Как получить ферментально модифицированную Stevia Glucosyl Stevia?

1. Предисловие

На протяжении почти полувека ученые были привержены поиску подсластителей с таким же вкусом, как сукроуз, но с более низкой энергетической ценностью, чтобы заменить сукроуз, с тем чтобы уменьшить возникновение ожирения и трех высоких (высокое кровяное давление, высокий уровень сахара в крови, высокие липиды крови). В настоящее время искусственные подсластители включают в себя ацесуламу, алитамы, аспартам, цикамат, сукралозу, неотам и т.д. С постоянным повышением уровня жизни люди начали использовать натуральные и зеленые продукты питания. Стевия выделяется из натуральных подсластителей. Его сладость в 250-400 раз больше, чем у сукроза. Стевия извлечена из стевии ребаудиана бертон херб из семейства Asteraceae. Его основными компонентами являются вторичные метаболиты стевиосида (ST) и ребунигисида а (RA), накопленные в листьях предприятия (химическая структура показана на рис. 1). Например, вторичные метаболиты stevioside (ST) и rebaudioside A (RA) (химическая структура показана на рис. 1).

Исследования Stevioside начались в начале прошлого века. На сегодняшний день в мире насчитывается более 1000 научных работ и патентов на стевиосиде, большинство из которых посвящены методам извлечения стевиосида, улучшению вкусовых свойств и безопасности, а также токсикологическим исследованиям на основе проб in vivo. В прошлом безопасность потребления стевии была спорной из-за неполноты данных токсикологии человека и метаболизма, и она использовалась только в больших количествах в южной корее и японии. После многих лет всесторонних исследований, проведенных различными странами, объединенный комитет экспертов фао/воз по пищевым добавкам (JECFA) четко заявил в докладе о работе своей 69 - й сессии в июне 2008 года, что stevia не оказывает никакого побочного воздействия на организм человека, когда ежедневное потребление составляет менее 4 мг/кг массы тела. В декабре того же года управление пищевых продуктов и лекарственных средств США (FDA) утвердило заявку на сертификацию по безопасности и надежности (GRAS) продукции высокой чистоты stevia A glycosides (RA content above 95%) на рынке США с заключением «нет возражений». Это ознаменовало начало широкого использования stevia на рынках пищевой промышленности в европе и США. Стевия, натуральный подсластитель с высокой сладостью и низким содержанием калорий, станет хорошей заменой сукроуз [1-3].

2. Технический прогресс

После более чем 30 лет промышленного производства стевия превратилась в третье поколение: первое поколение стевии — стевиосиде, второе поколение — это смесь санкт-петербурга и ра, а третье поколение — в основном ра. Сладость и ее характеристики показаны в таблице 1. Процесс подготовки стевии включает в себя следующие этапы: сушка и дробление листьев стевии, экстракция жидких фаз, удаление примесей, обработка смолы, распылительная сушка и уточнение.

2.1 извлечение материала

Стевия уходит на начальной стадии бад имеют самое высокое содержание стевия. После того, как листья на этой стадии высушены и раздавленны, экстракция жидкого растворителя в полярной фазе обычно используется для экстракции стевии, например, горячей воды или алкоголя. Сверхкритическая добыча двуокиси углерода пока еще не применяется в промышленности. Неполярные вещества, такие как масло, хлорофилл и эфирные масла в листьях, могут удаляться хлороформом или гексаном до экстракции [4-5]. Существуют два способа экстракции: экстракция из партии цистерны и непрерывная экстракция противотока [6]. Экстракт стевии получают путем удаления сломанных листьев и других твердых примесей путем центрифугации, прессования пластин и каркаса, а также мембранной фильтрации [7-8].

2.2 удаление примесей

Разделение и очистка стевииИзвлечение из системыСодержит большое количество примесей, таких как белок, органическая кислота, таннин, сапонин, пигмент и неорганическая соль. Содержание этих примесей в 5-7 раз превышает содержание гликозида [9]. Колонна хроматография или мембранная фильтрация широко используются для отделения и очистки стевии от экстракта стевии [10-25].

