой сквалена (SQS) для образования сквалена, который затем преобразуется эпоксидазой сквалена (SQE) в 2,3- оксидоскален, и, наконец, циклизируется оксидоскаленовыми циклонами (OSC) для образования грау-амирина и грау-амирина [83-85]; Затем грау-амирин и грау-амирин последовательно окисляются при C-28 ферзимами P450 CYP716A83/CYP716A86, образуя соответственно урсолиновую кислоту и оланолиновую кислоту [86].

Урсолиновая кислота гидроксилируется на позициях с -2 и с -23 CYP714E19 и CYP716C11 для формирования центральной части, которая затем гидроксилируется на позиции с -6 CYP714E41 для формирования гидроксиловой центральной части [86-87]. Азиат-кислота и мадекасия-кислота гликозилируются на C-28 посредством UGT73AD1 или UGT73AH1 или UGT1 для формирования соответствующей азиат-кислотной моноглюкозиды (2 - α,3 -β,23 - α-trihydroxyurs-12-ene-28-oic acid-28- glucopyranoside) и гидроксиматной кислоты моноглюкозиды (madecassic acid monoglucoside, 2- β, 3 - α, 6 -β,23 -β- tetrahydroxyurs-12-ene-28- оик acid-28-O- α- glucopyranoside) [88-90] (рис. 2) (рисунок 2).

Недавно команда чжоу цзинвэнь из цзяньнаньского университета получила выражение кандидата UGTs путем транскриптомного анализа различных частей Centella asiatica, включая корни, стебли и листья. В сочетании с ферзиматическими реакциями in 3. Пробиркаони обследовали и получили азиатскую кислоту диглюкозиды (2 - α,3 -β, 23 - α-trihydroxyurs-12-ene-28-oic acid-28- o -β- glucopyranoyl(1 → 6)- o -β- glucopyranoyl(1 6)- o - -glucopyranoside) глюкозилозиазы (CaUGT73C7 и CaUGT73C8) и раамнозилозиазы (CaRRT1~5), которые вырабатывают азиатскую кислоту диглюкозиды и азиатскую кислоту, были первыми, кто прояслил биосинтетический путь азиатикозида [91].

Вскоре после этого на основе данных asiaticoside 3. Функции транскриптомаи с учетом пространственной специфики аккумуляции asiaticoside и madecassoside в Centella asiatica, используя анализ совместного выражения, были успешно определены CaUGT3 и CaUGT4, которые участвуют в синтезе характерных глюкозиловых цепочек C-28 asiaticoside и madecassoside. CaUGT3 выгружает вторую глюкозу характерной гликозиловой цепи в 1 - ступенчатой форме связи, катализируя их моносакшариды гликозиды и гидроксимадекассионные кислоты диглюкозиды (madecassic acid diglucosides, 2- →,3 - α, 6 -β,23 -tetrahydroxyurs-12-ene-28-oic acid-28- o -β- glucopyranoyl(1 - α 6)- o -β- glucopyranoside), а затем в результате действия CaUGT4 в форму asiaticoside и madecassoside был добавлен третий носовой узел характерной сахарной цепи С 1 до 4 10. Связь.

Исследовательская группа использовала прогнозирование структуры белка, молекулярную доводку и эксперименты по мутагенезу, проводимые на местах, с тем чтобы установить, что две соседние аминокислоты, ответственные за фиксацию группы с -5 донора сахара, имеют важное значение для отбора гликозиловых доноров CaUGT3 и CaUGT4 [74]. Вышеуказанные два исследования полностью раскрыли биосинтетические пути асперулосидической кислоты и мадекасосида, заполнив пробелы в прояснении биосинтетических путей асперулосидической кислоты и мадекасосида и заложив основу для последующего синтеза in 3. Пробиркаэтих ценных тритерпеноидов с использованием синтетической биологии.

Оланолиновая кислота также может быть гидроксилирована на позициях с -2 и с -23 CYP714E19 и CYP716C11 для производства арджунолиновой кислоты. В недавнем докладе исследователи из индии обнаружили биосинтетический путь арджунолиновой кислоты. CYP716A233 и CYP716A432 Проведено три последовательных оксидирования грау-диссенола для получения олеанолиновой кислоты, затем CYP716C88 и CYP716C89 проведено гидроксилирование c2 - позиционного положения, а CYP714E107a и CYP714E107b проведено гидроксилирование c23 - позиционного положения для получения арджунолиновой кислоты [92]. На основе этой структуры предполагается, что аджмальная кислота, вероятно, будет гидроксилирована в точке с -6 CYP714E41 для образования термической кислоты. Структуры урсолиновой кислоты и олеанолиевой кислоты весьма схожи и различаются только по метиловому положению с -19 и с -20, поэтому предполагается, что они могут иметь некоторые общие биологические катализаторы. Scheffoleoside A/данные отсутствуют.и asiaticoside B, изолированные от Centella asiatica, основаны соответственно на аюголиевой кислоте и терминалической кислоте и имеют уникальную цепочку глюкозы-глюкозы-риносовой кислоты, соединенную в положении C-28 по структуре, аналогичной структуре asiaticoside и madecassoside.

