Как получить D тагатозу методом ферментации?

Д-тагатозе (D-tagatose)is A/данные отсутствуют.six-carbon ketose иА вот и нет.isomer Соединенные Штаты америкиD-galactose. Pure Д-тагатозе (D-tagatose)is not easy to find, as it is only found В случае необходимостиВ настоящее времяgum secreted По запросу:В настоящее времяSterculiA/данные отсутствуют.setigera tree. Small amounts Соединенные Штаты америкиД-тагатозе (D-tagatose)are also found В случае необходимостиpasteurised milk, hot chocolate, cheese иcheese products. Since only about 20% Соединенные Штаты америкиD-1. ТагатозеcА вот и нет.be absorКровать в номереПо запросу:В настоящее времяsmall intestine after consumption, it basically does not produce calories иdoes not cause blood sugar fluctuations. On В настоящее времяother hand, D-tagatose can prevent the formation Соединенные Штаты америкиdental caries иcan also be used by microorganisms В случае необходимостиthe intestine to promote the growth Соединенные Штаты америкиcertain probiotics [1]. In recent years, сthe improvement Соединенные Штаты америкиliving standards иthe prevalence Соединенные Штаты америкиdiseases such as obesity иdiabetes, there have been increasing calls дляD-tagatose to be used as a functional sweetener to replace sucrose, which has attracted a greПо адресу:deal Соединенные Штаты америкиattention.

- бидл. - бидл.et al. [2] изобрели процесс дляПроизводство d-тагатозы из изомерной d-галактозыИспользование Ca(OH)2 в 1991 году. D- галактозу можно получить путем гидролиза лактозы или более доступной сыворотки (отходы производства молочных продуктов), а стоимость процесса приемлема для рынка. Однако этот метод требует использования большого количества сильной кислоты для нейтрализации раствора реакции, который может привести к загрязнению сточных вод; Кроме того, существует много побочных продуктов реакции, что затрудняет разделение по течению. Читам и др. [3] обнаружили, что l-арабинозный изомер (L-AI фермент, EC. C.5). 3. 1. 4. Может стимулировать производство d-тагатозы из d-галактозы. В последующие 20 лет в результате проверки ферментов, экзогенного выражения и характеристики различных типов микроорганизмов ученые обнаружили различные L-AI ферменты, пригодные для промышленного производства D-tagatose L-AI ферменты, пригодные для промышленного производства D-tagatose; Установлено, что они в основном обладают характеристиками высокой скорости преобразования d-галактозы, хорошей термостойкостью фермента, а оптимальным каталитическим pH/ч.фермента, как правило, являются кислотными условиями, пригодными для промышленного производства (pH/ч.от 5,0 до 6,0) [4].

С другой стороны, генная инженерия дикого фермента L-AI с использованием молекулярных биологических методов может также эффективно повысить потенциал промышленного применения дикого фермента; Это нашло свое отражение главным образом в создании структурной модели L-AI фермента с использованием технологии компьютерного молекулярного моделирования и рациональной конструкции важных остатков аминокислоты в ферменте. Что касается каталитических процессов, то технология пакетного преобразования иммобилизованных клеток/ферментов позволила добиться определенных результатов; Однако такие проблемы, как низкие коэффициенты преобразования субструтов, длительные циклы реакции и короткий период полураспада фермента, остаются узкими местами в этой технологии. Кроме того, неотложная задача разработки более безопасного пищевого фермента L-AI экзогенного выражения для замены рекомбинантной Организация < < эшерихия > >1. Колиявляется неизбежной. В настоящее время американская компания Spherix проводит III этап клинических испытаний d-тагатозы для лечения сахарного диабета 2 типа [5].

Если испытания будут успешными, D-tagatose будет иметь широкие перспективы в области биомедицины, а также создаст еще более срочный спрос на биологические производственные процессы. Автор сочетает в себе результаты исследований, проведенных исследовательской группой в последние годы по L-AI ферменту и биотехнологическому производству D-tagatose, чтобы обеспечить обзор скрининга и применения L-AI фермента, исследования по модификации генной инженерии, а также применения технологии иммобилизации, с целью обеспечить основу для экологически чистого производства новых функциональных подсладителей, таких как D-tagatose.

1 исследование источника и свойств L-AI фермента

Известные в настоящее время L-AI ферментов были получены из прокариотических микроорганизмов путем клонирования и иностранного выражения, включая Бациллы (Bacillus)subtilis [6], Lactobacillus plantarum [7], 1. Ацидотермусthermophilus [8], - геобакиллСтеаротермофил. - да[9] и Thermus thermophilus [10] (таблица 1. Политика 1.

Как видно из таблицы 1, вполне возможно, что в силу весьма различных условий жизни этих микроорганизмов каталитические свойства ферментов L-AI из различных источников также значительно различались после долгосрочной естественной эволюции.