При использовании столбцовой хроматографии для отделения и очистки стевиозида необходимо предварительно обработать экстракт стевии. В противном случае, с одной стороны, такие примеси, как пигменты в жидком корме, загрязняют смолу, в результате чего смола адсорбирует большое количество пигмента и уменьшает адсорбцию гликозидов, сокращает цикл адсорбции, увеличивает потери алкоголя и гликозидов, снижает скорость экстракции,  Увеличение производственных издержек. С другой стороны, некоторые ионы металлов в жидкости могут вызывать постоянное отравление смолы, уменьшая срок ее службы и влияя на нормальный ход производства. В-третьих, когда продукт используется в производстве напитков, могут возникать такие проблемы, как седиментация и пена во время наполнения, что влияет на его широкое применение.

Поэтому гидроксид кальция и сульфат железа часто используются в качестве флокулянтов для удаления примесей из жидкости стевии. Соли кальция могут образовывать не только нерастворимые соли кальция с органическими кислотами, такими как лимонная кислота, тартарная кислота, сукциниевая кислота, малиновая кислота, аскорбиновая кислота и окислительная кислота для осадков, но и с полифенолами, белками, полисахаридами, пигментами, такими как хлорофилл, каротин и лютейн, для образования нерастворимых солей кальция и осадков. Соли железа могут осаждать таннины и соли металлов, такие как медь, цинк, алюминий и кальций. После предварительной обработки для удаления некоторых цветных веществ, белков и посторонних веществ из экстракта стевия стевиозид в экстракте селективно адсорбируется макропористой смолой, а затем пропускается водой или органическим растворителем. Соли, большинство пигментов и других полярных примесей в элюате удаляются анионными и катионными смолами для получения стевиообогащенного раствора [26].

2.3 обработка смолы

Исследования по очистке стевиевой жидкости с использованием смолы в китае начались в 1982 году. В 1984 году чэнь чжан и другие создали первый в китае завод по очистке стевии с использованием смолы в городе чжэньцзян провинции цзянсу.

Чаще всего используются катионные биржевые смолы Amberlite IR-120B, 001×14.5 и т.д., а анионные биржевые смолы Amberlite IRA-93, D-280 и т.д. Адсорбционные смолы могут быть Amberlite XAD-2, AB-8, Diaion Hp-20, ADS-7,D107, D108 и др. [27-30].

Когда стевиозид отделен и очищен с помощью мембранной фильтрации, фильтрация через керамические микропоры, ультра-фильтрационные мембраны и нанофильтрующие мембраны могут удалять ионные соединения и органические молекулы с молекулярными весами, которые сильно отличаются от весов стевиозидов и стевиозидных жидкостей, что дает стевиозидообогащенную жидкость [31]. В 1998 году национальный исследовательский совет канады разработал метод очистки стевии методом мембранной фильтрации, запатентованный в США [32].

2.4 распылительная сушка

Концентрированная жидкость может подвергаться охлаждающей кристаллизации, кристаллизации концентрации или распылительной сушке для получения сырой стевиевой продукции тёмного цвета и основных компонентов ST и RA. Активированный уголь может быть использован для декоризации продукта до кристаллизации или распыления сушки, чтобы получить белый продукт. Большинство производителей стевии в китае производят этот вид продукции [3].

2.5 переработка нефти

Очищенная стевия, богатая в ра или ст: из-за разницы в растворимости между ст и ра в гидрофильных растворителях, сырое вещество стевия может растворяться в растворителе, таком как метанол или этанол, до насыщенной концентрации, а затем кристаллы ст или ра могут избирательно ускоряться такими методами, как концентрация и охлаждение. Для обеспечения высокой чистоты RA кристаллы могут быть повторно растворены в растворе этанол-вода, отфильтрованы для удаления нерастворимых примесей, а затем высушены или сконцентрированы для кристаллизации продукта.

3. Методы анализа

Качественный и количественный анализ стевиосида может проводиться с использованием колориметрических параметров, осадков, газовой хроматографии, жидкостной хроматографии, тонкослойной хроматографии и других методов. Китай и Китай#39; национальный стандарт GB8270-1999 предусматривает стандарты и методы тестирования контента ST. Однако официального стандарта обнаружения ра не существует. В 2008 году кодекс пищевых химикатов опубликовал проект, который стандартизировал определение ра и ст высокопроизводительной жидкостной хроматографией. В качестве хроматографической колонны использовались аминоколонки или колонки анализа сахара, а в качестве подвижной фазы использовался смешанный раствор ацетонитрил-вода [34].