Из-за беспочвенного характера субстрата гликозилтрансферазов на основе структурной информации и информации об изоляции соединений Centella asiatica можно сделать вывод о Том, что арджунолическая кислота и арджунолическая кислота могут быть катализированы с помощью UGT73AD1/UGT73AH1/UGT1 для образования арджуноглюкозида (Ⅱ,  2 α,3 β,23-trihydroxyolean-12-en-28- оик acid-28-O-β- d- glucopyranoside), chebuloside Ⅱ, 2 α,3 β,6β,23-tetrahydroxyolean-12-en-28- оик acid-28-O-β- d- glucopyranoside, Затем на позиции C-28 добавляется вторая группа глюкозы CaUGT73C7/CaUGT73C8/CaUGT3 для формирования астепананосайда B (2 α,3β,23-Trihydroxyolean-12- en-28- оик acid-28-O-β-D-glucopyranoyl(1 → β by rhamnosyltransferase CaRRT1~5/CaUGT4 для производства соответствующих trisaccharides scheffoleoside a и asiaticoside B. гипотетический путь все еще нуждается в дальнейшем. Проверено экспериментально для демонстрации биосинэстетического пути от аджмалиновой кислоты и аджмалиновой кислоты к шеффолеосиду а и азитикосиду в.

4 регулирование биосинтетического процесса азиатикозидного и гетерологического биосинтеза

Из-за сложности окружающей среды и географических ограничений традиционные методы, опирающиеся на прямую добычу с первоначального предприятия, столкнулись со значительными ограничениями в промышленном масштабе. В частности, дикие сообщества Centella asiatica предпочитают расти во влажных районах, и этим районам часто угрожают загрязнение тяжелыми металлами и другими вредными химикатами, что может затруднить использование диких образцов из-за избыточного содержания тяжелых металлов и микробов [93]. Кроме того, ни масштаб Centella asiatica'. Искусственное культивирование s или его дикие запасы могут удовлетворить растущий спрос фармацевтической, химической и других отраслей промышленности. С учетом этого технология культуры In vitro стала новаторской и потенциально мощной альтернативой. Он может культивировать Centella asiatica масштабно и качественно в стабильной и единообразной среде, тем самым эффективно производя необходимые вторичные метаболиты и открывая новый способ получения ресурсов Centella asiatica [94-95].

Методы культуры In vitro включают культуру каллуса, культуру корень волос и культуру подвески клеток. Они могут не только сохранять высококачественную центеллу asiatica germplasm, но и массово усиливать и распространять ее, или использоваться в качестве биореакторов для получения целевых тритерпеноидных сапонинов [96]. PRASAD. Д.A/данные отсутствуют.В то же время- эл. - привет.[97] получают побеги Centella asiatica, распространяемые in vitro, путем добавления Cu2+, NH4+-N:NO3 -N. П.и т.д., для получения побегов Centella asiatica, распространяемых in vitro, в которых массовая доля asiaticoside увеличилась с 5,3 мг ·mL-1 DW до 8,9 мг ·mL-1 DW. Кроме того, исследователи обнаружили, что азитикозидное содержание может быть также увеличено путем корректировки концентрации сукроза (7,2 мг ·mL-1 св). GANDI S В то же время- эл. - привет.[98] использовали азиатский каллус для получения (1,46 грава0,06) мг ·mL-1 FW азиатской кислоты. Каллус и подвесные клетки, полученные из южноафриканского источника Centella asiatica, богаты тритепеновыми сапонинами, такими как азиатская кислота с массовой долей 1,5-2,5 мг ·mL-1 св, мадэкассиевая кислота с массовой долей 1,5-3 мг ·mL-1 св, азитикозид с массовой долей 14-29 мг ·mL-1 св и мадэкассид с массовой долей 13-28,4 мг ·mL-1 св [99].

Подвесные клетки Centella asiatica, обрабатываемые биореактивом 5 л, могут производить до 60,08 мг ·mL-1 св мадэкасосида в оптимальных условиях культуры [100]. Культура волосатых корней может быть выращена в ферментере и широко используется в метаболической инженерии и считается эффективным методом производства вторичных метаболитов. KIС. О.О (1)T В то же время- эл. - привет.[101] применяют 0,1 ммоль · л -1 метилжасмонат (меха) в качестве стимула к образованию волосатой корневой культуры Centella asiatica, которая производит большое количество азитикозида (7,12 мг · м -1 св), содержание которого значительно превышает содержание контрольной группы. Пэкк с и др. [102] использовали 2,5 ммоль · л -1 сквален и 5 ммоль · л -1 пирувация для усиления биосинтеза целевых тритерпеноидов в волосатых корней Centella asiatica, общая масса фракции тритерпене сапонин составила 57,53 и 29,13 мг · м -1 св., соответственно. Кроме того, исследовательская группа установила, что содержание тритпене сапонинов, произведенных в волосатых корнях Centella asiatica, обработанных 400 μmol·L-1 MeJA.,достигает 60,25 мг · mt -1 DW.

Помимо культуры In vitro, исследователи часто используют табак и дрожжи в качестве шасионных клеток для гетерогенного синтеза целевых продуктов [103]. Профессор чжоу цзинвэнь ' команда s в университете яньнань использовала лабораторный штамм GAL80 нокаута Saccharomyces cerevisiae в качестве штамма шасси, чрезмерно сжимая ключевые гены в пути MVA/данные отсутствуют.и пути синтеза сквалена, чтобы получить штамм с производством грау-амирина 125,8 мг · л -1. И затем представил гены CYP716A12 и ATR1, и объединил CYP716A12:ATR1 экспрессивное соотношение и улучшенный ацетилкоэнзим питания и регенерации NADPH. Объемы производства в фляжке для коктейлей с кислотой и 5 л ферментера достигли 304,0 и 680,8 мг · л -1, соответственно [104]. Используя аналогичную стратегию, группа получила дрожжевой завод по производству урсолиновой кислоты с мощностью 74,6 мг · л -1 [105]. Кроме того, после прояснения биосинтетических путей asiaticoside, команда метаболически конструировала Saccharomyces cerevisiae, выбирая гликозидазу EGH1, которая разлагает asiaticoside и вводя ключевые ферменты путей. После серии метаболических инженерных модификаций, де ново биосинтез asiaticoside был достигнут в 5 л ферментер, с выходом 772,3 μg·L-1. Впервые был определен и синтезирован de novo в микроорганизмах полный путь к азитикозиду [91].