1. Оптимальная температура для реакции d-галактозы изомеризации различна и, согласно сообщениям, варьируется от 15 до 95 градусов. Среди них L-AI ферменты из Shewanella sp. Ана -3 и Lactobacillus sakei 23K могут стабильно катализировать при низких температурах 4 градуса [11-12], в то время как - аноксибациллокружающей среды очень отличается. После длительной естественной эволюции каталитические свойства ферментов L-AI из различных источников также существенно различались.

1. Оптимальная температура для реакции d-галактозы изомеризации различна и, согласно сообщениям, варьируется от 15 до 95 градусов.

Среди них, L-AI ферменты из Shewanella sp. Ана -3 и Lactobacillus sakei 23K могут стабильно катализировать при низких температурах 4 °C [11-12], в то время как Anoxybacillus Флавитермус (флавитермус)L-AI ферменты могут поддерживать ферментную активность при экстремальных температурах 95 °C [17]. В целом, L-AI ферменты можно разделить на три категории в соответствии с их оптимальной температурой реакции: мезофильные L-AI ферменты, термофильные L-AI ферменты и гипертермические). Их оптимальная температура реакции меньше 60 градусов, между 60 и 80 градусов, и между 80 и 95 градусов, соответственно [18]. Среди них термофильный тип считается более подходящим для промышленного производства d-тагатозы, главным образом потому, что гиббса свободной энергии, необходимой для реакции изомеризации от d-галактозы доD- тагатоза высокая (4,96 КДЖ/моль), для получения высокой степени преобразования требуется относительно высокая каталитическая температура. Тем не менее, чрезмерно высокая температура приведет к реакции браунинг, что повлияет на качество продукта. Поэтому большинство ученых считают, что температура реакции от 60 до 70 градусов является наиболее подходящей [1, 4].

2. Оптимальная реакция pH варьируется и, согласно сообщениям, варьируется от 5,0 до 10,5. Большинство ферментов L-AI имеют оптимальный каталитический показатель pH от 7,5 до 8,5, но промышленное производство требует оптимального каталитического pH в кислотном диапазоне, чтобы избежать неспецифических побочных реакций, вызванных условиями щелочной реакции, и соответствовать кислотному pH, требуемому для гидролиза лактозы, избегая неоднократных корректировок и упрощения производственного процесса [1, 4].

3. Различные требования к ионам металлов. Большинство L-AI ферментов требуют ионы металлов, чтобы оказывать ферментативную активность и поддерживать тепловую устойчивость. Среди них наиболее распространенными являются Mn2 + и Co2 + ионы. Однако Co2 + не может быть использован в пищевой промышленности, поэтому L-AI ферменты, которые сильно зависят от Co2 +, имеют относительно ограниченное промышленное применение [10]. Интересно отметить, что ферментная активность L-AI от Бациллы (Bacillus)1. Галодураныи Бациллы (Bacillus)Стеаротермофил. - даСоединенные Штаты америкине уменьшилась после лечения EDTA. Возможные причины заключаются в Том, что эти два фермента не зависят от ионов металла, или активный центр фермента обладает сильной способностью связывания ионами металла, и ионы металла не легко отделяются [16].

4. Существуют значительные различия в специфике субстратов. Например, L-AI ферменты, полученные из Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis, способны лишь катализировать Г-н арабинозе[6, 13] и не могут катализировать d-галактозу, которая является очень особенной в L-AI ферменты семейства; Они пригодны для изучения селективности субстратов ферментов L-AI.

4. Различная каталитическая эффективность d-галактозы. Каталитическая эффективность (значение kcat/Km) почти всех ферментов L-AI для Г-н арабинозезначительно выше, чем для D-galactose, поэтому каталитическая эффективность L-AI ферментов для D-galactose, как правило, низкая. Однако ченг и др. [15] обнаружили, что L- ai фермент, получаемый из целлюлолитики ацидоthermus ATCC43068, обладает относительно высокой каталитической эффективностью (kcat/Km = 9,3 ммоль /(л · мин)) для d-галактозы. Рахим и др. [12] получили фермент L-AI от штамм Lactobacillus sakei 23K, который может катализировать d-галактозу при низких температурах и в кислотной среде. Его значение kcat/Km для d-галактозы достигает 10,3 ммоль /(л · мин), что является самым высоким значением, указанным в литературе до сих пор.

Что касается промышленного производства d- тагатозы, то если термофильный, кислотно-стойкий, независимо от металла L-AI фермент с высокой каталитической эффективностью для d- галактозы может быть проверен, это значительно облегчит технологический прогресс. Исследовательская группа, к которой я принадлежу, проверила штамм лактобациллуса ферментума, который производит L-AI фермент из традиционных маринованных огурцов [19-20]. Гены кодирования L-AI фермента, содержащиеся в этом штамме, были обнаружены экзогенно выраженными, а рекомбинантный L-AI -AI фермент катализирует d-галактозу при оптимальной температуре 65 градусов и оптимальном pH 6,5, с каталитической эффективностью 9,02 ммоль /(л · мин), демонстрируя определенный потенциал промышленного применения [14, 21].