4 улучшение вкуса

Стевиозид в основном используется в качестве низкокалорийного подсластителя в напитках, йогуртах, десертах и настольных подсластителях [35]. Св имеет определенную степень горения и вкус ментола, и его сладости характеристики не совершенны. Группа компаний RA' сладость характеристики ближе к sucrose, чем санкт-петербург, однако, поскольку очищать ра сложнее, стевия, содержащая 97% ра, все еще имеет определенный послевкусие санкт-петербурга есть три основных способа улучшить вкус стевии.

4.1 добавьте другие усилители вкуса, чтобы создать подсластитель соединения

Смесь подсластителя образуется путем смешивания ST с другими агентами маскировки вкуса и сладоусилителей. Используя синергический эффект между различными подсластителями и физиологическими характеристиками, он может уменьшить неприятные вкусы, сократить время, необходимое для развития вкуса, и улучшить стабильность и богатство сладости. Он может поддерживать специальные функции одного подсластителя, выводить новые вкусы и сокращать затраты [36 — 40].

4.2 увеличение содержания ра в стевии

Ботаники изучили более 220 видов растений семейства астероидов в южной америке в попытке найти растения с более высоким содержанием подсластителей или новые подсластители. Однако было обнаружено, что только одно растение, стевия флебофилла, содержало ST, как стевия ребаудиана бертони. Это растение было открыто в 1899 году и в настоящее время вымерло.

Выращивание стевии с высоким содержанием ра осуществляется на протяжении десятилетий, и Япония является одной из лучших стран для исследований по совершенствованию и применению сортов стевии. В дополнение к некоторым разновидностям стевии, культивируемым самой нашей страной, разновидности стевии, используемые в китае в последние годы, в основном происходят из японии. Японский сорт морита, с его относительно низкими ценами и отличными качественными характеристиками, занимает большую долю рынка стевийского посевного сектора в китае. Тем не менее, разнообразие серьезно деградирует, что негативно влияет на стабильность и развитие источника China's stevia industry. Нанкинский ботанический научно-исследовательский институт, циндао чуангшэн компании, шаньдун Huaxian Stevia Co., Ltd., янчэн Xiaguang Stevia Trading Co., Ltd., и другие подразделения в китае также разработали сорта с более высоким содержанием гликозида. В таблице 2 приводится содержание стевиозида в сушеных листьях некоторых разновидностей стевии [41-43].

Помимо выведения новых сортов для увеличения содержания ра в растениях, сообщается также о химических методах преобразования св в ра [44]. Разница между ST и RA заключается в количестве глюкозы, прикрепленной к позиции C13 стевиола гликозида (см. рис. 1). Ключом к преобразованию ST в RA является селективный гидролиз грау-софорозидного и терминального сахарного эфира соединения стевиозидной молекулы ферментом «Takadiastase Y», извлеченной из микроорганизма аспергилла оризае, для получения продукта рубусозида. Молекула гликозида β-sophoroside и соединение терминального гликозидного эфира выборочно гидролизируются для получения продукта stevioside, Rubusoside. Рубусосайд является еще одним естественным дитерpene гликосайд, который может быть извлечено из розакийского завода рубус suaviss mus. После удаления группы глюкозы в положении C19 щелочным гидролизом фенилалдегид используется для образования ацетала для защиты гидроксильных групп C4 и C6 группы глюкозы в положении C13. И C19- карбоксиловые гидроксиловые группы, а затем гидроксиловые группы C2 и C3 глюкозы, прикрепленные к C13, и гидроксиловые группы карбоксиловой кислоты C19 конденсируются, чтобы добавить глюкозу группы, а затем гидроксид бариурии используется для удаления защитной группы в метаноловом растворе для получения RA.

4.3 ферментативная модификация

Еще одним широко используемым методом улучшения вкуса стевии является ферментативная модификация. Изучая механизм производства сладости и используя каталитический эффект ферментов, в ST и RA добавляются такие специфические группы, как глюкоза (Glc) или фруктоза (Fru), чтобы сделать вкус ближе к сукроуз.Ферментно модифицированная стевияПримерно в 100 раз слаще, чем сукроуз [45-47].