Профессор ли чунь' команда s в университете цинхуа побудила промоутера регулировать шаг ограничения скорости, улучшила выражение ключевых генов в пути синтеза олеанолиевой кислоты, расширила пул прекурсоров, реконструировала путь, и построил диплоидный для увеличения производства олеанолиевой кислоты. Наконец, сочетание нескольких стратегий в биореакторе мощностью 100 л привело к тому, что выход олеанолиевой кислоты составил 4,07 г · л -1, что является самым высоким уровнем, о котором сообщалось на сегодняшний день [106]. Команда и ван юнг ' команда s из пекинского технологического института оптимизировала цитохром P450 и CPRs, а затем скорректировала поставки ацетилкоэнзим а и NADPH/NADH через cofactor engineering. Наконец, команда использовала инженерные бактерии WN85 для фед-групповой ферментации, а производство урсолиновой кислоты достигло (2 300 ± 180) мг · л -1, что является самой высокой урожайностью урсолиновой кислоты, синтезированной микроорганизмами [107].

После - сриваставаG В то же время- эл. - привет.[93], прояснив биосинтистический путь урсоляной кислоты в дереве ашваганда, CYP714E107a/CYP714E107b, β-amyrin synthase, CYP716C88 и CYP716A233, можно обнаружить продукт аджмалиновой кислоты. Команда ирины бородиной из технического университета дании разработала дрожжи Saccharomyces cerevisiae для производства трех ценных растительных тритерпеноидов (гиностероидная кислота, гидроксиностероидная кислота и аджмалиновая кислота) путем ферментации. Среди которых выход аджмалиновой кислоты был увеличен до 9,1 мг · mt -1 DCW[108] путем обмена n-терминального домена CaCYP714E19p с n-терминальным доменом фермента цитохром P450. Вышеуказанные результаты исследований обеспечивают богатый запас прекурсоров для биосинтеза азитикозида и других аналогичных тритерпене сапонинов и служат ценным справочным материалом для последующего гетерологического синтеза этих компонентов с нуля.

5. Выводы и перспективы

Centella asiatica — это многолетнее ползущее растение в семье Apiaceae, которое широко распространено и занимает важное место в традиционной китайской медицине и аюрведической медицине в индии. The Shennong Bencao Jing (Shennong&)#39; в классике материя медика (Materia Medica) говорится, что Centella asiatica "лечит сильную лихорадку, злокачественные язвы и карбунклы, красную и воспалительную кожу, а также лихорадку с красной кожей". Династия сон су шу лай (су шуи)#39;s книга) и чжэн лей Бен као (Zheng Lei&)#39;s Materia Medica характеризует его как "Centella asiatica, горькая, холодная, нетоксичная, пригодная для лечения лихорадки и кожных заболеваний", что указывает на то, что Centella asiatica используется для лечения кожных заболеваний с древних времен. С развитием фармакологии, Centella asiatica была обнаружена больше фармакологической деятельности. Обильные тритерпеноиды сапонины в Centella asiatica широко используются в фармацевтической и химической промышленности, и их уникальная биологическая деятельность принесла революционный прогресс в этих отраслях. Однако традиционный метод непосредственного извлечения этих веществ из растений сталкивается со многими проблемами, такими как низкая эффективность и высокая стоимость. Между тем химический синтез, хотя и является альтернативой, часто ассоциируется с суровыми условиями реакции, оперативной сложностью и загрязнением окружающей среды, что ограничивает его широкое применение.

В отличие от этого, преимущества синтетической биологии в производствеCentella asiatica triterpenoidsТакие, как экологичность, широкий ассортимент сырья и значительная затратоэффективность, выделяются и делают его новым методом получения этих соединений. Благодаря бурному развитию синтетической биологии эта область открыла беспрецедентные возможности для гетерологического и эффективного производства натуральных продуктов, получаемых из растений. Используя дрожжи и табак в качестве «клеточных заводов» и каллус и волосатые корни в качестве биореагентов, ученые тщательно разработали и оптимизировали метаболические пути, продемонстрировав большой потенциал и перспективы биосинтеза натуральных активных ингредиентов. В частности, использование синтетической биологии для гетерологического синтеза азитикозида в дрожжевых шасионных клетках не только имеет низкую стоимость сырья, но и весь процесс подготовки ферментации является безопасным и контролируемым, закладывая прочную основу для крупномасштабного производства.

В последние годы внимание к экстракту Centella asiatica продолжает расти, и глобальный спрос на ингредиенты, такие как asiaticoside чрезвычайно высок. Поэтому исследователи стремятся изучать разновидности Centella asiatica с высоким содержанием тритерпеноидов и использовать метаболическую инженерию и методы генной инженерии для получения целевых активных ингредиентов. Хотя тритерпеноидная структура Centella asiatica является сложной, с интеграцией и применением многоомических технологий, таких как геномика, транскриптомика и протеомика, ее биосинтез-путь постепенно прояснен, что способствует биосинтезе тритерпеноидных компонентов в Centella asiatica. В настоящее время, хотя центелла азитица гликозиды могут синтезироваться на основе Saccharomyces cerevisiae, урожайность является низкой, что все еще далеко от уровня, необходимого для промышленного производства, чтобы заменить текущий процесс добычи.