2 генная инженерия L-AI фермента

Учитывая, что существуют возможности для улучшения фермента L-AI, используемого в настоящее время в производстве d-тагатозы, были предприняты усилия для его рационального изменения на молекулярном уровне. В 2006 году была успешно решена кристальная структура L-AI фермента из Организация < < эшерихия > >1. Коли(номер присоединения к базе данных PDB: 2AJT/2HXG), которая заложила структурную биологическую основу генной инженерии L-AI фермента [22]. В последние годы технология прямой эволюции и мутагенез под руководством компьютерной гомологии стали эффективными средствами модификации фермента L-AI. В качестве важных показателей промышленного применения больше внимания стало уделяться изменению ферментной активности, оптимальной температуре реакции, оптимальной реакции pH и селективности субстритов (таблица 2).

Исследования, посвященные роли основных остатков аминокислот, в основном посвящены ферментам L-AI из Bacillus stearothermophilus. Rali et al. [23] провели молекулярное моделирование пространственной структуры B. stearothermophilus Соединенные Штаты америкиL-AI фермента и по месту действия мутировали 175 - ю аминокислоту. Таким образом, мутант (N175H) получил более широкий оптимальный температурный диапазон реакции (50-65 °C), чем дикий фермент, и по сравнению с диким ферментом (80 °C), который имеет более высокую оптимальную температуру реакции, мутант полезен для предотвращения браунга побочных реакций во время производства. О и др. [27] результаты, полученные в качестве основы для дальнейших исследований мутаций на местах, показали, что при изменении 408 - й аминокислоты фермента G. стеротермимофилуса L-AI с нейтральной аминокислоты на полярную или базовую аминокислоту оптимальная реакция pH штамма мутантов значительно снижается (с 8,5 до 7,5).

Предполагается, что это связано с тем, что это положение близко к активному центру L-AI фермента, поэтому изменение полярности аминокислоты может привести к изменению распределения заряда микросреды каталитического центра, тем самым повышая способность L-AI фермента катализировать субстрат в кислотных условиях. О и др. [28] пришли к выводу о Том, что бензольное кольцо аминокислоты 164 и размер боковой цепи аминокислоты 475 оказывают значительное воздействие на способность фермента L-AI катализировать d-галатозу путем мутагенеза под контролем участка многочисленных важных остатков аминокислоты фермента G. thermodenitrificans L-AI. - лактоза. Его двойной мутант C450S-N475K имеет 5- кратное повышение каталитической эффективности d-галактозы, а скорость преобразования d-галактозы увеличилась с 46% до 58%. В 2010 году P rabhu et al. [25] использовали гомологическую модель для анализа остатков аминокислот в каталитическом центре B. licheniformis L-AI и вблизи него и выборочно мутировали несколько участков. Результаты показали, что мутант (Y333A) полностью утратил способность катализировать l-арабинозу. Автор считает, что расстояние между основными остатками аминокислоты в каталитическом активном центре и субстратом определяет каталитическую способность. Поэтому сохраняемые остатки аминокислоты вблизи каталитического центра имеют важное значение для субстратной специфики фермента L-AI. Это дает идеи для изменения субстратной специфичности L-AI фермента.

3 производство d-тагатозы с использованием технологии иммобилизации

В качестве наиболее эффективного биологического метода производства d-тагатозы на сегодняшний день была глубоко изучена технология иммобилизации клеток/фермента для производства d-тагатозы, и были разработаны различные производственные процессы (таблица 3).

3.1 производство d-тагатозы с использованием иммобилированной клеточной технологии

Метод использования альгината натрия для иммобилизации рекомбинантных клеток кишечной палочки для производства d-тагатозы давно находится в поле зрения ученых. Этот метод отличается высокой оперативностью, надежностью и дешевизной и имеет потенциал промышленного применения. Как правило, после промышленного выражения рекомбинантные клетки кишечной палочки E. coli могут использоваться для катализа d-галактозы после их встраивания в альгинат натрия и обработки с помощью CaCl2. В работе Гонконг (США)et al. [35] создана стабильная и недорогая технология производства d-тагатозы с использованием альгинально-иммобилированных рекомбинантных клеток E. coli натрия. Клетки коли для производства d-тагатозы.

Имеет период полураспада 43 дня и производит aВысокая чистота (> 99%) d-тагатозеПосле разделения колонкой ионного обмена. Однако использование Escherichia coli в качестве штамма для производства d-тагатозы сопряжено с риском для безопасности; Поэтому одним из будущих направлений исследований могла бы стать разработка более безопасной технологии производства обездвиженных клеток с использованием пищевых микроорганизмов. Автор использовал штамм Lactobacillus fermentum CGMCC2921пищевого класса для производства иммобилизации клеток для производства d- тагатозы методом интродукции альгината натрия и перекрестного соединения глутаральдегида. При условии добавления борной кислоты, скорость преобразования d-галактозы в d-тагатозу может достигать 60%, с выходом 11,1 г /(л · ч). В течение восьми партий конвертации (в общей сложности 192 ч) значительного снижения коэффициента конвертации отмечено не было [37]. Вместе с тем для достижения стоимостных требований промышленного производства необходимо провести углубленные исследования по вопросу о высокоплотном культивировании и эффективном выражении производственной нагрузки.