(1) я Используя α-1,4-glucosidase (например, циклодекстроин глюкотрансферазы), глюкозы добавляются в стевиосиде через α- added reaction для улучшения послевкуса стевия. Однако по мере развития ферментативной реакции 4- я гидроксиловая группа глюкозы, связанная со стевиосидом, будет продолжать полимеризацию с новой глюкозой группой в соответствии с реакцией α-1,4-add., образуя длинную цепь глюкозы. Сладость полученного грау-глюкозила стевиосида снижается примерно на 45% по сравнению с домодификацией. Сладость модифицированного грау-глюкопираносила стевиозида снижена примерно на 45%. Грава-амилаза может быть использована для резки и сокращения длинных цепей глюкозы и повышения качества продукта [48-49].

(2) используя β-1,4- галактозилтрансферазы, дисаксариды (например, лактоза, α- d-галактоза и т.д.), которые состоят из источников β-1,4- галактозила, могут использоваться в качестве источников -1,4- галактозила для объединения группы глюкозы на 13- й позиции скелетона стевиола (называемой 13-G1), а также двух групп глюкозы на 13-G1 (называемой 13 -G2, 13 -G3) и четырех групп глюкозы, связанных с 19 - й позицией скелетона стевиола (называемой 19 -G1), Модифицируются путем привязки одной галоктозы с гравацией - 1,4 к одной-трем глюкозе, соответственно. В сентябре 2007 года Dainippon Ink and Chemicals Inc (Dic Fine Chemicals, Inc) использовала этот метод для подготовки производных инструментов ST и RA GST и GRA и получила американский патент. Гра и ГСТ поддерживают высокую сладость, но также имеют мягкую сладость, похожую на сахар, хороший послевкусный и уменьшить горький послевкусный ST [50-51].

(3) грау -fructofuranosidase используется для гидролиза сукроза под действием фосфорной кислоты, вводя группу фруктозы в св. И ра. Группа fructose связана с 6- ой группой 19-O-β-glucosyl группой β-2,6 гликосидической связью.

Ферментно модифицированная стевия может эффективно примирить послевкусие св, но это увеличивает потребление сахара и не подходит для диабетиков.

5. Внутреннее развитие

Развитие пищевой стевии в китае началось в 1970 - х годах в ботаническом саду наньцзинь чжуншань. В 2000 году#39. S stevia extract export был меньше нас$- 1 миллион. С 2006 года экспорт ускорился, и в 2009 году экспорт уже в 84 раза превысил объем экспорта 2000 года и составил около 2500 тонн (что эквивалентно сладости 675 000 тонн сукроза). Она экспортируется более чем в 10 стран, а ее годовой объем производства составляет более 600 млн. юаней. Китай стал миром и#39; ведущий производитель и экспортер стевии гликосайд [52]. Отечественные производители стевии сконцентрированы в шаньдуне, цзянсу, аньхой, фуцзянь, хэнань и других местах.

6. Применение

Более 500 лет назад парагвайцы уже использовали стевию для приготовления сладкого чая. В прошлом веке стевия была одобрена как пищевая добавка в южной америке и некоторых азиатских странах, таких как Китай, Япония и Южная Корея. В 2008 году управление по контролю за продуктами питания и лекарствами США (FDA) опубликовало уведомление Generaly, признанное безопасным (GRAS), подтвердив, что оно "не возражает" против использования RA в качестве заменителя нулевой калории с минимальной чистотой 95%.

Франция, Австралия, Новая Зеландия и Швейцария также выдали ра лицензии на пищевые добавки. В 2008 году JECFA объявила о введении RA ADI в размере 0-4 мг/кг массы тела в сутки. Стевия ребудиана не разбита ферментами в пищеварительном тракте. Стевия ребаудиана входит в толстую кишку через желудок и тонкую кишку и ферментируется микроорганизмами кишечника для производства короткоцепных жирных кислот. Калорийность стевии косвенно образуется короткоцепными жирными кислотами и составляет около 6,3 КДЖ/г. Стевия является низкокалорийным подсластителем, который используется во многих странах для замены сахара с целью снижения калорий в молочных продуктах, мороженом, конфетами и хлебобулочных изделий.

Кроме того, невосприимчивость стевиозида означает, что его потребление не приводит к повышению уровня глюкозы в крови и не способствует повышению уровня инсулина в крови, что делает его пригодным для использования диабетиками. Кроме того, стевия имеет большое потенциальное лекарственное значение, с такими функциями, как снижение сахара в крови, предотвращение кариеса, укрепление желудка и ослабление усталости. Оказывает поддерживающее воздействие на пациентов, страдающих ожирением, диабетом, сердечными заболеваниями, гипертонией и атеросклерозом.