The total synthesis of triterpenoid saponins using Saccharomyces cerevisiae is still a huge challenge. Since it contains a large number of glycoside hydrolases that can seriously interfere with the biosynthesis of triterpenoid saponins, researchers have adopted the method of knocking out the glycoside hydrolases of Saccharomyces cerevisiae to improve the yield, but the effect is still minim- эл. - привет.In the future, it may be possible to choose yeast, other microbial chassis bacteria for fermentation and synthesis. The continuous advancement of multi-omics technology, molecular breeding, gene editing,metabolic engineering, synthetic biology and other technologies is expected to fully unravel the mystery of the biosynthesis of triterpenoids in Centella asiatica, bringing more green, efficient and sustainable raw material solutions to the pharmaceutical and cosmetics industries.

Ссылка:

[1]  Цвет: серый N   E,   < < альказар > > С. О. A,  В аэропорту лос-анджелеса - п, В то же время - эл. - привет.  Centella  Азия-фитохимия and  Механизмы и механизмы of  Защита от заболеваний нервной системы and   Когнитивное развитие [J]. Phytochem Rev, 2018, 17(1): 161.

[2]  Сун б, у л, у у и др. Терапевтический потенциал centella asiatica и его тритерпенов: обзор [J]. Передний фармакол, 2020, 11: 568032.

[3]  Джеймс (США) - J.- т,DUBERY I A. пентациклические тритерпеноиды из лекарственной травы, Centella  asiatica  (L.) Городской [J]. Молекулы, 2009, 14(10): 3922.

[4] пэн цянь, се вэньли, чэнь цзиньи и др. Трансдермальные свойства и механизм центеллы asiatica asperulosid наноэмульсии и наноэмульсии геля. Китайский журнал традиционной китайской медицины, 2018, 43(9): 1857.

[5]  Национальная комиссия по фармакопее. Фармакопея людей и#39; китайская республика. Часть I [м]. Пекин: China Medical Science and Technology Press, 2020.

[6]  Лин чен, ван бин, лю южао и др. Научно-исследовательский прогресс в области химического состава и фармакологического воздействия centrella asiatica и анализа его маркеров качества [J]. Информация о китайской медицине, 2023, 40(8): 70.

[7]  Он л, хон г, чжоу л и др. Asiaticoside, компонент Centella asiatica attenuates индуцированный RANKL остеокластогенез через NFATc1 и NF-kappaB сигнальные пути [J]. - J.телосложение клеток, 2019, 234(4): 4267.

[8]  Тонг-он-он W, PATHOMWICHAIWAT - т,BOONSITH - с, В то же время - эл. - привет. - зеленый цвет extraction  3. Оптимизация Тритерпеноид гликоцид обогащенный Выдержка из Centella asiatica (L.) Городское использование методологии оценки поверхности реакции (RSM)[J]. Sci Rep, 2021, 11(1): 22026.

[9]  Джо с, эль-демердаш а, Оуэн с, и др. Разблокировка биосинтеза сапонина в soapwort[J]. Nat Chem Biol, 2024,doi:10.1038/s41589-024- 01681-7.

[10] лю у, чжао х, ган ф и др. Полный биосинтез QS-21 в искусственных дрожжах [J]. Природа, 2024, 629(8013): 937.

[11] юань - джей, - m - L, 13. Ван - Y, В то же время - эл. - привет. A  В последнее время В настоящее время Организация < < бахд > > Ацетилтрансферная аза, Ответственность за осуществление for  В чем дело? soyasaponin  A  Производство, производство, Незаменима для проращивания семян сои [J]. J Integr Plant Biol, 2023, 65(11): 2490.

[12] 1. Ли- Y,WANG - джей,LI L, И др. Естественные продукты пентациклических тритерпеноидов: от обнаружения до гетерологического биосинтеза [J]. Nat Prod Rep, 2023, 40(8): 1303.

[13] чжан Лу, сяо яо, лю минжи и др. Прогресс в исследовании биосинтеза пентациклических тритерпенов типа ursane [J]. Китайская фармацевтическая биотехнология, 2024, 19(3): 223.

[14] азербайджанский - р. По химическому оружию structures,  production  and  1. Ферментативная ферма 1. Преобразования of  Сапогенин (сапогенин) and  saponins  Из российской федерации  Centella  asiatica  (L.) Городской [J]. Филадельфия, 2016, 114: 168.

[15] PUTTARAK - п,PANICHAYUPAKARANANT P. факторы, влияющие на содержание пентациклических тритерпенов в Centella asiatica raw materials[J]. Фарм биол, 2012, 50(12): 1508-1512.

[16] чжэн синфан. Отделение и очистка гомолога пентациклических тритепенов сапонинов в центральной азии [D]. Ханчжоу: чжэцзян университет, 2011.

[17] Пан цзянь, кай гуйцин, юань чуаньсюнь и др. Отделение и определение содержания мадекассиевой кислоты в мадекасосиде методом добавления присадок в подвижной фазе (J). Хроматография, 2007 (3): 316.

[18] у бо, мао ренган, сон чунцин и др. Определение моноглюкозида азиатской кислоты B, моноглюкозида гидроксиазиатической кислоты и моноглюкозида азиатской кислоты в продуктах преобразования asiaticoside с помощью HPLC [J]. Исследования и разработки природных продуктов, 2012, 24 (S1): 54.

[19] янь руомен, тянь цзюнь, ли юнчэн. Оптимизация метода определения основных тритерпеноидов в Centella asiatica. Журнал северо-западного ботанического колледжа, 2024, 44 (10): 1639.