3.2 производство d-тагатозы с использованием иммобилизованных ферментов

Производство d-тагатозы с использованием иммобилизованного фермента может достичь высокой интенсивности производства, но требует сложного процесса очистки фермента. Ким ким кимet al. [31] использовали альгинат натрия для инкапсулирования термофильного L- ai фермента для производства d-тагатозы с производительностью 13,3 г /(л · ч). Рю (Ryu)et al. [30] использовали метод интродукции альгината натрия для обеззараживания очищенного фермента G. stearothermophilus L-AI, а затем использовали биореактор в пакованном слое для производства d- тагатозы. После изучения таких факторов, как оптимальное соотношение высоты и диаметра реакционного слоя, они успешно получили производительность 54 г /(л · ч), что является самым высоким значением, указанным в литературе на сегодняшний день. Юнг и др. [34] полагают, что причиной высокой урожайности д-тагатозы, полученной с использованием иммобилизованного фермента, является то, что после очистки фермент л-аи не подвергается воздействию других белков организма после иммобилизации, а биоокатализ может протеироваться с наиболее идеальной тенденцией реакции; В то время как иммобилизованные клетки содержат большое количество принимающих белков, присутствие этих белков имеет значительный стерильный эффект помехи, что приводит к гораздо более низкой d-тагатозы выход при использовании иммобилизованных клеток.

Кроме того, иммобилизованный L-AI фермент технология может также эффективно улучшить свойства L-AI фермент. Лианг (Liang)et al. [38] использовали альгинат натрия для встраивания фермента L-AI, полученного из загара. Матраний, и оптимальная температура реакции иммобилизованного фермента после встраивания была значительно улучшена (с 60 до 75 градусов). От 5 до 8. 0 может поддерживать более 80% активности фермента, и эти данные гораздо лучше, чем свободные ферменты. В работе Jebors et al. [39] впервые использовались полимерные материалы Noria/NoriaPG для иммобилизации фермента Lactobacillus sakei L-AI, и стабильность этого фермента при высоких температурах и низких значениях pH была повышена по сравнению со свободными ферментами.

4. Повышение урожайности д-тагатозы путем изменения равновесия химической реакции

In the Реакция на нихof the L-AI enzyme isomer D-galactose, some substances with high 3. Аффинити (аффинити)дляthe product D-tagatose (such as boric acid) can coordinate with it to dissociate it Из российской федерацииthe reaction, resulting in a decrease in the product in the solution and a shift in the chemical equilibrium towards product formation. Организация < < лим > >et al. [40 first used boric - кислота;to increase the Преобразование должностей в должностиrate of D-galactose to D-tagatose Использование программного обеспеченияpurified - термофилияL-AI enzyme to 77.4%, which is the highest conversion rate obtained using L-AI enzyme to prepare D-tagatose. The D-tagatose-boric acid complex formed is soluble in methanol, and the boric acid can be removed by evaporation without affecting the purity of the product. Therefore, this method has great 3. Применениеprospects. Further research has shown - что?the catalytic efficiency of L-AI enzyme on the 1. Субстратis significantly improved in the presence of boric acid. 1. Лиet al. [17] reported that the catalytic efficiency (kcat/Km) of Anoxybacillus flavithermus L-AI enzyme on D-galactose increased Из российской федерации5.16 mmol/(L·min) to 9.47 mmol/(L·min) with the addition of boric acid, an increase of 83.5%.

5 производство редких сахарных смесей, содержащих d-тагатозу, путем комбинированного действия L-AI фермента и коммерческого фермента

Lactose is hydrolyzed to produce an equimolar mixture of glucose and D-galactose. Glucose is not involved in the production Из д-тагатозеand can therefore be used to produce other rare sugars. - йоргенсен.et al. [32] were the first to report the use of lactose as a raw material to produce a mixed syrup В которых содержатсяD-tagatose and fructose using В неподвижном состоянииthermophilic L- AI enzyme, β-galactosidase and commercial glucose 1. Изомеры (изомеры)to produce a mixed syrup В которых содержатсяD-tagatose and fructose Из российской федерацииlactose, in order to fully utilize glucose to increase the added value of the product. Организация < < рахими > >et al. [41] used sodium Альгинат (альгинат)to encapsulate genetically engineered bacteria co-expressing the 1. ТермостабильностьL-AI enzyme and glucose isomerase, and successfully produced D-tagatose and fructose in a continuous batch using a biological В упаковкеbed with lactose hydrolysate as the raw material. However, the separation of the components in the mixed syrup still requires the support of downstream technology research, and is currently only in the exploratory stage.