Основные компоненты стевии, ST и RA имеют хорошую тепловую устойчивость к кислоте и щелочности и очень стабильны к свету, будь то в виде порошка или раствора. Они не становятся заплетенными или ухудшаются во время длительного хранения, а готовый продукт не становится коричневым после термической обработки, как в случае с сахарозом. Его можно использовать в карбонированных напитках, чае, вине, кофе, печенье, сладости, шоколаде, молочных продуктах, таких как мороженое, фруктовые и овощные соки, морепродукты, мясо, медицина, косметика и другие повседневные товары [53].

Мир и общество#39;s две крупнейшие компании по производству напитков, Coca-Cola и PepsiCo, уже запустили стевия-подслащенные продукты: Coca-Cola объединилась с сельскохозяйственной компанией Cargill для разработки Truvia, и PepsiCo объединилась с компанией Global Sweetener для разработки PureVia, чтобы содействовать запуску низкокалорийных напитков и увеличить продажи продукции.

Перспективы на будущее

По сравнению с традиционными безсахарными сладостями, такими как аспартам, цикламат, ацесуллама и сахарин, stevia имеет преимущества быть естественной, стабильной и безопасной. Выращивание стевии имеет хорошую экономическую ценность. Урожай сушеных листьев стевии составляет от 250 до 300 кг на му, а цена сушеных листьев стевии варьируется в зависимости от содержания гликозида. На юге стевию можно собирать два раза в год; На севере фермеры могут выращивать стевию вместе с озимой пшеницей в различные сезоны, что может эффективно увеличить их доходы. Использование стевии для замены sucrose стоит от 20% до 40% от стоимости sucrose. Как правило, стевия более чем на 90% чистая и в 250 раз слаще, чем sucrose в 2% sucrose растворе и в 200 раз слаще sucrose в 5% sucrose растворе.

Стевия используется в японии и южной корее более 30 лет и широко используется в напитках, пище и медицине. В последние годы использование стевии в японии выросло на 20% до 30%. Южная Корея не подходит для выращивания сахарной свеклы и сахарного тростника и полностью зависит от импорта сукроуз, поэтому существует большой спрос на заменители сукроуз. С момента своего появления в 1973 году, stevia захватила 40% корейского рынка подсластителей, большая часть которого используется в традиционной корейской soju. Кроме того, увеличивается количество стевии, используемой в мороженом, жевательной резинке, конфетах, кимчи, напитках, соусах и т.д. Стевия в одной линии с today'. Потребительские концепции «природной, зеленой, безопасной и медицинской помощи». В настоящее время, мир ' 500 крупнейших компаний, таких как Coca-Cola, Cargill и PepsiCo, инвестируют в стевию в глобальном масштабе, что будет способствовать развитию стевистской промышленности. Как наиболее перспективная альтернатива sucrose, stevia получит дальнейшее признание на рынке.

Ссылка:

[1] кишингорнад. Стеви тегенустевия [м]. Лондон :Taylor & Франси, 2002 год.

[2] Ван дедзи. На сладости, сладости и горьком послевкусе стевиосида [J]. Пищевые добавки китая, 2007 (3): 46-53.

[3] Свитгринфилд сообщает теу. С. фодандругамм в-истрация (улх)   Что теузе офребяна (RebaudiosideA)  Вырезанный из стевии ребудиана в качестве ингредиента aF od isобычно, узнаваемый edassafe, W ashingtonD. C., grn000282,  2009.

[4] Лю джей, - OngCP,  Лиз фи. - привет. Субкритическая экстракция жидкостей из подсластителей Stevia rebaudiana [J]. JournalofChromato- графология, 1997 год,   35:446 450.

[5] мудрость NaturalBrands GRAS assmentofhigh puritysteviol glycosides[м]. В эшингтоне, D. C.:, Метод grnMethod для этого-покрытия из материала plantraw [P]. US4892938,   1990.

[6] Ю цзюнь, юэ пэнсян, ю хонг и др. Исследование процесса извлечения стевиосида методом трехступенчатого противотока [J]. Наука о еде, 2009 (2): 146 — 148.