[20] WENG X - X,SHAO - Y,Чэнь (Китай)Y Y и др. Две новые монодесмозиды dammarane от Centella asiatica [J]. J В азииNat Prod Res, 2011, 13(8): 749.

[21] WENG X X, Хуанг (HUANG)W W, KONG D. Прогресс в исследованиях тритерпеноидных компонентов и фармакологической деятельности Centella asiatica [J]. Китайский журнал фармацевтической промышленности, 2011, 42 (9): 709.

[22] чжу чжуньи, чэнь юнтао, ни ютонг и др. Прогресс в исследовании фармакологических эффектов и механизмов экстракта Centella asiatica на кожу [J]. Медицина шаньдуна, 2023, 63 (20): 99.

[23] яо ч, йи й, чэнь и с и др. Wound- целебный эффект электроспиновых гелятиновых нановолокон, содержащих Экстракт Centella asiatica в крысиной модели [J]. J ткани Eng Regen Med, 2017, 11(3): 905.

[24] ш A A, - да. Тахер. - м, Мандал у - к, В то же время - эл. - привет. Фармакологические свойства of  Centella  asiatica  3. Гидрогель in  Ускорение темпов роста В случае ранения Лечение от рака В кроликах [J]. BMC дополнение Altern Med, 2019, 19(1): 213.

[25] до Хо (*) P,  Июнь 2009 года Песни песни песни - джей, В этом случае Чон (фр.) - к, В то же время - эл. - привет. Противовоспалительные средства effect  of  Centella  asiatica  1. Фитосом in  a  С помощью мыши Модель (модель) Атопического дерматита, вызванного фталическим ангидридом [J]. Фитомедицин, 2018, 43: 110.

[26] шэнь X,  Го (фр.) - м, у - г, В то же время - эл. - привет. - пропионибактерий Организация < < акнес > > По теме: 3. Противовоспаление and  skin  - увлажнение воды Мероприятия в области развития of  - мэдэкассосайд, A пентациклический тритерпень сапонин из Centella asiatica[J]. Biotechnol Biochem, 2019, 83(3): 561.

[27] ни янфэн. Подготовка экстракта Centella asiatica и его применение в косметике [D]. Гуанчжоу: цзинаньский университет, 2017.

[28] цзян H, чжоу X, CHEN  - я.азиатикосайд Задержки в работе 1. Старение and  - добрый день. Организация < < поколение > > Постоянный представитель российской федерации При воздействии уф-излучения Клетки через регулирует путь TGF-beta1/Smad [J]. Exp Ther Med, 2022, 24(5): 6 67.

[29] QUILES - джей, - кабрера - м,  - джонс. - привет. - джей, В то же время - эл. - привет. In  vitro  3. Определение содержания of  the  skin  anti-aging  potential   of  Четыре компонента Растительный ингредиент [J]. Молекулы, 2022, 27(22):8101.

[30] SINGH B, RASTOGI R P. A reinvestigation of the triterpenes of Centella asiatica[J]. Фитохимия, 1969, 8(5): 917.

[31] CAO S Y, WANG W, NAN F F, В то же время- эл. - привет.Азиатская кислота подавляет воспалительную реакцию, вызываемую кти, в эпителиальных клетках эндометрии [J]. Микроб патог, 2018, 116: 195.

[32] WU T, GENG J, GUO W, В то же время- эл. - привет.Азиатская кислота препятствует росту клеток рака легких in vitro и in vivo, уничтожая митохондрию [J]. Acta Pharm Sin B, 2017, 7(1): 65.

[33] лю й, чжан д, Дэн дж., и др. Подготовка и оценка безопасности общего гликозидного геля оксида азота Centella asiatica и его терапевтического воздействия на язвы кожных диабетиков [J]. Виртуальный компал Alt: eCAM, 2022, 2022:1419146.

[34] сюй х, он с, Лу с и др. Картирование отпечатков пальцев в сочетании с методом одномерного измерения-мультиоценки для определения пяти тритерпеноидных компонентов в центральной азии. Китайский журнал фармацевтических наук, 2021, 56(3): 181.

[35] мацуда H, - морикава T,  Г-н уэда х, В то же время al.  В медицинских целях - продукты питания. - на XXVII. Организация < < сапонин > > Состав участников of  Готу (англ.) В чем дело? (2): Структура организации объединенных наций Новые сорта ursane и oleanane triterpene oligoglycosides, centellasaponins B, C и - д,культивированные в шри-ланке [J]. Джем фарм булл (токио), 2001, 49(10): 1368.

[36] PUTTARAK P, dilokthorsakul P, SAOKAEW S и др. Эффекты Centella asiatica (L.) - урб. - привет. О результатах, связанных с когнитивной функцией и настроением: систематический обзор и мета-анализ [J]. Sci Rep, 2017, 7(1): 10646.

[37] азис х а, тахер м, ахмед а с и др. Исследования заживления ран In vitro и In vivo на метанолической фракции экстракта Centella asiatica [J]. S Afri J Bot, 2017, 108: 163.

[38] оян шандан, ню чунян. Защитное действие медрессоцида на заживление ожоговых ран и повреждения эндотелиальных клеток [J]. Китайская материя медика, 2014, 37(4): 645.

[39] песня D, JIANG X, Лю (LIU)Y, В то же времяal. Азитикосайд смягчает ингибирование роста клеток and  Апоптоз, вызываемый абета (1-42) через ингибирование tlr4/nf-kappab сигнализирующих путей в микрососудистых эндотелиальных клетках человеческого мозга [J]. Передняя аптека, 2018, 9: 28.