6 отделение и очистка д-тагатозы

Цель технологических исследований на последующих этапах заключается в налаживании эффективного процесса разделения и извлечения d-тагатозы. D- тагатоза в растворе преобразования может быть отделена путем экстракции органическим растворителем. Xu Guiqiang et al. [42] для отделения d- тагатозы использовали фенилбороническую кислоту-кватерничный аммиачный ионный жидкий растворитель с коэффициентом извлечения 65,7% и коэффициентом рекуперации 92,3%. Однако с учетом потенциальных рисков для безопасности пищевых продуктов и проблем загрязнения окружающей среды, связанных с системами органических растворителей, этот метод может оказаться непригодным для широкомасштабного использования. Поскольку d-тагатоза и d-галактоза являются различными формами альдопентозов, они могут быть разделены с помощью ионно-обменных смол. Хуан венся и др. [43] использовали ионно-обменную смолу типа Ca2+ для очистки d-тагатозы, синтезированной химическим методом, получая d-тагатозу с чистотой 98% и коэффициентом восстановления 83%. Опресненная d-тагатоза может быть кристаллизована с помощью этанола для получения чистого d-тагатозы. Этот метод прост в использовании и весьма осуществим.

7 эксплуатационные методы и требования к оборудованию для биологического производства д-тагатозы

Биологическое производство d-тагатозы в основном использует сыворотку сыворотки. Устройство мембранной сепарации используется для удаления таких примесей, как белок и соль, и для концентрации сыворотки. Смесь d-галактозы и глюкозы получается путем гидролиза концентрированной сыворотки иммобилизованной лактазы. Затем глюкоза в смеси ферментируется микроорганизмами (такими как brewer&)#39 дрожжи, и этанол выдирается. Оставшаяся d-галактоза преобразуется в d-тагатозу иммобилизированным L-AI ферментом (или генетически модифицированными бактериями, содержащими L-AI ферментом). D- галактоза, которая не была полностью преобразована, может быть отделена и восстановлена с помощью колонки обмена катиями. Испарение и концентрация раствора преобразования, содержащего только d-тагатозу, могут использоваться для кристаллизации и сушки продукта. Оборудование, задействованное во всем процессе, включает мембранные фильтрующие устройства, ферментеры, центрифуги (или пресс-подборщики и фильтры для рамы), дистилляционное оборудование, ионно-обменные смолы, кристаллизационное оборудование, сушилки и т.д. Принимая Kraft Foods Inc.' с д-тагатозный метод производства биотехнологических процессов в качестве примера [44], конкретные методы работы и использование оборудования показаны на рис. 1.

8 проблемы и перспективы развития биологического производства д-тагатозы

Будучи экологичной и низкоуглеродной технологией производства, биологический процесс производства d-тагатозы все еще не может заменить существующий химический каталитический метод, главным образом по следующим причинам:

1) Высокая стоимость процесса. С точки зрения современной технологии, самая высокая урожайность d-тагатозы достигается с помощью иммобилизованного L-AI фермента, но процесс очистки фермента требует сложного очистного оборудования и сложного управления процессом, которое является дорогостоящим в техническом обслуживании и трудоемким, а технический порог относительно высок. Производство d-тагатозы с использованием иммобилизованных рекомбинатов E. coli клеток является простым в эксплуатации и метод является зрелым. Недостаток заключается в Том, что урожайность низкая, и есть скрытые опасности в пищевой безопасности кишечной палочки хозяина. Однако этот метод по-прежнему имеет самые большие перспективы для промышленности.

2. Цикл реакции биологического метода подготовки д-тагатозы является относительно продолжительным. Время, необходимое для производства d-тагатозы с использованием пакетного преобразования, как правило, составляет 24 ч/партию или даже 168 ч/партию, и на протяжении всего процесса необходимо поддерживать высокую температуру. По сравнению с простым химическим каталитическим методом это не имеет преимуществ с точки зрения потребления энергии или цикла реакции. Хотя производство d-тагатозы с использованием фермента L-AI комнатной температуры относительно недорого с точки зрения потребления энергии, оно ограничено низким коэффициентом преобразования (от 20% до 30%) и имеет мало практического применения.

3) Lack of development and utilization of food-grade L-AI enzyme Выражение на английском языкеhosts. Since the main future application of D-tagatose is in the food and pharmaceutical fieldsНеобходимо развивать микроорганизмы, пригодные для пищевых продуктов (например, сертифицированные GRAS), в качестве биокаталитических векторов. В число потенциальных кандидатов входят бациллусовые субтилии, оксиданы глуконобактера, Saccharomyces cerevisiae и т.д. Ким и др. [45] выразили фермент - геобакиллsp. L-AI в сертифицированном gras микробном хосте для производства d-тагатозы, но урожайность неизвестна. Следует отметить, что rali et al. [46] выразили B. stearothermophilus Соединенные Штаты америкиL-AI фермент в проботических штаммах L. bulgaricus и S. thermophilus. Новые штаммы смогли производить d-тагатозу во время ферментации молока, что привело к йогурту, который сохранил свой вкус и сократил калории.