[7]  - кутойо,   Чжан пл.,  - кумара. Экстракция сладкого com- фунтов из стевии ребаудины бертони [P]. US5972120,  1999.

[8] Chen T F. жидкостное фильтрационное устройство [P]. US2005155935, 2005.

[9] цин шихен. Исследование флокулянтов при производстве стевиосида [J]. Пищевые добавки китая, 1998 (2): 40-41.

[10] кингорнад,   - суджартодд. Современное состояние stevioside asa услаждающий агент для использования человеком [м]. Прогресс в области медицинских и экономических исследований растений,   Лондон: академия наук, 1985,1:1 -51.

[11] Кингхорн а д,   Соеяртод д. стевиосиде [м]. Альтернативные подсластители (2 nd edn,  Пересмотрен на andExpanded. Нью-Йорк :MarcelDekke Inc.,   1991:157 -171.

[12] Организация < < бакала > > О ' Бриан наборл,   Stevioside[M].Alternative Sweeteners New York: Marcel Dekke Inc., нью-Йорк,1986:295 -307.

[13] Phillips K C. Stevi разрабатывает новый подсластитель [м]. Развития 1/3 /   Лондон: ElsevierAp- Наука 1987:1 -43.

[14] Джексонм с,   Франкмкпт J,  Высокопроизводительный метод производства. US20060083838,  2006.

[15] - хидэджин,  - тадаом,   - тадашик,    Этальный процесс для производства бета  Glycosyl stevioside производные [P]. US4590160,    1986.

[16] Добберштейн RH,   Ахмедм с. метод извлечения отдельных сладких гликозидов из Завод «стевия ребаудиана» [ П.]. US4361697,   1982.

[17] Магомет,   - томотт,  - соманнт,  Etal Processformanufac- turinga sweetneranduse [P].US2007082103,  2007.

[18] - "пракаш" - дюбуа,  Кингг а,   Состав и способ очищения Rebaudioside [P]. US20070292582,   2007.

[19] - абельянва,  Гочикьянвт,  - маркосяна,   Экстракция etal и модификация sweetglycosides от steviarebaudianaplant[п]. US2006134292, 2006.

[20] Янг ф., - хуадж, - кинл. - привет. High-PurityRebaudiosideAAnd MethodOfExtractingSame[P]. US2008300402,   2008.

[21] пэйзантдж,   - лайдлерк,   - ипполитор. Способ извлечения отдельных конфет из стевиаребаудианапласта [п]. US5962678,   1999.

[22] Miyake T. процесс производства подсластителя [P]. US4219571,   1980.

[23] Персинос G J. метод производства стевиосиде [п]. US3723410,   1973.

[24] моритат,  Фуджита ивамураж. Подсластительное соединение,  Метод восстановления, И использование их [п]. US4082858,   1978.

[25] - кутойо,   Жангловский район,  - кумара. Экстракция сладких соединений из стевии ребаудины бертони [P]. US5972120, 1999.

[26] чэнь шаоцю, ян юнхуа, чжай чжицян. Обсуждение процесса извлечения стевиосида [J]. Преподавание и научные исследования: журнал хэбэйского сельскохозяйственного университета в хандане, 1991 год (3): 1-3.

[27] Chen T H, Zhang Y, Liu X H и др. Обогащение и отделение стевиосида а от стевии новым типом смолы, содержащей пиридин группы. Китайская наука B, 1999, 29 (5): 461-466.

[28] лю цонглин, пэн йияо, го ян и др. Исследование процесса экстракции и кристаллизации стевиосида [J]. Наука о еде, 2002, 23 (8): 99-100.

[29] ши цуокинг, ши ронгфу, фэн цзюньцянь. Одноэтапное извлечение стевиозидных прикладных исследований адсорбционной смолы adsorption -7 [J]. Китайские пищевые добавки, 1995 (2): 18-21.

[30] ху цзинь, чэнь юру, вей ся и др. Отделение стевиола гликозидов от стевии макропористыми смолами D107 и D108 [J]. Исследования и разработки в области продовольствия, 2008, 29 (6): 1-4.

[31] He Changsheng, Wang Bingnan, Zhu Nanshan. Исследования по применению ультра-фильтрации стевиосида [J]. Технология очистки воды, 1994 (2): 89-94.