[40] мокбель - с, - он... Y, сюй, - L, et  al.  - крысы. - хондроцит - воспаление; and  - остеоартрит are  Улучшена madecassoside[J]. Оксид (оксид) Организация < < мед > > Клеточный лонгев, 2020, 2020: 7540197.

[41] ван у, у л, ли кью и др. Madecassoside предотвращает острую печеночную недостаточность у мышей, вызываемых КДС/д галлином, путем ингибирования p38/NF-kappaB и активации сигналов Nrf2/HO-1 [J]. Biomed Pharmacother, 2018, 103: 1137.

[42] NHIEM N X, TAI B H, QUANG T H и др. Новый тритерпеноид типа ursane от листья Centella asiatica модулирует производство оксида азота и секреции TNF- альфа в активированных первичных клетках 264,7 [J]. Bioorg Med Chem Lett, 2011, 21(6): 1777.

[43] ян л, чжан л, ду джей и др. Два новых оланана тритерпеноида сапонина из эльшольциа бодиниери [J]. Nat Prod Res, 2021, 35(21): 3658.

[44] WENG X, ZHANG J, GAO W и др. Два новых пентациклических тритерпеноида Centella asiatica[J]. Helvetica Chimica Acta, 2012, 95: 255.

[45] JIANG Z, ZHANG X M, ZHOU J, et al. Новый тритерпеноид гликозиды от Centella asiatica[J]. Helvetica Chimica Acta, 2005, 88: 297.

[46] YY D, T - L,YD. Д.- L,et al. Антифотоактивность тритерпеноидов, изолированных от Centella asiatica[J]. Фитохимия (фитохимия), 2024, 228:114246.

[47] WU C, C,DUAN Y H, LI M M, et al. Тритерпеноиды сапонины из стеблей шеффлера гептафилла [J]. Планы, 2013, 79(14): 1348.

[48] румалла с., али з., веерасурия а д., и др. Две новые тритерпенские гликосайды Centella asiatica[J]. Планы развития, 2010, 76(10): 1018.

[49] шао и к, оуян д, гао в и др. Три новых пентациклических тритерпеноида Centella asiatica[J]. ChemInform, 2014, 97(7):992.

[50] вэн сяосян, чэнь юньюн, шао ян и др. Новый ursane- тип тритерпене гликосайд от Centella asiatica. Китайский журнал фармацевтической промышленности, 2011, 42 (3): 187

[51] шао и к, оуян д, чэн л и др. Новые пентациклические тритерпеноиды Centella asiatica[J]. Helvetica Chimica Acta, 2015, 98: 683.

[52] фэн X, Лу Y H, лю Z и др. Микробное преобразование антидиабетической коросолевой кислоты каннингемелой эчинулатой [J]. J Asian Nat Prod Res, 2017, 19(7): 645.

[53] чонсут п., Ромясамит с, коньяни а, и др. Потенциальная деятельность Centella asiatica Экстракт листьев против патогенных бактерий — связанные с ними биопленки и их противовоспалительные эффекты [J]. Av Pharmacol Pharm Sci, 2024, 2024: 5 959077.

[54] гаятри к, абхинанд п а, гаятри V и др. Вычислительный анализ содержания фитосоединений Centella  asiatica  Для его свойств антифибротического и лекарственного подобия-трава для исследования наркотиков [J]. Гелион, 2024, 10(13): e33762.

[55] SOLET J M, SIMON-RAMIASA A,COSSON L, et al. Centella asiatica (L.) Urban, (Pennywort): клеточная культура, производство терпеноидов и способность к биотрансформации [м]//Bajaj Y P S. лекарственные и ароматические растения X. Berlin, idelberg:Springer,1998:81.

[56] курода м, мимаки и харада х и др. Пять новых тритерпеновых гликозидов от Centella asiatica[J]. J нат мед, 2001, 55(3):134.

[57] шукла и н, SRIVASTAVA  - р, 3. Трипати A  - к, et  al.  3. Определение характеристик of  an  ursane  triterpenoid  Из российской федерации Centella  asiatica  with  Ингибиторная активность роста против распространения бликуа [J]. Фарм биол, 2000, 38(4): 262.

[58] QL Y, HQ D, Y T, et al. Роман тритерпене из Centella asiatica[J]. Молекулы (базель, Швейцария) (молекулы), 2006 г. 11(9): 661.

[59] маеда с, отани к, касай р и др. Оланан и урсане гликозиды из Schefflera octophylla[J]. - фитохимия, 1994 год, 37(4): 1131.

[60] ян х м, инь з к, чжао м г и др. Пентациклические тритерпеноиды из Cyclocarya paliurus и их антиоксидантная деятельность в стеатозных клетках, индуцированных ффа [J]. Химия, 2018, 151: 119.

[61] YU - Q,DUAN H Q, GAO W Y, et al. Новый тритерпень и сапонин от Centella asiatica[J]. Китайские химические письма, 2007, 18: 62.

[62] WU Z W, LI W B, ZHOU J, et al. Тритерпене сапонины олейнана и урсаны типа от Centella asiatica демонстрируют нейрозащитные эффекты [J]. J Agric Food Chem, 2020, 68(26): 6977.

[63] саху н п., Рой с. К., махато С "б". Спектроскопическое определение структур тритерпеноидных трисакхаридов от Centella  Asiatica [J]. Химия, 1989, 28: 2852.

[64] ян г х, чжан р з, Лу б и др. Химические составляющие меластомы додеканбарабана и их ингибиторная активность при производстве интерлейкина -8 в клетках вт -29 [J]. Nat Prod Res, 2014, 28(17): 1383.