4. Отсутствует достаточное понимание каталитического механизма фермента L-AI, что затрудняет эффективное улучшение каталитических свойств фермента. Из-за очень ограниченных структурных данных L-AI фермента, трудно использовать структурную биологию для анализа каталитического механизма и попытки фермента инженерной модификации; В качестве более точного средства технология кристаллизации белка имеет большое значение для изучения субстратного каталитического процесса L-AI фермента. Поэтому анализ кристаллической структуры фермента L-AI станет важной темой в будущем.

Конечно, развитие промышленного процесса по производству д-тагатозы имеет большой потенциал. По сравнению с химическими методами производства преимущества биологических методов включают простоту извлечения продуктов, высокую каталитическую специфичность и социально приемлемую продовольственную безопасность. Была также раскрыта концепция развития основной технологии, которая заключается в Том, чтобы найти L-AI фермент, который может эффективно производить d-тагатозу и установить недорогой и безопасный производственный процесс, который может эффективно производить d-тагатозу. Считается, что с постоянным углублением соответствующих исследований может созревать биологический процесс использования фермента L-AI для подготовки д-тагатозы.

Ссылка:

[1] О, боже мой! D. Д. - к. Tagatose: свойства, приложения и Биотехнологические процессы [J]. Appl Микробиол (микробиол)Biotechnol,2007,76:1-8.

[2] Beadle  - J.R,Saunder - J.P,Wajada T J. Технология производства тагатозы: US,500261[P].1991-3-26.

[3] Читам п. С джей, вуттон На букву "н". Биопреобразование d-галактозы в d-тагатозу [J]. Фермент микроб технол,1993,15:105 — 108.

[4] 1. Будеббуз  - с, магуин  И, рахими,  - м. С помощью бактерий  L- арабинозы изомеразы: промышленные application  for  D-tagatose  Производство [J]. Недавно Пэт ДНК ген Seq,2011,5 (3) : 194-201.

[5] Лу и, левин Джи ви, доннер ти Ч. : м. Тагатоза, новый антидиабетический контроль и контроль ожирения Наркотик [J]. 3. Диабет Obes Metab,2008,10 (2) :

109-134.

[6] Ким ким ким J  Ч, прабху - п, джея.  М, и  Al.description (характеристика) of  an  L- изомеры арабинозы Из российской федерации Bacillus  Subtilis [J]. Группа по планированию семьи  Микробиол (микробиол) Биотехнол,2009,85 (6) : 1839 — 1847.

[7] - чуайе H,Bejar W, rхими M,et al.ization of L- арабинозе1. Изомеры (изомеры)Из российской федерацииthe Lactobacillus plantarum NC8 - штамм С выраженным выражением Стабильность в эксплуатации at  Кислотный pH[J]. Фонд финансовой помощи Микробиол (микробиол) Летт,2007,277 :260 — 267.

[8] В чем дело? С. S Дж., ли  D. Д. W,Choe E. E. A,et и Al.description (характеристика) of  - термоацидофилия  Г-н арабинозе  1. Изомеры (изомеры)   Из российской федерации  Alicyclobacillus acidocaldarius: роль лис -269 в pH optim[J]. Appl Environ Microbiol,2005,71 :7888-7896.

[9] В чем дело? О 'кей, чу E. E.A,Ким ким кимС. SB,et al.metal dependence Для каталитических и структурных функций в l-арабинозем изомере Из российской федерации the   - мезофилия Bacillus  halodurans   and  the  thermophilic  Geobacillus stearothermophilus[J]. Arch - биохим.Biophys,2005, 434:333 — 343.

[10] В чем дело? D. Д. Ч, чжан, H  Дж., чхве  E. E. A,et и Al.description (характеристика) of  A термостабильный. Г-н арабинозе   (d-галактоза)  1. Изомеры (изомеры)  Из российской федерации   - гипертермофилия 3. Эвбактерия Термотога (термотога) Маритима [J]. Appl Environ Microbiol,2004,70:1397-1404.

[11] Организация < < рахими > > - м, баджик  - джи, иламмами R,et и И в то же время Кислотно-стойкий L- изомеры арабинозы из мезофильной Shewanella sp. Анаа -3 Высокая активность при низких температурах [J]. Факт микробных клеток,2011,10:

96. - да. Doi: 10.1186 /1475-2859-10-96.

[12] Организация < < рахими > > М-р ильхаммами - р, баджик G,et и И в то же время acid  А. обеспечение терпимости L- изомеры арабинозы из пищевой марки Lactobacillus sakei 23K Привлекательный д-тагатозе Производитель [J]. 1. Биорезор Технол,2010, 101 :9171 — 9177.

[13] Прабху (прабху) P,Tiwari С. О.K,Jeya M, и др. клонирование и характеристика нового l-арабинозного изомера из Bacillus licheniformis[J]. Appl Microbiol Biotechnol,2008,81 :283 — 290.