[32] хуан сонлиан, чэнь тяньшунь. Влияние pH активированного угля на содержание стевиозида в стевиозидном растворе очистки [J]. Наука и технологии пищевой промышленности, 2009, 30 (1): 133 — 135.

[33] Больше J. RebaudiosideA [м]. Второе дополнение к FC6:1438.

[34] линдлейм г. разработки в низкокалорийных подсластителях [J]. Fod entsand ProcessingInternational 2000,   22 (3) : 17-20.

[35] цин шихен. Разработка и характеристика стевиола гликозидного продукта для деодоризации [J]. Китайские пищевые добавки, 1994 (4): 25-26.

[36] го шуцяо, ян ювен, ни ванчао. Клонирование и анализ биоинформатики гена глюкозилтрансферазы стевии ребудианы UGT76G2 [J]. Геномика и прикладная биология, 2009, 28 (3), 422-428.

[37] ботанический институт цзянсу, китайская академия наук. Исследования и применение методов селекции и размножения для превосходных сортов стевии [м]. 2002.

[38] янь ю. процесс селекции и совершенствования растений стевии для новой разновидности [п]. CN03131156. 3, 2003.

[39] канедан,  - касейр,  - ямасакик,   Etal chemalstudieson sweetditerpene-glycosidesofStevia rebaudiana: преобразование stevioside intorebaudiosideA [м]. Химический и фармакологический Ticalбюллетеней тин25,    1977 год,   2466-2467.

[40] Ли синьхуа, ван ци, ши чэнь. Исследование влияния и механизма действия глюкозилтрансферазы на улучшение горького вкуса стевии [J]. Журнал шэньянского сельскохозяйственного университета, 2009, 40 (5): 605 — 607.

[41] - эсакис,  - танакар,  - кам ияс. Синтез и дегустация некоторых стевиолликозидов [J]. Сельское хозяйство и биологическая промышленность,1984 г.  48: 1831 -1834 годы.

[42] подсластители DuBoisG E BunesLA Dietrich P S синтезируют и ценностьбиологически устойчивых аналогов стевиосида [J]. Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии, 1984 год,   32:1321-1325.

[43] Дюбуа, стефенсонра. Дитерпеноиды sweetenerssynsisand sensoryevaluation ofsteviosideanalogueswith mi доказали органолеп-ticpropertieJ. Журналистики, 1985, 28:93  98.

[44] мизутаник,  - миятат,  - касейр,   Etal Studyon the miprovementof sweetnessof steviolbisglycoside selective enzymatic transglycosylation ofthe13 - o-glycosylmoity [J]. Агрику тураланбиологическая химия, 1989 год,   53:395-398.

[45] Танака о. улучшение вкуса натуральных подсластителей [J]. Чистоплотный прикладной химиотерапия, 1997 год,  69: 675 -683.

[46] - нишихаши,  - матсубаяшит,  Катабам это,   Подсластитель etal и процесс для производства то же самое [P].US7267835,  2007.

[47] нишибаши,  - матсубаяшит,  Катабам это,   Метод etal для опровержения вкуса подсластителя stevia [P]. S58094367,   1983.

[48] Сюй чжунвэй, ли на, нин чжэнсян. Исследования по ферментативной модификации стевии [J]. Наука и техника о продовольствии, 2008, 33 (12): 35 — 39.

[49] Морита т,  Хосоно ф. альфа-глюкозилированный подсластитель стевии [п]. H09-107913,   1997.

[50] сюй чжунвэй, шао пейша, чэнь хуаюн и др. Исследования по модификации стевиосида с гравитационным фриктозидатором [J]. Современная пищевая наука и технология, 2008, 24 (11).

[51] хуан йингсен, го айги. Разработка R-A-type stevioside [J]. Растительные ресурсы и окружающая среда, 1996, 5 (4): 29-32.

[52] чжун шишенг. Инновационные идеи по расширению и укреплению стевия-доклад о развитии стевийской промышленности в ганьцзянском крае. Современное садоводство, 2009 (7): 2-3, 14.

[53] чжао юнлян, чжу хуанлин, лю цзинбинь и др. Сравнительное исследование Rebaudioside A контента в стевии листья различного происхождения [J]. Anhui Agricultural Science Bulletin (верхняя половина месяца), 2009, 15(21): 82-83.