[65] даве A,  3. < < талом > > B,  Организация < < капче > > - г, et  al.  Термиглаусессин, a  Новая версия сайта 1. Полигидроксид triterpene  glucoside  Из российской федерации  В аэропорту венеции Глаусес-сены С антиоксидантным и противовоспалительным потенциалом [J]. Z Naturforsch C J Biosci, 2017, 72(5/6): 203.

[66] гао дж., хуан ф., чжан дж., и др. Цитотоксичные циклоартановые тритерпены сапонины из Actaea asiatica[J]. J Nat Prod, 2006, 69(10): 1500.

[67] MANNA P, SIL P C. Arjunolic acid: благотворная роль в типе 1 диабет и связанная с ним патофизиология органов [J]. Free Radic Res, 2012, 46(7): 815.

[68] GHOSH J, SIL P C. Arjunolic acid: новое многофункциональное терапевтическое обещание альтернативной медицины [J]. М. : химия, 2013, 95(6): 1098.

[69] ю кванлин, гао вэньюань, чжан яньвэнь и др. Исследование химического состава Centella asiatica. Китайский журнал традиционной китайской медицины, 2007, 32(12): 1182.

[70] ё сикава м, мацуда х, морикава т и др. Медицинские продукты питания. - ххvi. Ингибиторы альдозы редуктазы и новые тритерпене и Его oligoglycoside, centellasapogenol A и centellasaponin A, из Centella asiatica (Gotu Kola)[J]. Гетероциклы, 2001, 55: 1499.

[71] QU Y,  LIU  Ч у, Го х х, et  al.  Перевод из категории общего обслуживания Женьшень (женьшень) Из российской федерации На стеблях и ветвях and  - листья. Из Panax notoginseng по микроволновой обработке И улучшение их антикоагулянтной и антиканцерогенной деятельности [J]. РСК адв, 2018, 8(70): 4 0471.

[72] лю сяоци, лю ша, лю фусон и др. Исследование оптимального времени сбора урожая в центральной азии на основе комплексной оценки качества [J]. Китайский журнал традиционной китайской медицины, 2023, 41(12): 73.

[73] ван L,  HUANG  Q,  LI  C,  et  al.  Объединенные арабские эмираты 3. Метаболизм and  transcriptome  3. Анализ 3. Идентификационные данные Кандидат на должность Гены и гены Участие в проекте in  Биосинтез тритерпеноида сапонина в листьях Centella asiatica (L.) Городской [J]. Передний завод Sci, 2023, 14: 1295186.

[74] хань X, Чжао чжу, чжоу х, et  al.  - биосинтез. От азиатикосайда И madecassoside раскрывает тандем B. дублирование усилий Iii. Эволюция Гликозидных гликозилтрансферазы в апиалах [J]. Заводская коммон, 2024,5(10):101005.

[75] Li Jiaozhen, Sun Zhenghai, Cai Qihang, et al. Анализ химических компонентов в различных частях Centella asiatica на основе LC-MS [J]. Западная наука о лесном хозяйстве, 2022, 51(4): 75.

[76] азиз з а, DAVEY M R, мощность J B, et  Al. Производство От азиатикосайда И мадрессосайд с нами Centella  asiatica  in  vitro  and  in  Vivo [J]. Biologia Plantarum, 2007, 51(1): 34.

[77] гюнтер б, вагнер х. количественное определение тритерпенов В экстрактах и фиторепарациях Centella asiatica (L.) urban[J]. Фитомедицин, 1996, 3(1): 59.

[78] хуан янфен, лин сюанлинг, ван линюнь и др. Влияние качества света сид на рост и общее содержание сапонина Centella asiatica [J]. Журнал светотехники, 2023, 34(5): 19.

[79] вон дж., син дж С, пак х джей и др. Противовоспалительные эффекты мадекасиновой кислоты через подавление пути NF-kappab в клетках КДС-индуцированные сырые 264,7 макрофагических клеток [J]. Планы развития, 2010, 76(3): 251.

[80] былка в, жнаддек-авизен п, штудзинска-срока е и др. Centella asiatica в дерматологии: обзор [J]. Фото: Phytother Res, 2014, 28(8): 1117.

[81] тхиммаппа р, гейслер к, луво т и др. Биосинтез тритерпене в растениях [J]. Анна рев завод биол, 2014, 65: 225.

[82] вэй яд, сюн с, чжан ти и др. Исследование путей синтеза тритерпеноидных сапонинов в каштанах лошадей на основе транскриптомных данных. Китайский журнал традиционной китайской медицины, 2019, 44(6): 1135.

[83] ким о т, ан джей с, хван с джей и др. Клонирование и выражение синтазы фарнезилдифосфата Centella asiatica (L.) Городской [J]. Mol ячейки, 2005, 19(2): 294.

[84] ким о т, сон н с, ким м и др. Изоляция и характеристика синтазы сквалена cDNA Fromcentella asiatica (L.) Городской [J]. J растительный биол, 2005, 48(3): 263.

[85] ким о т., ким м., ха с м., и др. Клонирование cDNA, вероятно, кодирует оксидоскаленовой циклон, связанный с азиатикозидским биосинтезом из Centella asiatica (L.) Городской [J]. Заводская клеточная Rep, 2005, 24(5): 304.

[86] миеттинен - к, В чем дело? J,  1. Покупка 1 D,  et  al.  The  В древние времена - да, сэр. family  is  a  На главную страницу Страна, предоставившая взнос to  the  B. диверсификация экономики of  Eudicot triterpenoid biosynthesis[J]. Nat Commun, 2017, 8: 14153.

[87] ким о т., джин м., и др. Новый многофункциональный оксидаз с -23, CYP714E19, участвует в Asiaticoside Biosynthesis[J]. Телосложение растительных клеток, 2018, 59(6): 1200.