[14] Сюй зи, цин уJ,Li С, и, и Al.A роман Г-н арабинозеизомеры из Lactobacillus ферментум CGMCC2921  Для ди-тагатозе Производство: клонирование, очистка и определение характеристик генов [J]. J Моль (Mol)Catal B: Enzy,2011,70:1-7.

[15] Чэн (Китай) L,Mu Ч, чжан, T,et, Организация < < ал.ан > > Г-н арабинозе 1. Изомеры (изомеры) Из российской федерации Acidothermus   - целлюлолит   ATCC43068: Клонирование, выражение, очищение и определение характеристик [J]. Appl Microbiol Biotechnol, 2010,86:1089 — 1097.

[16] Организация < < рахими > >   - м, бежар  - с. Клонирование, очистка   and   1. Биохимическая технология Характеристика металлических ионов независимых и термоактивных L- арабинозе 1. Изомеры (изомеры) Из российской федерации the  Bacillus  stearothermophilus  US100  Штамм [J]. Biochim Biophys Acta,2006,1760:191 — 199.

[17] Li  уJ,Zhu Y,Liu A и др. идентификация и характеристика A Роман о любви  Г-н арабинозе  1. Изомеры (изомеры)   Из российской федерации  Anoxybacillus   flavithermus  Очень полезная информация   in    D-tagatose    Производство [J]. Экстремофилы,2011, 15 :441 — 450.

[18] Hong  Y  Г, ли ли D. Д. W, пён (фр.) Y  R,et и Al.Creation. Создание of  Металл-независимый    - гипертермофилия    Г-н арабинозе     1. Изомеры (изомеры)    by  Гомологическая рекомбинация [J]. - J. 3. Агрик - продукты питания  Химия,2011,59: 12939-12947.

[19] ван фуронг, сюй хон, ли ша и др. Выявление штаммов, вызывающих d-тагатоз [J]. Пищевая и ферментационная промышленность, 2009, 35 (8): 15-19.

[20] сюй хон, ван фуронг, ли ша и др. Метод приготовления д-тагатозы с использованием ферментируемого лактоцилля и лактоцилля: Китай, 200910025982. 9 [P]. 2010-12-29.

[21] сюй хон, сюй чжэн, чжу хуньян и др. Высокотемпературный изомер l-арабинозе и его применение: Китай, 2010-10153253. 4 [P]. 2011-08-31

[22] манжасетти Б а, шанс м р. Кристаллическая структура Escherichia coli Г-н арабинозеизомера (ECAI) - как предполагается. Целевой показатель of  Биологическое производство тагатозы [J]. J Mol Biol,2006,360 :297 — 309.

[23] Организация < < рахими > > - м, агаджари - нет, джуй. М, и Аль.рациональное использование природных ресурсов Проектирование зданий и сооружений Бацилл стеаротермофил   US100     Г-н арабинозе     Изомеры (isomdelete) : Потенциальные области применения для производства д-тагатозы [J]. Биохимия,2009,91:650 — 653.

[24] Организация < < рахими > > M,Juy M,Aghajari N и др. проверка основных каталитических остатков and   substrate   affinity    in   the   1. Термоактивный элемент Бацилл стеаротермофил US100  Г-н арабинозе 1. Изомеры (изомеры) by  Site-режиссер mutagenesis[J]. J бактериология,2007,189:3556 — 3563.

[25] Прабху п, джея - м, ли J  - к. Я проверяю молекулярную ткань Определение каталитической эффективности изомера l-арабинозы из Bacillus licheniformis[J]. Appl Environ Microbiol,2010,76:1653 — 1660.

[26] Kim  Эйч джей, ким джей О, о, о H J,et Al.description (характеристика) По состоянию на 31 декабря - с мутацией Geobacillus     stearothermophilus     Г-н арабинозе    1. Изомеры (изомеры)     that  Увеличивает производительность D-tagatose[J]. J Appl Microbiol, 2006,101 :213 — 221.

[27] О, боже мой! D. Д.K,О, боже мой!H J,Kim H J, и др. изменение оптимального pH в л-арабинозе 1. Изомеры (изомеры) from   Geobacillus   - стеротермический мофил for  D- галактоза Изомеризация [J]. - J.  Mol   Организация < < ката > >  Б: фермент,2006,43: 108-112.

[28] Oh  Х джей, ким х джей, о ди кей. Увеличение производства d-тагатозы  Сюжет на сайте  1. Мутагенез   of   L-Арабинозе (арабский язык)   1. Изомеры (изомеры)   От геобакилла Термоденитрификаны [J]. - биотехнол  Летт,2006,28:145 — 149.

[29] Цзян бо, му ванменг, чэн липан. Фермент-мутант L20A с высокой урожайностью d-тагатозе и методом мутанта: Китай, 2010-10112337. 3[P]. 2012-05-23.