[88] д Коста ф, парикмахер С, ким и б, et  Al. Молекулярная структура Клонирование одного из Тритерпеноид, формирующий эфиры: удп-глюкоза   28- о-глюкозилтрансферазы участвуют в биосинтезе сапонина из лекарственных растений Centella asiatica[J]. Завод Sci, 2017, 262: 9.

[89] хан X, чжао J, чан X и др. При повторном анализе транскриптомной информации Centella asiatica был выявлен тритерпеноид, формирующий стер: UDP-глюкоза 28- o-глюкозилтрансферазы [J]. Тетраэдр, 2022, 129: 133136.

[90] ким O  T,  (подпись) джин M  L,  В чем дело? D  Y,  et  al.  3. Определение характеристик of  the  asiatic  acid  - глюкозилтрансферазы, UGT73AH1, Участие в проекте in  Asiaticoside biosynthesis в Centella asiatica (L.) Городской [J]. Int J Mol Sci, 2017, 18(12).

[91] чжао х, вэй в, ли с и др. Разъяснение биосинтеза азиатикосайда и его восстановление в дрожжах [J]. Акг устойчивая химия и Инжиниринг, 2024, 12(10): 4028.

[92] сривастава г, вяс п, кумар а, et  Эл, разрушает роль Из цитохрома р450 1. Ферменты in  Биосинтез оланана тритерпеноида В арджуне дерево [J]. Завод J, 2024.

[93] ONG G H, WONG L - с,TAN A L, et al. Воздействие загрязненной металлами почвы на накопление тяжелых металлов в готу-коле (Centella asiatica) и потенциальные риски для здоровья: исследование на полуостровном полуострове Малайзия [J]. Environ Monit assessment, 2016, 188(1): 40.

[94] WU T, KERBLER S M, FERNIE A R, et al. Культуры растительных клеток как гетерологические биозаводы для производства вторичного метаболита [J]. Заводская коммон, 2021, 2(5): 100235.

[95] ван хуан, ли цзиньсинь, ли цзяньли и др. Применение технологии культуры растительных тканей в традиционной китайской медицине [J]. Китайский журнал традиционной китайской медицины, 2017, 42(12): 2236.

[96] чжан с, ван с, ван и др. Исследования по применению технологии культуры ткани лекарственных растений в устойчивом развитии ресурсов традиционной китайской медицины. Китайский журнал традиционной китайской медицины, 2023, 48(5): 1186.

[97] прасад а, матур а, Сингх м и др. Рост на душу населения И asiaticoside производства в нескольких культурах съемки лекарственных трав, Centella asiatica (L.) В городах, под влиянием манипуляций питательными веществами [J]. J нат мед, 2012, 66(2): 383.

[98] ганди S, гири а. производство и количественная оценка азиатской кислоты В пробном состоянии Съемки и каллус культур Centella asiatica (L.) Urban[Z]. 2013.

[99] JAMES J T, MEYER R, DUBERY I A. характеристика двух фенотипов Centella asiatica в южной части африки через состав четырех тритерпеноидов в каллусе, клеточных суспензия и листьях [J]. Растительные клетки Tiss орган Cul, 2008, 94(1): 91.

[100] LOC N Ч, нхат н - ти. - привет. Производство и продажа От азиатикосайда from  centella  (в центре) asiatica  L.  Городские районы) 2. Камеры В биореакторе [J]. Asian  Комитет содействия развитию J  Trop Biomed, 2013, 3(10): 806.

[101] ким о т, бах к х, Син и с, И др. Увеличение производства азитикозида из волосатых корней культур Centella asiatica  (L.) Городской показатель, получаемый с помощью метилжасмоната [J]. Заводская клетка Rep, 2007, 26(11): 1941.

[102] пэк С, хо т, ли х, И др. Улучшенный биосинтез тритерпеноидов в Centella  Азиатская культура волосатых корней путем кормления прекурсоров И возбуждение [J]. Завод биотехнол Rep, 2020, 14(1): 45.

[103] ши вэньлонг, ван цзянь, ма ин и др. Научно-исследовательский прогресс в области анализа биосинтетических путей активных ингредиентов в традиционной китайской медицине. Китайский журнал традиционной китайской медицины, 2023, 48(9): 2273.

[104] дуан лина, цзэн вейчжу, сунь ян и др. Метаболическая инженерия Saccharomyces cerevisiae для эффективного синтеза оланолиевой кислоты. Пищевая и ферментационная промышленность, 2024, 50 (18): 67.

[105] чжао синьин, цзэн вэйцху, чжоу цзинвэнь. Метаболическая инженерия Saccharomyces cerevisiae для эффективного синтеза урсолиновой кислоты [J]. Пищевая и ферментационная промышленность 2024, 50 (20): 9.

[106] Ченг X, панг Y, бан Y и др. Применение различных стратегий для усиления биосинтеза оланолиевой кислоты с помощью инженера Saccharomyces cerevisiae[J]. Bioresour Technol, 2024, 401: 130716.

[107] цзя н, ли дж., зан г и др. Инженерные Saccharomyces cerevisiae для высокоэффективного производства урсолиновой кислоты посредством кофакторной инженерии и оптимизации ацетил-коа [J]. М. : наука, 2024, 203: 109189.

[108] арнесен J  A,  - "белмонте" D  A  A,  - джаячандран  S,  et  al.  Инженерно-технические работы of  3. Ярровия Организация < < липолитика > > for  the  production  of  Растительные тритерпеноиды: азиатские, мадейкассические и арджунолические кислоты [J]. М. : наука, 2022.