[30] Ryu  S  A, ким C  С, ким, H  J,et и  Al.Continuous (продолжение) Производство D-tasgatose путем иммобилизации термостабильного l-арабинозного изомера в a  Кровать с пакетом   Биореактор [J]. Биотехнол (биотехнол)   Prog,2003, 19:1643 — 1647.

[31] Kim  H J,Ryu S A,Kim P, и др Производство d-тагатозы иммобилизированным термостабильным l-арабинозом Изомеры в пакетном биореакторе [J]. Биотехнол Prog,2003, 19 :400-404.

[32] Jorgensen  F, хансен, Франция О (1) - к, стаугар - п. 1. Ферментативная ферма conversion  of  От д-галактозы до д-тагатозы: гетерологично expression  И определение характеристик a  thermostable  L-arabinose  1. Изомеры (изомеры) from  Термоанаэробактер матрании [J]. Группа по планированию семьи Microbiol  Biotechnol, 2004,64:816-822.

[33] Организация < < лим > > Би СИ, ким х джей, о ди кей. Производство тагатозы с контролем pH a   - в волнение.  В цистерне  В отношении реактора  containing   В неподвижном состоянии  L- арабиноз изомеры  from    Термотога (термотога)   Неаполитана [J]. Группа по планированию семьи   Biochem Biotechnol,2008,149 :245 — 253.

[34] Чон э с, ким х джей, о ди кей. Производство тагатозы С помощью иммобилизованного рекомбинанта   Escherichia     coli    2. Камеры    containing     Geobacillus stearothermophilus L-arabinose изомеров мутанта в пакетной кровати биореактор [J]. Биотехнол Prog,2005,21:1335-1340.

[35] Гонконг Y Г, ли ли D  Ч, ли S J,et Al.Production. Производство of D-tagatose  На высшем уровне  - температура воздуха   using   В неподвижном состоянии   Escherichia    coli    Количество ячеек, выражающих L-arabinose  1. Изомеры (изомеры) - из термотоги Неаполитана [J]. Biotechnol Lett,2007,29 :569 — 574.

[36] Фу фенген, сюй чжэн, ли гисян и др. Производство d-тагатозы с использованием иммобилизованных рекомбинатов Escherichia coli клеток [J]. Китайский журнал биоинженерии, 2011, 31 (7): 85-90.

[37] Сюй зи, ли С, ф, ф F. F. G,et и Al.Production. Производство Д-тагатозе, а Функциональный подсластитель, используя alginate  Иммобилизованный Lactobacillus fermentum CGMCC2921 Клетки [J]. Группа по планированию семьи  Biochem   Биотехнол,2012,166 (4) : 961-973.

[38] Liang  M,Chen M,Liu X,et al.Bioconversion of D- галактоза в D- тагатоза: непрерывное packed  bed  reaction  with  an  immobilized  Термостабильный l-арабиноз 1. Изомеры (изомеры) and  В целях повышения эффективности Очистка с помощью На выборочной основе На микробной основе Деградация [J]. Группа по планированию семьи  1. Микробид Биотехнол, 2012,93:1469 — 1474.

[39] Jebors S,Tauran Y,Aghajari N, и др. надмолекулярная стабилизация кислоты А. обеспечение терпимости L-arabinose   1. Изомеры (изомеры) От Lactobacillus sakei [J]. М. : химия,2011,47:12307 — 12309.

[40] Lim  Би СИ, ким х джей, о ди кей. Высокое производство d-тагатозы путем добавления борной кислоты [J]. Биотехнол Prog,2007,23:824 — 828.

[41] Организация < < рахими > > - м, мессауд E  B, борги (борги) M  A,et и Al.co-выражение of  L- arabinose  1. Изомеры (изомеры) and  D- глюкоза isomerase  in  1. E.coli  and  Разработка эффективного процесса производства Одновременно д-тагатоза и д-фруктоза [J]. 1. Фермент Microb Technol,2007,40: 1531-1537.

[42] сюй гицян, фэн бьяо, цзян бо и др. Отделение тагатозы фенилбороновой кислотой/четвертичным аммиачным ионным экстракцией жидкого растворителя [J]. Наука и технологии пищевой промышленности, 2010(8): 294-297.

[43] хуан вэнься, му ванменг, цзян бо. Отделение и очистка д-тагатозе [J]. Пищевая и ферментационная промышленность, 2008, 34(6): 168 — 171.

[44] В. ибрагим О, распылин джей и. Технология производства D-tagatose: US,6057135[P].2000-05-02.

[45] Ким с. B, ли, М, парк с W,et al.Food класс термофилии arabinose    isomerase    Выраженные в процентах    from    Гра, и   tagatose  Способ изготовления: US,20080124771[P]. 2008- 05-29.

[46] Rhimi  - м, чуайе - эйч, гуйлуар I, и др. производство D- тагатоза, низкокалорийный подсластитель при ферментации молока с использованием L- арабинозы   Изомеры [J]. 1. Биорезор    Technol, 2011, 102: 3309-3315.